全 文 ：连翘茎叶的鉴别研究
薛愧玲 1, 2 ,袁王俊 2 ,吴宏欣1 ,李昌勤 2 ,康文艺 2＊
(1.河南大学校医院 ,河南 开封 475001;2.河南大学天然药物研究所 ,河南 开封 475004)
　　摘要　目的:对连翘茎叶的药材性状 、显微特征 、matK基因序列等进行鉴别。方法:采集原植物叶片和嫩枝 ,对
其进行生药鉴定。结果:连翘茎叶的生药特征为连翘叶质地较薄 , 但栅栏组织发达 , 海绵组织较紧密;气孔不定式。
嫩枝表面有沟槽 , 表皮完整 ,维管柱椭圆形 ,韧皮纤维多散在 , 髓发达;粉末中导管成束 , 木纤维管胞状 , 木薄壁细胞
壁念珠状 , 腔内纹孔明显。结论:上述特征可为连翘叶质量标准的制定提供参考依据。
关键词　连翘叶;性状鉴别;显微鉴别;matK
中图分类号:R282.5　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2009)05-0700-02
收稿日期:2008-10-09基金项目:河南大学校科研基金(06YBZR073)作者简介:薛愧玲(1966-),女,主治医师 ,主要从事临床医学工作。＊通讯作者:康文艺 , Tel:13723274694
　　连翘是临床常用中药之一 ,又名黄花条 、连壳 、
青翘 、落翘等 。 2005年版中国药典一部收载的连翘
为木 犀科连 翘属植 物连 翘 Forsythiasuspensa
(Thunb.)Vahl的干燥果实 ,有清热解毒 、消肿散结
之功效 〔1〕。连翘开花期如受倒春寒的影响 ,会造成
严重减产 ,结果造成较大的市场缺口 ,价格骤涨 ,而
大量的连翘叶片及嫩茎又被丢弃。采收叶片时会掺
有嫩枝 ,习称茎叶。 《本草纲目 》记载连翘茎叶 ,主
心肺积热。近年有文献报道 ,连翘叶中的有效成分
如连翘苷 、连翘酯苷 、齐墩果酸等的含量高于果
实 〔2〕 ,连翘茎叶很有可能在一定程度上弥补连翘的
产量不足。至今未见连翘茎叶的生药鉴定方面的文
献 ,为此 ,笔者对其进行了性状 、组织形态 、粉末特
征 、理化性质和分子鉴定等方面的研究。
1　材料与仪器
1.1　材料　实验材料于 2008年 7月采自河南栾
川龙峪湾国家森林公园 ,经河南大学生药教研室袁
王俊讲师鉴定为木犀科植物连翘 Forsythiasuspensa
(Thunb.)Vahl的叶片和嫩枝 ,标本保存于河南大学
天然药物研究所 。所用试剂均为分析纯。
1.2　仪器　XSZ-H光学显微镜(重庆光电), MG96
+PCR仪(杭州郎基)。
2　方法与结果
2.1　药材性状　干燥的叶多破碎 ,黄绿色或棕黄
色 。完整的叶片呈卵形至长椭圆状卵形 ,长 3 ～ 8
cm,宽 0.5 ～ 1.5 cm,先端渐尖 ,基部不对称 ,边缘上
部有疏锯齿 ,基部全缘 。上表皮灰绿色 、黄棕色或红
棕色 ,光滑;下表皮淡灰色或棕绿色 ,较光滑 。主脉
于下表面显著突起 ,侧脉羽状。叶柄长 0.5 ～ 1.5
cm,光滑 。叶质脆 ,易折断。气微 ,味苦。嫩枝深褐
色 ,类圆形。皮孔较小 ,类圆形 。叶对生 ,节明显 ,节
间在与两个芽间相对应的位置有凹槽。质脆 ,较易
折断 。气微 ,味苦。
2.2　显微特征　横切面采用石蜡切片 ,番红 -固绿
对染 ,二甲苯透化 ,加拿大树胶封片。粉末采用水合
氯醛透化 ,稀甘油装片。显微镜下观察并绘图。
2.2.1　叶横切面:上下表皮均由 1列形态 、大小一
致的扁平细胞构成 ,排列整齐紧密 ,外被角质层。栅
栏组织细胞 2列 ,长圆柱形 ,海绵组织排列较紧密 ,
细胞间隙较小 。主脉上表面向里凹 ,下表面向外凸
出较多 ,外韧维管束排列成扇形 ,由 10多束维管束
组成 ,维管柱与表皮之间均为薄壁细胞 ,未见有机械
组织存在 。见图 1。
图 1　连翘叶横切面详图
1.上表皮　2.栅栏组织　3.海绵组织　4.下表皮　5.木
质部　6.韧皮部
2.2.2　嫩枝横切面:类圆形 ,可见两个明显对生的
凹槽 。表皮细胞 1列 ,类长方形整齐排列 ,外被角质
层。木栓细胞 3 ～ 5层 ,细胞类方形 ,排列紧密。皮
层发达。维管柱椭圆形 ,与凹槽对应的位置木质部
较薄 ,韧皮纤维不发达 ,多散在 ,有的 2 ～ 3个簇生。
髓发达。见图 2。
2.2.3　叶粉末:黄绿色或棕黄色。表皮细胞多见 ,
·700· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 5期 2009年 5月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2009.05.038
呈多角形 ,垂周壁多平直。气孔不定式 ,仅分布于下
表皮 ,副卫细胞多 4 ～ 6个。叶肉碎片多见 ,有的可
见表皮细胞与角质层 。导管多为螺纹和梯纹导管 ,
直径约 30μm。见图 3。
图 2　连翘嫩枝横切面简图
1.表皮　2.木栓层　3.次生韧皮部　4.髓　5.次生木质
部　6.韧皮纤维
图 3　连翘叶粉末显微图
1.上表皮　2.下表皮　3.叶碎片(可见表皮)　4.导管
图 4　连翘嫩枝粉末显微图
1.导管束　2.木纤维管胞　 3.韧皮纤维　4.木栓细胞　
5.木薄壁细胞　6.表皮
2.2.4　嫩枝粉末:淡黄色 。导管束多见 ,多为孔
纹 、网纹和梯纹 ,直径 30 ～ 50 μm。木纤维呈管胞
状 ,直径约 40 μm,管壁纹孔清晰可见 ,腔内纹孔模
糊。韧皮纤维多散在 ,也有 2 ～ 3个簇生 ,边缘平滑
或波状 ,壁厚 ,腔较窄。木薄壁细胞类方形 ,多簇生 ,
壁呈念珠状 ,纹孔清晰可见。表皮细胞和木栓细胞
也较多。见图 4。
2.3　分子鉴定　取连翘新鲜叶片用常规的 CTAB
法提取 DNA。 PCR扩增和测序使用的引物为 MG1
和 MG15, 序列如下 MG1(5′-CTACTGCAGAAC-
TAGTCGGATGGAGTAGAT-3′), MG15 (5′-ATCT-
GGGTTGCTAACTCAATG-3′)〔3〕。 25μL反应体积中
含:2.5μL10×bufer(Mg2 +浓度为 1.5 mmol/L), 2
μL(1 mmol/L)dNTPs, 引物各 1 μL(浓度为 10
μM);Taq酶 0.14μL(2U/μL),模板 1μL(50 ng/
μL),其余为蒸馏水 。扩增条件为 94 ℃变性 5 min,
接以 94 ℃ 1 min, 46 ℃ 2 min, 72 ℃ 1min,循环 30
次 ,最后 72 ℃保温 10 min, 4 ℃存放。取 2μL检测
确保扩增成功后 ,留下的纯化并测序 ,所用测序仪器
为 ABIPRISM3730。 matK基因序列的范围根据已
报道的同科的云南桂花的 matK序列确定。其序列
长度为1 158bp,序列号为 FJ263956。
3　结论
实验结果表明 ,连翘叶虽然质地较薄 ,但栅栏组
织发达 ,海绵组织细胞排列也较紧密;主脉处上 、下
表皮内侧均无机械组织;气孔不定式 ,副卫细胞 4 ～
6个。嫩枝表面有沟槽 ,表皮完整;维管柱椭圆形 ,
韧皮纤维多散在 ,髓发达 。粉末中韧皮纤维多散在 ,
壁平滑或波状 ,木薄壁细胞类方形 ,纹孔明显 。这些
特征都可以作为连翘叶鉴定的依据。分子鉴定也是
非常好的鉴定依据 ,尤其可以用以鉴别同属内叶片
形态非常难以区分 ,即混淆品的鉴别。
参 考 文 献
[ 1] 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 [ S] .一部 .北
京:化学工业出版社 , 2005:117-118.
[ 2] 朱凤云 , 陈志红 , 王春雷 , 等 .连翘叶采收期探讨 [ J] .
中药材 , 2002, 25(8):547-548.
[ 3] LiangH, HiluKW.ThematKgene:sequencevariation
andapplicationinplantsystematics[ J] .AmericanJournal
ofBotany, 1997, 84(6):830-839.
·701·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 5期 2009年 5月