全 文 ：〔鲍班夏煎, , , , , , 》 》 , , , , , , 、j
广西瑶族藤茶中双氢杨梅树皮素的含量测定方法研究 `
覃洁萍 ,谭建宁 , 欧 莹 ,陆石英
(广西 中医学院药学院 , 南宁 5 3000 1)
〔摘要」 目的 :建立广西瑶族藤茶中有效成分双氢杨梅树皮素 ( id h y山or n l州 ce t in) 的 RP 一HP L C 定量分析方法 。
方法 :采用 hS irn aP ck C L C ( 150 ~ X 4
.
6
~
,
5哪 ) , 流动相为甲醇 一0 . 05 %磷酸 ( 5 : 45 ) ,流速 1 . o m L . m in 一 ’ ,检测波
长 29 2 nm 。 结果 :双氢杨梅树皮素在 0
.
81 6一 4
.
0 8腮 范围内线性良好 , 二 二 0 . 9 9 9 , 平均回收率为 98 . 8 % , RDS <
2
.
3 % (
n = 9)
。 结论 :本法快速 ,简便 , 重复性好 , 可作为藤茶的质量控制方法 。
【关键词 〕 藤茶 ;双氢杨梅树皮素 ;反相高效液相色谱法
【中图分类号 ] 2R 8 4 ; 2R 8 9 . 5 [文献标识码」A [文章编号」10 03 一 37 34 ( 20 04 ) 10 一 0 9 15 一 0 3
R P
一
H P L C d e t e m i
n a t i o n o f d ih y d r o m y r i e e t i n in
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8 1 6一 4 . 08拼g ( r = 0 . 99 9 9 ) . T h e a v e r昭 e r e co v e r y
r a t e w a s 98
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8 % w i t h R SD ( 2
.
3 % (
n = 9 )
.
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t h e q u al i t y co n t or l o f d ih y d r o ln y r i e e t i n
.
[K e y w o
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广西瑶族藤茶系葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡
萄 A m介 105 15 g or s de n at at
·
( H an d
.
M az z ) W
.
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.
W an g 的嫩茎叶经传统加工揉制 、 干燥而成 。 味甘 、
淡 , 性凉 , 具 有清热解 毒 、 祛 风 湿 、 强筋 骨之功
效〔’ , “】。 藤茶中主要有效成分为黄酮类化合物 ,其
中双 氢 杨 梅树 皮 素 ( d ih y domr y
r i e e t i n ) 含 量最
高〔” · 4〕 ;药理实验表明 ,藤茶中的黄酮类成分具有较
好的降血糖 、 降 血脂 、 抗氧 化及保肝 护肝 的作
用 [5 ,“ 〕。 我们课题组正在研究一种 以双氢杨梅树皮
素为主要成分的用 于治疗高血脂和糖尿病的药物 ,
前期药效学实验已显示出明显的药理活性 。 为了更
好地控制在生产过程中藤茶药材的质量 , 本实验建
立了 RP - H P L C 测定藤茶中双氢杨梅树皮素的含量
测定方法 。
仪器与试药
gA i l
e n t 一 1 1 00 高效液相色谱仪 , G 1 3 14 A 型
V丫门〕紫外检测器 , G 13 1 3 A 型 自动进样器 , G 13 16 A
型智能化柱温箱 。 G 13 l l A 型四元梯度泵 , G 1 322 A
型脱气机 。
甲醇为优级纯 (北京化工厂 ) ;水为高纯水 ;磷酸
为分析纯 (广东化学试剂厂 ) 。 双氢杨梅树皮素对照
品为从广西瑶族藤茶中提取分离得到 , 经 U V , M S ,
` H N M R和 IR 光谱分析鉴定结构 ,其提取分离流程
和结构鉴定数据详见参考文献 〔3 ] ,用 H PCL 归一
化法检测其纯度在 98 . 5% 以上 。 双氢杨梅树皮素
, 基金项目 : 国家中医药管理局资助项 目 ( o 一 01 L M 0 1 )
915
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a lo f Ne wD川只 52 0 04, Vo l
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.
10
结构见图 1 。 藤茶购于广西恭城县 ,并经我院刘寿
养副教授鉴定为 A m加 lop is g or s se 汉e n at at 的干燥嫩
茎叶 ,经传统工艺加工制作而成 。
图 1 双氢杨梅树皮素结构图
咙 1 S t nj eutr e of id 冲如 m y巧e e t in
方法与结果
1 溶液的制备
1
.
1 对照品溶液 精密称取纯度为 98 . 9 % 的双氢
杨梅树皮素对照品 10 . 3grn , 置 25 m L 量瓶中 ,用 甲醇溶解并定容 , 制成 0 . 4 08 mg
.
n 1L
一 `的溶液作为对
照品溶液 。
1
.
2 样品溶液 取藤茶细粉适量 , 置 25 m L 量瓶
中 ,加人甲醇 20 1 l l L ,超声 40 而n , 使其有效成分溶
解 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,静置 ,作为供试品溶液 。
2 色谱条件及系统适用性
色谱 柱 : Sh im p a kC C L C O D S 柱 ( 150mrn X
4
.
6
mrn
,
5脚 ) ;流动相 : 甲醇一0 . 05 % 磷酸 ( 55 : 4 5 ) ,
流速 : 1 . o rn L . 而 n 一 ’ ;检测波长 2 92 nr ,柱温 : 25 ℃ 。
在此色谱条件下 , 双氢杨梅树皮素对照品溶液和藤
茶供试品溶液的色谱图见图 2 。
中国新药杂志 20 04 年第 13 卷第 10 期
定双氢杨梅树皮素的峰面积 ,计算得 RSD 为0 . 2% 。
5 稳定性试验
精密称取双氢杨梅树皮素对照 品 1 0grn , 置
2 5 1l l L 量瓶中 ,用甲醇溶解并定容 。 避强光放置 , 每
隔 Z h 进样测定 1 次 ,每次进样 5拜L ,测定双氢杨梅
树皮素的峰面积 。 结果表明在 s h 内测得的峰面积
无明显变化 , R S D 为 2 . 1% 。
6 加样回收率试验
精密称取已知双氢杨梅树皮素含量的藤茶特级
品细粉 20 grn 3 份 , 置 25 m L 量瓶中 ,分别准确加人
高 、 中 、低 3 个不同量的双氢杨梅树皮素 , 加人甲醇
2 0 n 1L
,超声 40 而 n ,使有效成分溶解 , 最后加甲醇至
刻度 ,摇匀 ,放置 , 作为供试品溶液 。 按 “ 色谱条件 ”
项下进行测定 ,进样 5拌L ,测得双氢杨梅树皮素在样
品中的总含量 ,计算公式计算加样回收率 ;重复以上
测定 3 次 , 结果见表 1 ;3 个组的平均 回收率为
9 8
.
8 % (
n = 9 )
。
表 1 藤茶样品中双里杨梅树皮素的加样回收率
’
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d ih yd 门m y n ce t i n in A m脚忍op s臼岁仍 s司助盆浏。 n = 3
样品含量介名 . 加人量小g 测得总量今 g 回收率 / % F S D /%
飞ù00,` J.二,lOù09781
.
57 6
1
.
57 6
1
.
57 6
0
.
4 20
0
.
8 40
1
.
2 60
1
.
9 87
2
.
40 6
2 8 34
4 5 6 7 2 3 4 5 6
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对照 品 样品
1 双氢杨梅树皮素 ;2 杨梅树皮索
图 2 藤茶中双氢杨梅树皮素含量测定的 F IP CL 色谱图
iF g 2 H P LC c h or ma tq 犷日 r 巧 for d et e r r ” n a it on of
山h y dj or m iyr e e t in in A 刀诬加 Z。放: g 旧 5岛苗沈 at at
3 线性关系考察
分别吸取 0 . 408 mg . m L 一 `对照品溶液 2 , 4 , 6 ,
8
,
10拌L , 在上述色谱条件下进样测定 , 以对照品的
进样量 X (拌g ) 对峰面积的积分值 Y 进行线性回
归 ,结果表明 , 在 0 . 816 一 4 . 08 拌g 范围内 ,进样量与
其峰面积之间呈良好的线性关系 , 双氢杨梅树皮素
回归方程为 : Y = 80 8X 一 12 . 7 , r = 0 . 99 9 9 ( n = 5 ) 。
4 精密度试验
精密吸取浓度为 0 . 408 n罗 m L 一 `的双氢杨梅树
皮素对照品溶液 ,连续进样 5 次 , 每次进样 5拜L ,测
一 9 16 一
7 重复性试验
精密称取藤茶特级品细粉 5份 ,均按 “ 供试品溶
液的制备 ” 方法制备供试液 ,再按 “ 色谱条件 ”项下进
行测定 , 结果显示该法重复性较好 , R SD 为 2 . 0 % 。
8 样品含贵测定
精密称取藤茶样品细粉 (特级品 、 一级品 、 次级
品 ) 2 8grn 各 3 份 ,制备供试液 ,再按 “ 色谱条件 ” 项下
进行测定 ,进样 5拌L ,根据测得的峰面积计算样品中
的双氢杨梅树皮素的含量 ,结果见表 2 。
表 2 藤茶样品中双氮杨梅树皮紊含 . 测定结果
几b 2 l h e s 刃” p le 血 et n in an t ion 州治 ul st o f
山 h y d门m州ce it n in A m彬协SP钻 g m“ 司玩才以“ n = 3
藤茶样品 双氢杨梅树皮素含量平均值 / % RS D / %
特级品 39 . 4 2 . 4
一级品 36 . 7 2 . 0
等外品 32 . 6 2 . 8
讨 论
双氢杨梅树皮素 久~ 为 2 92 nr 。 经考察 , 用
29 2~ 作为检测波长 , 可获得较高的测量灵敏度 ,
且色谱峰形较好 ,故选择此波长进行检测 。
藤茶中主要成分为双氢杨梅树皮素 ,并含少量
的杨梅树皮素 ;以上 2 种成分结构相近 ,若流动相选
{,JI, .`刁且,ùùlesL1.J
C肠 n es Jo urn 目 of N e w D r u只5 2 0 0 4 , VO I
,
1 3 N o
.
10
择不好 , 则 2 峰不易分开 。 实验中曾试用过不同比
例的甲醇 一水 , 乙睛 一水等流动相组成 ,分离效果均不
理想 。 经实验摸索用甲醇一 0 . 05 %磷酸 ( 5 : 45 )可获
得较好的分离效果 。
经考察 ,藤茶样品细粉需超声 40 m in 才能使有
效成分得到充分溶解 。 取同一级别藤茶样品细粉分
别超声 1 0 , 2 0 , 30 , 4 0 和 50而n ,结果表明 ,超声 10一
30 而 n ,提取液中双氢杨梅树皮素的含量低且差异
不显著 ,超声 40 而 n 后 ,提取液中双氢杨梅树皮素的
含量明显升高 ,而在超声 50 m in 后 ,提取液中双氢杨
梅树皮素含量稍有降低 ,原因尚不清楚 。 故本实验
采取超声 40 m in 提取 。
[作者简介」 覃洁萍 ( 1% 2 一 ) ,女 ,教授 。 主要从事中药和
天然药物及其制剂的成分分析。 联系电话 : ( 07 71 )29 93 5 93 ,
-E朋! : c ih n~ 旬p@ nsT n . ~ 。
参 考 文 献
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.`r
l
[ 6〕
广西中医药研究所 . 广西药用植物名录【M 〕.南宁 :广西民族出
版社 , 19 7 4 . 2 0 2 一 2 0 6 .
《全国中草药汇编》编写组 . 全国中草药汇编【M 〕. 下册 . 北京 :
人民出版社 , 1978 . 7 8 .
覃洁萍 , 许学健 ,李剑江 .广西瑶族藤茶化学成分的研究 〔J〕. 天
然产物研究与开发 , 1 9 9 7 , 9 ( 4 ) : 4 1 一 4 3 .
覃洁萍 ,许学健 , 董明娇 . 广西藤茶中黄酮类成分的提取工艺研
究 [ J ] . 中国现代应用药学杂志 , 2 0 0 0 , 17 ( 3 ) : 1 9 6 一 1 9 7 .
覃洁萍 , 许学键 ,钟正贤 ,等 广西藤茶中双氢杨梅树皮索的提
取 、鉴定及药理活性研究 〔J] . 中国中药杂志 , 19 9 , 24( 增刊 ) :
8 5
.
覃洁萍 , 钟正贤 ,周桂芬 ,等 . 双氢杨梅树皮素降血糖的实验研
究 [ J」. 中国现代应用药学 , 2 0 0 1 , 1 8 ( 5 ) : 3 5 1 一 3 5 2 .
(收稿日期 : 20 0 4 一 0 6 一 0 3 )
毛细管气相色谱法测定阿德福韦醋中残留溶剂的含量
武向峰` ,柴逸峰 2 ,沈 娟 ` ,娄子洋 2 ,李 科 2
( 1 中国人民解放军总后勤部药品仪器检验所 ,北京 10 0 0 71 ;2 第二军医大学药学院 ,上海 2 00 4 33)
【摘要」 目的 :建立 阿德福韦醋中残留溶剂的含量测定方法 。 方法 : 采用 HP 5 890 气相色谱仪 , PH 一 F F AP 石
英毛细管柱 ( 50 m X 0 . 32nlt
,
0
.
52 脚 ) ,高纯氮气为载气 , F DI 检测器 , D M F 溶液直接进样 ,外标法进行测定 。 结果 :
所建立的色谱方法对待测溶剂具有 良好的分离度 , 在所考察的浓度范围内线性关系 良好 , 各溶剂的回 收率在
9 7
.
9% 一 10 3 . 4 % ,最低检测限 38 一 52 gn 。 结论 : 本实验所建立的方法简便快捷 ,稳定可靠 ,能用于阿德福韦醋中残
留溶剂的检测 。
〔关键词」 毛细管气相色谱法 ;阿德福韦醋 ;残留溶剂 ; 直接进样
[中图分类号 ] 9R 2 7 . 2 ; 9R 7 8 . 7 【文献标识码 I A [文章编号 ] 100 3 一 3 73 4 ( 20 04 ) 10 一 0 917 一 0 3
D e t e r 刃n i n a t i o n o f r韶 id u a l 沁I v e n t s i n a d e fo v i r
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L肋 s atr e t ] O bj ec t i v e : T o es t ab l ihs a m e tho d f o r d e t emr i n a t i o n o f t h e er s id u a l 、 Iv e n t s i n a d e -
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