全 文 ：亚 太 传 统 医 药
Asia-Pacific Traditional Medicine
Vol. 5 No. 11%
Nov. 2009
第 5 卷 第 11 期
2009 年 11 月
收稿日期：2009－08－10
作者简介：黎莉（1962-），女，博士，武汉工程大学化工与制药学院教授、硕士生导师，研究方向为中药活性成分及制剂。
正交实验法优选陆英总黄酮的提取工艺
周 文，黎 莉 *，戴立珍，杨 靖，韩新才，辛敏甲
（武汉工程大学 绿色化工过程教育部重点实验室；
湖北省新型反应器与绿色化学工艺重点实验室，湖北 武汉 430073）
摘 要：目的：筛选陆英总黄酮的最佳提取工艺。 方法：采用正交实验法，以总黄酮含量为考察指标，比较不同
乙醇浓度、溶剂用量及提取时间对提取效果的影响。 结果：最佳提取工艺为：10倍量60％乙醇，回流提取3次，每
次40min。 结论：优选的陆英总黄酮提取工艺合理稳定，可为制定陆英的质量标准提供一定的实验依据。
关键词：陆英；总黄酮；提取工艺；正交实验
中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1673－2197（2009）11－0030－02
中药陆英为忍冬科接骨木属植物陆英 Sambucus chi-
nesis Lindl.的全草，又名八棱麻、接骨木、八里麻。 全年可
采，洗净切碎，晒干或鲜用。 陆英是我国民间常用草药，产
于全国各地，资源丰富［1－2］。 陆英具有活血散瘀、祛风活络、
发汗利尿的功效。用于跌打损伤、风湿痛、脱臼、肾炎水肿、
脚气水肿、荨麻疹。黄酮类化合物是陆英的活性成分之一，
对陆英的总黄酮进行含量测定，可以将其作为检测陆英质
量的一个标准［3］。 中药制剂陆英片、陆英颗粒、陆英糖浆的
质量标准均建立了总黄酮含量测定方法 ［4－6］。 作者在前期
的实验研究中发现新鲜陆英中总黄酮含量高于干品（将鲜
品折算成相应重量的干品以便于比较）， 故本文采用正交
实验对新鲜陆英叶中总黄酮的提取工艺进行优化，将为该
药材的质量标准及开发利用提供一定的实验依据。
1 材料
紫外可见分光光度计（T6 新世纪，北京普析通用仪器
公司）；陆英于 2009 年 9 月采自武汉市洪山区，经中南民
族大学万定荣教授鉴定为忍冬科植物陆英 Sambucus chi-
nesis Lindl.；芦丁对照品（批号 100080－200306，中国药品
生物制品检定所）；所用试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 标准曲线的制备
精密称取在 120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品，以
60％乙醇为溶剂，制得芦丁标准溶液（0.200mg·mL－1）。精密
吸取芦丁标准溶液 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL 分别置于 25mL
的容量瓶中，加 5％亚硝酸钠溶液 1mL，摇匀，放置 6min，
加 10％三氯化铝试液 1mL，摇匀，放置 6min，再加 5％的氢
氧化钠 10mL，加水至刻度摇匀，以第一管为空白对照，于
波长 510nm 扫描，测定吸光度。 绘制浓度—吸光度曲线，
求得回归方程为：Y＝0.0118X－0.0066，R2＝0.9992。线性范围
为：0～0.040mg·mL－1。
2.2 正交实验设计
采用 L9（34）正交表进行实验（见表 1），以总黄酮含量
为指标，选择乙醇浓度、溶剂量、提取时间 3 种影响因素，
每个样品的提取次数均为 3次。
表 1 正交实验因素水平表
水平
A B C
乙醇浓度/％ 溶剂量/倍 提取时间/min
1 40 8 30
2 60 10 40
3 80 12 50
2.3 供试品溶液的制备及测定
依据表 1 排定的实验， 称取定量已切碎的陆英叶鲜
品，加入一定浓度和体积的乙醇溶液，回流提取一定时间，
滤过。 提取 3次，将 3次滤液合并，定容为供试品溶液。
精密吸取供试品溶液 3.0mL，按标准曲线项下方法进
行总黄酮吸光度的测定，代入芦丁标准曲线方程得出质量
浓度，计算各样品中总黄酮的百分含量（以芦丁计）。
2.4 方法学考察
2.4.1 稳定性实验
取供试品溶液 3.0mL， 按标准曲线项下方法操作，并
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每隔 5min测定 1次吸光度。结果表明，供试品溶液与三氯
化铝形成的红色络合物不稳定， 显色 25min 后吸光度由
0.665 下降到 0.590，下降了约 11％，故建议显色定容后立
即测定。
2.4.2 精密度实验
取 5 份试样液，按标准曲线项下方法，自“分别置于
25mL 的容量瓶中”起，同法操作，对试样液中进行平行测
定。 总黄酮含量均值为 1.30％，RSD＝0.56％（n＝5）。
2.4.3 重复性实验
取同一批切碎的陆英鲜品 5 份，精密称定，按供试品
溶液的制备和标准曲线项下方法测定总黄酮的含量，均值
为 1.302％，RSD＝0.86％（n＝5）。
2.4.4 回收率实验
准确称取 5 份已知总黄酮含量为 1.521％的样品 10g，
分别制备为供试液，加入定量的芦丁标准品，按标准曲线
项下方法测定总黄酮含量，计算加样回收率。 结果平均回
收率为 98.5％，RSD＝0.65％（n＝5）。
3 结果与分析
（1）正交设计实验结果见表 2，方差分析结果见表 3。
表 2 正交实验结果
编号 A B C D
1 1 1 1 1
2 1 2 2 2
3 1 3 3 3
4 2 1 2 3
5 2 2 3 1
6 2 3 1 2
7 3 1 3 2
8 3 2 1 3
9 3 3 2 1
K1 3.489 3.845 4.076 4.047
R 0.286 0.186 0.064 0.043
总黄酮/%
1.159
1.297
1.033
1.383
1.548
1.415
1.303
1.502
1.340
K2 4.346 4.347 4.020 4.015
K3 4.145 3.788 3.884 3.918
表 3 方差分析结果
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F P
A 0.134 2 0.067 44.514 0.022
B 0.063 2 0.032 20.970 0.046
C 0.006 2 0.003 2.161 0.316
D 0.002 2 1.000
Σ 0.205 8
注：F0.05（2，2）＝19.00，F0.02（2，2）＝99.00。
（2）提取时间对提取效果的影响。
从表 2进行直接比较和计算比较的结果看出，最佳因
子水平组合分别为 A2B2C3和 A2B2C1，虽然从方差分析结果
看出，因素 C 对实验结果没有显著影响，仍需对单因素 C
进行考察，即固定 AB 2 因素为 A2B2，变动 C 因素的水平，
实验结果见图 1。 可见提取时间在 30min以上时总黄酮含
量变化不大，与方差分析结果一致，综合考虑经济因素，将
C因素的最佳水平确定为 C2即 40min。
图 1 提取时间对总黄酮含量的影响
（3）最佳工艺验证。
综合全部实验及结果分析可知，陆英总黄酮的最佳提
取条件为 A2B2C2， 即用 10 倍 60％乙醇提取 3 次 ， 每次
40min，在此条件下进行 3次重复性验证试验，经测定其总
黄酮含量分别为 1.552％、1.543％、1.560％， 表明提取效率
和重现性较好。
4 讨论
由于芦丁和陆英提取液经显色后的吸收图谱很相似，
分别于 510nm 和 492nm 处有最大吸收峰， 所以采用芦丁
为对照品测定陆英中总黄酮的含量。
经正交实验、 方差分析及对提取时间的单因素实验，
确定主次因素顺序为 A＞B＞C， 即乙醇浓度＞溶剂用量＞提
取时间，最佳提取工艺为 A2B2C2，即 60％乙醇 10 倍量，提
取 3 次，每次 40min。 乙醇浓度和溶剂用量均对提取结果
有显著影响，提取时间的影响不显著。 本文可为中药材陆
英的质量控制标准提供一定的实验依据。
参考文献：
［1］ 徐国钧，徐珞珊，金蓉鸾，等．中国药材学［M］．北京：中国医药科
技出版社，1996：1601.
［2］ 全国中草药汇编编写组 ．全国中草药汇编（上册）［M］．北京：人
民卫生出版社，1983：437.
［3］ 涂剑平，汪玢，何京，等 ．分光光度法测陆英中总黄酮含量时
NaOH的用量研究［J］．江西医学院学报，2005，45（4）：140，142.
［4］ 汪玢，张宁，何京，等．陆英片中总黄酮的含量测定［J］．江西医
学院学报，2006，46（4）：148-50.
［5］ 汪玢，张宁，何京，等．陆英颗粒质量标准研究［J］．中国现代中
药，2007，9（8）：15-16，19.
［6］ 何京，汪玢，涂剑平，等 ．陆英糖浆质量标准研究［J］．时珍国医
国药，2006，17（12）：2536-37.
（责任编辑：胡 静）
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Optimization of Extraction Process of Flavones from Sambucus Chinesis
Lindl by Orthogoral Test
Zhou Wen，Li Li*，Dai Lizhen，Yang Jing，Han Xincai，Xin Minjia
（KeyLaboratoryforGreenChemicalProcessofMinistryofEducation，HubeiKeyLaboratoryofNovelChemical
Reactor&GreenChemicalTechnology，WuhanInstituteofTechnology，HubeiWuhan430073，China）
Abstract：Objective :To optimize the extraction conditions of the total flavonoids from Sambucus chinesis Lindl.Methods:The
orthogonal test was carried out.The influence of solvent concentration，the dosage of solvent and time of extraction were investigated with
the content of total flavonoids as index.Results:The optimum extraction procedure was described as follows：the concentration of alcohol
was 60%，volume of alcohol was 10 times amount of herb，and the herb was extracted 3 times with 40min for each time.Conclusion：The
optimum extraction procedure is reasonable and stable，which can provide some experimental evidence for making quality specification of
Sambucus chinesis.
Key Words:Sambucus chinesis Lindl；the total flavonoids；Extraction conditions；Orthogonal test
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
收稿日期：2009－09－22
基金项目：科技部国际合作项目（2008DFA31650）；陕西省国际合作项目（2008KW－29）
作者简介：王佺珍（1963－），男，博士，西北农林大学副教授，研究方向为植物资源和植物天然产物开发利用。崔健（1964－），西北
农林科技大学副教授，主要从事植物资源和药用植物开发利用的教学和研究。
中草药菊苣天然产物的药效药理及开发前景
王佺珍 1，崔 健 2*
（1.西北农林科技大学 动物科技学院，陕西 杨凌 712100；
2.西北农林科技大学 生命科学学院，陕西 杨凌 712100）
摘 要：菊苣天然产物药效主要有降血糖、降血脂、降尿酸作用、保肝作用以及对消化系统和心血管系统的影
响作用，并促进对钙的吸收，提高机体免疫力，在抗过敏、抗菌、抗病原微生物等方面有一定作用；其主要化学
成分有糖类、有机酸类、生物碱类、三萜类、倍半萜类和香豆素等；目前对其天然药效利用除了作为中草药利用
外，主要用于保健饮品和功能性食品开发，未来在特效药品开发方面极具开发潜力和利用前景。
关键词：菊苣；药效；临床药理；开发前景
中图分类号：R285 文献标识码：A 文章编号：1673－2197（2009）11－0032－04
利用中草药活性成分研发新药是我国药物研究工作
的特色，也是一条业界公认的捷径［1］。中医学中广泛应用的
化学药物，其一半左右来源于天然化合物及其衍生物或类
似物。 我国 50年来研究成功的化学新药中 90％以上与天
然产物有关［1］。例如，目前大约 60％的抗肿瘤药物都是从植
物中开发得到的，而感染、免疫和代谢疾病的治疗也期待
效果更强的天然产物药物、类似物或衍生物的出现 ［2］。 由
此，为研发新药，业界学者越来越多对植物天然产物进行
成分、药效和药理的深入研究［3－6］。
菊苣（Cichorium intybus L）是菊科菊苣属多年宿根植
物，是维吾尔族和蒙古族习用药材（维吾尔药志，1999）。国
外亦有菊苣药用的报道［7，8］。
近年来，通过对菊苣天然产物化学成分和临床药效药
理研究的不断深入， 发现菊苣提取物具有众多生理活性，
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