全 文 ：2010 年 月第 卷第 期 陕 西 中 医 学 院
即
学 报
法测定土贝消肿汤中熊果酸和土贝母普甲的含量
金 良 , 唐俊琪
陕西中医学院 ,陕西 成阳 西安医学院 ,陕西 西安
摘 要 目喃 建立土贝消肿汤中熊果酸和土贝母等甲的含量共同测定方法。方技采用 一 法 , 色谱
柱为 色谱柱 , 林 及保护柱 流动相为甲醉一 盐酸 氛水调 至 梯度
洗脱 ,体积流量为 ,检刚波长为 。 浩果 熊果酸进样量在 一 卜 范围内线性关系良好 ,
回归方程为 二 二 , 平均加样回收率为 , 土贝母普甲进样
量在 卜 范围内线性关系良好 ,回归方程为 二 一 , 平均加样回收率为
, 。 祛格 此方法准确 、可靠 、重复性好 ,可作为土贝消肿汤中熊果酸和土贝母答甲含量共同
测定 方法 。
关键词 土贝母普甲 熊果酸 共同测定
中图分类号 文献标识码 文章编号 一 一 一
土贝消肿汤由夏枯草 、土贝母等组成 ,本制剂
具有较好的软坚散结作用 ,主治恶性淋巴瘤 。其中
夏枯草有降压 、降糖 、抗茵 、抗炎 、抗过敏及抗病毒
等功效 ,主要用于治疗 目赤肿痛 ,畏光流泪 ,乳腺
炎 ,乳癌 ,单纯性甲状腺肿 ,腮腺炎等川 ,夏枯草含
有丰富的三菇类化合物 ,主要为齐墩果烷型 、乌苏
烷型和羽扇烷型三菇 土贝母具有清热解毒 、消肿
散结的功效 ,皂昔类为土贝母中的主要活性成分 ,
含量较大 。因此 ,我们采用反相高效液相色谱法建
立了土贝消肿汤中熊果酸和土贝母昔甲的含量测
定方法 ,为进一步阐明本方治疗淋巴瘤的机理提供
分析方法并缩短了分析时间 。
仪器与材料
仪器 岛津 一 液相色谱仪
色谱柱
, 卜 保护柱 型电子分析天平 德
国 公司 。
药品和试剂 土贝母昔 甲标准品 批号为
一 刃 、熊果酸对照品 批号为
均购 自中国药检所 进 口甲醇 公
司 盐酸 、氨水为分析纯 水为高纯水 。
方法与结果
色谱条件 色谱柱 柱
, 林 ,以甲醇和 盐酸 氨水调
到 溶液为流动相 ,采用梯度洗脱 ,比例见表
流速 检测波长为 。见图 。
表 甲醉 盐酸流动相梯度表
时间 盐酸甲醉
丫 三 别
手舞 舞
吞 士 、白 鸽 书
图 色谱分析图
土贝母昔甲对照品 熊果酸对照品 土贝消肿汤制剂样品
DOI :10.13424/j.cnki .jsctcm.2010.03.042
陕 西 中 医 学 院 学 报 年 月第 卷第 期
郎
方药的提取 按土贝消肿汤处方称取各位中 林岁 的熊果酸对照溶液 ,分别进样 次 ,按
药 ,按传统水煎方法提取 次 ,加水量分别为 倍 , “ ”项下色谱条件测定 ,记录色谱图 ,将峰面积
倍 ,每次 ,合并煎煮液 ,浓缩 ,喷雾干燥成干 代人线性方程 ,求出计算浓度 ,并计算相对标准偏
膏粉 ,备用 。 差 ,结果见表 。
对照品溶液的制备 精密称定熊果酸标品 表 熊果酸对照品溶液的精密度和回收率 。二
,用无水乙醇定容至 容量瓶中 ,得母 熊果酸标液 低浓度 中浓度 高浓度
液浓度为 林岁 的标准溶液 ,再分别取对应 配制浓度 闻
量用无水 乙醇稀释成浓度为 、 、 、 、 计算浓度 闻 士 以 , , 叨
卜扩 的系列浓度熊果酸标准溶液 。 回收率 土。· · 士。· · 士。·精密称取土贝母昔甲 ,用无水乙醇定 精密度 · ·
容于 的容量瓶中 ,分别精确移取相应体积的 选浓度为 、 、 协酬 的土贝母昔甲
土贝母昔甲标准溶液 ,用无水乙醇稀释成 、巧 对照溶液 ,分别进样 次 ,按 “ ”项下色谱条件
、 、 、 林酬 的土贝母昔甲标准品溶液 。 测定 ,记录色谱图 ,将峰面积代人线性方程 ,求出计
供试品溶液的制备 精密称取处方干膏粉 算浓度 ,并计算相对标准偏差 ,结果见表 。
,置 锥形瓶中 ,精密加人甲醇 ,称 表 土贝母普甲对照品溶液的精密度和回收率 凡
重 ,超声提取 ,取出补重 ,过滤 。滤液蒸干后用 土贝母普甲标液 低浓度 中浓度 高浓度
无水乙醇溶解 ,定容于 容量瓶 中 ,过滤后 配里浓度 闻
即得 。 计算浓度 林 , ,
线性范围的测定 分别精密吸取各对照品溶 回收率 士 士。
液 林 , 按 色谱条件测定 ,以浓度 为横坐 精密度 · 。· ·
标 ,峰面积 为纵坐标进行回归 ,得熊果酸标准曲 加样回收率考察 精密吸取 “ ”项下供试
线方程 二 , ,进 液 ,加人土贝母昔甲对照溶液和熊果酸对照溶
样量在 一 协 范围内线性关系良好 土 液一定量 ,混匀 ,过滤 ,按 “ ”项下色谱条件分别
贝母昔 甲标准曲线方程 一 测定峰面积 ,根据标准曲线计算含量 ,计算平均加
, ,进样量在 一 卜 范围内 样回收率和 ,结果见表 。
线性关系良好 。
精密度及回收率的测定 选浓度为 、 、
表 土贝母普甲和熊果酸加样回收率 二
样品 平均配制浓度 林扩词
平均计算
浓度 卜酬
平均含
贵
平均加样
回收率
土贝母替甲
熊果酸
土
士
稳定性考察 分别于 , , , , , 测定
土贝母昔甲和熊果酸各中浓度标品的峰面积 次 ,
计算 ,结果土贝母昔甲峰面积 ,
熊果酸峰面积 。说明熊果酸和土贝
母昔甲在 稳定 。
, 含量测定 按 “ ”项下供试品溶液制备方
法制备供试品溶液 份 ,分别吸取 林 ,按 “ ”
色谱条件进行分析 ,测定峰面积并计算含量 ,结果
供试液 中熊果酸含量分别为 、 、
,平均含量为 土贝母昔甲含量为
、 、 ,平均含量为 。
讨论
熊果酸在 波长下有最大吸收 ,土贝母
昔甲在 波长下有最大吸收川 ,因此本实验
采用 作为测定波长 。我们尝试用乙睛和
的醋酸作为流动相 ,但在 下检测因醋酸
的末端吸收 ,导致基线严重漂移 ,改用 盐酸
代替 的醋酸 ,用氨水调 到 ,此条件
下 ,土贝母昔甲在各个梯度相应位置无色谱峰 。最
终我们确定用进口甲醇和 盐酸 氨水调
到 采用梯度洗脱的方法 ,结果 色谱图
清晰 ,熊果酸和齐墩果酸分离度 ,且方法精
密度 、加样回收率 均在 范围内 。
实验中基线有一定的漂移 ,但不影响积分 ,此
方法精密度以及线性关系良好 ,有效的缩短了分析
时间 。
参考文献
〔 〕顾晓洁 ,钱士辉 , 李友 ,等 夏枯草的化学成分及药理作
用研究进展【 , 中国野生植物资源 , , 一
仁 〕国家药典委员会 中华人民共和国药典【 北京 化学
工业出版社 , , 收稿 日期 一 一