全 文 ：参考文献:
[ 1] 　梁龙 ,戴静.穿心莲防治心血管疾病的研究进展[ J] .中草药 ,
1996 , 27(1):52-54.
[ 2] 　高福军 ,张文高.穿心莲的心血管药理作用研究进展[ J] .中草
药 , 2000 , 31(10):W6-8.
[ 3] 　王建升 ,陆丽珠.穿心莲药理研究最新进展[ J] .国外医学:中医
中药分册 , 1998 , 20(6):3-5.
[ 4] 　陆付耳 ,李鸣真 ,叶望云.清热解毒治法研究的思路与方法[ J] .
中国中西医结合杂志 , 2004 , 24(12):1124-1129.
[ 5] 　张瑶珍 ,唐锦治 ,张玉金 ,等.穿心莲提取物抗血小板聚集与释
放作用及其机理的研究[ J] .中国中西医结合杂志 , 1994 , 14
(1):28-30.
[ 6] 　黄振倩 ,张瑶珍 ,张东华 ,等.穿心莲提取物 F0134抗红细胞膜氧
化损伤的实验研究[ J] .同济医科大学学报 , 1999 , 28(4):332-
334.
[收稿日期] 2007-10-21
[ 作者简介] 王玉亮 ,男 ,硕士研究生 ,助理研究员 ,电话:021-62824073 , E-mail:w angyuliang@sjtu.edu.cn
水龙骨镇痛抗炎有效部位的筛选
王玉亮1 ,张磊2 ,辛海量3 　(1.上海交通大学农业与生物学院 , 上海 200240;2.第二军医大学药学院生药教研室 , 上海
200433;3.中国人民解放军第 546 医院 ,新疆 马兰 841700)
[ 摘要] 　目的:观察水龙骨提取物各极性部位的镇痛抗炎效果。方法:镇痛实验采用小鼠扭体法和小鼠热板法 , 抗炎实验采
用二甲苯致鼠耳肿胀法和角叉菜胶致大鼠足趾肿胀法。结果:水龙骨提取物的 A 部分对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀以及角
叉菜胶所致的大鼠足肿胀的抑制作用最强 ,能明显地抑制小鼠的化学性或物理性疼痛。结论:水龙骨大孔树脂 25%乙醇洗脱
部分应为抗炎镇痛的有效部位。
[ 关键词] 　水龙骨;镇痛 ;抗炎 ;有效部位
[中图分类号] R285.6　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2008)20-1749-03
Screening of anti-inflammatory and analgesia components in Poly podiodes ni ponica
WANG Yu-liang 1 ,ZHANG Lei 2 ,XIN Hai-liang3(1.School o f Ag ricultural and Bio lo gy , Shanghai Jiao tong Unive rsi-
ty , Shanghai 200240;2.Depar tment o f Pha rmacogno sy , Schoo l o f Pharmacy , Second M ilitary Medica l Univ ersity , Shanghai
200433 , China;3.No.546 Hospital of PLA , Xinjiang Malan 841700 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To investig ate the anti-inflammato ry and analgesia effect of different ex tr ac t of Poly podiodes ni pon-
ica.METHODS　Ho t plate and acetic acid w rithing test in mice w as used to evaluate the pain releasing effect of Polypodiodes
niponica , and the anti-inflamma to ry effec t w ere obser ved by means of dimethylbenzene inducing ear edema model and ca rrag-
eenan inducing r at voix pedis sw ell model.RESULTS　It w as found tha t fr action A of alcohol ex tract of Polypodiodes niponica
had the best anti-inflamma to ry effect and analg esia effect.CONCLUSION　The effective f raction of anti-inflammatory and anal-
gesia in Polypodiodes niponica was 25% ethano l elution fraction.
KEY WORDS:Poly podiodes niponica;analg esia;anti-inflammator y;effective fraction
　　水龙骨始载于《本草纲目拾遗》 ,以草石蚕名之 ,
《植物名实图考》名水龙骨 ,列入石草类 ,来源为水龙
骨科植物水龙骨[ Polypodiodes niponica (Mett.)Ch-
ing]的干燥根茎 ,性味苦 、凉 ,可化湿 ,清热解毒 ,祛风
通络 ,治痧秽泄泻 、痢疾 、淋病白浊 、风痹腰痛 、筋骨酸
痛 、跌打损伤等症[ 1-3] 。水龙骨在江浙一带医院和民
间被广泛地用于治疗风湿性关节炎 ,腰腿痛 ,并对肝
炎有一定的疗效。但文献调研中未见关于其药理的
研究 ,本实验以抗炎镇痛为指标 ,筛选水龙骨的有效
部位 ,为研究其药理作用和有效成分打下基础。
1　材料
旋转蒸发仪(上海鲁伊工贸有限公司);TC-15
套式恒温器(上海新华医疗器械有限公司);水龙骨
采自浙江天目山 ,经第二军医大学生药教研室张汉
民教授鉴定为水龙骨科植物水龙的干燥根茎;角叉
菜胶(美国 SIGMA 公司 ,批号 034K0128);阿司匹
林肠溶片(上海信宜百路达药业有限公司 , 批号
060201);95%乙醇和 D101大孔树脂(天津市海光
化工有限公司 ,批号 070809);二甲苯 ,醋酸均为分
析纯;SPF 级 ICR 小鼠 ,体质量 18 ～ 20 g , ♀♂兼
用;SPF 级 Wistar 大鼠 ,体质量 200 ～ 220 g , ♀♂各
半[ 上海斯莱克实验动物中心 , 动物合格证号:
SCXK(沪):2003-0003] ;实验环境温度(20 ±2)℃,
相对湿度 70%。
·1749·中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 20期 Chin H osp Pharm J , 2008 Oct , Vol 28 , No.20
2　方法与结果
2.1　水龙骨提取物的制备　取粉碎好的水龙骨药材
300 g ,置圆底烧瓶中 ,70%的乙醇回流提取 3次 ,每次
3 000 mL 70%的乙醇 ,回流 1 h 。合并提取液 ,回收
乙醇 ,减压蒸干 。将水龙骨提取物混悬于 300 mL 热
水中 ,过 D101大孔树脂柱 ,依次用 25%, 50%,75%,
95%乙醇各冲洗 10倍柱体积 ,分别浓缩干燥 ,得 A
(25%乙醇洗脱部分)、B(50%乙醇洗脱部分)、C(75%
乙醇洗脱部分)、D(95%乙醇洗脱部分)4 部分 ,与
70%乙醇总提物共 5种 ,作为供试药物。
2.2　镇痛实验
2.2.1　小鼠醋酸扭体法[ 4] 　选择体质量 18 ～ 20 g
的健康 ICR小鼠 70 只 , ♀♂各半 ,随机分成 7 组:
空白对照组(纯净水 ,10 mL·kg-1);阳性对照组(阿
司匹林 , 5 mg·kg-1);总提物组(4 .66 g·kg-1 ,相当
于生药 15 g·kg-1);A部分组(3.67 g·kg-1 ,相当于
生药 15 g·kg-1);B部分组(0 .32 g·kg-1 ,相当于生
药 15 g·kg-1);C部分组(0.18 g·kg-1 ,相当于生药
15 g·kg-1);D部分组(0.48 g·kg-1 ,相当于生药 15
g·kg-1)。水龙骨的给药剂量参考中华本草 ,治疗
风湿痹痛为成人每日用量 125 g ,小鼠的剂量为人的
6倍 ,约为 15 g·kg-1 。每日灌胃给药 ,连续 3 d ,末
次给药 1 h 后 ,小鼠腹腔注射0 .8%的醋酸(10 mL·
kg -1 ,醋酸溶液临用前配制),记录各组小鼠注射后
15 min 内扭体(腹部收缩内陷 ,四肢伸展)次数 。
2.2.2　鼠热板法[ 4] 　水温(55±0.5)℃,记录小鼠
从放入金属盒至出现舔后足反应所需时间(s),小于
5 s或大于 30 s或跳跃的都弃之不用 。取预选合格
的♀小鼠 70只 ,间隔 10 min后再重新测定痛阈值 1
次 ,将 2次的值取平均数作为小鼠给药前的痛阈值 。
实验分组及给药方法同前 。末次给药后 ,测定给药
1 h 和 2 h 后小鼠的痛阈值 。
2.3　抗炎试验
2.3.1　小鼠耳肿胀法[ 4] 　选体质量 18 ～ 20 g 的♂小
鼠 70只 ,分组和给药方式同前。末次给药 30 min后 ,
于小鼠右耳两面均匀涂抹二甲苯致肿 ,1 h 后将小鼠脱
颈处死 ,剪下双耳 ,用 9 mm 打孔器冲下两耳同一部位
的耳片 ,称重 ,以同一小鼠左右耳片之差为肿胀度。
2.3.2　大鼠足肿胀法[ 4] 　选 180 ～ 200 g 的大鼠 70
只 ,分组和给药方式同前 。末次给药 1 h后 ,分别于
大鼠右后足跖下注射 1%角叉菜胶0.1 mL致炎。致
炎前测量足容积 ,致炎后每 1 h测一次 ,至 6 h ,前后
容积差为肿胀度 。
2.4　结果
2.4.1　水龙骨对醋酸致小鼠扭体反应的影响　水
龙骨的总提物和 A 部分可降低醋酸致小鼠扭体的
次数 ,与空白对照组比较差异有显著性(P <0.01),
结果表明水龙骨的总提物和 A 部分对醋酸腹腔注
射所致的小鼠疼痛有抑制作用 , 5 种试验药中 A 部
分扭体次数最少。见表 1 。
2.4.2　水龙骨对小鼠热板反应的影响　结果水龙
骨 A 部分组具有和阿司匹林相似镇痛作用 , C 部分
也有一定的镇痛作用 ,但痛阈值高于 A 部分 ,且持
续时间较短。见表 2 。
表 1　水龙骨对小鼠扭体次数的抑制作用( x±s , n=10)
Tab 1 　Inhibition of polypodiodes niponica on acetic acid
w rithing of rat( x±s , n=10)
组别 剂量 扭体次数
空白对照组 10 mL·kg -1 18.9±7.0
阿司匹林组 5 mg·kg -1 7.2±6.0b
总提物组 4.66 g·kg -1 11.0±6.0a
A 部分组 3.67 g·kg -1 8.5±4.0b
B部分组 0.32 g·kg -1 17.3±7.0
C部分组 0.18 g·kg -1 18.8±4.0
D部分组 0.48 g·kg -1 16.7±8.0
注:与空白对照组比较 , aP <0.05 , bP <0.01
表 2　水龙骨对小鼠热板法痛阈值的影响( x±s , n=10)
Tab 2　Effect o f po lypodiodes niponica on the thre shold of
r at in Ho t plate( x±s , n=10)
组别 剂量 痛阈值/ s给药前 给药后 1 h 给药后 2 h
空白对照组 10 mL·kg -1 18.5±2.8 17.1±2.3 18.6±3.6
阿司匹林组 5 mg·k g -1 17.4±4.1 31.6±4.2a 23.4±3.5a
总提物组 4.66 g·k g -1 17.1±3.2 22.5±4.1 17.5±3.2
A 部分组 3.67 g·k g -1 18.9±2.5 29.5±4.3a 22.5±3.6a
B部分组 0.32 g·k g -1 16.9±4.2 18.4±3.9 13.6±2.1
C部分组 0.18 g·k g -1 18.4±3.0 22.3±3.2＊ 16.5±3.2
D部分组 0.48 g·k g -1 17.3±2.5 18.9±5.2 16.2±3.1
注:同一时间内与空白对照组比较 , a P<0.05
2.4.3　水龙骨对小鼠耳肿胀的影响　水龙骨的总提
物 、A和 C部分对二甲苯致小鼠的耳肿胀均有抑制作
用 , A部分左右耳片质量差小于C部分。见表 3。
表 3　水龙骨对小鼠耳肿胀的影响( x±s , n=10)
Tab 3　Effect of Polypodiodes niponica on dime thy lbenzene
inducing ea r edema( x±s , n=10)
组别 剂量 左右耳片质量差
空白对照组 10 mL·kg -1 5.0±1.7
阿司匹林组 5 mg·kg -1 2.3±0.6a
总提物组 4.66 g·kg -1 3.0±2.3a
A 部分组 3.67 g·kg -1 3.1±1.4a
B部分组 0.32 g·kg -1 4.9±2.3
C部分组 0.18 g·kg -1 3.5±1.2a
D部分组 0.48 g·kg -1 3.8±1.9
注:与空白对照组比较 , aP<0.05
2.4.4　水龙骨对大鼠足肿胀的影响　水龙骨的 A
部分从用药后 1 h 到 6 h都对角叉菜胶导致的大鼠
足肿胀有明显的抑制作用 ,总提物在用药后 1 h 有
抑制作用 。见表 4。
·1750· 中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 20期 Chin H osp Pharm J , 2008 Oct , Vol 28 , No.20
表 4　水龙骨对大鼠足肿胀的影响( x±s , n=10)
Tab 4　Effect of Po lypodiodes niponica on car rageenan inducing r at voix pedis sw ell( x±s , n=10)
组别 剂量 足肿胀度
1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h
空白对照组 10 mL·kg -1 0.28+0.05 0.59+0.09 0.62+0.08 0.55+0.05 0.48+0.06 0.40+0.04
阿司匹林组 5 mg·kg -1 0.11+0.07a 0.28+0.09a 0.16+0.07a 0.11+0.07a 0.05+0.06a 0.03+0.04a
总提物组 4.66 g·kg -1 0.16+0.11a 0.54+0.17 0.63+0.15 0.56+0.17 0.54+0.15 0.49+0.15
A部分组 3.67 g·kg -1 0.19+0.07a 0.49+0.08a 0.48+0.09a 0.32+0.09a 0.28+0.09a 0.18+0.06a
B部分组 0.32 g·kg -1 0.23+0.11 0.52+0.10 0.62+0.08 0.55+0.08 0.48+0.10 0.42+0.12
C部分组 0.18 g·kg -1 0.26+0.08 0.63+0.11 0.65+0.13 0.57+0.10 0.55+0.11 0.51+0.12
D部分组 0.48 g·kg -1 0.29+0.09 0.68+0.15 0.67+0.12 0.60+0.05 0.54+0.09 0.49+0.06
注:同一时间内与空白对照组比较 , aP<0.05
3　讨论
水龙骨被广泛地应用于各种炎症和疼痛性疾
病 ,具有明显的抗炎镇痛作用 。因此本实验以抗炎
镇痛效果为指标 ,筛选水龙骨的有效部位。通过观
察水龙骨各部分对化学性疼痛(醋酸)和物理性疼痛
(热板)的抑制 ,及对小鼠耳肿胀和大鼠足肿胀 2 种
炎症模型的影响 ,综合实验结果表明:水龙骨的25%
乙醇洗脱部分在抗炎和镇痛两方面均有明显的作
用 ,应为水龙骨的抗炎镇痛的有效部位 ,其有效成分
及作用机制有待于进一步研究。
参考文献:
[ 1] 　姚振生 ,葛菲 ,龚旭.《植物名实图考》中的水龙骨科植物考证
[ J] .中药材 , 1994 , 17(10):41.
[ 2] 　中国植物志编委会.中国植物志[ M ] .第 6 卷 2分册.北京:科
技出版社 , 2000:10 , 255.
[ 3] 　姚振生 ,熊耀康 ,俞冰 ,等.浙江省水龙骨科药用植物资源[ J] .
中药材 , 2004 , 27(10):718-721.
[ 4] 　徐叔云 ,陈修 ,卞如廉.药理实验方法学[ M] .4版.北京:人民
卫生出版社 , 2002:700.
[收稿日期] 2007-11-01
[ 作者简介] 徐敏 ,女 ,硕士研究生 ,药师 ,电话:13898457320 , E-mai l:minmin 2000 2000@163.com
青叶胆高效液相色谱特征图谱研究及指标性成分的含量测定
徐敏 ,张振秋　(辽宁中医药大学 , 辽宁 大连 116600)
[ 摘要] 　目的:建立青叶胆高效液相特征图谱的测定方法 , 并对其中獐牙菜苦苷 、龙胆苦苷 、獐牙菜苷 3 种指标性成分进行含
量测定。方法:采用 Phenom sil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm , 5 μm),流动相为甲醇-乙腈-0.02%磷酸 , 梯度洗脱 , 流速1.0 mL
·min -1 , 柱温 35 ℃,检测波长 254 nm ,记录时间 70 min , 对 10 批青叶胆药材的特征图谱进行研究及含量测定。结果:初步建
立了青叶胆药材的高效液相特征图谱 ,标定了 14 个共有特征峰。实验中各共有峰相对保留时间的 RSD小于 5%,相对峰面
积的相似度在 80%左右。待测的 3 种成分均达到基线分离 ,獐牙菜苦苷 、龙胆苦苷 、獐牙菜苷的线性范围分别为0.33 ～ 1.98
μg(r=0.999 7)、0.16 ～ 0.96 μg(r=0.999 7)、0.20～ 1.20μg(r=0.999 9),回收率分别为99.9%, 98.2%, 100.7%。结论:此
方法稳定 、准确 、有效 ,可以全面的反映青叶胆药材的质量 ,可作为控制青叶胆药材质量的依据。
[ 关键词] 　青叶胆;特征图谱;含量测定;高效液相色谱法
[中图分类号] R282.7 , R927.2　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2008)20-1751-05
Study on the specific chrometogram of Swer tiamileensis and determination of target components
by HPLC
XU Min ,ZHANG Zheng-qiu(Liaoning Univ ersity of T raditional Chinese Medicine , L iaoning Dalian 116600 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To e stablish specific chr omatog ram o f sw ertia mileensis by using H PLC fo r quality ev alution and to
determina te the contents o f therr iridoids , sw er tiamarin , gentiopicr oside , and swe roside in sw ertia mileensis.METHODS　The
analysis w as perfo rmed on a Phenomsil C18 column(4.6 mm×250 mm , 5 μm)with me thanol- ace tonitrile- wa te r(0.02% phos-
phoric acid)as mobile phase in a g radient mode at a flow rate of 1.0 mL·min-1 , and at a column tempe rature of 35 ℃.The de-
tection wavelength w as at 254 nm.RESULTS　The specific chromatog ram of S weitia mileensis was established and 14 common
peaks were indicated.Through reference substances , 3 common peak we re identified.The rela tive standard dev iations fo r rela-
tive re tention values and relative peak areas we re le ss than 5% in the pr ecision and repeated test.Base line resolution w as a-
chieved.The linear r anges of swer tiamarin 、gentiopicro side and sw ero side we re 0.33-1.98 μg(r= 0.999 7), 0.16-0.96 μg(r
·1751·中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 20期 Chin H osp Pharm J , 2008 Oct , Vol 28 , No.20