全 文 ：丝棉木组织培养技术
李春玲 ,石建宁＊　(宁夏生态工程学校 ,宁夏银川 750004)
摘要　[目的 ] 促进丝棉木种苗的快速繁殖并保持其优良性状。 [方法] 以丝棉木的嫩茎、叶片为材料 ,消毒后接种在不同激素水平的
MS培养基上诱导产生幼苗。 [结果] 培养基MS+6-BA0.3 mg/L+NAA0.10 mg/L是丝棉木外植体诱导产生腋芽的最佳培养基。
丝棉木叶片在培养基MS+ 6-BA0.3mg/L+NAA0.10mg/L+2, 4-D0.05mg/L上能成功诱导出小苗 ,诱导出来的小苗叶色鲜绿、生
长旺盛。在培养基 MS+ 6-BA0.3mg/L+NAA 0.10mg/L上幼苗的分化系数最高 ,且幼苗生长最好。在培养基 1/2MS+IBA0.4
mg/L+NAA0.10mg/L+根皮苷 3mg/L上幼苗的生根率较高且根系较发达。在基质草炭 +蛭石 +珍珠岩(5∶3∶2)上移栽苗的生根
时间最短 ,为 10d,生根率和成活率最高 ,分别为 95.6%和 85.48%。 [结论] 该研究为丝棉木的组培育苗提供了技术支持。
关键词　丝棉木;外植体;嫩茎;叶片;组织培养
中图分类号　S722.3+7　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2009)30-14625-02
TissueCultureTechniqueofEuonymusbungeanus
LIChun-lingetal　(EcologicalProjectSchoolofNingxia, Yinchuan, Ningxia750004)
Abstract　 [ Objective] ThepurposeoftheresearchwastopromotetherapidpropagationofEuonymusbungeanusseedlingsandkeeptheir
goodtraits.[ Method] WiththeimmaturestemsandleavesofE.bungeanusasmaterials, theywereinoculatedonMSmediawithdifferenthor-
monelevelstogenerateseedlingsbyinductionaftersterilization.[ Result] ThemediumMS+ 6-BA0.3mg/L+NAA0.10mg/Lwasthe
optimummediumtogenerateauxiliarybudsbyinductionfromE.bungeanusexplants.TheseedlingscouldbeinducedfromE.bungeanus
leavessuccessfulyonthemediumMS+6-BA0.3mg/L+NAA0.10mg/L+ 2, 4-D0.05mg/Landtheinducedseedlingshadbrightlygreen
leavesandgrewvigorously.OnthemediumMS+6-BA0.3mg/L+NAA0.10mg/L, thediferentiationcoeficientofseedlingswashighest
andtheseedlingsgrewbest.Onthemedium 1/2MS+IBA0.4mg/L+NAA0.10mg/L+phloridzin3mg/L, therootingrateofseedlings
washigherandtheirrootsweremoredeveloped.Onthesubstratepeat+vermiculite+perlite(5∶3∶2), therootingtimeoftransplantedseed-
lingswasshortest, being10dandtheirrootingrateandsurvivalratewerehighest, being95.6% and85.48%resp.[ Conclusion] There-
searchsuppliedtechnicalsupportforthetissuecultureandraisingseedlingofE.bungeanus.
Keywords　Euonymusbungeanus;Explants;Immaturestem;Blade;Tissueculture
基金项目　宁夏生态工程学校资助项目。
作者简介　李春玲(1982-),女 , 宁夏银川人 ,研究实习员 , 从事生物
技术及其应用方面的研究。 ＊通讯作者 ,硕士,高级工程师。
收稿日期　 2009-06-25
　　丝棉木(EuonymusbungeanusMaxim)又名桃叶卫矛 ,属
卫矛科卫矛属 。为落叶小乔木或灌木。树冠圆形或卵形 ,树
皮灰褐色 ,小枝绿色 ,近四棱形。叶对生 ,椭圆状卵形或宽卵
形 ,边缘有细锯齿。聚伞花序腋生 ,花 3 ～ 7朵 ,黄绿色 。蒴
果 4瓣裂 ,淡红色或带黄色;种子有桔红色假种皮。花期 5 ～
6月 ,果熟期 9～ 10月。丝棉木为暖温带树种 ,产我国中部 、
北部各省 ,浙江 、福建也有分布。喜光 ,稍耐荫 ,耐寒 ,亦较耐
旱 。适生于肥沃 、湿润之地 ,中性土 、微酸性土均能适应 。根
系发达 ,萌生能力强。丝棉木为园林景观设计中广为推广的
观赏性植物 ,该研究旨在通过植物组织培养的方法促进其种
苗的快速繁殖 ,保持其优良的性状 [ 1-5] 。
1 　材料与方法
1.1　材料　外植体材料采自宁夏回族自治区银川市永
宁县。
1.2　方法　将采来的丝棉木外植体清洗干净 ,用流水冲洗
30min后放在超净工作台上 ,用浓度 70%的酒精消毒 30 s,
后用浓度 0.1%氯化汞溶液振荡消毒 5 ～ 6 min,再用无菌水
清洗 3～ 5遍。剪成 1.5cm的茎段 ,备接种用。在温度(25±
2)℃, pH值 5.8的培养基上进行培养 。基本培养基为 MS
培养基 ,琼脂为 5.4 g/L,诱导和分化培养基蔗糖为 30 g/L,
生根培养基蔗糖为 15 g/L,按照培养目的不同添加不同浓度
细胞分裂素和生长素 ,置于培养室培养 ,光照时间 12 h/d,光
照强度 2 400 lx[ 6-10] 。
(1)外植体诱导。①以 MS为基本培养基 ,再添加不同
浓度的 6-苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)设计 3种不同
浓度的配比 ,选取 300株幼嫩健壮的丝棉木嫩茎经过处理后
接种于加有不同浓度 6-BA、NAA、吲哚乙酸(IAA)、黄体生成
素(LH)的 MS培养基上 ,接种 2周后 ,观察记录培养结果 ,分
析不同激素水平对嫩茎发芽及小苗诱导率的影响。②在丝
棉木的培养过程中 ,将叶片转培到加有不同浓度 6-BA、
NAA、2, 4-D的 MS培养基上 ,每种培养基接种 25个叶片 ,每
个叶片能剪成 4个 0.5cm×0.5 cm的小方块。 45 d后观察
其生长及诱导情况 ,分析不同激素水平对叶片诱导率的
影响。
(2)继代培养 。将诱导出来的小苗接种在加有不同浓度
6-BA、NAA、IAA、LH的 MS培养基上 ,每个培养基接种 100
株 , 15 d后观察其生长及分化情况。
(3)生根培养及炼苗移栽。①复壮后的丝棉木试管苗生
根诱导 。采用不同浓度的生长素对其根的诱导情况也不一
样 ,选取高度超过 2 cm的幼苗接种在不同浓度生长素的培
养基上 ,每种培养基接种 100株 ,观察其生根情况。②当试
管苗具有 2条以上根系 ,根长到 1cm时 ,即可将组培苗转移
到温室进行炼苗 。炼苗 1周后 ,把盖子打开炼苗 1d,取出小
苗 ,洗尽根上的培养基 ,置于 3种不同配比的基质中 。控制
空气温度 25 ～ 28 ℃,空气湿度 85%～ 90%。 12 d后 ,调查丝
棉木移栽情况。
2　结果与分析
2.1　外植体诱导结果
2.1.1　不同激素水平对嫩茎发芽及小苗诱导率的影响。由
表 1可知 ,通过对 3种不同培养基的最早发芽时间 、诱导率 、
发芽数量及其生长情况的对比可知:MS+6-BA0.3mg/L+NAA
0.10mg/L的培养基是丝棉木外植体诱导腋芽的最佳培养基。
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2009, 37(30):14625-14626, 14652 责任编辑　张杨林　责任校对　卢瑶
表 1　不同种类激素和浓度配比对外植体诱导腋芽的影响
Table1　Effectsofdiferenthormoneandconcentrationproportionsoninducedaxilarybudofexplants
编号
No.
6-BA
mg/L
NAA
mg/L
IAA
mg/L
LH
mg/L
萌芽时间∥d
Germinatingtime
诱导率∥%
Inductionrate
发芽数量∥个
Numbersofbud
叶色绿∥%
Degreeofgreening
生长情况
Conditionofgrowth
1 0.3 0.01 0.05 100 10 20.6 1 31 长势差 Badgrowth
2 0.3 0.10 - - 7 42.3 4 68 长势好 Goodgrowth
3 1.0 - 0.05 100 9 31.5 2 42 长势一般 Normalgrowth
2.1.2　不同激素水平对叶片诱导率的影响。由表 2可知 ,
丝棉木叶片在培养基 MS+6-BA0.3 mg/L+NAA0.1 mg/L
+2, 4-D0.05mg/L上能成功诱导出小苗 ,诱导出来的小苗
叶色鲜绿 、生长旺盛。
表 2　不同激素水平对叶片诱导的影响
Table2　Efectsofdiferenthormonelevelsonleafinduction
编号No. 6-BAmg/L NAAmg/L 2, 4-Dmg/L
愈伤组织形成时间∥dTimeofcalustissuesformation
萌芽时间∥dGerminatingtime
出愈率∥%Frequenciesofcalusinduction
愈伤组织直径∥cmDiameterofcalustissues
出芽率∥%Germinatingrate
愈伤组织生长情况Conditionofcallustisuesgrowth
1 1.5 0.1 0.05 18 - 56.16 1.0 - 长势差 Badgrowth
2 1.0 0.1 0.05 20 - 62.53 1.5 - 长势一般Normalgrowth
3 0.3 0.1 0.05 15 45 70.92 1.5 50.0 长势好 Goodgrowth
2.2　继代培养结果　由表 3可知 ,配比 MS+6-BA0.3 mg/L +NAA0.10mg/L的培养基上苗分化系数最高 ,且生长情况
表 3　不同激素水平对芽分化系数及生长状况的影响
Table3　Efectsofdiferenthormonelevelsonseedlingbuddifferentiationandgrowthstatus
编号
No.
6-BA
mg/L
NAA
mg/L
IAA
mg/L
LH
mg/L
分化系数
diferentiationindex
褐化
browning
叶色绿∥%
Degreeofgreening
脱叶∥%
Defoliation
1 1.0 0 1.00 0 2 + 30 10
2 1.0 0.05 0 0 1 - 45 12
3 1.0 0.10 0 100 2 + 25 8
4 1.0 0 0.01 100 1 ++ 25 9
5 1.0 0 0.05 100 2 + 35 10
6 0.3 0.10 0 0 4 - 80 11
　注:+为较强;++为强。
　Note:+standsforstrong;++standsforcomparativestrong.
表现最好。
2.3　生根培养及炼苗移栽结果
2.3.1　不同生长素浓度对幼苗生根的影响。由表 4可知 ,
生长素浓度高低不仅影响幼苗生根率 ,而且对根系及生长势
都有影响。其中 1/2 MS+IBA0.4 mg/L+NAA0.10mg/L+
根皮苷 3mg/L的培养基生根率较高 ,且根系较发达。
表 4　不同浓度生长素对幼苗生根情况的影响
Table4　Effectsofdiferentauxinconcentrationsonrootingsituation
培养基∥mg/L
Media
生根时间∥d
Rootingtime
生根率∥%
Rootingrate
根系位置
Rootingposition
生根情况
Rootingcondition
叶片生长情况
Conditionofleafgrowth
1/2MS+IBA0.4 7 40.00 愈伤 Calus 发达Developed 一般 Normal
1/2MS+IBA0.4+NAA0.10 14 15.30 愈伤 Calus 弱Weak 差 Bad
1/2MS+IBA0.6 5 26.40 愈伤 Calus 发达Developed 一般 Normal
1/2MS+IBA0.6+NAA0.05 15 36.20 愈伤 Calus 弱Developed 一般 Normal
1/2MS+IBA0.4+NAA0.10+根皮苷 3 12 82.50 皮部 Cutaneousregion 较发达 Moredeveloped 好 Good
1/2MS+IBA0.4+NAA0.20+根皮苷 5 10 24.40 皮部 Cutaneousregion 弱Weak 一般 Normal
1/2MS+IBA0.6+NAA0.20+根皮苷 5 10 8.97 皮部 Cutaneousregion 发达Developed 差 Bad
　注:根系较发达:根长﹥ 1.0cm,根粗,有 3 ～ 5个须根;根系发达:根长 0.5～ 1.0cm,根粗 ,有 3个须根;根系弱:根长﹤ 0.5 cm, 根细 ,有 1 ～ 2个
须根。
　Note:Rootsarecomparativedeveloped:rootlength>1.0cm, rootthickness, 3-5fibrousroots, Rootsaredeveloped:rootlength0.5-1.0cm, rootthick-
ness, 3fibrousroots;Rootsareweak, rootlength<0.5cm, rootfine, 1-2fibrousroots.
2.3.2　炼苗移栽。由表 5可知 ,草炭∶蛭石∶珍珠岩的配比
为 5∶3∶2的基质上移栽苗生根时间短 ,生根率最高 ,达到
95.6%,且成活率达到 85.48%,生长情况表现良好。
3　结论
(1)嫩茎的初代培养及诱导过程中 6-BA和 NAA浓度
的高低以及配比的恰当与否都直接影响到嫩茎的发芽数及
诱导成活率。采用 MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.10mg/L配
比的培养基其发芽数 、诱导率都是最高的 ,且幼苗叶色正常 ,
长势明显好于其他配比的培养基。
(下转第 14652页)
14626 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2009年
研究结果表明 ,紫甘蓝是一种有益于身体健康 ,抑制自由基
所致的机体内 LDL氧化损伤的食物资源 ,可能有益于预防动
脉硬化和高血脂等相关疾病。
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(上接第 14626页)
　　(2)叶片的诱导培养过程中 ,在培养基 MS+6-BA0.3
mg/L+NAA0.10 mg/L+2, 4-D0.05 mg/L上能成功诱导出
小苗 ,诱导出来的小苗叶色鲜绿 ,生长旺盛 ,出愈率最高可以
达到 70.92%。
表 5　不同基质配比对幼苗移栽情况的影响
Table5　Effectsofdifferentsubstratecompositionsonseedlingtrans-
plantingsituation
基质(草炭∶蛭石∶珍珠岩)Medium(Turf∶Vermiculite∶Perlite)
生根时间dRootingtime
生根率%Rootingrate
成活率%Survivalrate
生长情况Conditionofgrowth
5∶3∶2 10 95.6 85.48 一般 Normal
10∶0∶0 13 83.4 70.19 差 Bad
6∶2∶2 12 92.7 80.38 良好 Good
　　(3)芽的继代培养过程中适宜的培养基对芽的增殖及扩
繁起到非常重要的作用 ,而采用配比为 MS+6-BA0.3 mg/L
+NAA0.10 mg/L的培养基其分化系数可以达到 4,同时叶
片褐化程度最弱 , 80%以上苗叶色为绿 ,苗长势良好 ,所以该
配方为芽继代培养的最佳培养基。
(4)丝棉木为木本植物 ,采用 1/2 MS+IBA0.4 mg/L+
NAA0.10mg/L+根皮苷 3 mg/L的培养基其生根率可以达
到 82.5%,且生根时间较其他配比的短 ,根系较发达 ,褐化现
象不严重 ,生长势表现良好 ,因此该培养基是丝棉木试管苗
生根的最佳培养基。
(5)丝棉木在移栽过程中极易生根 ,采用草炭∶蛭石∶珍
珠岩基质配比 5∶3∶2的移栽苗生根时间短 ,生根率最高 ,达到
95.6%,且成活率达到 85.48%,生长情况表现良好 ,因此其
为丝棉木移栽成活的最佳基质配方。
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