全 文 ：本研究首次对药用植物沉香的 RAPD扩增反应体系进行优
化 , 确定了适合于沉香的 RAPD扩增反应体系 ,对进一步进行沉
香种质资源和遗传多样性的 RAPD分析以及分子标记等方面的
研究奠定了基础。
参考文献:
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收稿日期:2007-10-24;　修订日期:2008-01-12
基金项目:贵州大学 SRT学生创新基金资助 [贵大 SRT字(2006)153号 ]
作者简介:牛玉乐(1983-),男(汉族),河北栾城人 ,现为贵州大学在读硕
士研究生 ,主要从事天然产物化学研究工作.
＊通讯作者简介:李　焱(1974-), 女(汉族),湖南醴陵人 , 现任贵州大学
副教授 ,硕士生导师 ,主要从事天然产物提取分离研究工作.
复方鱼腥草口服液提取工艺研究
牛玉乐 , 李　焱＊ , 孙　艳 , 黄　波 , 张　振
(贵州大学化工学院 ,贵州 贵阳　550003)
摘要:目的 研究复方鱼腥草口服液的提取工艺。方法 含有挥发油类成分的药材采用水蒸气蒸馏法进行提取;水溶性
成分煎煮提取 , 采用正交实验法进行优选 , 薄层 -紫外分光光度法进行含量测定。结果 挥发油提取最佳工艺:10倍量
水 , 温浸 0.5h,水蒸气蒸馏提取 4 h;水溶性成分提取最佳工艺:10倍量水 ,煎煮两次 , 2 h/次。结论 该方法简便可行 , 可
作为复方鱼腥草口服液的提取工艺。
关键词:复方鱼腥草口服液;　提取工艺;　正交实验;　薄层 -紫外分光光度法
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)01-0076-02
OptimalExtractionofCo-HerbaHouttuyniaeOralLiquid
NIUYu-le,LIYan＊ ,SUNYan,HUANGBo,ZHANGZhen
(ColegeofChemicalEnginering, GuizhouUniversity, Guiyang550003 , China)
Abstract:ObjectiveToresearchtheextractionprocessoftheCompoundHouttuyniaOralLiquid.MethodsVolatileoilswhich
areactiveingredientsofthemedicinalmaterialswereextractedbysteamdistillationmethod;water-solublecomponentswhichare
activeingredientswereextractedbyboilingmethods, optimizedbyorthogonaltestanddeterminedbyTLC-UVspectrophotome-
try.ResultsTheoptimumtechnologicalconditionsforextractingvolatileoilwereasfolows:theratioofwatertosamplewas10:1,
thetimeofwarm-infusionwas0.5R, Steamdistilationtimewas4 h;thewatersolubleconstituentswereextractedwithwater(10
timesofthematerials)for2 times, twohourseachtime.ConclusionThemethodissimpleandfeasible, canbeusedastheex-
tractionprocessoftheCompoundHouttuyniaOralLiquid.
Keywords:Co-HerbaHouttuyniaeOralLiquid;　Extractionprocess;　UVphotometermethod;　Orthogonaldesign
　　复方鱼腥草口服液是由复方鱼腥草片改剂型而来。其处方
由鱼腥草 、板蓝根 、连翘 、黄芩 、金银花组成 ,用于治疗咽喉红肿 ,
咽痛 , 急性咽炎 ,急性扁桃体炎 [ 1] 。本实验对复方鱼腥草口服液
的提取工艺进行了研究 ,采用水蒸气蒸馏法提取处方中所含挥发
油类成分 , 采用水煎煮法提取处方中水溶性成分。并用正交实验
法对水溶性成分的提取工艺进行了优选。现报道如下。
1　材料与试剂
1.1　药材及试剂 黄芩 、板蓝根 、鱼腥草 、金银花 、连翘 , 均购自贵
阳市药材批发市场;黄芩苷对照品 , 购自中检所 , 批号 110715 -
200514;5mm×10 mm青岛海洋硅胶 G板 、10 mm×10 mm青岛
海洋硅胶 G板。所用试剂均为分析纯。
1.2　仪器与设备 挥发油提取装置 , R2 -201型旋转蒸发仪(上
海中科机械研究所);755B型紫外可见分光光度计(上海精密科
学仪器有限公司分析仪器总厂);R2 -201型旋转蒸发仪(上海
中科机械研究所);SB2200型超声波提取器 [必能信超声(上海)
有限公司 ] 。
2　方法与结果
2.1　挥发油提取工艺研究 对处方中鱼腥草 、金银花 、连翘 3
味药材的主要有效成分 ———挥发油类成分的提取条件进行
研究。
2.1.1　挥发油提取方法的确立 鱼腥草 、金银花 、连翘主要有效
成分为挥发油类成分 , 且密度都小于 1, 所以本实验采用水蒸气
蒸馏法对挥发油进行提取。
2.1.2　实验操作 取处方量药材 , 适当粉碎 ,过筛 , 置于挥发油提
取装置中 ,加 10倍量水 , 温浸 0.5 h后 , 水蒸气蒸馏 , 馏出液用乙
醚萃取 ,萃取液加无水亚硫酸钠干燥 24h后过滤 , 滤液用旋转蒸
发仪挥去乙醚 ,收集挥发油 , 挥发油呈现淡黄绿色。
2.1.3　结果与分析 采用以上方法蒸馏时间分别为 1, 2, 3, 4, 5
h,以所得挥发油的量及加鱼腥草素和品红亚硫酸反应后呈现淡
紫色的理化鉴别实验 [ 2]作为分析依据。结果见表 1。
由表 1数据可以看出 , 挥发油提取 3h,即可提取出挥发油总
量的 95%, 而反应 4 h基本可以提取完毕 , 且理化鉴别也显示为
阴性。所以挥发油的提取工艺定为:加 10倍量水 , 温浸 30 min,
水蒸气蒸馏提取 4 h。
2.2　水溶性成分的提取工艺研究
2.2.1　水溶性成分的提取方法的确立 黄芩的主要成分黄芩苷
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及板蓝根的主要成分靛蓝 、靛玉红均为水溶性成分 , 适宜采用水
煎煮法进行提取。为了对提取工艺条件进行优选 ,本实验采用正
交实验法进行提取研究。
表 1　挥发油提取及理化鉴别
时间 /h 挥发油量 V/ml 挥发油理化鉴别
1 0.07 +
2 0.11 +
3 0.20 +
4 0.21 -
5 0.21 -
　　+:阳性;-:阴性
2.2.2　因素水平的确定 水溶性成分提取过程中的影响因素主
要有加水量(A)、提取时间(B)及提取次数(C)。其因素水平见
表 2。
表 2　因素水平表
水平 A加水量 /倍
B
提取时间 t/h
C
提取次数 /次
1 8 1 1
2 10 1.5 2
3 12 2 3
2.2.3　正交实验 根据以上因素和水平 , 按正交设计表 L9(34)
进行正交实验 , 以黄芩苷含量未评价指标 , 选取最佳的水溶性成
分提取工艺条件。
2.2.4　含量测定
供试品溶液的预处理:将正交实验所得提取液适当浓缩 ,取
一定量的浓缩液分别加入 0, 0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.25, 1.5倍的
无水乙醇 , 搅拌均匀 , 静置 12个 h, 抽滤 , 晾干称重 , 得出沉淀物
的质量。绘制醇沉曲线 , 见图 1。
图 1　水提醇沉图
实验中加入 0.75倍的乙醇即可使得提取液澄清透明 , 从
图 1中也可看出当加入 0.75倍的乙醇时沉淀物质量达到最大
值 , 说明此时已基本上沉淀完全。为了确保沉淀完全 , 实验中加
入 0.8倍的无水乙醇。
澄清的提取液即可进行黄芩苷含量测定。
黄芩苷标准曲线的绘制:配制浓度为 0.05 mg/ml的黄芩苷
甲醇对照品溶液在紫外分光光度计上进行扫描 , 由扫描结果可
知 , 在 274 nm处有最大吸收峰。见图 2。
分别配置浓度为 0.01, 0.02, 0.03, 0.04, 0.05 mg/ml的黄芩
苷标准品甲醇溶液在 274 nm处测定吸光度 , 并绘制标准曲线。
对所绘制的标准曲线进行线性回归 ,其回归方程为:
Y= 61.009X- 0.018 7
该回归方程的 r=0.999 9,线性良好 , 可作为标准曲线使用。
2.2.5　供试品溶液的制备及黄芩苷含量测定 取制得的口服液
25 ml, 低温蒸干 ,加甲醇适量 , 超声处理 5 min, 滤过甲醇定容至
25 ml, 取 200 μl点于 10mm×10 mm的硅胶 G板上 , 用醋酸丁酯
∶甲酸∶水 =14∶5∶5展开 , 将黄芩苷对应部分刮下 , 加甲醇适
量超声处理 5 min, 滤过 ,配成 10ml溶液 [ 3, 4] 。测定其吸光度 , 由
标准曲线可得对应的黄芩苷含量。结果见表 3。
图 2　对照品 UV扫描图
表 3　实验结果
实验号 A B C 黄芩苷含量 /mg
1 1 1 1 5.00
2 1 2 2 18.80
3 1 3 3 27.88
4 2 1 2 15.90
5 2 2 3 23.00
6 2 3 1 15.50
7 3 1 3 18.80
8 3 2 1 10.06
9 3 3 2 22.50
K1 17.2 13.2 10.2
K2 18.1 17.3 19.1
K3 17.1 21.96 23.2
R 1.0 8.96 13
方差分析表明 ,加水量(A)为次要因素 , 对实验结果影响不
大 , 提取次数(C)和煎煮时间(B)对实验影响较大 , 最好的水平
为 A2B3C3。但从实际生产出发 , 提取 3次 , 2h/次耗能太大 , 所以
选择加水 10倍量 ,煎煮 2次 , 2 h/次 , 即选择 A2B3C2为最佳提取
工艺。
3　讨论
实验中水提取部分加入乙醇沉淀下来的胶体类成分不溶于
水 , 不溶于醇 ,经检验也不含有实验中的有效成分 ,故为杂质类成
分将其除去。
本实验中采用的薄层 -紫外分光光度法测定黄芩苷的含量 ,
操作简便 ,仪器便宜 , 方法准确可靠。
挥发油类成分最佳提取工艺条件为:加 10倍量水 , 浸泡
30 min, 提取 4 h;水溶性成分最佳提取工艺条件为:取处方量药
材加水 10倍量水 ,煎煮 2次 , 2 h/次。
参考文献:
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