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47个香菇主栽菌株的SCAR标记分子鉴别



全 文 :食用菌学报 2010.17(2):7 ~ 14
收稿日期:2010-03-17原稿;2010-05-21 修改稿
基金项目:“十一五”国家科技支撑计划课题“人工栽培食用菌优质新品种选育研究”(编号:2008BADA1B02)、浙江
省创新团队建设与人才培养项目“现代食用菌技术创新团队建设”(编号:2009F20019)、浙江省农业科技
成果转化资金项目“专用型香菇新品种推广与种性安全快速鉴定技术示范应用”的部分研究内容
作者简介:赵微微(1984-), 女 ,东北农业大学资源与环境学院和浙江省林业科学研究院联合培养硕士研究生 , 研
究方向为食用菌遗传育种与生物技术。
*本文通讯作者 E-mail:fulizh ong@163.com
文章编号:1005-9873(2010)02-0007-08
47个香菇主栽菌株的 SCAR标记分子鉴别
赵微微1 , 李海波2 , 付立忠2 , 3 , 吴学谦2 , 3 , 许修宏1 , 贺 亮2 , 程俊文2 , 魏海龙2 , 3 , 吴庆其2 , 3
(1东北农业大学 ,黑龙江哈尔滨 150030;2浙江省林业科学研究院 ,浙江省森林资源生物与化学利用重点实验室 ,
浙江杭州 310023;3丽水市食用菌研究开发中心 ,浙江丽水 323000)
摘 要:利用前期研究开发的 10个 SCAR 分子标记对 47个香菇主栽菌株的基因组 DNA 进行扩增分析。基
于 SCAR标记在检测菌株中的存在与缺失差异 , 7 个香菇菌株被首先鉴别出来 , 其余 40 个菌株被分成 11 个小
组 ,其中一些形态特征极为相近的菌株 ,如 L241 与 L241-4 、闽丰 1号与 L12 、Cr02 与 7402 等被相互辨别。
关键词:香菇;主栽品种;SCAR标记;分子鉴定;食用菌
  香菇(Lentinula edodes (Berk.)Pegler)以
其营养 、医疗价值和独特的口味闻名于世 。目前
中国香菇的产量居世界第一位[ 1] 。不同香菇品
种具有不同的生物学特性和消费途径。我国香
菇菌种市场上 , “同种异名” 、“异种同名”现象严
重。因此对香菇菌种进行可靠准确的鉴定事关
香菇产业的发展。
近年 ,基于PCR的分子标记技术包括 RAPD
(Randomly Amplified Polymorphic DN A)、
AFLP ( Amplified Fragment Leng th
Po lymo rphism)、 ISSR (Inter-Simple Sequence
Repeats)、 SRAP (Sequence-Related Ampli fied
Po lymo rphism)等相继用于香菇菌株的亲缘关
系 、遗传多样性和菌株分型研究[ 2 ~ 5] 。上述标记
技术所使用的或为通用引物或为成套设计引物
的随机组合 ,缺乏特异性 。
SCA R(Sequence Characterized Ampli fied
Region)标记克服了 RAPD标记的不稳定性[ 6] ,
已成功用于香菇菌株和灵芝种间的分子鉴
定[ 7 ~ 10] ,这些鉴定均是通过获得某个菌株的“株
特异性” SCAR 标记来实现的 。但在实际操作
中 ,很难从大量的香菇菌株中获得某个菌株特有
的“株特异性”SCAR标记 ,尤其是在菌株间的亲
缘关系较为接近时更加困难 。本文利用前期研
究开发的 10个 SCAR 分子标记对 47个香菇主
栽菌株的基因组 DNA 进行扩增分析 ,以期明确
多个 SCA R标记的联合使用提高菌株鉴定效率
的可行性 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试菌株
  试验菌株 47个来自福建 、浙江 、上海等15个
省市 。菌株名称 、生产性状及主栽地见表 1。
1.1.2 培养基
  斜面培养基:PDA 。
液体培养基:马铃薯 20%, 葡萄糖 2%,
KH 2PO 4 0.1%,MgSO 4 0.05%,蛋白胨 0.15%,
pH 自然。
1.1.3 试剂
  DNA 磁珠纯化试剂盒 、PCR扩增试剂购自
杭州博日科技有限公司 。
1.1.4 SCA R引物及序列
  前期研究中 ,基于 RA PD和 SRAP 分子标记
的大量筛选 ,从 23个香菇标准菌株样品中相继
开发出了 10个稳定的 SCA R标记 SCA R1 ~ 10 ,
SCAR标记的引物序列 、最适退火温度和片段长
度见表 2 ,引物由上海生工生物技术公司合成 。
食 用 菌 学 报 第 17卷
表 1 47 个香菇主栽菌株的来源和生产性状
Table 1 Sources and commercial traits of 47 major L.edodes cultivars in China
编号
No.
名称
Str ain
来源
Source1)
栽培方式1)
Cultivation2)
生产性状
Commercial traits
主栽地2)
Major cultivation ar ea3)
1 L03
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP A
中 温 型 、 高 产 Moderate growth
temperature , high-yield Zj , Js , Sh , Fj , Gd
2 L26
上 海 市 农 业 科 学
院, SAAS B
中温型 、早熟 、高产 Moderate growth
temperature , early maturity , high-yield Zj , Js , Sh , Fj , Gd , Hb
3 L27
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP B
广温型 、早熟、高产
A wide range of growth temperature,
early maturity , and high yield
Zj , Js , Sh , Fj , Gd
4 L42
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP B
高产
High-yield Zj , Js , Sh , Fj , Gd
5 L10
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP A
中高温型
Moderate-high growth temperature Zj , Js , Sh , Fj , Gd
6 L11
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP A
中高温型、出菇早、高产
Moderate-high growth temperature,
early fruiting, high-yield
Zj , Js , Sh , Fj , Gd
7 L12
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP A
中 温 型 、 高 产 Moderate growth
temperature, high-yield Zj , Js , Sh , Fj , Gd
8
L秋2
Lqiu-2
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP A
中 温 型 、 优 质 Moderate growth
temperature, high-quality Zj , Js , Sh , Fj , Gd
9 L507
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP A
中温型、出菇早、抗逆性强、高产
Moderate-high g rowth temperature , early
fruiting , strong resistance to biotic and
abiotic factors , high-yield
Zj , Js , Sh , Fj , Gd
10 L241
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP A
中低温型
Moderate-low growth temperature Zj , Js , Sh , Fj , Gd
11 L241-4 上 海 市 农 业 科 学院, SAAS A/B
中低温型、迟熟 、高产
Moderate and low growth temperature,
late maturity , high-yield
Zj , Js , Sh , Fj , Gd
12
武香1 号
Wuxiang-1
上 海 市 农 业 科 学
院, SAAS B
高温型 、早熟
High growth temperature , early maturity
Zj , Fj , Hb , Sc, Sd ,
Hn , Bj
13 Cr02
上 海 市 农 业 科 学
院, SAAS B
中温偏低型、早熟、抗逆性强
Moderate-low growth temperature , early
maturity , strong resistance to bio tic and
abiotic factors
Zj , Js , Sh , Fj , Gd
14 Cr04
上 海 市 农 业 科 学
院, SAAS B
中温偏高型、高产 Moderate-high growth
temperature, high yield Zj , Js , Sh , Fj , Gd , Hb
15 9015
丽水市食用菌研究开发
中心 , LEFC B
中低温型、高产Moderate and low growth
temperature, high yield Zj , Js , Sh , Fj Gd
16
三明7401
Sanming-7401
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP A
中 温 型 、 冬 菇 Moderate growth
temperature, fruiting in winter Zj , Jx , Sh , Fj
17
三明7402
Sanming-7402
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP A
中 温 型 、 冬 菇 Moderate growth
temperature, fruiting in winter Zj , Jx , Sh , Fj
8
第2期 赵微微,等:47个香菇主栽菌株的 SCAR标记分子鉴别
续表
18 135
上海市农业科学院食用
菌研究所, IEF-SAAS B
低 温 型、 优 质 高 产 Low growth
temperature, high quality and yield
Zj , Js , Sh , Fj , Gd ,
Hb , Sc
19
申香2 号
Shenxiang-2
上海市农业科学院食用
菌研究所, IEF-SAAS B
中高温 型、高产 Moderate and high
grow th temperature , high yield Zj , Js , Sh , Fj , Gd
20
申香6 号
Shenxiang-6
上海市农业科学院食用
菌研究所, IEF-SAAS B
花菇率高
High frequency of flower mushroom
Sd , Hn , Bj
21
申香8 号
Shenxiang-8
上海市农业科学院食用
菌研究所, IEF-SAAS B
中偏高温型、早熟 Moderate-high growth
temperature, early maturity Zj , Js , Sh , Fj , Gd
22
申香10号
Shenxiang-10
上海市农业科学院食用
菌研究所, IEF-SAAS B
高产
High yield
Sd , Hn , Bj
23
沪农1 号
Hunong-1
上海市农业科学院食用
菌研究所, IEF-SAAS A
中 温 型 、 高 产 Moderate growth
temperature, high-yield Zj , Js , Sh , Fj , Gd
24 苏香 Suxiang 上海市农业科学院食用菌研究所, IEF-SAAS B
中温型、早熟 、高产 Moderate growth
temperature, early maturity , high-yield Zj , Js , Sh , Fj , Gd
25
香菇9 号
Xianggu-9
上海市农业科学院食用
菌研究所, IEF-SAAS B
花菇率高
High frequency of flower mushroom
Zj , Jx , Sh , Fj
26 939
丽水市食用菌研究开发
中心 , LEFC B
抗逆性强、秋栽、质优高产 Strong
resistance to biotic and abiotic factors ,
cultivation in autumn , high quality
and yield
Jx, Zj , Hb , Gd , Fj ,
Sc , Sd , Hn , Hlj
27
庆科20
Qingke-20
上海市农业科学院食用
菌研究所, IEF-SAAS B
中温偏低型、抗性强、高产
Moderate-low g rowth temperature , strong
resistance , high yield
Js , Zj , Hb , Gd , Fj ,
Sc , Sd , Hn , Hlj
28 日大 Rida 福建省三明真菌研究所, SMyIFP A/B
高产质优
High quality and yield
Zj , Js , Sh , Fj , Gd
29
闽丰1 号
Minfeng-1
福建省三明市真菌研究
所, SMyIFP B
早熟、高产
Early maturity , high-yield Zj , Js , Sh , Fj , Gd
30
菌兴8 号
Junxing-8
丽水市食用菌研究开发
中心 , LEFC B
高温型、抗逆性强、高产 High growth
temperature, strong resistance to biotic
and abiotic factors , high-yield
Zj
31
菌兴10号
Junxing-10
丽水市食用菌研究开发
中心 , LEFC B
中温型 、抗 逆性强 、高产 Moderate
grow th temperature, strong resistance to
biotic and abiotic facto rs , high-yield
Zj
32 856
华中食用菌栽培研究
所, HIMV B
中温偏低型
Moderate-low growth temperature Hb
33 868
丽水市食用菌研究开发
中心 , LEFC B
中温偏低早熟型、高产
Moderate-low growth temperature , early
maturity , high-yield
Hb
34 903
华中农业大学菌种实验
中心 , SRC-HAU B
中温偏低型
Moderate-low growth temperature Hb
35
森源2 号
Senyuan-2
湖北森源食用菌有限公
司, HSM Co., Ltd. B
中低温型、早熟Moderate and low growth
temperature, early maturity Hb
36 8404
华中农业大学菌种实验
中心 , SRC-HAU A
低温型、迟熟 、优质高产 Low growth
temperature, late maturity , high-yield Hb
9
食 用 菌 学 报 第 17卷
续表
37
秋栽3 号
Qiuzai-3
华中农业大学菌种实验
中心 , SRC-HAU B
中温偏高型、高产 Moderate-high growth
temperature, high-yield Hb
38 9508
华中农业大学菌种实验
中心 , SRC-HAU B
中低温型
Moderate and low growth temperature
Hb
39 L109
华中农业大学菌种实验
中心 , SRC-HAU B 早熟型 、高产 Early maturity , high-yield Hb
40 L236
华中农业大学菌种实验
中心 , SRC-HAU B
广温型 、高产Wide adaptability to growth
temperature, high-yield Hb
41
华香2 号
Huaxiang-2
华中农业大学菌种实验
中心 , SRC-HAU A 中温型 Moderate growth temperature Hb
42 B01
陕西省微生物研究
所, SIM B
花菇率高、高产 High frequency of flower
mushroom , high-yield Sx
43
秦香02
Qinxiang-02
陕西省微生物研究
所, SIM B
中 温 型 、 早 熟 Moderate growth
temperature, early maturity Sx
44
秦香19
Qinxiang-19
陕西省微生物研究
所, SIM B
中 温 型 、 高 产 Moderate growth
temperature, high-yield Sx
45
秦香46
Qinxiang-46
陕西省微生物研究
所, SIM B
中 温 型 、 高 产 Moderate growth
temperature, high-yield Sx
46
赣香1 号
Ganxiang-1
江 西 省 农 业 科 学
院, JAAS B
中低温型、高产Moderate and low growth
temperature, high-yield Jx
47 金地香菇 Jindi 四川省农业科学院土壤肥料研究所 , SFI-SAAS B
中低温型、高产Moderate and low growth
temperature, high-yield Sc , Yn , Gz
1)表中 A 代表段木栽培 , B代表代料栽培;2)Zj:浙江 , J s:江苏 , Sh:上海 , Fj:福建 , Gd:广东 , Hb:湖北 , Sc:四川 , Sx:陕西 , Sd:山东 , H n:
河南 , Bj:北京 , Jx :江西, Hlj:黑龙江 , Yn:云南, Gz:贵州
1)SMyIFP(S anming Mycological In sti tu te of Fujian Provin ce), SAAS (Shanghai Academy of Agricul tu ral Sciences);LEFC (Lishui
Edible Fungi R & D C enter), IEF-SAAS(Inst itute of Edib le Fungi , Shang hai Academy of Agricultural Sciences), H IMV (H uazhong
Inst itute of Mu shroom Cult ivation), SRC-HAU (Spaw n Experiment C enter , H uazhong Agricu ltural Universi ty), HSM C o., Ltd.
(H ubei Senyuan M ush room Co., Ltd.), SIM(Sh aangxi Ins ti tu te of M icrobiology), JAAS(Jiangxi Academy of Agricul tu ral Sciences);
SFI-SAAS(S oi l and Ferti lizer In sti tu te , Sichuan Academy of Agricultural Sciences);2)A :cul tivation on w ood log s;B :art if icial
cul tivation;3)Zj:Zhejiang P rovince , J s:Jiangsu Province , Sh:Shanghai , Fj:Fu jian Province , Gd:Guan gd on g Province , H b:Hubei
Province , S c:S ichu an Provin ce , Sx:Shaanxi Province , Sd:Shandong Province , H n:Henan Province , Bj:Beijing , Jx:Jiangxi
Province , H lj:H eilon gjiang Province , Yn:Yunnan Provin ce , Gz:Guizhou Province
表 2 SCAR标记及引物
Table 2 SCAR markers and primers
SCAR标记
SCAR marker
引物对
Pr ime rs
引物序列
Pr ime r sequence(5-3 )
退火温度
Optimal annealing
tempe ra tur es (℃)
SCAR 片段长度
SCAR marker
length (bp)
SCAR1
SCF 1
SCR1
TCTCGATGCAAGAAACTTGAA
TCGGTCAAAATTAGTCAGGT
53 333
SCAR2
SCF 2
SCR2
ATCCGAAGCTCTTCAGTAAAC
TGCCGAAGTATATCAAG
52 493
SCAR3
SCF 3
SCR3
AGGCAAACTGGTTCCATGATA
CTGTGAAGTCATTACAGTCGC
54.5 1 084
SCAR4
SCF 4
SCR4
GCTTCTGGAATGGCACGACAT
CGCTAATGAACATCAACCCT
56.8 532
10
第2期 赵微微,等:47个香菇主栽菌株的 SCAR标记分子鉴别
续表
SCAR5
SCF 5
SCR5
CACGGGGCCATCGACACT
CGGTCACCTCGCGATGAACAG
61 793
SCAR6
SCF 6
SCR6
GGTCCAGAGGGTAAGGGTT
TCCAGACATCTGATGAGTCGC
54 301
SCAR7
SCF 7
SCR7
GGTTCTGCTCCTTG TGACTG
TCTGCTCTTCAGATGCAAGCT
60 1 609
SCAR8
SCF 8
SCR8
AGGCAGGCCCATCATTTC
TTGCAGGCAGCAGTAGAATG
56.5 582
SCAR9
SCF 9
SCR9
GGGCCACTACTCTATGCAA
CGCGACAGAAGACAACGATTA
55.5 596
SCAR10
SCF10
SCR10
CGAATTAATGCCCAAGTTGT
TTGAAGTGGTTGCAGGAGGGTACA
59 441
1.2 方法
1.2.1 菌丝体制备
  将供试菌株从斜面培养基 PDA 上挑取 3块
(5 mm ×5 mm)转接到装有 200 mL 液体培养基
的 500 mL 三角瓶内 ,于 25 ℃、130 r/min 振荡培
养 7 ~ 10 d ,过滤收集菌丝球 ,滤纸吸干菌丝外表
水分 ,于-20 ℃短期保存 ,备用 。
1.2.2 DNA提取及浓度测定
  菌丝体 DNA 的提取参照 SDS-CTAB法[ 11] ,
使用 DNA 磁珠纯化试剂盒纯化 。纯化后的
DNA 先用 1.5%的琼脂糖凝胶电泳定性检测 ,再
用 DNA/ RNA 紫外分光光度计(GeneQuant
Pro ,GE Healthcare 公司)定量检测 , DNA 样品
的 OD260/OD280 1.8 方可用于 PCR 反应 , DNA
样品于-20 ℃保存备用。
1.2.3 PCR检测
  20 L PCR 扩增体系为:10×PCR Buf fer
2 L , 10 mmo l/L dN TPs 3.2 L , 25 mmol/ L
M gCl21.5 L , 5 U/ L Taq DNA 酶 0.3 L ,
25 mol/L上下游引物各 1 L , 30 ng/ L DNA
模板 3 L ,加 ddH 2O 补齐到 20 L。扩增反应
条件:94 ℃预变性 6 min;92 ℃变性 40 s ,退火
40 s(温度见表 2), 72 ℃延伸 2 min ,共 30个循
环;最后于 72 ℃补平 7 min ,终止温度为 4 ℃;
PCR反应产物在 1.5%琼脂糖凝胶上电泳 , EB
染色 ,用上海培清 JS-380A 自动凝胶图像分析仪
摄取扩增图谱 。
2 结果与分析
2.1 SCAR-PCR检测
  SCAR-PCR 扩增图谱见图 1。10 个目的
SCAR标记在 47 个香菇主栽菌株菌丝 DNA 样
本中均得到了稳定高效的扩增 ,且在不同的样本
间表现出丰富的多态性。其中 , 582 bp 的
SCAR8仅在香菇 9 号中检测到 , 1 084 bp 的
SCAR3和 333 bp的 SCAR1分别在 4 个和 6 个
菌株中检测到 ,其它几个 SCAR标记也各自在部
分菌株中检测到。
2.2 菌株鉴定与相互辨别
  基于 10 对 SCA R引物检测得到的不同样
本间的 SCA R标记的存在与缺失 ,绘制 47个菌
株的分类图(图 2),在 10 个 SCA R标记的联合
使用下 , 7 个香菇菌株 -L42 、申香 6 号 、闽丰 1
号 、8404 、秦香 02 、香菇 9 号 、B01 首先从 47 个
供试香菇主栽菌株中鉴定出来 。其次 , 另外的
40 个菌株分别被划分为 Ⅰ ~ Ⅺ共 11 个小组 。
其中 , L241-4 是以 L241 为出发菌株选育成 ,闽
丰 1 号是由 L12 与 L34 经单孢杂交育成 , Cr02
为 7402 与 Lc-01经单孢杂交育成 ,申香 10号为
L26与苏香原生质体非对称杂交育成 , 金地香
菇为 939 与 135 经原生质体融合育成 , 森源 2
号为 856 与 8404 经单孢杂交育成[ 12] 。因而 ,
L241-4 与 L241 、闽丰 1 号与 L12 、Cr02 与
7402 、申香 10 号与 L26 、金地香菇与 939 和
135 、森源 2 号与 856 和 8404 均具有较近的亲
缘关系 ,尤其是 241与 241-4。本研究分类结果
显示 , 开发的 10 个 SCAR 标记不仅高效地鉴
定 、区分了我国大部分的香菇主栽菌株 ,同时也
使得一些形态特征极为相近 、亲缘关系较近的
菌株相互区别 。
11
食 用 菌 学 报 第 17卷
1~ 47号泳道对应表 1的 47个香菇菌株, M 泳道为DNA分子量标准 ,C泳道为 DNA 阴性对照 ,图中的小圆圈表示 SCAR特异条带
Lan es l to 47 correspond to the 47 st rain s lis ted in T ab le 1;l ane M , m olecu lar markers;lane C , cont rol;numbers on the lef t of the
figu re indicate the siz e of the DNA markers(kb);the respective SCAR bands are indicated by w hi te circles
图 1 10 对 SCAR引物对 47个香菇主栽菌株的 PCR扩增
Fig.1 SCAR marker profiles of 47 L.edodes strains amplified with ten SCAR primer pairs
12
第2期 赵微微,等:47个香菇主栽菌株的 SCAR标记分子鉴别
图中数字 1~ 47对应表 1中 47菌株 , Ⅰ ~ Ⅺ表分组
Numbers 1~ 47 corr esp ond to the 47 s tr ains l is ted in Tab le 1 , Ⅰ ~ Ⅺ r ep res en t the different groups s eparated on the bas is of
SCAR ampli ficat ions
图 2 基于 SCAR标记建立的 47 个香菇主栽菌株的分类图
Fig.2 Classification diagram of 47 L.edodes strains based on amplif ication of SCAR markers
3 讨论
  近年来 , SCAR 标记已用于葡萄[ 13] 、竹[ 14] 、
中草药[ 15 , 16] 、食用菌[ 7 ~ 10]等的物种鉴定。不同于
文献报道的种间鉴别或利用 1个特异的 SCAR
标记来鉴定 1个菌株 ,本研究将 10个 SCAR标
记组合使用以达到鉴定同种内多个 、多组菌株的
目的 。由于种内菌株间或个体间的差异极小[ 17] ,
缺乏可用的分类单元 ,因而笔者从整个基因组的
水平上 、利用 SCAR标记来区分具有不同性状的
香菇菌株间的差异 。笔者将 10 个 SCAR标记的
联合使用 ,在短时间里完成了对目前我国 47个
主栽香菇菌株中 7个菌株的逐一鉴定和另 40个
菌株的分组 ,其中部分从形态特征上难以区分 、
亲缘关系较近的菌株也被鉴别 ,表明通过 SCAR
标记的组合使用可以提高鉴定或辨别香菇菌株
的效率。本研究开发的 SCA R分子标记组合使
用技术可在一定程度上弥补经典手段用于香菇
菌株分类鉴定的不足 ,也可为香菇菌株的知识产
权保护和菌株管理部门的行政决策提供技术
依据 。
参考文献
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[本文编辑]  于荣利
Molecular Iden tif ication of 47 Major Lent inula edodes
Cult ivars in China
ZHAO Weiwei
1 , LI Haibo2 , FU Lizhong2 , 3 , WU Xueqian2 , 3 , XU Xiuhong1 ,
HE Liang
2 , CHENG Junwen2 , WEI Ha ilong2 , 3 , WU Qingqi2 , 3
(1Nor theast Agr icultur al Unive rsity , Harbin , H eilongjiang 150030 , China;2Z hejiang
Forestr y Academy , Z hejiang P rovincial Key Laboratory of Biological and Chemical Utilization of Forest
Resource , Hangzhou , Zhejiang 310023 , China;3Lishui Edible Fungal Resear ch and Development
Center , Lishui , Z hejiang 323000 , China)
Abstract:For ty-seven Lentinula edodes str ains th at are pr esently cultivated in China on a large scale were
collected and analyzed with 10 previously developed stable sequence char acter ized amplified r egion (SCAR)
molecular markers.Based on detected diff erences in SCAR phenotypes , seven individual L .edodes strains
we re identif ied , and the remaining 40 strains were separ ated into 11 distinct groups.Our data provide the
first molecular-based evidence conf irming the distinction between closely related L .edodes str ains having
similar morphological f eatures , including str ains L241 and L241-4 , Minfeng-1 and L12 , and Cr02 and 7402.
Key words:Lentinula edodes stra ins;major cultivars;SCAR molecular marke r;molecula r identif ica tion;
edible mushroom
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