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过山枫与异形南五味子和买麻藤的生药学鉴别



全 文 :收稿日期:2014-11-30; 修订日期:2015-04-16
基金项目:国家自然科学基金科学部主任基金项目(No. 31240045)
作者简介:刘 遥(1989-),男(汉族),湖北荆州人,南方医科大学在读硕
士研究生,主要从事药用资源植物的开发与利用研究工作.
* 通讯作者简介:谢 扬(1963-),男(汉族),湖南邵阳人,南方医科大学
药学院教授,硕士研究生导师,博士学位,主要从事药用资源植物的开发
与利用研究工作.
过山枫与异形南五味子和买麻藤的生药学鉴别
刘 遥1,田立文1,谢 扬1* ,张宏伟2
(1.南方医科大学药学院,广东 广州 510515; 2.南方医科大学中医药学院,广东 广州 510515)
摘要:目的 通过对过山枫、异形南五味子和买麻藤三者的生药学比较,为过山枫的鉴定和资源利用提供科学的依据。方
法 性状鉴别茎的大小、表面、断面特征;显微鉴别茎横切面的显微结构与粉末中晶体、石细胞、纤维的形状;利用薄层色
谱(TLC)和化学鉴定反应比较甲醇提取液的主要化学成分组成。结果 过山枫的主要特点是栓皮易脱落,栓皮外侧有石
细胞层,TLC法可检测出扁蒴藤素斑点。结论 性状鉴别、显微鉴别、化学反应鉴定与 TLC 鉴定的方法准确可靠,鉴定结
果可以作为过山枫的鉴定和资源利用的科学依据。
关键词:过山枫; 性状鉴别; 显微鉴别; 理化鉴定
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 07. 047
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)07-1655-02
The Pharmacognostical Identification Studies on Celastrus aculeatus,Kadsura heteroclita
and Gnetum montanum
LIU Yao1,TIAN Li-wen1,XIE Yang1* ,ZHANG Hong-wei2
(1. School of Pharmaceutical Sciences,Southern Medical University,Guangzhou,510515,China;2. College of
Traditional Chinese Medicine,Southern Medical University,Guangzhou,510515,China)
Abstract:Objective To provide the scientific basis for the utilization and identification of Celastrus aculeatus Merr. by compa-
ring the pharmacognostical studies among Kadsura heteroclita (Roxb.)Craib.,Gnetum montanum Markgr. and Celastrus aculeatus
Merr. .Methods The size,surface and transverse - section characters of stems were described in the method of morphological i-
dentification. The microscopic identification was employed to observe the shape of fiber,stone cells,calcium oxalate crystals and
the microstructures of stem transverse - section. The thin - layer chromatography(TLC)and the chemical identification were also
employed to identify the main ingredients of the methanol extracts. Results The main distinguishing features of Celastrus aculeatus
Merr. were confirmed:the layer of cork was easy to fall off and surrounded by stone cells. Pristimerin was identified by TLC. Con-
clusion The morphological identification,microscopic identification,chemical identification and TLC identification were reliable.
The results could referenced for identifying and utilizing Celastrus aculeatus Merr.
Key words:Celastrus aculeatus Merr.; Morphological identification; Microscopic identification; Physical and chemical i-
dentification
过山枫 Celastrus aculeatus Merr. 是卫矛科南蛇藤属(Celas-
trus)植物,在我国主要分布于云南、广西、广东等地,生长于海拔
100 ~ 1000m的山地灌丛或路边疏林中,少见人工栽培[1]。其性
凉,味苦、辛;清热解毒、祛风除湿、消肿解毒等功效,民间多用其
藤茎的水煎剂或外敷来治疗类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthri-
tis,RA)、风湿痹痛等病症[2,3]。
笔者在对过山枫的资源调查中发现,买麻藤属植物买麻藤,
因为以藤茎入药,亦有祛风除湿、舒经活络之功,容易与过山枫相
混淆。南五味子属植物异形南五味子以“广东海风藤”之名收录
于《广东省中药材标准》第一册,因其藤茎可见粗针状导管,吹烟
可穿过,因此也常被冠以“过山风”之名。三种药材分布范围重
叠、功效相似、入药部位均为藤茎,在市场上常被混淆使用。目前
三种药物之间未见有明确和系统的区别鉴定方法。所以本实验
从药材的性状、显微结构、理化性质三个方面,对过山枫、异形南
五味子和买麻藤进行生药学鉴定,为过山枫的鉴定和资源使用提
供科学依据。
1 材料与仪器
过山枫 Celastrus aculeatus Merr. 采自广东南部,经华南植物
园叶华谷教授鉴定,样品存放于华南植物园标本室。异形南五味
子购自广东从化神岗,经南方医科大学中医药学院药用植物鉴定
教研室马骥教授鉴定,为木兰科南五味子属植物异形南五味子
Kadsura heteroclita ( Roxb.) Craib. 买麻藤 Gnetum montanum
Markgr.采自广东增城,由张宏伟副教授鉴定。
PM -2135 型切片机,Nikon coolpix 4500 数码相机;Nikon E-
clipse E600 生物显微镜,OLYMPUS(COVER - 018)体视显微镜,
暗箱式薄层色谱摄影仪 GoodSee - II(上海科哲生化科技公司)。
硅胶板 GF - 254(青岛海洋化工厂)。实验使用试剂均为分析
纯,扁蒴藤素、丹叶大黄素对照品为自制。
2 方法与结果
2. 1 性状鉴别 对三者藤茎的形状、色泽、气味、大小、质地、断面
特征进行鉴定。比较结果见表 1。
2. 2 显微鉴别 三者干燥的藤茎软化处理、脱水后,按常规石蜡
切片法制作成约 14 μm的切片,番红 -固绿染色、封片。过山枫
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 7 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 7 期
(见图 1)与异形南五味子、买麻藤茎横切面的特征比较如下:
表 1 过山枫与其易混品藤茎的性状比较
过山枫 异形南五味子 买麻藤
①外皮灰褐色。栓皮
薄,常鳞片状剥落,栓
皮内面鲜黄色。
①外皮灰褐色,不规则纵
皱明显。栓皮内面有粘
性。
①外皮黑褐色,可见膨大
的茎节。皮孔多呈黄白
色麻点。
②质硬。 ②质硬。 ②质轻。
③皮部红棕色;木部较
类白色,针状小孔轮状
排列。髓部较小,深褐
色。
③皮部棕褐色;木部类白
色,密布的粗针状小孔,
轮状排列。髓部小,红棕
色。
③皮部深褐色;木部灰褐
色,有 2 ~ 4 层棕褐色环。
有多数小孔放射状排列。
髓部较小,灰褐色。
④气微,味微苦、辛。 ④气微,味微辛。 ④气微,味淡、微苦。
2. 2. 1 过山枫 ①木栓层细胞 5 ~ 7 列,细胞扁平、排列紧密;外
侧可见石细胞断续排列成环。②皮层类圆形薄壁细胞排列紧密;
有散在的草酸钙簇晶,偶见石细胞。③韧皮部细胞排列疏松;形
成层呈波浪环状。④木质部导管大小悬殊、多散在,周围较规整
地排列木纤维;木射线由 1 列薄壁细胞组成。⑤髓部最外侧 4 ~
7列厚壁细胞,中间疏松排列薄壁细胞;周围厚壁细胞中可见草
酸钙方晶。
2. 2. 2 异形南五味子 ①木栓层细胞 4 ~ 5 列。②皮层类圆形薄
壁细胞排列疏松;有多数嵌晶石细胞散在。③韧皮部可见大型分
泌腔断续成环,腔内充满灰棕色物质;韧皮射线为 1 列含棕色物
质的细胞;形成层类圆形。④木质部导管散生,偶见草酸钙方晶。
⑤髓部可见环髓纤维,可见嵌晶石细胞。
2. 2. 3 买麻藤 ①木栓层细胞数 10 列,偶见散在的石细胞;内侧
可见 1 列石细胞断续排列成环。②皮层类长方形薄壁细胞排列
疏松。③韧皮部细胞不规则、排列疏松;韧皮射线中有石细胞群
存在,径向排列成条状并延伸至木质部的射线中;形成层类环形。
④木质部可见管胞,导管和管胞壁增厚。⑤髓部细胞壁均增厚;
可见散在的石细胞,偶见草酸钙方晶。
1.石细胞层 2.木栓层 3.皮层 4.韧皮部
5.韧皮部石细胞 6.形成层 7.木质部 8.髓部
图 1 过山枫藤茎横切面图
2. 3 粉末的显微鉴定 取三者藤茎切成 1 cm厚小段,60 ℃下烘
干 1 h后粉粹,制做粉末装片。过山枫粉末的显微特征(见图 2)
对比易混品的结果见表 2。
2. 4 理化鉴定
2. 4. 1 供试品与对照品的制备 称取药材粉末约 5 g,400 ml 甲
醇加热回流提取 2 h,抽滤后水浴旋蒸干,再用甲醇溶解、定容至
10 mg /ml,作为供试品溶液。扁蒴藤素、丹叶大黄素标准品也配
制成 10 mg /ml的甲醇溶液,作为对照品溶液。
1.分隔纤维 2.石细胞 3.木薄壁细胞 4.木栓细胞
5.具缘纹孔导管 6.纤维石细胞 7.网纹导管 8.草酸钙簇晶排列成行
图 2 过山枫粉末显微图
表 2 过山枫与易混品粉末的显微特征差异
过山枫 异形南五味子 买麻藤
①粉末红棕色。 ①粉末红棕色。 ①粉末棕黄色。
②可见分隔纤维。 ②可见嵌晶纤维。 ②纤维长圆柱形。
③石细胞多类圆形。 ③可见嵌晶石细胞。
③石细胞层纹、孔沟明
显。
④导管多为具缘纹孔,
偶见网纹导管。
④导管多为网纹与螺纹
导管。
④导管和管胞都存在。
导管多为具缘纹孔。
2. 4. 2 化学鉴定反应 参考相关文献[4],三者的供试品溶液进行
常规的化学显色与沉淀反应,确定了过山枫甲醇提取物的主要化
合物类型有黄酮类、酚性化合物和萜类(Liebermann - Burchard反
应显红色)。三者的比较结果如表 3。
表 3 过山枫与易混品的主要化学成分比较
检测物质 实验项目 甲醇提取液结果
黄酮类 盐酸 -镁粉反应 A + B - C -
甾体或三萜 Liebermann - Burchard反应 A + B + C -
生物碱 Dragendoff反应 A - B - C -
酚性化合物及鞣质 FeCl3反应 A + B + C +
羟基蒽醌类化合物 Borntrger's反应 A - B - C -
内酯类化合物 异羟肟酸铁反应 A - B + C -
糖类化合物 Molish反应 A - B - C -
“ +”表示结果为阳性,“ -”表示结果为阴性
2. 4. 3 薄层色谱鉴定 按照药典方法[5],将三者的供试品溶液和
对照品点溶液样于同一硅胶薄层板上,以石油醚 -乙酸乙酯 -甲
醇(4∶ 1∶ 1)展开。喷 5%香草醛 -浓硫酸溶液,于 115 ℃下加
热至斑点显色清晰,对照品与供试品斑点位置的对比结果如图
3。TLC法检测出过山枫供试品溶液有扁蒴藤素特征斑点,但不
能检测出买麻藤中特征的丹叶大黄素斑点,而异形南五味子检测
出特征的深蓝色斑点[6]。其中扁蒴藤素是一种醌甲基三萜类化
合物,在紫外下没荧光,但日光下呈黄色,显色后黄色点消失。此
化合物可以用作 TLC鉴别。
3 讨论
过山枫药材在采集、贮存、流通、使用上多以传统饮片形式为
主,即以厚度为 2 ~ 4 mm 的藤茎斜片为主。过山枫与易混品在
叶、果实等器官上虽也有差别,但由于采集季节、药用价值较低等
原因,在用以鉴别时这些材料不易得。三种植物的藤茎原样品多
干燥、坚硬,制横切面装片前需要经过反复的软化处理,显微结构
的鉴定耗时较长,但鉴定的结果可靠、准确;而性状鉴定和理化鉴
定法相对简便、直观。所以需要通过生药性状、显微结构、理化鉴
定的方法进行鉴定,保证鉴定试验的可靠性和科学性。
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时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 7 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 7
1.过山枫 2.扁朔藤素 3.异形南五味子 4.买麻
图 3 日光下检视(左)与显色检视(右)TLC图
实验总结出通过对比,得出过山枫最主要的鉴别点是:①木
栓层外侧有石细胞环,栓皮易脱落。②粉末红棕色、可见分隔纤
维。③甲醇提取液的主要化学成分组成为萜类,Liebermann -
Burchard反应明显,TLC可检测出含有扁蒴藤素特征点。此外实
验中可发现从过山枫的热甲醇提取液中会冷却析出粗针状晶体,
异形南五味子和买麻藤没有此现象,可以作为参考。
参考文献:
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效观察及免疫机制探讨[J].解放军药学学报,2006,22(5):353.
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[J].时珍国医国药. 2010,21(11):2899.
收稿日期:2014-11-14; 修订日期:2015-04-20
基金项目:国家自然科学基金 (No. 31272600);
甘肃省科技支撑计划 -社会发展类 (No. 1204FKCA161)
作者简介:张 玲 (1987-),女(汉族),甘肃兰州人,甘肃农业大学动物医
学院在读硕士研究生,学士学位,主要从事兽医中药学研究工作.
* 通讯作者简介:魏彦明 (1963-),男(汉族),甘肃通渭人,甘肃农业大学
动物医学院教授,博士研究生导师,博士学位,主要从事中药药理、中兽药
研发和临床兽医学工作.
黄芪和红芪的红外光谱法结合化学计量学方法鉴别
张 玲,李朋玲,华永丽,纪 鹏,李锦霞,魏彦明*
(甘肃农业大学动物医学院,甘肃 兰州 730070)
摘要:目的 建立黄芪和红芪鉴别模型,以对黄芪、红芪进行快速鉴别。方法 利用傅里叶变换红外光谱给合主成分分析
(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS - DA)对黄芪和红芪进行鉴别。结果 红外光谱可以区分黄芪与红芪差异,结合化
学计量学方法分析,在 559cm -1、1073. 51 -1、1413. 57cm -1、1635. 34cm -1、2372. 01cm -1、3000. 69cm -1、3432. 67cm -1处能够
判别两者之间的明显差异。结论 利用傅里叶变换红外光谱结合化学计量法可以高效、简便、准确地鉴别黄芪与红芪,为
黄芪和红芪的鉴别提供一种参考依据。
关键词:黄芪; 红芪; 傅里叶变换红外光谱; 化学计量学方法
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 07. 048
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)07-1657-03
Recognition of Radix Astragali and Radix Hedysari Based on Fourier Transform Infrared
Spectrometry Combined with Chemometrics
ZHANG Ling,LI Peng-ling,HUA Yong-li,JI Peng,LI Jin-xia,WEI Yan-ming*
(School of Veterinary Medicine,Gansu Agriculture University,Lanzhou,Gansu,730070,China)
Abstract:Objective To develop a quick identification method for Radix Astragali and Radix Hedysari. Methods The power of
Radix Astragali and Radix Hedysari were analyzed by using Fourier,transfrom infrared spectroscopy(FTIR)combined with prin-
cipal component analysis (PCA)and partial least squares discriminant analysis (PLS - DA). Results There is a difference be-
tween Radix Astragali and Radix Hedysari in FTIR,the main different appear in 559 cm -1,1073. 51cm -1,1413. 57cm -1,
1635. 34cm -1,2372. 01cm -1,3000. 69cm -1,3432. 67cm -1 . Conclusion The FTIR method combined with chemometrics can be
utilized to distinquish Radix Hedysari and Radix Astragali efficiently,conveniently and accurately,and provide a reference basis.
Key words:Radix Astragali; Radix Hedysari; Fourier Transform Infrared Spectrometry; Chemometrics
黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge)Hsiao 或膜荚黄芪 Astragalus mem-
branaceus (Fisch.)Bge. 的干燥根,红芪为多序岩黄芪 Hedysarum
polybotrys Hand. - Mazz 的干燥根[1]。黄芪与红芪同科异属,中医
临床自古就有以红芪替代黄芪入药的习俗,尤以我国西北地区更
为普遍,我国台湾、港、澳及东南亚一些地区,有药用红芪的习惯,
认为红芪是黄芪的优良品种。1977 年药典中多序岩黄芪和黄芪
都认为是中药黄芪。黄芪、红芪都具有补气固表、利尿排毒、排
脓、敛疮生肌等功效,直至 1982 年中科院院士肖培根等人将红芪
从黄芪中分出。1985 年版《中国药典》将红芪作为一味常用补益
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 7 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 7 期