全 文 ：食用菌学报２０１５．２２（１）：２１～２５
收稿日期：２０１４－１２－０８原稿；２０１５－０２－１６修改稿
基金项目：吉林省自然科学基金（２０１３０１０１１４６ＪＣ）的部分研究内容
作者简介：兰西（１９８９－），女，在读研究生，主要从事生物技术方向研究。
＊本文通讯作者　Ｅ－ｍａｉｌ：ａｒｓｗｓｑ＠ｙｂｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
ＤＯＩ：
基于ＳＲＡＰ的松茸与假松茸特异性分子标记
兰　西，全雪丽，金美玉，吴松权＊
（延边大学农学院，吉林延吉１３３０００）
摘　要：从３００对ＳＲＡＰ引物组合中分别筛选出一对对松茸（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ　ｍａｔｓｕｔａｋｅ）有特异性的引物（ＭＥ６，
ＥＭ２６）与一对对假松茸（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ　ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ）有特异性的引物（ＭＥ９，ＥＭ７），并将这两对引物扩增的
特异条带进行克隆、测序；在此基础上重新设计引物后成功地构建了松茸特异性分子标记（Ｔｍ１／Ｔｍ２）和假
松茸特异性分子标记（Ｔｂ１／Ｔｂ２）。Ｔｍ１／Ｔｍ２在所有供试松茸样品中均能扩增出２４３ｂｐ的条带，Ｔｂ１／Ｔｂ２
在所有供试假松茸样品中均能扩增出３８９ｂｐ条带。这两种标记可在分子水平上快速、准确地鉴定出松茸和
假松茸。
关键词：松茸；假松茸；特异性分子标记
　　松茸（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ　ｍａｔｓｕｔａｋｅ），口蘑属［１－２］，能
与寄主植物根共生形成外生菌根［３］，由于独特的香
味被誉为“菌中之王”［４］，且具有很高的药用价
值［５］。由于难以合成有活力树木根系的营养条件
和生物环境，目前还不能实现人工栽培［６］。松茸由
于近年来的过度采挖现已经被列为国家二级保护
物种［７］。假松茸（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ　ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ）与松
茸同是口蘑属菌根菌［８－９］，外观、香味和口感与松
茸有相似之处［１０］，价格却比松茸低得多，因此经
常被冒充松茸出售。传统方法区别松茸与假松
茸主要通过鉴别子实体特征和子实体微观特征，
近年来也有一些分子水平的鉴别报告，如基于
ＩＴＳ序列［１１］，基于 ＲＡＰＤ 的ＳＣＡＲ 标记［１２］等。
为了进一步从基因水平上探索真假松茸的特异
性标记，笔者在筛选ＳＲＡＰ引物、找到特异性分
子标记的基础上设计了区别真假松茸的特异性
引物，可准确快速鉴定出真假松茸。
１　材料与方法
１．１材料
　　笔者所在实验室从国内外不同地区收集了
松茸 （Ｔ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ）子 实 体 和 假 松 茸 （Ｔ．
ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ）子实体，材料见表１，经吉林省松
茸专家傅伟杰教授鉴定之后，于－７５ ℃保存
备用。
１．２ＳＲＡＰ分子标记筛选
１．２．１ＳＲＡＰ引物
　　引物由上海英潍捷基贸易有限公司合成，１０
个上游引物（编号 ＭＥ１～ＭＥ１０）和３０个下游引
物（编号ＥＭ１～ＥＭ３０）组合成３００对引物。其中
松茸特 异 性 引 物 对 为 ＭＥ６（ＴＧＡＧＴＣＣＡＡ－
ＡＣＣＧＧＧＣＴ）和 ＥＭ２６（ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡ－
ＴＴＧＡＴ），假松茸特异性引物对为 ＭＥ９（ＴＴＣ－
ＡＧＧＧＴＧＧＣＣＧＧＡＴＧ）和 ＥＭ７（ＧＡＣＴＧＣＧ－
ＴＡＣＧＡＡＴＴＡＴＧ）。
１．２．２样品基因池建立
　　分别选取表１中每个编号１至１０的子实体
各一个，削掉表皮，取１．５ｇ（包含菌柄、菌盖），按
ＣＴＡＢ［１６］法分别提取不同样品基因组 ＤＮＡ，电
泳检测后用ＢＳＡ方法［１７］从１至５号样品中各取
５００ｎｇ混合组成松茸基因池，６至１０号样品中各
取５００ｎｇ混合组成假松茸基因池。
１．２．３ＳＲＡＰ反应条件
　　反应体系总体积为２０μＬ，其中２μＬ模版
ＤＮＡ（５ｎｇ／μＬ），２μＬ引物（２μｍｏｌ／Ｌ），２μＬ
ｄＮＴＰ（２ｍｍｏｌ／Ｌ），０．４μＬ　Ｂ　Ｔａｑ 酶（２．５Ｕ／μＬ，
Ｔｏｙｏｂｏ公司），２μＬ的１０×Ｔａｑ　ｂｕｆｆｅｒ，双蒸水
补足体积；扩增程序为９４ ℃预变性５ ｍｉｎ，
９４℃变性１ｍｉｎ，３５℃退火１ｍｉｎ，７２℃延伸
１ｍｉｎ，５个循环；９４ ℃变性１ｍｉｎ，５０ ℃退火
10.16488/j.cnki.1005-9873.2015.01.004
食　用　菌　学　报 第２２卷
１ｍｉｎ，７２℃延伸１ｍｉｎ，３６个循环；最后７２℃
延伸５ｍｉｎ。
ＰＣＲ产物在 １％ 的琼脂糖凝胶上电泳，
０．５μｇ／ｍＬ的溴化乙锭染色、缓冲液为１×ＴＡＥ
（ＰＨ　８．０），８５Ｖ 恒压下电泳约５０ｍｉｎ左右，
Ｄｏｌｐｈｉｎ凝胶成像仪（美国 Ｗｅａｌｔｅｃ公司）拍照
保存。
１．２．４特异性片断的回收、克隆和测序
　　将松茸和假松茸特异性目的片段切下后，装
进１．５ｍＬ的离心管中，按照康为世纪公司回收
试剂盒说明书将目的片段回收。将回收的片段
与ｐＭＤ１８－Ｔ载体（大连宝生物公司）连接后转化
到大肠杆菌ＪＭ１０９，转化后的片段经克隆过夜摇
菌培养，提取质粒ＤＮＡ后用Ｍ１３引物（Ｍ１３Ｆ和
Ｍ１３Ｒ）进行 ＰＣＲ 鉴定，其鉴定体系总体积为
２０μＬ，包括５ｎｇ／μＬ质粒ＤＮＡ　２μＬ，Ｍ１３Ｆ和
Ｍ１３Ｒ（２μｍｏｌ／Ｌ）引物各２μＬ，２ｍＭ　ｄＮＴＰ
２μＬ，２．５Ｕ／μＬ　Ｂ　Ｔａｑ　ＤＮＡ 聚合酶０．４μＬ
（Ｔｏｙｏｂｏ公司），１０×Ｂ　Ｔａｑ　ｂｕｆｆｅｒ　２μＬ，剩余用
双重蒸馏水补足。鉴定的阳性克隆委托上海英
潍捷基贸易有限公司进行测序。
１．３特异引物设计和ＰＣＲ扩增
　　根据测序结果和引物设计原则用 Ｐｒｉｍｅｒ
ｐｒｉｍｅｒ　５分别设计松茸特异性上游引物 Ｔｍ１
（ＡＧＡＡＧＡＴＴＧＧＧＴＡＴＧＧＧＡＧＴ）、下游引物
Ｔｍ２（ＣＣＡＧＡＣＴＴＴＴＣＡＣＡＴＴＴＧＧＴ），假松茸
特异 性 上 游 引 物 Ｔｂ１（ＴＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＧ－
ＡＧＧＧＴＧＴＣ）、下游引物 Ｔｂ２（ＴＧＡＧＴＧＴＣＧ－
ＴＣＧＴＡＴＧＴＡＡＧＴＡＡ），引物由上海英潍捷基
贸易有限公司合成。ＰＣＲ反应总体积为２０μＬ，
除上、下游引物组成不同外，其余成分同１．２．３
ＰＣＲ反应体系相同。
松茸特异性 ＰＣＲ 程序为：预变性９４ ℃、
５ｍｉｎ，变性９４℃、３０ｓ，退火５５℃、３０ｓ，延伸
７２℃，２０ｓ共循环３０次；最后延伸７２℃、５ｍｉｎ。
假松茸特异性ＰＣＲ程序为：预变性９４℃、５ｍｉｎ，
变性９４℃、３０ｓ，退火５５℃、３０ｓ，延伸７２℃、２５ｓ
共循环３０次；最后延伸７２℃、５ｍｉｎ。
表１　供试子实体及其来源
Ｔａｂｌｅ　１　Ｄｅｓｉｇｎａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｏｒｉｇｉｎ　ｏｆ　ｆｒｕｉｔ　ｂｏｄｙ　ｓａｍｐｌｅｓ
松茸编号
Ｔ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｃｏｄｅ　ｎｕｍｂｅｒ
来源
Ｏｒｉｇｉｎ
假松茸编号
Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｃｏｄｅ　ｎｕｍｂｅｒ
来源
Ｏｒｉｇｉｎ
１ 汪　清 Ｗａｎｇｑｉｎｇ＊ ６ 安图 Ａｎｔｕ＊
２ 汪　清 Ｗａｎｇｑｉｎｇ＊ ７ 安图 Ａｎｔｕ＊
３ 牡丹江 Ｍｕｄａｎｊｉａｎｇ＊＊ ８ 安图 Ａｎｔｕ＊
４ 牡丹江 Ｍｕｄａｎｊｉａｎｇ＊＊ ９ 安图 Ａｎｔｕ＊
５ 牡丹江 Ｍｕｄａｎｊｉａｎｇ＊＊ １０ 安图 Ａｎｔｕ＊
Ⅰ 龙　井 Ｌｏｎｇｊｉｎｇ＊ Ⅴ 丽江 Ｌｉｊｉａｎｇ＊＊＊
Ⅱ 昆　明 Ｋｕｎｍｉｎｇ＊＊＊ Ⅵ 安图 Ａｎｔｕ＊
Ⅲ 日　本Ｊａｐａｎ Ⅶ 龙井 Ｌｏｎｇｊｉｎｇ＊
Ⅳ 宝　山 Ｂａｏｓｈａｎ＊＊＊
＊吉林省；＊＊黑龙江省；＊＊＊云南省
＊Ｊｉｌｉｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ；＊＊Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ；＊＊＊Ｙｕｎｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ
２　结果与分析
２．１ＳＲＡＰ标记
　　从３００对引物组合中筛选出一对松茸特异性
引物 ＭＥ６／ＥＭ２６和一对假松茸特异性引 ＭＥ９／
ＥＭ７。用这２对引物分别对１～１０的单个样品扩
增，结果如图１，ＭＥ６／ＥＭ２６在松茸样品中均能扩
增出一条４２０ｂｐ左右的条带，而ＭＥ９／ＥＭ７在假
松茸样品中均能扩增出一条５６０ｂｐ左右的条带。
２．２目的片段的测序与分析
　　根据特异片段的测序结果，包括引物序列在
内松茸特异片段长度为４２２ｂｐ（图２）、假松茸特
异片段长度为５６３ｂｐ（图３），与根据电泳图谱预
测的结果相近。
２２
第１期 兰　西，等：基于ＳＲＡＰ的松茸与假松茸特异性分子标记
　Ｍ：Ｍａｒｋｅｒ；１～５：松茸样品；６～１０：假松茸样品，箭头为特异性片段
Ｍ：ＤＮＡ　ｍａｒｋｅｒｓ；ｌａｎｅｓ　１－５：Ｔ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｓｔｒａｉｎｓ；ｌａｎｅｓ　６－１０：Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｓｔｒａｉｎｓ；Ａｒｒｏｗｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｔｈｅ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｔｏ
ｅａｃｈ　ｓｐｅｃｉｅｓ
图１　部分样品用引物对 ＭＥ６／ＥＭ２６（左）和 ＭＥ９／ＥＭ７（右）ＰＣＲ扩增产物的琼脂糖凝胶电泳图谱
Ｆｉｇ．１　Ａｇａｒｏｓｅ　ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｏｆ　ＰＣＲ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｆｒｏｍＴ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ａｎｄ　Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ
ｓｔｒａｉｎｓ　ｕｓｉｎｇ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ＭＥ６／ＥＭ２６（ｌｅｆｔ　ｐｌａｔｅ）ａｎｄ　ＭＥ９／ＥＭ７（ｒｉｇｈｔ　ｐｌａｔｅ）
下划线单线部分为对应的 ＭＥ６／ＥＭ２６引物序列，双线部分为新设计引物Ｔｍ１／Ｔｍ２序列
Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ＭＥ６／ＥＭ２６ａｒｅ　ｕｎｄｅｒｌｉｎｅｄ；ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｐｒｉｍｅｒｓ　Ｔｍ１／Ｔｍ２ａｒｅ　ｄｏｕｂｌｅ　ｕｎｄｅｒｌｉｎｅｄ
图２　松茸目的片段的碱基序列
Ｆｉｇ．２　Ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔａｒｇｅｔ　ｆｒａｇｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｔ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ
下划线单线部分为对应的 ＭＥ９／ＥＭ７引物序列，双线部分为新设计引物Ｔｂ１／Ｔｂ２序列
Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ＭＥ９／ＥＭ７ａｒｅ　ｕｎｄｅｒｌｉｎｅｄ；ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｐｒｉｍｅｒｓ　Ｔｂ１／Ｔｂ２ａｒｅ　ｄｏｕｂｌｅ　ｕｎｄｅｒｌｉｎｅｄ
图３　假松茸目的片段的碱基序列
Ｆｉｇ．３　Ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔａｒｇｅｔ　ｆｒａｇｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ
２．３松茸和假松茸的特异性标记
　　根据测序结果分别设计了针对松茸的特异
引物 （Ｔｍ１／Ｔｍ２）和针对假松茸的特异引物
（Ｔｂ１／Ｔｂ２）（序列见图３和图４双下划线部分），
分别对部分样品进行扩增，电泳结果如图４所
示，其中 Ｔｍ１／Ｔｍ２可在松茸样品中扩增出约
２５０ｂｐ特征带、Ｔｂ１／Ｔｂ２可在假松茸样品中扩增
出约３９０ｂｐ特征带，条带清晰且特异性好，与预
测的结果相同。
２．４特异性标记的验证
　　为了进一步验证引物，分别以Ｔｍ１／Ｔｍ２和
Ｔｂ１／Ｔｂ２对表１中的Ⅰ～Ⅶ子实体样品进行了
ＰＣＲ扩增，结果如图５，证明了这两对分子标记
的特异性。
３２
食　用　菌　学　报 第２２卷
　Ｍ：Ｍａｒｋｅｒ；１～５：松茸样品；６～１０：假松茸样品，箭头为特异性扩增片段
Ｍ：ＤＮＡ　ｍａｒｋｅｒｓ；ｌａｎｅｓ　１－５：Ｔ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｓｔｒａｉｎｓ；ｌａｎｅｓ　６－１０：Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｓｔｒａｉｎｓ；Ａｒｒｏｗｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｔｈｅ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｔｏ
ｅａｃｈ　ｓｐｅｃｉｅｓ
图４　部分样品用引物对Ｔｍ１／Ｔｍ２（左）和Ｔｂ１／Ｔｂ２（右）ＰＣＲ扩增产物的琼脂糖凝胶电泳图谱
Ｆｉｇ．４　Ａｇａｒｏｓｅ　ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｏｆ　ＰＣＲ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｆｒｏｍＴ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ａｎｄ　Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ
ｓｔｒａｉｎｓ　ｕｓｉｎｇ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ｏｆ　Ｔｍ１／Ｔｍ２（ｌｅｆｔ　ｐｌａｔｅ）ａｎｄ　Ｔｂ１／Ｔｂ２（ｒｉｇｈｔ　ｐｌａｔｅ）
Ｍ：Ｍａｒｋｅｒ；Ｉ～ＩＶ：松茸样品；Ｖ～ＶＩＩ：假松茸样品，箭头为特异性扩增片段
Ｍ：ＤＮＡ　Ｍａｒｋｅｒｓ；ｌａｎｅｓ　Ｉ－ＩＶ：Ｔ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｓｔｒａｉｎｓ；ｌａｎｅｓ　Ｖ－ＶＩＩ：Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｓｔｒａｉｎｓ；Ａｒｒｏｗ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｔｈｅ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｔｏ　ｅａｃｈ　ｓｐｅｃｉｅｓ
图５　部分样品用引物对Ｔｍ１／Ｔｍ２（左）和Ｔｂ１／Ｔｂ２（右）ＰＣＲ扩增产物的琼脂糖凝胶电泳图谱
Ｆｉｇ．５　Ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ｐｒｉｍｅｒｓ　Ｔｍ１／Ｔｍ２ｆｏｒ　Ｔ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｓｔｒａｉｎｓ（ｌｅｆｔ　ｐｌａｔｅ）ａｎｄ　ｐｒｉｍｅｒｓ
Ｔｂ１／Ｔｂ２ｆｏｒ　Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ　ｓｔｒａｉｎｓ（ｒｉｇｈｔ　ｐｌａｔｅ）
３　讨论
　　假松茸形态上与松茸及其相似，其肉嫩味
美，含有人体所需的８中氨基酸和多种生物碱，
可进行人工栽培。与假松茸相比松茸的营养价
值高，不能进行人工栽培，目前出售的野生松茸
其价格是假松茸的１０倍以上，从形态上很难鉴
定出松茸和假松茸，即使是松茸专家有时也不能
区分二者因此常有不法商贩将假松茸混入松茸
中出售，严重影响了松茸品质。
分子标记经常用于鉴定物种的真伪，它是
依据生物的 ＤＮＡ信息进行鉴定可以准确的反
应出该种群或个体的本质特征［１８］，其鉴定结果
准确而且成本低，实验操作方便可以在实验室
操作不需要等待生物生长的周期，也不受外界
环境条件的影响［１９－２０］。目前分子标记方法很
多，如 ＲＡＰＤ、ＩＴＳ、ＳＲＡＰ、ＳＣＡＲ 等，但大多只
建立了松茸特异标记而没有建立假松茸特异性
标记。本研究在ＳＲＡＰ的分子标记基础上根据
基因序列分别找到了松茸与假松茸的特异序
列；同时根据其特异序列分别设计了一对特异
引物，经ＰＣＲ建立了真假松茸的特异性的分子
标记，这两个分子标记具有高效性、准确性、可
重复性，也进一步证明了ＳＲＡＰ分子标记在物
种真伪鉴别中的实用性。
将本实验所得的序列在 ＮＣＢＩ上比对分析
未发现任何结果，原因可能是已报道松茸和假松
茸基因序列太少，也可能是所得的序列只是基因
标记序列，其验证工作正在进行中。
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Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｍａｒｋｅｒｓ　ｔｏ　Ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈ
Ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ　ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ａｎｄ　Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ
ＬＡＮ　Ｘｉ，ＱＵＡＮ　Ｘｕｅｌｉ，ＪＩＮ　Ｍｅｉｙｕ，ＷＵ　Ｓｏｎｇｑｕａｎ＊
（Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｙａｎｂｉａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｂｉａｎ，Ｊｉｌｉｎ　１３３０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｗｏ　ｐｒｉｍｅｒ　ｐａｉｒｓ（ＭＥ６／ＥＭ２６ａｎｄ　ＭＥ９／ＥＭ７）ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｒｅｅ　ｈｕｎｄｒｅｄ　ＳＲＡＰ　ｐｒｉｍｅｒ
ｐａｉｒｓ　ｔｅｓｔｅｄ　ｆｏｒ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｔｏ　ａｍｐｌｉｆｙ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ＤＮＡ　ｆｒａｇｍｅｎｔｓ　ｆｒｏｍＴｒｉｃｈｏｌｏｍａ　ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ａｎｄ　Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ
ｓｔｒａｉｎｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ，ｔｗｏ　ｎｅｗ　ｐｒｉｍｅｒ　ｐａｉｒｓ（Ｔｍ１／Ｔｍ２ａｎｄ　Ｔｂ１／Ｔｂ２）ｗｅｒｅ
ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ａｎｄ　ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｉｎ　ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｉｎｇ　ａ　ｓａｍｐｌｅ　ｏｆ　Ｔ．ｍａｔｓｕｔａｋｅ　ａｎｄ　Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ
ｓｔｒａｉｎｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ　ｍａｔｓｕｔａｋｅ；Ｔ．ｂａｋａｍａｔｓｕｔａｋｅ；ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍａｒｋｅｒｓ
［本文编辑］　曹　晖
５２