全 文 ：微生物学杂志 2阴刀 年 3月 第 20 卷 第 1期 J OR UN AI户 份’ M I CR B O 10 顶〔 Y M a r. 2 0( X )勺b l. 2 0 N o. 1
·研究简报 ·
松茸发 酵中菌丝体生 长 的 营养要求及高产研 究
刘 天责 胡 尚勤
(重庆师范学院生物系 4以X )4 7
松茸菌属于担子菌亚门、 层菌纲 、 无隔担子菌
亚纲 、 伞菌 目、 口 蘑科 、 口蘑属 [] l。 近十多年来 ,
国内外十分重视对食用菌的研究 , 尤其是对金针
菇和香菇等抗癌物质的研究十分活跃 , 这方面以
日本开始较早 。 目前 , 国内外由于松茸不能象其
它食用菌那样在室内进行人工栽培 , 它只能在野
外松林中生长繁殖 , 致使松茸的利用研究受到限
制 。 为了充分利用松茸菌 , 例如生产抗癌物质 , 首
先必须弄清其该菌的最佳营养要求和高产所需生
长因子 。 本研究旨在了解 1 株新松茸菌在发酵过
程中菌丝体生长的营养要求和高产所需最佳碳
源 、氮源 、 C/ N 、无机盐和生长因子 , 以便进一步利
用松茸菌和发酵生产抗癌物质奠定基础。
酸作为氮源 , 按 C/ N 为 6 : 1 , 8 : 1 , 10 : 1 , 12 : 1 , 14 :
1
,
16 : 1
,
15 : 1
,
20 : 1
,
2 2 : 1
,
V B z
,
v 残 , N A A 生长
因子和 aC , K , 凡 , M h 等无机盐均按 10 , 20 , 3 0,
4 0
,
50
,
60
,
70
,
80
,
9 0
,
1X()
,
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,
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,
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,
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,
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,
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,
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,
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,
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,
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,
9 00
,
1 00 义
10
“ 3用量 配制成 p H 5 . 5 液体和 固体培养基 ,
n s℃灭菌巧而 n , 共 324 组处理 。 接种 1% 菌悬
液 , 25 ℃振荡培养 % h 准时测定菌丝体生物量 。
1
.
2
.
3 浏试方法 在培养结束时 , 取其培养物用
1/ 万电光分析天平称重不同组处理培养中菌丝体
生物量 。
1 材料与方法
1
.
1 材料
1
.
1
.
1 菌种 松茸菌 ( T八 e h of ~ ma 朽
u
akt 。
s1 )由重庆师范学院应用微生物研究室提供 。
1
.
1
.
2 培 养基和各 种 药品 ① P D A 培养基 2j[ 。
② 葡 萄 糖 、 麦 芽 糖 、 乳 糖 、 柠 檬 酸 钱
【( N氏 ) ZH蛛珑岛 , 即 N A A 〕、 蔗糖 、 磷酸二氢氨 、
N践 lC 、碳酸氢馁 、 aC o 、 F e C I、 硫酸锰 、 硫酸亚铁 、
M宫C l、 VB I 、 V场 、 V C 、 L 一 半脱氨酸 、 氢氧化钠和
盐酸 。
1
.
1
.
3 仪器设备 可变速变温振荡培养器 、 培养
箱 、高压锅 、 超净工作台、 P F卜一 。 酸度计 、 以及各
种仪器设备等 。
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 菌种活化培 养 将松茸菌斜面种接种到
P D A 培养基上 , 24 一 25℃培养 4 do
1
.
2
.
2 将上述各种糖分别作为碳源 ,按盐和氨基
2 结果与分析
2
.
1 松茸菌最适 C/ N 及碳源氮源的研究
将松茸菌接种到不同种类碳源 、 氮源和不同
C/ N 的培养基中 , 25℃振荡培养 (液体培养基 )
96h
, 所得菌丝体生物量结果见表 1 。
从表 1 中可以看出 , 不同种类碳源 、 氮源以及
不同 C/ N 量对松茸菌丝体生长有 明显影响 。 结
果表 明 , 在 所 用 碳 源 和 氮 源 中 以 葡 萄 糖 和
(N氏 ) 2 (S )4 最好 , C/ N 10 : 1 为佳 , 其松茸菌丝体
的生物量 1 . 20 以10 耐 为最高 , 。 其次是葡萄糖
为碳源 , (N风 )玩 P q 为氮源 , C/ N 为 16 “ 1 时为
好 , 菌丝体产量为 1 . 08 岁10 时 。 且菌丝体形成
明显球状。 这可能是由于该菌的合成能力与其它
食用菌不同的缘故 , 也许正是由于此特性 , 以及对
特殊生长因子的要求不 同 , 致使该菌仍不能在室
内人工栽培 。
2
.
2 松茸对矿物质和生长因子需要的研究
松茸菌在不 同种类 、 不同数量矿物质和生长
因子培养基中的生长情况 , 结果见表 2 。
收稿 日期 : 19 9 一 08 一 07
作者简介 :刘天贵 女 , 讲师。 现从事科学研究工作和科研管理工作。
1期 刘天贵等 :松茸发酵中菌丝体生长的营养要求及高产研究
表 1松茸菌最佳破氮比试脸结果 (生物量 :岁 10 0耐 )
(N 玮 )2 90 月 N践 C I (N践 )践R 儿 (N H4 )H 〔X见
项目
10 : 12 1: 14 1: 1 16 : 1 18 : 1
1
.
2 0 1
.
0 3 1
.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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0
.
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.
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.
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.
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.
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.
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6 : 18 : 10 1: 1 12 : 1 14 : 1
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.
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.
4 0 5
.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
3 5
0
.
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.
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.
4 2 0
.
3 30
.
4 3
表 2 矿物质 与生 长 因子对松茸菌丝体生 长
的影响
矿物质 浓度 菌丝体生物量 生长因子 浓度
/ g’ 10 闹 一 1些
0 5
菌丝体生物量
份 10 耐 一 1
1204 537
` . 1吸,11J1工
1023456
8056790on
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.
8 0
V场
体生长 , 这可能是由于各种无机盐在过高过低情
况下 , 影响细胞透性和酶活性 。 例如钙过高时控
制着细胞生理状态 , 可降低细胞膜透性 , 如果适量
时 , 可对一些阳离子毒性有拮抗作用 。 在此范围
内 ,菌丝体生物量高 , 分 别平均为 0 . 8 酬10 iln ,
0
.
7 8酬1 00nlT , 0 . 4 7酬 I OOlrn , 0 . 3 5 9 / 10 0 n il , 分另IJ
是对照的 7 . 6 倍 、 6 . 8 倍 、 4 . 1 倍 、 3 . 0 倍 , 对 V B I ,
V岛 , V C 和 N A A 的需要量分别为 50 一 30 丫
10
一 6 , 菌丝体生长较好 , 菌丝体生物量最高 , 分别
为 1 . 53 9八 00ml , 1 . 2岁1 ()o iln , 1 . 09岁100耐 , 分
别是对照的 1 . 5 3 倍 , 1 . 52 倍 , 1 . 20 倍 , 1 . 0 9 倍。
值得注意的是 V B I , V BZ , 需要量都较高 , 均在 30
义 10 一 6最好 。
0
.
7 9
0
.
7 7
3 结 论
0
.
4 2
0
.
4 7
0
.
3 9
0
.
3 8
0
.
3 8
0
.
3 7
0
.
3 6
0
.
3 3
0
.
3 5
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.
2 5
0
.
1 7
0
.
1 7
0
.
1 6
0
.
1 4
0
.
1 3
0
.
1 1
0
.
1 2对照
从表 2 中可以看出 , 松茸菌丝体生长对部分
矿物质需要量为钾和钙 10 0一 5 0 X 10 ’ “ , 锰 50 X
10
’ “ , 铁 10 义 10 ’ “为宜 , 过高过低都不利于菌丝
3
.
1 松茸菌丝体生长最好碳源为葡萄糖 , 最好氮
源为 (N氏 ) 250 4 , 最适 C/ N 为 10 : 1 , 其次是葡萄
糖为碳源 , (N风 )践 P O比为氮源时 , C/ N 为 16 : 1
时最好 , 其菌丝体生物量为 1 , 08 9 / 1 00司 -
3
.
2 松茸菌丝体生长对部分矿物质元素的需要
量在钙和钾为 10 0 一 5 0 0 x 10 一 6 , 锰 5 0 义 10 一 6 , 铁
为 10 X 10 ’ “ 时最好 。 其菌丝 体生物量 平均 为
0
.
62 岁10 Oinl , 是对 照的 5 . 2 倍 。
3
.
3 松茸菌丝体生长对部分生长因子的需要量
为 V B z 和 V残 各 300 义 10 一 6 , V C 50 ` 10 一 6 ,
N A A 50 X 10
一 ” 为最好 , 其菌丝体生物量平均为
1
.
3 酬l o iln , 是对照的 1 . 3 倍 。
综上所述 , 在满足松茸菌丝体生长的最佳 C/
N 和碳源 、 氮源以及生长因子等营养要求 , 可以使
该菌丝体生物量获得最大收得率 , 产量是对 照的
1
.
3 倍 。 为充分利用松茸菌 , 以及进行掖体发酵
生产抗癌生理活性物质提供了理论依据。
参 考 文 献
「1] 陈明树 , 胡尚勤 .食用菌栽培与发酵 . 重庆 : 西南师范大学出
版社 , 1 9 9 3 . 4 : 2 5 7一 2 5 8 .
【21 娄隆后 , 朱慧真 . 食用菌生物学及栽培技术 . 北京 :中国林业
出版社 : 19 8 4 , 1 1 , 2 18 .