全 文 :收稿日期:2005-07-26; 修订日期:2006-02-20
基金项目:陕西省自然科学基金资助项目(No. 2003C1 02)
陕西省教育厅重点实验室科研资助项目
作者简介:赵 桦(1957-),男(汉族),陕西汉中人 ,现任陕西理工学院生
物系教授 ,硕士学位 ,主要从事植物形态学研究工作.
马蹄香及其易混品华细辛的薄层鉴别
赵 桦 1 , 张国柱2 , 彭 强 2
(1.陕西理工学院 ,陕西 汉中 723000; 2.陕西省汉中市药品检验所 723000)
摘要:目的 用薄层色谱法鉴别马蹄香及其易混品华细辛。方法 对样品分别依次用石油醚 、乙醚 、甲醇提取;将样品碱
化后用氯仿提取;将样品用水蒸气蒸馏提取挥发油。然后将所得各部分制成供试液进行薄层对比实验。结果 各部分薄
层对比实验结果均显示两者的色谱存在明显差异;在甲醇提取部分 , 马蹄香色谱中检出马兜铃酸 A。结论 马蹄香含马兜
铃酸 A ,是区别于华细辛的一个重要特征;其他薄层对比实验结果也为鉴别提供了依据。
关键词:马蹄香; 华细辛; 薄层色谱; 马兜铃酸 A
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2006)06-0926-01
马兜铃科植物马蹄香 Saruma henry iO liv.以其干燥的根及根
茎入药 , 习称马蹄香 、高脚细辛 、马头细辛 [ 1] , 与我区产的同科植
物华细辛 Asarum siebod iiM iq药用部位相同 , 名称易相混淆。为
防止发生用药品种错误 ,我们曾对马蹄香做生药鉴定并与华细辛
鉴别 [ 2] 。为进一步提供鉴别依据 , 本文对二者进行了薄层色谱
对比实验。
1 材料和试剂
1. 1 材料 马蹄香药材采自汉中镇巴县 , 部分样品来源于民间药
摊;华细辛药材来源于民间药摊 , 部分样品购于当地药材市场并
取其根及根茎。 两种药材样品的原植物均由作者鉴定 , 分别为
Sarum a henry i O liv. 和 Asarum siebodiiM iq。
1. 2 试剂 薄层层析用硅胶 G(化学纯 , 青岛海洋化工有限公司
产 , 国家药典委员会监制 ), 以 0. 5%CMC-Na调制 , 涂布器铺板
(厚度 0. 5 mm),室温晾干 , 105℃烘烤 30 m in,置干燥器贮备。马
兜铃酸 A 对照品 (批号 0746-9002, 中国药品生物制品检定所
供)。其他用实验试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 样品石油醚提取液 TLC比较 取马蹄香和华细辛根及根茎
粉末各 0. 5 g,加石油醚(30 ~ 60℃)超声处理 3次 , 10 m l /次 , 10
m in,滤过 , 合并各自石油醚液 ,滤渣挥尽石油醚备用。取上述 2
种石油醚液分别浓缩至 1 m l, 得 2种供试液。吸取 2种供试液各
10 μl, 分别点样于同一硅胶 GCMC薄层板上 , 以已烷-醋酸乙酯
(17∶3)为展开剂 , 展开 ,取出 , 晾干。喷以茴香醛试液 , 于 100℃
加热 3 m in, 立即在日光下观察。结果见图 1。 2种供试品色谱上
各显 10 ~ 11个斑点 , 其中多数斑点 Rf值不同。
2. 2 样品乙醚提取液 TLC比较 取 2. 4项下的滤渣 ,分别加乙醚
超声处理 3次 , 10 m l /次 , 10 m in, 滤过 , 合并各自乙醚液 , 滤渣挥
尽乙醚备用。取上述 2种乙醚液分别浓缩至 1 m l, 得 2种供试
液。吸取 2种供试液各 10μl, 分别点样于同一硅胶 GCMC薄层
板上 , 以已烷-醋酸乙酯(1∶1)为展开剂 , 展开 , 取出 , 挥尽溶剂 ,
在 365 nm紫外灯下检视。结果见图 2。供试品马蹄香色谱所显
荧光斑点明显多于华细辛。
2. 3 样品甲醇提取液 TLC比较 取 2. 2项下的滤渣 ,分别加甲醇
回流 2次 , 10 m l /次 , 15 m in, 滤过。合并各自甲醇液 ,分别浓缩至
1 m l,得 2种供试液。另取马兜铃酸 A对照品 , 加乙醇制成 0. 5
m g /m l的对照品液。吸取 2种供试液各 10 μl、对照品液 5 μl,分
别点于同一硅胶 GCMC薄层板上使成条状 , 以甲苯-醋酸乙酯-
水-甲酸(20∶10∶1∶1)的上层展开 , 取出 ,晾干。分别在日光下
和 365 nm紫外灯下检视。结果见图 3。供试品马蹄香色谱在与
对照品马兜铃酸 A色谱相应位置上 , 日光下显一个相同的灰黄
色条斑 , 紫外光下该条斑呈暗灰黄色 , 同时在紫外光下尚显 5个
荧光色斑。供试品华细辛色谱日光下未检出任何斑点 ,紫外灯下
只检出与马蹄香色谱中其它 5个荧光斑点相同的色斑。
2. 4 样品碱化后氯仿提取液 TLC比较 取马蹄香和华细辛根及
根茎粉末各 1 g, 加氨水使润湿 ,加氯仿 10 m l, 回流 20 m in,滤过 ,
滤渣再加氯仿 10 m l振摇数分钟 , 滤过。合并氯仿液 , 浓缩至 1
m l, 得 2种供试液。吸取 2种供试液各 10 μl,分别点于同一硅胶
GCMC薄层板上 , 以正丁醇-冰乙酸-水 (8∶2∶ 1)为展开剂 , 展
开 , 取出 ,晾干 , 在 365 nm 紫外灯下检视。 结果见图 4。 马蹄香
色谱中显 9个荧光斑点 , 华细辛色谱中只显一个荧光斑点。
a.马蹄香 b.华细辛 a.马蹄香 b.华细辛
图 1 石油醚提取液 TLC谱 图 2 乙醚提取液 TLC谱
a.马蹄香 b.华细辛 a.马蹄香 b.华细辛
s.马兜铃酸 A
图 3 甲醇提取液 TLC谱 图 4 样品碱化氯仿提取液 TLC谱
2. 5 样品中挥发油 TLC比较 取马蹄香和华细辛根及根茎粗
粉 , 照挥发油测定去 [ 3]测定 ,分别得 2种密度均小于 1的挥发油 ,
得率分别为华细辛 4. 0%(黄白色 ), 马蹄香 0. 8%(淡绿黄色)。
挥发油经无水硫酸钠脱水 ,以乙醚溶解(1→10), 得 2种供试液。
吸取 2种供试液各 5 μl, 分别点于同一硅胶 GCMC薄层板上 , 以
苯-乙酸乙脂(95∶5)为展开剂 , 展开 ,取出 , 晾干。喷以茴香醛试
液 , 在 105℃加热 3 m in, 立即在日光下检视。结果见图 5。两种
挥发油供试品色谱不相同。
a.马蹄香 b.华细辛
图 5 挥发油 TLC谱
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 6期 LISH IZHEN MED IC INE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 6
3 小结
3. 1 马兜铃酸具有肾毒性 [ 4] , 存在于马兜铃科多种植物中 ,如
关木通 、马兜铃 、青木香 、汉中防己等。本文通过实验 , 在样品甲
提取液马蹄香根及根茎色谱中亦检出马兜铃酸 A,这不仅是区别
于华细辛根及根茎的一个特征 ,也提示使用马蹄香时应注意可能
发生的毒害作用。
3. 2 2. 5项下的薄层实验原系对生物碱的检识 , 但经薄层展开
后 , 喷以通用的生物碱显色试剂稀碘化铋钾试液未见出现生物碱
的呈色斑点。而将展开后的薄层板置 365 nm 紫外灯下检视 , 2
种供试品色谱所显荧光斑点却有显著差异 , 因此 , 可将其作为鉴
别二者的依据之一。其他各项薄层对比实验结果 ,均显示二者有
明显不同 ,也可作为鉴别的依据。
参考文献:
[ 1 ] 江苏新医学院. 中药大辞典 [M ] . 上海:上海科技出版社 ,
1986:1160.
[ 2 ] 马蹄香的生药鉴定及其与华细辛的鉴别 [ J] . 中草药 , 2005, 36
(2):277.
[ 3 ] 国家药典委员会. 中国药典 , Ⅰ 部 [ S] . 北京:化学工业出版
社 , 2000.
[ 4 ] 对美国 FAD关于含马兜铃酸中草药肾损害两个通告的分析 [ J] .
中国中医药信息杂志 , 2001, 8(2):82.
药理药化
收稿日期:2005-10-09; 修订日期:2006-02-15
基金项目:科技部资助资助项目(No. 2004BA901A09)
广西科技厅资助资助项目(No.桂科攻 0537017-13)
作者简介:李学坚(1965-),男(壮族),广西上林人 ,现任广西中医学院新
药开发中心副主任 ,硕士学位 ,主要从事中药新药研发及中药有效成分研
究工作.
不同良种芒果叶中芒果苷的含量比较
李学坚 1 , 莫长林2 , 邓家刚 1
(1.广西中医学院 ,广西 南宁 530001; 2.广西科技厅 ,广西 南宁 530023)
摘要:目的 比较不同良种芒果叶中芒果苷的含量。方法 从广西田阳县采集芒果叶 , RP-HPLC法测定。结果 芒果苷含
量最低的是桂七芒 , 最高的是台农一号;测定的 17个芒果叶样品中 , 13个良种的芒果苷含量与本地芒的相同 , 只有 3种
高于本地芒。结论 大部分良种芒果叶中芒果苷的含量与本地芒果相同。
关键词:芒果叶; 芒果苷; 含量测定
中图分类号:R284. 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2006)06-0927-01
芒果叶系漆树科植物芒果 Mangifera ind ica L. 的叶子 , 在广
西有丰富的资源 , 是生产芒果止咳片的主要原料 [ 1] 。研究表明 ,
芒果苷是芒果叶止咳 、化痰的主要活性成分 [ 2] 。 100多年前有人
从南洋引种芒果 , 种植于广西田阳县百育镇 , 在当地称为 “土芒”
或 “本地芒”。由于田阳县盛产芒果 , 1995年被农业部命名为 “芒
果之乡” 。据调查 , 1980年以来 ,芒果果树不断改良 , 在田阳县先
后种植过的芒果良种有 30多种 , 已淘汰不种的有四季芒 、桂西
芒 、红芒 6号 、粤西一号 、桂叶 10号 、爱民一号 、凯特 、秋芒 、肉民
芒 、红台农 、白象牙 、鸡蛋芒 、珍珠芒等;目前普遍种植的有田阳香
芒 、红象牙 9号 、22号 、紫花芒 、红苹芒 、台牙芒 、金穗芒 、农院 3
号 、5号 、泰国芒等;正在推广的新良种有台农一号 、红贵妃 、美国
红芒 、玉文芒 、桂七芒 、金煌芒等。作者采集不同良种的芒果叶 ,
测定其中的芒果苷含量。结果报道如下。
1 仪器与试药
HP1100系列高效液相色谱仪 ,包括 G1131四元泵 , G1313自
动进样器 , G1131脱气机 , G1314A紫外可见检测器 , G1316柱温
箱 , 配备 HP工作站。甲醇为色谱纯 , 水为去离子重蒸水 , 其余试
剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 芒果叶采集 2005-07采自田阳县 , 每个良种在 3个不同的
地点采集 , 采集后即置太阳下晒干;经广西中医学院刘寿养副教
授鉴定为 Mang ifera ind ica L.的干燥叶子。
2. 2 芒果叶供试液的制备 芒果叶打成 12 ~ 24目的细粉 ,取 1. 0
g, 精密称定 ,置索氏提取器中 ,加石油醚(30 ~ 60℃)100 m l,热回
流除尽叶绿素 , 弃去石油醚。药渣挥干石油醚后用甲醇 90 m l索
氏热回流提取至无色 , 放冷 , 转移至 100 m l容量瓶中 ,加甲醇至
刻度 , 摇匀 ,得芒果叶供试液。
2. 3 芒果苷含量测定 按文献 [ 3]方法测定。结果见表 1。
表 1 不同良种芒果叶中芒果苷的含量(–x±s) %
良种 含量 良种 含量
本地芒 1. 53±0. 11 玉文芒 1. 70±0. 13
田阳香芒 1. 72±0. 14 桂七芒 1. 37±0. 11
红象牙 9号 1. 65±0. 40 金煌芒 1. 81±0. 141)
红象牙 22号 1. 67±0. 12 红苹芒 1. 74±0. 19
紫花芒 1. 72±0. 41 台牙芒 1. 41±0. 34
金穗芒 2. 07±0. 291) 农院 3号 1. 42±0. 21
台农一号 2. 35±0. 201) 农院 5号 1. 51±0. 27
红贵妃 1. 56±0. 17 泰国芒 1. 61±0. 11
美国红芒 1. 68±0. 16 平均值 1. 69
与本地芒的含量比较 , 1)P <0. 05;n=3
3 讨论
3. 1 芒果苷含量最低的是桂七芒(1. 37%), 最高的是台农一
号(2. 35%)。与本地芒的含量相比 , 金穗芒 、台农一号 、金煌芒
等 3种在统计学上比本地芒的高 ,其余的没有显著性差异。
3. 2 大部分芒果叶的芒果苷含量集中在平均值(1. 69%)附
近。文献 [ 3]曾报道本地芒不同月份叶子中芒果苷的含量 , 其中 7
月份的含量为 1. 70%, 与本次本地芒的测定值(1. 53%)接近。
3. 3 同系良种 , 如 “红象牙”系的 9号和 22号 、“农院”系的 3
号和 5号 , 芒果苷含量极为相近。
3. 4 芒果良种是相对芒果果实而言的 , 果实的品质有改善 , 叶
子的品质不一定有改善。研究结果显示 ,在田阳县有上百年种植
历史的本地芒 , 芒果叶中的芒果苷含量不是最高的;测定的 16种
良种中 , 只有 3种高于本地芒。作为一种药材 ,芒果叶在种植 、采
收时 , 有必要选择特定的良种 , 以保证其有效成分芒果苷达到一
定的含量水平。
参考文献:
[ 1 ] 国家卫生部药典委员会.药品标准 中药成方制剂 ,第 5分册 [ S] .
1992:50.
[ 2 ] 邓家刚 ,郑作文 ,曾春晖.芒果苷的药效学实验研究 [ J] .中医药学
刊 , 2002, 7(12):37.
[ 3 ] 黄海滨 ,李学坚 ,梁秋云. RP -HPLC法测定芒果叶中芒果苷的含
量 [ J] .中国中药杂志 , 2003, 28(9):839.
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LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 6 时珍国医国药 2006年第 17卷第 6期