免费文献传递   相关文献

竹节人参总皂苷抗炎作用的实验研究



全 文 :收稿日期:2007-06-28; 修订日期:2007-09-30
作者简介:文德鉴(1973-),男(土家族), 湖北恩施人, 现任湖北民族学院
医学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事中草药药理研究工作.
竹节人参总皂苷抗炎作用的实验研究
文德鉴1 , 陈国栋 1 , 张翠兰2 , 董兴高 1 ,肖本见1
(1.湖北民族学院医学院 ,湖北 恩施 445000; 2.湖北民族学院附属医院 ,湖北 恩施 445000)
摘要:目的 观察竹节人参总皂苷的抗炎作用 ,以确定竹节人参抗炎作用的活性部位。方法 通过二甲苯致小鼠耳廓肿
胀实验及醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验 ,观察竹节人参总皂苷对炎症的影响。结果 竹节人参总皂苷高 、低剂量
组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用 ,与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.01),对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通
透性的抑制作用与生理盐水组比较也具有显著性差异(P<0.05, P<0.01)。结论 竹节人参总皂苷具有明显的抗炎作
用 , 是竹节人参发挥抗炎作用的主要活性部位。
关键词:竹节人参总皂苷; 活性部位; 抗炎作用; 药理作用
中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2008)05-1155-01
StudyontheAnti-inflammatoryEffectsofTotalPanaxjaponicusSaponins
WENDe-jian1 , CHENGuo-dong1 , ZHANGCui-lan2 , DONGXing-gao1 , XIAOBen-jian1
(1.MedicalColegeofHubeiInstituteforNationalities, Enshi445000, China;2.AfiliatedHospitalofHubeiIn-
stituteforNationalities, Enshi445000 , China)
Abstract:ObjectiveTostudyanti-inflammatoryeffectsoftotalPanaxjaponicussaponins(tPJS).MethodsEaredemain-ducedbydimethylbenzeneandabdominalcapilarypermeabilityinducedbyaceticacidinmicewereusedtostudytheanti-in-
flammatoryeffects.ResultstPJS(1g/kgand2g∕ kg)couldinhibitearedema(P<0.01)andreducetheabdominalcapilary
permeability(P<0.05, P<0.01).ConclusiontPJShasanti-inflammatoryefects, anditisthemainactivepartofPanaxja-
ponicusonanti-inflammatoryefects.
Keywords:TotalPanaxjaponicus(tPJS); Activepart; Anti-inflammatoryEfect; Pharmacologicalactivities
  竹节人参为五加科植物竹节参 PanaxjaponicusC.A.Mey.的
干燥根茎 , 为常用中药 , 味甘 、微苦 , 性温 , 归肝 、脾 、肺经 , 具滋补
强壮 、散淤止痛 、止血祛痰的功效。用于病后虚弱 、劳嗽咯血 、咳
嗽痰多 、跌扑损伤 [ 1] 。研究表明竹节参复方制剂对小鼠炎症模
型具有明显的抗炎作用 [ 2] , 而关于其作用的物质基础未见相关
报道。为了探讨竹节人参抗炎作用的活性部位 ,本实验对竹节人
参主要成分竹节人参总皂苷(totalPanaxjaponicussaponins, tPJS)
进行了抗炎作用研究 ,以便为竹节人参的临床应用和进一步研究
开发提供理论依据。
1 器材与方法
1.1 药材 竹节人参由宣恩民丰药业有限公司提供。
1.2 动物 昆明种小鼠 , 18 ~ 22 g, 湖北省实验动物中心提供。
1.3 药物与试剂 二甲苯(AR, 北京化学试剂厂);阿司匹林(南
京第二制药厂 , 批号 20060404);0.6%醋酸溶液的配制:取 0.6
ml冰醋酸(AR,武汉市江北化学试剂有限责任公司)加入 100 ml
蒸馏水中搅匀即得 , 备用;2%伊文思蓝(Ffluka进口分装 , 上海化
学试剂供应站经销);生理盐水的配制:取 2 g伊文思蓝加入 100
ml生理盐水中搅匀即得 ,备用;其它化学试剂均为分析纯。
1.4 供试药液(竹节参总皂苷水溶液)的制备 将适量竹节参粉
碎过 40目筛 ,加甲醇浸泡过夜 , 超声提取 2次 , 45 min/次 , 合并
滤液 , 将滤液蒸干 ,再溶于水中 ,用乙醚提取 3次 ,去除脂类物质 ,
醚液弃去 , 水层再用水饱和的正丁醇提取 4次 ,合并正丁醇液 ,用
水洗 3次 , 最后将正丁醇液减压浓缩至干 , 即得 tPJS。 取适量
tPJS加水溶解 , 调 pH至中性 , G4垂熔玻璃漏斗滤过 , 使成 100
mg/ml水溶液。冷藏备用。
1.5 仪器 CQ-250超声波清洗器(上海弘兴超声电子仪器有
限公司), 722分光光度计(上海第三分析仪器厂);电子分析天平
(上海天平仪器厂);6 mm打孔器。
1.6  二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验 按文献 [ 3]取 18 ~ 20 g小鼠
40只 , 随机分为 4组 , 每组 10只。 A组(生理盐水组 , 给予等体
积的生理盐水)、B组(阿司匹林组 ,给药剂量为 0.2g/kg)、CH组
(tPJS高剂量组)、CL组(tPJS低剂量组)。高 、低剂量组按 2, 1g/
kg分别灌胃 tPJS水溶液。各组灌胃给药 1次 /d, 连续 3 d, 于最
后 1次给药 30min后 ,将二甲苯 0.3 ml涂于小鼠右耳正反两面 ,
15 min后颈锥脱臼处死 , 用直径 6 mm打孔器在左右两耳廓相同
部位打孔取样 ,及时称重 , 以左右耳片重量之差为肿胀度 ,按下式
计算抑制率 ,并与对照组进行比较。
抑制率(%)=对照组肿胀度 -给药组肿胀度对照组肿胀度 ×100%
1.7 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验 按参考文献 [ 4]取 18
~ 20 g昆明种小鼠 40只 , 分组及给药方法同上。 末次给药 30
min后尾静脉注射 2%的伊文思蓝生理盐水 0.01ml/g,立即腹腔
注射 0.6%醋酸 0.2 ml/只。 20 min后 , 脱颈处死小鼠 , 剪开腹
腔 , 用 5 ml生理盐水冲洗腹腔数次 ,收集洗涤液 , 2 500 r/min离
心 5 min, 取上清液于 590nm处比色 , 测定光密度值(OD值)。
1.8 统计方法 各组数据以 x±s表示 , 组间差异比较用 t检验 ,
由 spss11.5系统完成。
2 结果
2.1  tPJS对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度的影响 实验结果可见
tPJS高 、低剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有抑制作用 , 与生
理盐水组比较差异有显著性 , tPJS高剂量组与阿司匹林组比较无
统计学意义(P>0.05), 表明 tPJS对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有
很好的抑制作用 ,其作用强度与剂量有关 , 剂量越大作用越明显。
结果见表 1。
表 1 tPJS对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度的影响( x±s)
组别 剂量C/g· kg-1
右耳重量
m/mg
左耳重量
m/mg 肿胀度
抑制率
(%)
A - 27.68±2.72 11.92±1.75 15.76±1.28bB 0.2 17.50±1.34 12.10±1.55 5.40±1.14a 65.74CL 1 24.68±2.00 12.42±1.76 12.26±1.37ab 22.21
CH 2 19.07±1.59 12.17±1.44 6.70±1.07a 57.49
  与生理盐水组比较 , aP<0.0 1;与阿司匹林组比较 , bP<0.01
·1155·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.5 时珍国医国药 2008年第 19卷第 5期
2.2  tPJS对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 实验结
果可见 tPJS高 、低剂量组和阿司匹林组对 0.6%醋酸所致小鼠腹
腔毛细血管通透性均有抑制作用 , 与生理盐水组比较差异有显
著性 , tPJS高剂量组与阿司匹林组比较无统计学意义(P>0.5),
表明 tPJS对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性有很好的抑制作
用 , 其作用强度与剂量有关 ,剂量越大作用越明显。结果见表 2。
表 2 tPJS对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响( x±s)
组别 剂量 C/g· kg-1 OD值
A - 1.757 9±0.236 0c
B 0.2 0.719 7±0.207 1a
CL 1 1.304 8±0.383 7bc
CH 2 0.776 2±0.292 4a
  与生理盐水组比较 , aP<0.01, bP<0.05;与阿司匹林组比较 , cP<
0.01
3 讨论
当前用于风湿病治疗的药物效果均不理想 , 而且毒性比较
大。竹节人参在民间主要用于风湿病的治疗 ,以竹节人参为主的
复方制剂以医院内部制剂的方式在湖北恩施临床被用于 ,并取得
了较好的治疗效果。 tPJS是竹节人参的主要成分 ,所以本实验对
tPJS进行了提取并研究其抗炎作用 , 以便为竹节人参的临床应用
和进一步的研究开发提供理论支持或参考。
二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通
透性实验是研究药物抗炎作用的常用实验方法。二甲苯可引起
耳廓急性炎症水肿 ,醋酸可引起小鼠腹腔毛细血管通透性增加。
从抗炎结果看 , tPJS能抑制二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀和醋酸所
致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高 , 当给药剂量为 2 g/kg时与
给药剂量为 0.2 g/kg阿司匹林组比较无统计学意义 , 表明其作
用强度相近 ,因此 tPJS具有较好的抗炎作用 ,是竹节人参具有抗
炎作用的主要活性部位。其作用机制可能是通过抑制毛细血管
的扩张 ,降低通透性 , 使渗出减少以达到抗炎作用。
参考文献:
[ 1 ]  国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005:93.
[ 2 ]  陈龙全 ,袁德培 ,孟卫星 ,等.复方竹节参片镇痛 、抗炎作用的实验
研究 [ J] .江苏中医 , 1998, 19(9):47.
[ 3 ]  徐叔云 , 卞如濂 , 陈 修 .药理实验方法学 [ M] .北京:人民卫生
出版社, 1994:719.
[ 4 ]  陈 奇.中药药理研究方法学 [ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1993:305.
收稿日期:2007-07-25; 修订日期:2007-09-26
作者简介:翟 娜(1980-),女(汉族),河北霸州人 ,现任河南大学药学院
在读硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事中药药理研究工作.
*通讯作者简介:许启泰(1955-), 男(汉族),河南周口人 , 现任河南大学
药学院教授 ,学士学位 ,主要从事中药药理学研究工作.
穿心莲内酯衍生物的急性毒性实验
翟 娜 , 许启泰* , 宋沛然 , 陈百泉
(河南大学药学院 ,河南 开封 475004)
摘要:目的 研究穿心莲内酯衍生物的急性毒性。方法 采用灌胃和腹腔注射法给药 , 观察 14 d内小鼠的活动情况及死
亡情况 , 用寇氏(krber)法测定穿心莲内酯衍生物对小鼠的半数致死量(LD50)及可信限。结果 小鼠给药途径不同毒性表
现差别很大 , 如口服给药的 LD50比腹腔注射的 LD50大。结论 穿心莲内酯衍生物毒性极低 , 属低毒范围 ,但对眼睛有一定
刺激 , 对胃有一定影响。
关键词:穿心莲内酯衍生物; 半数致死量; 急性毒性实验
中图分类号:R962  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2008)05-1156-02
ExperimentofAcuteToxicityofAndrographolideDerivatives
ZHAINa, XUQi-tai,SONGPei-ran, CHENBai-quan
(HenanUniversityofPharmacologicalColege, HenanKaifeng475004, China)
Abstract:ObjectiveTostudytheacutetoxicityofandrographolidederivatives.MethodsActivityconditionanddeathcondition
ofmusculusalbuswereobservedwithinfourteendayswithintragastricalyandperitonealinjection, andthemethodofkrberwas
usedtodetermineLD50 ofandrographolidederivativestomusculusalbusandconfidencelevel.ResultsandConclusionThetox-icitymanifestationhadtremendousdiferenceduetodifferentadministrationroutes, forinstance, LD50 oftheoraladministrationwasbiggerthanthatofperitonealinjection.Thetoxicityofandrographolidederivativesisverylow, belongstolowtoxicity, but
thosecanstimulateeyesandinfluencestomachtosomeextent.
Keywords:AndrographolideDerivatives; LD50; Experimentofacutetoxicity
  穿心莲内酯 [ 1] (andrographolide)为爵床科植物穿心莲 An-
drographispaniculata(Bum.f)Nees中提取得到的二萜内酯类化
合物 , 是中药穿心莲的主要有效成分之一 , 具有清热解毒 、凉血消
肿等功能。现代药理研究表明 [ 2] , 穿心莲内酯及其衍生物具有
抗炎抗菌 、抗病毒 、抗肿瘤 、免疫调节 、治疗心脑血管疾病 、保肝利
胆及抗生育等功能。鉴于穿心莲内酯的诸多功效 ,致力于穿心莲
内酯衍生物研究的人员越来越多 ,新衍生物不断出现。为确保新
合成的穿心莲内酯衍生物的安全性 ,笔者对部分新衍生物做了急
性毒性实验。
1 器材
1.1 动物 小鼠 , 体重 18 ~ 22 g, 雌雄各半 , 实验前禁食 12 h, 不
禁水。购自河南省实验动物中心。
1.2  器材 天平 , 量筒(25 ml), 灌胃针 ,注射器(1 ml), 烧杯(50
ml),玻璃棒 , 小鼠笼。
1.3 试剂及药品 0.5%的 CMC-Na溶液 , 香油 , DMSO, 穿心莲
内酯衍生物样品 1, 2, 3, 4(由河南大学药学院药物研究所提供)。
2 方法与结果
2.1 灌胃实验
2.1.1 方法 由于穿心莲内酯的毒性尚未见报道 , 所以均将 4种
样品以最大浓度溶于 0.5%的 CMC-Na水溶液中 ,分别以 0.2,
·1156·
时珍国医国药 2008年第 19卷第 5期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.5