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白檵木花抗实验性胃溃疡活性部位筛选研究



全 文 :白檵木花抗实验性胃溃疡活性部位筛选研究
荆常锋
浙江省宁波明州医院 浙江 宁波 315000
摘要 目的:研究白檵木花各提取部位抗实验性胃溃疡的作用。方法:采用冷水浸拘束法致小鼠实验
性胃溃疡模型和幽门结扎法致大鼠实验性胃溃疡模型,观察白檵木花各提取部位抗实验性胃溃疡的作
用。结果:白檵木花正丁醇部位组小鼠胃溃疡溃疡指数和大鼠胃溃疡溃疡指数均极显著低于生理盐水
对照组 (P<0.01),说明正丁醇部位组对实验性胃溃疡具有显著的治疗作用,此外白檵木花其他提取
部位对实验性胃溃疡也有一定的疗效。结论:白檵木花各提取部位具有良好的预防和治疗胃溃疡作用。
关键词 白檵木花 活性部位 实验性胃溃疡
  白檵木花来源于金缕梅科 (Hamamelidaceae)檵
木属 (Loropetalum R.Br.植物檵木 (Loropetalum
chinensis(R.Br.)Oliv.)的花,具有解热、止血、
通经活络的功效,常用来治疗血瘀经闭,跌打损伤,
慢性关节炎,外伤出血,子宫出血,腹泻等疾病[1]。
民间有用白檵木花煎水内服治疗胃脘疼痛以及慢
性胃炎等消化道疾病,能明显缓解疼痛,颇具疗效。
查阅文献,未发现有用白檵木花治疗消化性溃疡的报
道。本实验通过建立冷水浸拘束法致小鼠实验性胃溃
疡模型和幽门结扎法致大鼠实验性胃溃疡模型,筛选
白檵木花抗实验性胃溃疡活性部位,为今后进一步开
发白檵木花提供实验依据。
1 材料
1.1  动物:昆明种小鼠,20~25g,雌雄各半;
Wistar大鼠,体重180~230g,雌雄各半,由温州医
科大学实验动物中心提供。
1.2 药品与试剂:白檵木花采于温州市郊大罗山区,
经温州医科大学附属第一医院林崇良老师鉴定为檵木
(Loropetalum chinensis(R.Br.)Oliv.)的花;盐酸
雷尼 替 丁, 中 诺 药 业 有 限 公 司, 产 品 批 号:
256110706。乙酸乙酯、正丁醇和无水乙醇,购于宁
波新之源化工有限公司,分析纯。
2 实验方法
2.1 制备白檵木花各提取部位:取干燥的白檵木花
100g,粉碎成粗粉,用80%乙醇回流提取3次,浓
缩为稠浸膏,得总提取物。用少量水将浸膏分散,依
次用乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、水萃取,收集各萃取
部位,蒸干溶剂,即得白檵木花的各提取部位:乙酸
乙酯部位组、正丁醇部位组、乙醇部位组、水部位
组。将各组提取物减压干燥,保存备用。
2.2 白檵木花各部提取物对小鼠实验性胃溃疡模型
的影响:取健康昆明种小鼠60只,雌雄各半,随机
分成6组,分别为生理盐水对照组、雷尼替丁组、乙
酸乙酯部位组、正丁醇部位组、乙醇部位组、水部位
组。对照组给予生理盐水,雷尼替丁组按体重40mg/
kg给予雷尼替丁,给药组分别给予400mg/kg的提
取物。每天2次,连续给药5天。实验前禁食不禁水
12h,末次给药1h后,将小鼠绑于铁栅栏上,放入
20℃左右的水浴中,液面保持在胸骨剑突水平。24h
后处死小鼠,打开腹腔,分别结扎贲门和幽门,胃内
注入1%甲醛溶液6ml。取出胃,10min后沿胃大弯
剪开胃,轻轻冲洗胃壁,在解剖镜下观察胃黏膜损伤
并计算小鼠胃溃疡溃疡指数及溃疡抑制率[2-3]。
胃溃疡溃疡指数计算方法:溃疡点或面1mm以
下者,计1分;1~2mm者,计2分;2~3mm者,
计3分;3~4mm者,计4分;大于4mm者,计5
分,将计分相加即为该只动物的溃疡指数。
抑制率 (%)= [(对照组溃疡指数-给药组溃
疡指数)/对照组溃疡指数]×100%
2.3 白檵木花各部提取物对大鼠幽门结扎致实验性
胃溃疡模型的影响:取SD大鼠 (180~220克)60
只,雌雄各半,随机分成6组:生理盐水对照组、雷
尼替丁组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组、乙醇部
位组及水部位组。对照组灌饲生理盐水,雷尼替丁组
给予雷尼替丁40mg/kg,给药组分别给予400mg/kg
的提取物。每天1次,连续给药5天。第4日给药后
开始禁食不禁水,末次给药后3h,对大鼠行幽门结
扎术,术后禁食禁水,24h后处死大鼠,开腹,取
胃,同时向胃注入1% 甲醛溶液5ml,将全胃浸入甲
醛溶液中,固定10min。沿胃大弯剪开,观察胃黏膜
损伤,按2.2项下方法测量并计算大鼠胃溃疡溃疡指
数及溃疡抑制率。
·503·浙江中医杂志2015年4月第50卷第4期
2.4 统计学处理:各组数据以均值±标准差 (x±s)
表示,组间差异的显著性采用t检验。
3 实验结果
3.1 白檵木花各部提取物对小鼠实验性胃溃疡模型
的影响:在解剖镜下观察,溃疡主要发生在小鼠腺胃
部,为点状或条索状粘膜出血、糜烂,少数溃疡出现
穿孔。雷尼替丁和白檵木花各个提取部位的胃溃疡发
生较少,仅在胃粘膜表面有少数出血点。
雷尼替丁组、白檵木花正丁醇部位组与生理盐水
对照组比较有极显著性差异 (P<0.01),表明对冷
水浸拘所致小鼠实验性胃溃疡具有明显的保护作用;
乙酸乙酯部位组、乙醇部位组和水部位组均可以有效
降低溃疡指数 (P <0.05)。结果见表1。
表1 白檵木花各提取部位对小鼠
实验性胃溃疡的影响 (x±s)
组别 剂量 (mg/kg) 溃疡指数 溃疡抑制率 (%)
生理盐水对照组 — 25.50±5.36 —
雷尼替丁组   40mg/kg  10.80±2.76** 57.65
乙酸乙酯部位组 400mg/kg  21.20±3.48* 16.87
正丁醇部位组  400mglkg  13.20±2.57** 48.24
乙醇部位组   400mg/kg  18.40±4.49* 27.84
水部位组    400mg/kg  20.60±3.91* 19.22
  注:与生理盐水对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
3.2 白檵木花各部提取物对大鼠幽门结扎致实验性
胃溃疡模型的影响:肉眼观察,溃疡主要发生在大鼠
前胃部粘膜,溃疡呈点状、不规则片状,部分深达肌
层,个别出现穿孔。雷尼替丁组和白檵木花正丁醇萃
取组大鼠的溃疡明显减轻。同生理盐水对照组比较,
雷尼替丁组和白檵木花正丁醇萃取组有极显著差异
(P<0.01),说明雷尼替丁组和正丁醇萃取组对大鼠
幽门结扎型胃溃疡具有明显的治疗作用。此外,白檵
木花其他提取部位对大鼠幽门结扎型胃溃疡均具有较
好的治疗作用 (P <0.05)。实验结果见表2。
表2 白檵木花各提取部位对大鼠
实验性胃溃疡的影响 (x±s)
组别 剂量 (mg/kg) 溃疡指数 溃疡抑制率 (%)
生理盐水对照组 — 28.90±3.24 —
雷尼替丁组   40mg/kg  14.70±1.66** 49.13
乙酸乙酯部位组 400mg/kg  20.60±1.47* 28.72
正丁醇部位组  400mg/kg  16.20±0.98** 43.94
乙醇部位组   400mg/kg  19.80±1.94* 31.49
水部位组    400mg/kg  19.20±2.36* 33.56
  注:与生理盐水对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
4 讨论
消化性胃溃疡的发生机理可能是胃黏膜平衡失调,
目前多数学者认为是胃黏膜防御因子与攻击因子综合力
量作用的结果,涉及到情志刺激、神经内分泌、胃平滑
肌运动、胃黏膜血流、胃酸、胃蛋白酶、外来理化因素
等诸多因素。当其中某个或几个攻击因素或保护因素发
生改变而影响系统平衡,则引发胃黏膜的破坏。胃溃疡
是各种应激情况下引起的以胃黏膜充血、水肿、糜烂和
出血等为主的急性胃黏膜病变[4-5]。
本实验采用水浸拘束法和幽门结扎法制造出的实
验性胃溃疡模型,属于急性应激性溃疡。一般认为应
激性溃疡是由于中枢神经系统及植物神经系统功能紊
乱导致胃肠运动与分泌功能紊乱所引起的急性溃疡。
目前,对于急性应激性胃溃疡动物模型的制备方法
有:水浸拘束法,幽门结扎法,组织胺法,烫伤应激
法,阿司匹林、乙酸、盐酸等酸剂灌服法等。由于水
浸拘束法和幽门结扎法诱发应激性溃疡的成功率非常
高,且重复性好[6],故本实验采用水浸拘束法和幽门
结扎法造模。
实验结果显示,白檵木花正丁醇提取部位小鼠实
验性胃溃疡溃疡指数和大鼠幽门结扎型胃溃疡溃疡指
数均极显著低于对照组 (P<0.01),另白檵木花其他
组提取物和对照组比也具有显著性差异 (P<0.05)。
由实验结果可以知道,白檵木花各个提取部位对小鼠
和大鼠实验性胃溃疡均有一定的抑制作用,尤其正丁
醇部位组具有显著的作用。由于应激性溃荡的机理与
促进攻击因子胃酸、胃蛋白酶分泌,抑制胃粘液分泌
相同,故推测白檵木花抑制应激性胃溃疡的原理可能
与抑制胃酸及胃蛋白酶的分泌有关。
由于檵木在我国分布极广,故其具有很大的开发
价值。白檵木花抑制和修复胃溃疡的作用机理及其有
效成分,有待于进一步研究。
5 参考文献
[1]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海人民出版社,
1977:1990-1991.
[2]宋立人,洪恂,丁绪亮,等.现代中药学大辞典[M].北京:人民
卫生出版社,2001:257.
[3]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,
1993:461.
[4]李兆申.应激性溃疡发生机制及预防对策研究现状[J].解放
军医学杂志,1999,24(6):391-393.
[5]李兆申,湛先保,崔忠敏,等.应激对胃黏膜表面上皮层抗酸形
态屏障及壁细胞超微结构的影响[J].解放军医学杂志,1999,24
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[6]徐叔云.药理实验方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,
1991:1158.
收稿日期 2014-11-01
·603· 浙江中医杂志2015年4月第50卷第4期