作 者 :喻晶晶Organ-单位: 华中农业大学
期 刊 :华中农业大学 2012年 02期 页码:66
关键词:香菇;遗传转化;3-磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子;农杆菌;潮霉素筛选效率;
摘 要 :香菇(Lentinula edodes)是广泛种植的食用菌之一,随着其基因组测序的完成,功能基因组学研究将逐渐展开。遗传转化体系是基因功能研究的基础,其中农杆菌介导的转化方法有着插入拷贝数少、稳定高效等优点。本研究采用农杆菌介导转化法构建了一套适用于香菇的遗传转化体系。 首先从香菇菌株武香1号(W1)中克隆得到gpd启动子,以质粒pCAMBIA1301为骨架,替换掉HYG基因前的启动子CaMV35S,构建了一个新的转化载体pCAMBIA1301-gpdo再将载体pCAMBIA1301-gpd和pCAMBIA1301分别导入农杆菌EHA105,在乙酰丁香酮(AS)存在的条件下,农杆菌EHA...