全 文 ：食用菌学报 2010.17(1):69 ～ 71
收稿日期:2009-12-29 原稿;2010-01-13 修改稿
基金项目:山西农业大学博士科研启动经费项目(编号:412564)、山西省科技攻关项目(编号:021025)、山西省自然科
学基金(编号:2010011043-1)的部分研究内容
作者简介:吕喜茹(1987-), 女 ,山西农业大学食品科学与工程学院在读硕士 , 主要从事食品营养与安全研究。
＊本文通讯作者　E-mail:ndfcp@163.com
文章编号:1005-9873(2010)01-0069-03
姬松茸粗多糖抗氧化作用
吕喜茹1 , 郭　亮2 , 常明昌1 , 李　振1 , 王国晋1 , 冯翠萍1＊
(1山西农业大学食品科学与工程学院 , 山西太谷 030801;2北京农业职业学院 ,北京 102442)
摘　要:为研究姬松茸(Agaricus blazei)粗多糖的抗氧化作用 ,对姬松茸粗多糖的还原能力 、螯合金属离子能
力 ,清除 DPPH·和 O2-·的能力及体外抗脂质过氧化能力进行测定 。结果表明 , 姬松茸粗多糖具有一定的抗
氧化能力 ,且随其浓度的增加而增强。当浓度为 2 mg/mL时 , 还原力测试混合液的吸光值为 0.293 , 对金属螯
合率 、DPPH ·和 O2 -·的清除率以及体外脂质过氧化抑制率分别为40.1%、88.8%、71.2%和 84.5%。
关键词:姬松茸;粗多糖;还原力;金属螯合率;自由基清除率;脂质过氧化
　　姬松茸(Agaricus blazei Murill)又名小松菇 、
柏 式 蘑 菇 、 巴 西 蘑 菇 , 隶 属 担 子 菌 纲
(Basidiomycetes)伞菌目(Agaricales),除含有丰富
营养成分外 ,还含有对人体有保健作用的功能成
分 ,尤其是多糖类 ,具有提高人体免疫力 、抑制肿
瘤 、降血糖 、降血脂 、抗炎 、抗动脉硬化等多种生理
功能[ 1] 。据文献报道 ,植物多糖对物理的 、化学的
及生物来源的多种活性氧(ROS)具有良好的清除
作用 ,能抑制紫外照射所导致的脂质过氧化和体外
H2O2诱导的红细胞溶血[ 2 ～ 6] ,增加超氧化物歧化
酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH2 Px)活性
等[ 7] 。本试验从姬松茸粗多糖的还原能力 、螯合金
属离子能力 ,清除 DPPH ·和 O2 -·的能力及体外
脂质抗氧化能力等方面 ,来探讨姬松茸多糖的体外
抗氧化作用 ,寻求其作为功能性抗氧化剂的可能 ,
从而为姬松茸的综合开发应用提供参考。
1　材料与方法
1.1 材料
　　姬松茸(A.blazei)子实体由山西农业大学
食用菌中心提供 。
1.2 主要试剂
　　2 , 2-二苯基-1-苦基肼基游离自由基(2 , 2-
Dipheny l-1-picrylhydrazy l radical , DPPH ·)、三
羟甲基氨基甲烷(Tris)、3-(2-吡啶基)-5 , 6-双(4-
苯磺酸)-1 ,2 , 4-三嗪(Ferrozine)由 Sigma公司提
供 ,其他试剂均为国产分析纯 。
1.3 粗多糖的制备
　　姬松茸子实体干燥粉碎后过 80目筛 ,粉末按
料液比 1/10 加乙醚 ,封口 ,用磁力搅拌器搅拌
20 min , 8层纱布过滤 ,重复处理 3次 ,得脱脂姬松
茸粉。然后脱脂姬松茸粉加水(料水比 1/10),沸
水浴 5 h ,冷却至室温后 ,用 8层纱布过滤 ,重复提
取1次 ,合并两次提取液 ,加入等体积无水乙醇 ,混
匀 ,静置 24 h ,42 000 g 离心 5 min ,弃上清液 ,加入
约5倍体积丙酮洗涤沉淀 ,重复数次 ,直至丙酮溶
液无色。用蒸馏水溶解沉淀 ,加入到 DEAE-纤维
素柱(北京恒业中远化工有限公司提供)中 ,用蒸馏
水洗脱 ,冷冻干燥(物料温度:-40 ℃,冷井温度:
-40 ℃,加热板温度:60 ℃,真空度:20 Pa),得纯
化粗多糖。加入蒸馏水得2 000 g/mL初始溶液 ,
然后再依次稀释得浓度为 1 000 、500 、250 、125 和
62.5 g/mL 的粗多糖溶液。
1.4 抗氧化试验
1.4.1 还原能力的测定
　　参考 OYAIZU 的方法[ 8] 加以改进 ,不同浓
度样品各取 0.5 mL ,分别加入 1.25 mL PBS(pH
6.6 , 0.2 mol/L)和 1.25 mL 1% K 3 Fe(CN)6 ,
50 ℃反应 20 min , 然后再分别加入1.25 mL
TCA(10%, w/v), 42 000 g 离心10 min ,取上清
液2.5 mL , 与 0.25 mL 新配的 FeCl3 (0.1%,
w/v)混合摇匀后 ,在 700 nm 处检测混合溶液的
吸光值。
1.4.2 螯合金属离子能力的测定
DOI :10.16488/j.cnki.1005-9873.2010.01.012
食　用　菌　学　报 第 17 卷
　　参考 DECKER 的方法[ 9] 加以改进 , 将
600 μL待测液与 40 μL 2 mmol/L FeCl2混合后
加入 80 μL 5 mmol/L Ferr ozine试剂 ,充分混合
后 ,室温下反应 10 min 后 ,在 562 nm处测吸光
值。计算各待测样品螯合金属离子的能力。
螯合率(%)=(1-Ai -Aj
Ac
)×100
(Ai :添加样液和 Ferr ozine试剂的混合液吸
光值;Ac :未添加样品的混合液吸光值;Aj :未添
加 Ferr ozine试剂的混合液吸光值)
1.4.3 清除 DPPH ·能力测定
　　清除 DPPH ·能力测定参照文献[ 10]进行。
清除率(%)=A 0 -(A -A b)
A 0
×100
(A 0 :无水甲醇吸光值;A :样液添加 DPPH·
及无水甲醇的吸光值;A b :样液添加无水甲醇而
未添加 DPPH ·的吸光值)
1.4.4 清除 O2 -·能力测定
　　清除 O2 -·能力测定参照文献[ 11]进行。
抑制率(%)=■A1 -■A2■A1 ×100(■A1为邻苯三酚自氧化的反应速率;■A2
为加入样品后邻苯三酚自氧化的反应速率)
1.4.5 体外脂质过氧化抑制率的测定
　　体外抑制脂质过氧化能力的测定参照文献
[ 12]进行 。
抑制率(%)=(1-A sample -A sample blank
A control
)×100
(A con trol :未添加硫代巴比妥酸的样品反应液吸光
值;A sample :样品反应液吸光值;A sample blank :以蒸馏
水代替样品的反应液吸光值)
2　结果与分析
2.1 还原力
　　在试验浓度范围 ,还原力测试混合液的吸光
值随着浓度的增加而增大(见表 1),低浓度时吸
光值极低 ,当浓度增至 2 000 g/mL 时 ,测试混
合液的吸光值为 0.293 ,说明姬松茸粗多糖具有
一定的还原力 ,但还原力较弱 。
2.2 螯合金属离子能力
　　在试验浓度范围内 ,对金属离子的螯合能力
随着浓 度 的增 加 而逐 渐 增强 , 当 浓 度从
62.5 g/mL增加至 2 000 g/mL 时 ,金属离子
螯合率从 3%增至 40.1%(表 1)。
表 1　姬松茸粗多糖的还原力 、对金属离子的螯合率 、对自由基的清除率以及体外脂质过氧化的抑制率
Table 1　Ferricyanide reducing , metal chelating , radical scavenging , and lipid oxidation inhibiting
activity of A.blazei crude polysaccharide(x±SD)
测试项目
Tested par ame ters
粗多糖浓度 Crude polysacchar ide concentr ation ( g/mL)
62.5 125 250 500 　1 000 　2 000
吸光度值
Fe rr icyanide r eduction (A700) ND ND ND ND 0.12±0.01 0.29±0.01
a金属离子螯合率
aMetal chelating activity
3.0±0.2 12.3±0.8 24.6±3.1 29.8±2.8 37.2±3.8 40.1±3.6
aDPPH·清除率
aDPPH·scavenging ac tivity 4.9±0.5 8.8±0.4 19.3±1.8 38.7±2.6 70.3±4.4 88.8±4.6
aO2-·清除率
aO2-·scavenging activity 10.4±0.8 14.5±1.9 19.0±1.1 33.9±3.1 54.5±3.4 71.2±3.2
a脂质过氧化抑制率
aLipid oxidation inhibiting r ate
66.1±2.6 74.9±4.6 78.2±4.3 82.3±3.9 84.4±3.8 84.5±2.5
　ND:检测值≤0.05;　a:数值单位为“ %”
　ND:not detectable;a V alues exp ressed as %– see Methods and Materials
2.3 清除自由基和抑制脂质过氧化的能力
　　由表 1可知 ,对 DPPH·和 O 2 -·的清除能力
以及对脂质过氧化的抑制能力 ,在试验浓度范围
内 ,均随浓度的增加而增强。其中 ,对 DPPH ·
的清除率 ,在较低的供试浓度范围内 ,其与多糖
浓度几乎正相关 ,而在较高供试浓度范围内 ,其
随浓度增加而增大的幅度相对减小;对 O 2 -·的
清除率 ,则其随浓度增加而增大的幅度在较低供
试浓度范围内小于其在较高浓度范围内增加的
幅度;对脂质过氧化的抑制率 , 在较低浓度时
(62.5 g/mL)就达 66.1%,其随浓度增加而增
大呈逐渐减小之势 ,在 2 000 g/mL 时 ,抑制率
为 84.5%。试验结果表明 ,姬松茸粗多糖具有较
强的自由基(DPPH·和 O2 -·)清除能力和抗脂质
70
第 1 期 吕喜茹 ,等:姬松茸粗多糖抗氧化作用
过氧化能力 。
3　讨论
　　姬松茸粗多糖具有一定的体外抗氧化能力 ,且
在供试浓度范围内 ,随着浓度的增加而增强。当浓
度为 2 mg/mL 时 ,其还原混合液吸光值为 0.293 ,
对金属螯合率为40.1%,对DPPH·和 O2 -·的清除
率分别为88.8%和 71.2%,对体外脂质过氧化抑
制率为 84.5%。
本试验是通过体外实验对姬松茸粗多糖的抗
氧化功效进行测定 ,而在生物体内多糖的抗氧化作
用途径更为复杂。作为外源性抗氧化剂 ,多糖在生
物体内发挥作用的机理除了直接参与猝灭自由基
的途径外 ,还可能通过参与调动或激活机体的内源
性抗氧化剂 ,使其数量增大和活性增强到机体需要
的水平 ,从而避免或减轻自由基对机体的损伤。因
此 ,关于姬松茸多糖体内抗氧化作用及不同组分多
糖的抗氧化作用还有待于进一步研究 。
参考文献
[ 1] 曾小龙 ,廖新梅.姬松茸多糖化学组分及其药理作用
的研究进展[ J] .中国食用菌 , 2007 , 26(1):3-6.
[ 2] 朱晓宦 ,吴向阳 ,仰榴青 , 等.马齿苋粗多糖的提取及
清除羟自由基活性作用[ J] .江苏大学学报(医学版),
2007 , 17(1):57-60.
[ 3] 高荫榆 ,洪雪娥 ,罗丽萍 , 等.薯蔓黄酮的体外抗氧化
作用研究[ J] .食品科学 , 2006 , 27(7):233-235.
[ 4] 庞会忠 ,余志雄 ,施建敏 , 等.华木莲叶多糖的提取及
其抗氧化作用[ J] .江西农业大学学报 , 2006 , 28(6):
813-817.
[ 5] TROM MER H , NEUBERT RH.The examina tion
of po ly saccharides as potential antio xidativ e
compounds fo r topical administration using a lipid
model sy stem[ J] .I ntl J Pharmaceut , 2005 , 298(1):
153-163.
[ 6] 刘娟 , 邓泽元 ,于化泓.决明子水溶性多糖的抗氧化
作用[ J] .食品科学 , 2006 , 27(5):61-63.
[ 7] 罗丽萍 , 高荫榆 ,洪雪娥 , 等.薯蔓黄酮和多糖体内抗
氧化作用的研究 [ J] .食品科学 , 2005 , 26(8):
408-410.
[ 8] OYAIZU M.Studie s on products of br ow ning
reaction:antio xidative activities o f products br ow ning
reaction pr epar ed from g luco samine[ J] .Jpn J Nutr ,
1986 , 44:307.
[ 9] DECKER EA , WELCH B.Ro le o f fer ritin as a lipid
ox idation ca ta ly st in muscle food[ J] .J Ag ric Food
Chem , 1990 , 38:674-677.
[ 10] RUBERTO G , RENDA A , DAPUNO C , et al.
Po lyphenol constituents and antiox idant activity o f
g rape pomace ex tr ac ts fr om fiv e Sicilian r ed g rape
cultiv ars[ J] .Food Chem , 2007 , 100(1):203-210.
[ 11] 丁红秀 , 高荫榆 ,晁红娟 ,等.毛竹叶柄多糖体外抗氧
化作用研究[ J] .食品科学 , 2007 , 28(11):122-124.
[ 12] ZHANG EX , YU LJ.S tudies on poly saccharide from
Sargassum thunber gii Ⅱ fo r its ability to scavenge
active oxygen species[ J] .Chinese Journal o f Ma rine
Drug s , 1997 , 3:1-4.
[本文编辑] 　于荣利
Antioxidant Activity of Polysacchar ide from
Agaricus blazei Murill
LV Xir u
1 , GUO Liang2 , CHANG Mingchang1 , LI Zhen1 , WANG Guojin1 , FENG Cuiping1 ＊
(1Sh anxi Agricultur al University , Food Science and Engineer ing College , Taigu , Shanxi 030801 , China;
2Beijing Vocational College of Agricultur e , Be ijing 102442 , China)
Abstract: Antioxidant activity of Agaricus blazei Mur ill polysaccha ride was evaluated by measur ing
fer r icyanide reducing activity , metal chela ting activity , DPPH · and O2 -· scavenging ac tivities , and lipid
oxidation inhibiting activity in v itro .Values of all the test indices incr eased with incr easing concentra tions of
crude polysacchar ide.At 2 mg/mL polysaccha ride concentr ation , low ferr icyanide r educing activity was
de tectable , and recorded met al chela ting , DPPH · and O2 -· scavenging , and lipid oxidation inhibiting
activities were 40.1%, 88.8%, 71.2% and 84.5%, respectively.
Key words: Agaricus blazei ;polysacchar ide;r educing power;metal chelation;radical scavenging activity;
lipid oxidation
71