全 文 ：DOI：10.13629/j.cnki.53-1054.2015.01.016
黄鳞多孔菌多糖提取和抗氧化活性的研究 *
谢美华 1，2，罗中泽 3，李 霖 4，胡永涛 1，李雪玲 1，2，杨海艳 1，2，王振吉 1，2，范树国 1，2
（1.楚雄师范学院 化学与生命科学系，云南 楚雄 675000；2.云南省高校应用生物学重点实验室，云南 楚雄 650000；
3.楚雄州农业科学研究所，云南 楚雄 675000；4.楚雄医药高等专科学校信息中心，云南 楚雄 675000）
摘要：采用水提醇沉法，通过单因素和正交试验，对提取黄鳞多孔菌粗多糖的最佳方法进行了筛选，并采用 DPPH法
对其抗氧化能力进行了测定。结果表明，提取黄鳞多孔菌粗多糖最佳工艺条件为微波时间 4 min，料液比 1∶45，提取次
数 2次，粗多糖的得率达到 39.42 mg·g-1。当黄鳞多孔菌粗多糖溶液浓度为 0.8 mg·mL-1时，抗氧化活性为 42.86％，且
提取液中粗多糖的含量与抗氧化活性成正比。
关键词：黄鳞多孔菌；粗多糖；抗氧化活性；提取方法
中图分类号：S646.9 文献标志码：A 文章编号：1003-8310（2015） 01-0057-03
Study on Polysaccharide Extraction and Antioxidant Capacity of Polyporus ellisii
XIE Mei-hua1，2, LUO Zhong-ze3, LI Lin4, HU Yong-tao1, LI Xue-ling1，2,
YANG Hai-yan1，2, WANG Zhen-ji1，2, FAN Shu-guo1，2
(1.Department of Chemistry and Life Science, Chuxiong Normal University, Chuxiong 675000, China;
2.Yunnan Province Applied Biology Key Laboratory of University, Chuxiong 675000, China;
3.Chuxiong Institute of Agricultural Sciences, Chuxiong 675000, China;
4.Information Center, Chuxiong Pharmaceutical College, Chuxiong 675000, China)
Abstract: Taking water extraction and alcohol precipitation method, the best extraction condition for crude polysaccharide in
Polyporus ellisii was screened by single factor and orthogonal test. DPPH assay method was used to determine the antioxidant
activities of extract. The results showed that the best extraction condition for crude polysaccharide of Polyporus ellisii was that
the microwave extraction rime was 4 minutes, solid-liquid ratio was 1 ∶45, extraction times was 2, and the extraction yield was
39.42 mg·g-1. The antioxidant properties was 42.86% when solution concentration of crude polysaccharide in Polyporus ellisii
was 0.8 mg·mL-1，and the content of crude polysaccharide was directly proportional to the antioxidant activities.
Key words: Polyporus ellisii; crude polysaccharide; antioxidant capacity; extraction method
黄 鳞 多 孔 菌 [ Polyporus ellisii Berk. P.
flavosquamosus Underw. - Albatrellus ellisii ( Berk.)
Pouz]，别名黄虎掌菌，是一类外生菌根菌，主要产
于云南省楚雄彝族自治州和丽江纳西自治县[1]。该菌
有特殊的香味，是一类非常珍稀的野生食用菌资源。
有研究表明，真菌多糖由于具有广泛的抗病治病能
力，已成为生物学和医学领域中的研究热点[2]。与其
同属的黑虎掌 Sarcodon aspratus (Berk) S.Ito 多糖在
*项目来源：云南省重点建设学科、楚雄师范学院重点建设学科基金项目 （05YJJSXK03）；云南省高校科技创新团队支持计划项目 （IRT
STYN）；楚雄师范学院基金项目（10YJYB02）；楚雄师范学院大学生创新创业训练计划项目（2013cxcy04）。
作者简介：谢美华（1981-），女，硕士，实验师，主要从事植物病理学与微生物方面研究。E-mail: xiemeihua@cxtc.edu.cn
**通信作者：杨海燕（1979-） 女，博士，高级实验师，主要从事植物病理学研究，E-mail: cxwhh@cxtc.edu.cn
收稿日期：2014 - 10- 20
中国食用菌 2015，34（1）：57~59
EDIBLE FUNGI OF CHINA
CN53－1054/Q ISSN 1003－8310
对肿瘤细胞的抑制作用和药用保健、液体深层方面
已有较多研究报道 [3-6]。目前，黄虎掌菌中粗多糖的
提取工艺和抗氧化能力还未见报道。研究表明，自
由基与机体的许多功能障碍和疾病的发生密切相关，
DPPH分析法被广泛应用于清除自由基物质的性质研
究[7]。为此，本文采用水提醇沉法，利用单因素和正
交试验，对提取云南野生黄鳞多孔菌粗多糖的最佳
方法进行了筛选，并采用 DPPH法对其抗氧化活性
进行了测定，为这一资源药用和保健功效方面的研
究提供一定的理论依据。
1 材料与方法
黄鳞多孔菌，采自云南省楚雄地区松树林中。
将新鲜黄鳞多孔菌子实体洗净、切片、干燥、粉碎
后过 40目筛。
1.1 多糖的提取及工艺筛选
1.1.1 提取真菌粗多糖方法的筛选
称取 3份 0.5 g的黄鳞多孔菌子实体粉末，以水
为提取剂，固定料液比 1∶20（g·mL-1）。分别采用微
波 5 min、热水浸提 2 h、超声波 20 min三种提取方
法，离心取上清液，再加入活性炭去色素，抽滤后
取滤液，Sevage法除蛋白（加入氯仿∶正丁醇=4∶1），
离心（取上层），旋转蒸发浓缩至 1/3 体积，醇沉，
离心取沉淀（4 000 r·min-1，10 min），然后 50℃鼓
风干燥得到黄鳞多孔菌粗多糖。每个处理 3个重复。
1.1.2 正交试验法优选提取工艺
通过 1.1.1的方法筛选试验，选出最佳的提取方
法为微波提取法。然后采用 L9（34） 正交设计进行
试验，研究不同的微波时间、料液比和提取次数 3
个因素对黄鳞多孔菌粗多糖提取率的影响，因素与
水平设计见表 1。每个处理设 3个重复试验。
1.1.3 黄鳞多孔菌粗多糖的测定
采用硫酸-蒽酮比色法[8]。
1.2 不同浓度黄鳞多孔菌的抗氧化能力测定
采用 DPPH 法 [8]，将维生素 C配成浓度为 0.01
mmol·L -1、 0.03 mmol·L -1、 0.05 mmol·L -1、 0.07
mmol·L -1、 0.09 mmol·L -1、 0.1 mmol·L -1、 0.2
mmol·L-1、0.3 mmol·L-1、0.4 mmol·L-1、0.5 mmol·L-1
的溶液作为对照试验 [9]。试验加样表见表 2。所有测
定重复操作 3次，取平均值。
1.3 数据处理
采用 SPSS Statistics 16.0 进行数据分析，Excel
作图。
2 结果与分析
2.1 单因素法筛选提取黄鳞多孔菌粗多糖最佳方法
分别采用微波法、热水浸提法、超声波法提取
鳞多孔菌粗多糖，结果见表 3。
试验结果表明提取效率最高的是微波法，与热
水浸提法、超声波法相比在 5%水平存在显著差异。
2.2 正交试验结果
2.2.1 提取工艺条件的比较
根据 2.1单因素方法筛选结果，采用微波法进行
正交试验，结果如表 4所示。
表 1 试验因素与水平表
Tab.1 Factors and levels
水平 A微波时间/min B料液比 C提取次数
1 2 1∶30 1
2 4 1∶45 2
3 6 1∶60 3
表 2 DPPH试验加样表
Tab.2 Sample-adding method in the DPPH test for extracting
crude polysaccharide from Polyporus ellisii
Ai 3mLDPPH.溶液+1mL样品溶液
Aj 1mL样品溶液+3mL无水乙醇
A0 3mLDPPH.溶液+1mL无水乙醇
编号 成分
表 3 3种提取方法提取黄鳞多孔菌粗多糖的结果比较
Tab.3 Result comparison of three extraction methods on
polysaccharides of Polyporus ellisii
提取方法 粗多糖得率/(mg·g-1） 显著水平 排序
微波法 39.51±6.30 a 1
热水浸提法 36.18±1.642 b 3
超声波法 36.71±1.68 b 2
表 4 黄鳞多孔菌提取粗粗多糖正交试验结果
Tab. 4 The results of orthogonal tests of Polyporus ellisii
实验
编号
因素 粗多糖得率
/(mg·g-1)
排序A
微波时间/min
B
料液比
C
提取次数
1 1 1 1 26.48938 8
2 1 2 2 26.02898 9
3 1 3 3 32.37086 6
4 2 1 2 39.41957 1
5 2 2 3 32.95447 5
6 2 3 1 29.30367 7
7 3 1 2 36.24214 3
8 3 2 1 34.77663 4
9 3 3 3 36.60203 2
K1 28.296407 34.050362 30.189895 - -
K2 33.892572 31.25336 33.896895 - -
K3 35.873601 32.758856 33.97579 - -
R 7.5771945 1.2915058 3.7858954 - -
中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA Vol． 34 No．158
谢美华等：黄鳞多孔菌多糖提取和抗氧化活性的研究
表 6 黄鳞多孔菌粗多糖与 VC抗氧化抑制率比较
Tab.6 Antioxidant inhibitory rate of Polyporus ellisii
polysaccharides compared with VC
VC质量浓度
/(mg·mL-1)
粗多糖质量浓
度/(mg·mL-1)
粗多糖抗氧
化抑制率/%
0.0018 0.0500 1.06
0.0054 0.1500 4.72
0.0088 0.3000 6.16
0.0120 0.4500 10.24
0.0160 0.6000 22.11
0.0180 0.7720 41.95
0.0350 0.8000 42.86
0.0530 - -
0.0700 - -
0.0880 - -
VC抗氧化
抑制率/%
33.04
35.02
39.20
42.55
49.46
55.85
96.09
96.17
96.77
97.16
表 5 黄鳞多孔菌粗多糖提取正交试验方差分析表
Tab.5 The table of variance analysis of Polyporus ellisii crude
polysaccharides
因素 自由度 F值 显著性
微波时间/min 2 7.284 0.003
料液比 2 5.9 0.562
提取次数 2 1.572 0.228
根据极差判断，3个因素对黄磷多孔菌粗多糖得
率的影响大小依次为微波时间>提取次数>料液比。
通过试验数据直观分析，最佳提取方法是 A2B1C2，
即微波时间 4 min，料液比 1∶45，提取次数2 次。黄
鳞多孔菌粗多糖提取正交试验方差分析见表 5。
从表 5的方差分析可以看出，在本试验所研究
的范围内，微波时间对黄磷多孔菌粗多糖得率有极
显著的影响，微波 2 min 多糖得率 （Mean±SE） 为
28.29±1.59，微波 4 min 为 33.89±1.83，微波 6 min
为 36.03±0.82。料液比和提取次数对粗多糖得率没
有明显的影响。
2.2.2 最佳提取条件的验证
为了验证正交试验优选的黄鳞多孔菌粗多糖最
佳提取工艺条件的稳定性，每组称取原料粉 0.5 g，
做 3 组平行实验，每组 3 个重复。试验结果表明，
试验工艺重复性较好，粗多糖得率平均为 40.59 ±
0.91，试验的重复性较好。
2.3 不同浓度虎掌菌粗多糖的抗氧化能力
黄鳞多孔菌粗多糖与 VC抗氧化抑制率比较情况
见表 6。
试验结果表明，随着黄鳞多孔菌粗多糖浓度的
提高，抗氧化抑制率也随之提高。黄磷多孔菌粗多
糖质量浓度为 0.8 mg·mL-1时，其抑制率与 VC质量
浓度为 0.012 mg·mL-1相当，说明黄鳞多孔菌粗多糖
存在一定的抗氧化活性。
3 讨论与结论
云南野生食用菌资源非常丰富，但目前大部份
野生食用菌产品的科技含量较低，依然处于产业链
的最低端[10]。如何进一步地加工开发出高层次的产品
是一个急需解决的问题。很多研究表明，食用真菌
多糖是一种从食用真菌中提取获得的安全无毒的天
然高分子聚合物，具有复杂多样的生物学活性[11]。所
以积极开展这一绿色食品的粗多糖研究，能使其药
理保健方面的功效被更好地开发利用。本文通过单
因素试验对提取黄鳞多孔菌粗多糖的方法进行筛选，
结果表明，微波提取法对提取该菌的粗多糖具有较
高的提取效率。进一步的正交试验结果表明，提取
黄鳞多孔菌粗多糖最佳工艺条件为微波时间 4 min，
料液比 1∶45，提取次数 2 次，粗多糖得率为 39.42
mg·g-1。采用 DPPH法对其抗氧化活性能力进行了测
定，结果表明粗多糖浓度 0.8 mg·mL-1时，抗氧化活
性为 42.86％，且提取液中总粗多糖的含量与抗氧化
活性成正比，说明黄鳞多孔菌粗多糖存在一定程度
的抗氧化活性。
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第 34卷 第 1期 59