全 文 ：[作者简介 ] 　凌东辉(1969 - ),男 ,主管技师 ,主要从事理化检验
工作。
【测定方法】
分光光度法测定冬菇中的甲醛
凌东辉1 ,钟春霞 2
(1.广州市海珠区疾病预防控制中心 ,广州海珠　510288;2.珠江医院 , 广州珠江　510280)
[摘要 ] 　目的:建立分光光度法分析冬菇中甲醛的方法。方法:采用硫酸钠溶液对样品进行预提取 , 然后对样品进行蒸
馏提取与净化 , 最后通过分光光度法测定冬菇中甲醛的含量 。结果:通过对实验条件的优化 , 甲醛的检出限为
0. 15 mg /kg, 当甲醛的添加范围在 0.2 ～ 2.0 mg /kg时 , 甲醛的回收率可达 91. 5% ～ 94. 0%。结论:该方法准确 、快速 、灵
敏度高。
[关键词 ] 　分光光度法;冬菇;甲醛
[中图分类号 ] 　R155.5　　　　[文献标识码 ] 　A　　　　[文章编号 ] 　1004 - 8685(2005)04 -0430 - 02
　　甲醛是一种有机溶剂和化工原料 ,作为常用的防腐剂 ,一
般用于杀菌 、消毒和保鲜 ,在冬菇中加入含甲醛的化合物如甲
醛次硫酸钠 , 可使冬菇较久保存 ,且色泽美观。这类化工产品
进入人体 , 导致头晕 、头痛 、腹泻。重者促癌和致癌 ,严重影响
人们的身体健康。因冬菇干燥与甲醛结合紧密 , 本文改进传
统的蒸馏法 , 先采用硫酸钠溶液预提取 ,然后再进行蒸馏。最
后用分光光度法进行测定 [ 1] 。结果令人满意。
1　材料与方法
1. 1　原理
甲醛次硫酸氢钠在硫酸钠溶液中加热游离出甲醛 , 甲醛
在 pH 5. 5 ～ 7. 0条件下与乙酰丙酮及铵离子反应生成黄色 3,
5 -乙酰基 -1, 4 -二氢吡啶二羰酸 , 在 412 nm 波长处有吸收
峰 , 利用此性质测定冬菇中甲醛含量。
1. 2　仪器与试剂
日本岛津 UV -1601型分光光度计;10%(v /v)磷酸溶液;
20%硫酸钠溶液;液体石蜡。乙酰丙酮溶液:在 100 m l蒸馏
水中加入醋酸铵 25 g, 冰醋酸 3 m l, 和乙酰丙酮 0. 4 m l, 振摇
促溶 , 储备于棕色瓶中 ,此液可保存 1个月。 甲醛标准储备溶
液:取甲醛 1 g放入盛有 5 m l水的 100 m l容量瓶中精密称量
后 , 加水至刻度。 从该溶液中吸取 10.0 m l放入碘量瓶中加
0. 1 m o l /L碘溶液 50 m l, 1 mo l /L KOH 溶液 20 m l, 在室温放
置 15 m in后 ,加 10% H
2
SO
4
15 m l,用 0.1 mo l /L Na
2
S
2
O
3
滴定
(以 1 m l新配制的淀粉溶液为指示剂)。另取水 10 m l同样操
作进行空白实验。甲醛标准使用液:吸取标定后的甲醛标准
储备液适量 ,置于 100 m l容量瓶中 , 加水稀释至刻度 , 此溶液
每毫升相当于 10 μg甲醛 , 置冰箱保存。
1. 3　分析步骤
1. 3.1　样品处理　将样品粉碎均匀 , 准确称取混匀样品 1 ～
5 g(视所检样品中甲醛含量的高低而定 ), 置于 50 m l具塞比
色管中 ,加入 35 m l 20%硫酸钠溶液 , 加塞 ,振摇均匀 , 60℃水
浴 45 m in, 水浴过程中不时振摇。取出并将溶液移至蒸馏烧
瓶中 , 加入液体石蜡 2. 5 m l, 10%磷酸 10 m l,立即进行水蒸气
蒸馏。冷凝管下口应事先插入盛有 10 m l蒸馏水且置于冰浴
的容器中 , 准确收集蒸馏液至 150 m l,另做空白蒸馏。
1.3.2　显色操作　视所检样品中甲醛含量的高低 , 吸取样品
蒸馏液 2 ～ 10 m l, 补充蒸馏水至 10 m l, 加入乙酰丙酮溶液
2 m l混匀 , 至沸水浴中 10 m in, 取出冷却 。然后以蒸馏水调
“ 0”, 于波长 412 nm 处 , 以 1 cm 比色杯进行比色 , 记录吸光
度 , 查标准曲线计算结果。
1.3.3　标准曲线的制备　吸取 0, 0.2, 0.4, 0. 8, 1.6, 3. 2 m l
甲醛标准使用液(相当于 0, 2, 4, 8, 16, 24μg甲醛), 分别置于
10 m l比色管中 ,定容至 10 m l,以下从加乙酰丙酮溶液起同样
操作。减去 “ 0”管吸光度 , 绘制标准曲线。
2　结果与讨论
2.1　吸收光谱的确定
取 1.6 μg /m l甲醛标准使用液按实验方法在不同波长下
测其吸光度 , 见图 1所示。在 pH 5.5 ～ 7.0条件下 , 与乙酰丙
酮及铵离子反应生成的黄色 3, 5 -乙酰基 - 1, 4 -二氢吡啶二
羰酸 , 最大吸收波长为 412 nm。
图 1　吸收光谱曲线
2.2　标准曲线及线性方程
本方法的甲醛浓度在 0.2 ～ 2 mg /kg范围内符合比尔定
律 , 见图 2, 其线性方程为 Y =23. 003X -0.33902, r=0.9998。
图 2　标准曲线
(下转第 444页)
430 中国卫生检验杂志 2005年 4月第 15卷 第 4期　C hinese Jou rnal ofH ealth Laboratory Technology, Apr 2005;V ol 15　No 4
具有相同的准确性 , 本法的精密度也符合分析要求。 2种方法
测定结果一致 , 但操作过程及测定所需时间却大相径庭。实
验表明 , 本法比酸水解法更适合鸡蛋样品中脂肪含量的测定。
2. 2　检测限
乳脂计的最小刻度为 0. 1格 , 按本法操作 ,鸡蛋中脂肪含
量在 1%以上时 ,乳脂计的读数为 0.2格以上 , 可以准确地被
检出。
2. 3　取样量的确定
鸡蛋中脂肪含量一般在 10% 左右 [ 3] 。本法选择取样量
为 2 g,这样使乳脂计中脂肪柱的读数在 1 ～ 2格之间 , 较易读
取 , 并且样品容易与酸迅速反应完全 , 离心分层后脂肪柱界面
清晰易读数 , 操作误差较少。
3　小结
本文对鸡蛋中脂肪含量的测定方法进行了探讨 , 建立了
测定鸡蛋中脂肪含量的新方法。通过与现行的国家标准方法
对比 , 证明了本法准确可靠 , 并且简便快速 , 具有自身的特点
和优势 , 更适用于鸡蛋中脂肪的含量测定。
[参考文献 ]
[ 1] GB5009. 6 - 85.食品中脂肪的测定方法 [ S] .
[ 2] GB5413 - 85.乳粉检验方法 [ S] .
[ 3] 王光亚 , 主编 .食物成分表 [ M ] . 北京:人民卫生出版社 ,
1993. 38.
(收稿日期:2004 -12 - 05)
(上接第 430页)
2. 3　方法比较
已经有文献采用蒸馏法对甲醛进行提取 , 其方法是将冬
菇直接放入蒸馏烧瓶中 , 加入液体石蜡和磷酸 , 然后进行蒸
馏。由于冬菇中甲醛结合较紧密 , 所以很难将其蒸馏出来 ,提
取效率较低。本方法预先采用 20%硫酸钠溶液在 60℃对冬
菇提取 45 m in, 然后将提取液和样品一起倒入蒸馏瓶中 , 进行
水蒸气蒸馏。从表 1可以看出 , 提取效率明显高于前法。
表 1　3种提取方法的比较
提取方式 光密度 浸出液甲醛含量(m g /kg)
20% Na2 SO 4提取 45 m in 0. 26 1.13
直接水蒸气蒸馏 0. 21 0.999
20%Na2 SO 4预先提取
45 m in+水蒸气蒸馏 0. 30 1.37
2. 4　提取时间的优化
称取 5份 1 g样品 , 分别浸泡提取 15、 30、45、 70、 85 m in,
其提取走势如图 3所示。
图 3　提取时间与回收率的关系
由图形可知 , 随着加热提取时间的增加 , 回收率逐渐增
加 , 当提取时间为 70 m in时 , 达到最高 , 随后又开始下降。分
析其原因可能为加热提取时间短则不能对甲醛进行有效提
取 , 而时间过长则甲醛有可能因为挥发溢走而损失。 70 m in
为最佳提取时间。
2. 5　回收实验
方法灵敏度 、准确度及精确度:取 1份冬菇加入 3种浓度
(5, 10, 20μg)的标准 ,用已优化条件检测冬菇中的甲醛 ,并用
标准添加法进行回收率的测定 , 测得甲醛的最低检出限为
0.15 m g /kg,回收率达 91.5% ～ 94. 0%(见表 2)。
表 2　回收率实验
本底值
(m g /kg)
加标量
(5 mg /kg)
加标量
(10m g /kg)
加标量
(20 m g /kg)
平行测得均值 1. 23 5.93 15. 20 19. 52
回收率(%) 94. 0 93. 1 91. 5
2.6　精密度实验
分别取 A, B2种浓度的样品进行五次平行测定 ,所得结果
见表 3。
表 3　精密度实验
样品 样品测得值(m g /kg) x±s RSD(%)
A 2. 07 1. 94 2. 01 2. 05 1.99 2.03 2.02±0. 05 2. 4
B 4. 07 3. 95 3. 98 4. 12 4.03 4.15 4.05±0. 07 1. 9
3　小结
目前 , 冬菇中甲醛的检测缺乏国家标准方法 , 导致不少超
标样品充斥市场 , 极大的损害了消费者的身体健康。本实验
对用分光光度法检测冬菇中的甲醛进行了研究 , 并对实验条
件进行了分析。实验结果表明本方法测定的线性范围广 , 相
关性好 ,准确度高 ,检出浓度低 , 操作方便简单 , 具有较高的使
用价值。
[参考文献 ]
[ 1] 马金波 ,张琦 .乙酰丙酮法测定海产品中甲醛 [ J] .中国卫生检
验 , 2004, 14(1):63 - 64.
[ 2] 陈宁生 ,郭新愿 .催化光度法测定水发食品浸泡液中的甲醛 [ J] .
中国公共卫生杂志 , 2003, 19(9):1113.
[ 3] 朱英 ,王晓航 .分光光度法测定消毒剂中甲醛 [ J] .卫生研究 ,
2001, 30(1):2002.
(收稿日期:2004 -12 - 06)
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