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木蹄层孔菌子实体提取物体外抑菌活性研究



全 文 :木蹄层孔菌子实体提取物体外抑菌活性研究
姜 丽, 包海鹰 *
(吉林农业大学中药材学院, 食药用菌教育部工程研究中心, 吉林 长春 130118)
摘要: 首次采用滤纸扩散法和平板涂布法对木蹄层孔菌 Fomes fomentarius (L.:Fr.) Kick.子实体的水、甲醇、丙酮、乙酸
乙酯、氯仿、石油醚等提取物进行了抑菌活性研究。结果表明,木蹄层孔菌各提取物对白色念珠菌JLC31680、白色念
珠菌 JLC31681、大肠杆菌 ATCC 8099、金黄色葡萄球菌 ATCC 6538均有不同程度的抑制作用。其中水提物与其他 5个
提取物相比,对金黄色葡萄球菌 ATCC 6538的抑制作用最强,其次对大肠杆菌 ATCC 8099,当浓度为 100 mg·mL-1时,
抑制率分别为 95.54%和 73.80%,最小抑菌浓度(MIC) 分别是 50 mg·mL-1、25 mg·mL-1。对白色念珠菌 JLC31680和白
色念珠菌 JLC31681的抑制作用也较为明显,当浓度为 100 mg·mL-1时,抑菌率分别为 33.06%和 26.67%,最小抑菌浓
度(MIC) 分别是 12.5 mg·mL-1、50 mg·mL-1。甲醇提取物与其他 5个提取物相比,对大肠杆菌 ATCC 8099和金黄色葡
萄球菌 ATCC 6538的抑制作用最强,当浓度为 50 mg·mL-1时,抑菌率分别为 99.39%和95.10%,最小抑菌浓度(MIC)
是12.5 mg·mL-1、25 mg·mL-1,且均有量效关系。
关键词: 木蹄层孔菌;白色念珠菌;大肠杆菌;金黄色葡萄球菌;抑菌活性
中图分类号: S646.9 文献标识码: A 文章编号: 1003-8310 (2011) 02-0039-05
Antimicrobial Activity of Different Extracts from Fruiting Body
of Fomes fomentarius in Vitro
JIANG Li, BAO Hai-ying
(College of Traditional Chinese Medicine, Jilin Agricultural University, Engineering Research Center of Chinese Ministry of
Education for Edible and Medicinal Fungi, Changchun Jilin 130118)
Abstract: The antimicrobial activity of water extract, MeOH extract, acetone extract, EtOAc extract, chloroform extract and
petroleum ether extract from fruiting body of Fomes fomentarius were studied in the paper by the paper diffusion method and
plate coating method for the first time. The results indicated that all extracts of F. fomentarius had different degrees of inhibitory
activity on Candida albicans JLC31680, Candida albicans JLC31681, Escherichia ATTC8099 and Aureus ATCC 6538. The wa-
ter extraction had obvious inhibiting activity compared with other five extracts on Aureus ATCC6538 and for the Escherichia
ATTC8099, the inhibition rates were 95.54% and 73.80% on concentration of 100 mg·mL-1 respectively, and the minimum in-
hibitory concentration (MIC) were 50 mg·mL-1 and 25 mg·mL-1. The water extract also had good effect on both Candida albi-
cans JLC31680 and Candida albicans JLC31681, the inhibition rates were 33.06% and 26.67% on concentration of 100 mg·mL-1,
and the minimum inhibitory concentration (MIC) were 12.5 mg·mL-1 and 50 mg·mL-1. The MeOH extraction had obvious in-
hibiting activity compared with other five extractions on Escherichia ATTC8099 and Aureus ATCC6538. The max inhibitory
rates of Escherichia ATCC8099 and Aureus ATCC6358 were 99.39% and 95.10% on concentration of 50 mg·mL-1, respectively.
The minimum inhibitory concentration (MIC) were 12.5 mg·mL-1 and 25 mg·mL-1, and the antimicrobial activity had relation-
ship with the dose-effect.
Key words: Fomes fomentarius; Candida albicans; Escherichia; Aureus; Antimicrobial activity
木蹄层孔菌 Fomes fomentarius (L.:Fr.) Kick, 又名火绒
层孔菌 , 隶属于担子菌纲 (Basidiomycetes)、 多孔菌目
( Polyporales) 、 多 孔 菌 科 ( Polyporaceae) 、 层 孔 菌 属
(Fomes), 子实体入药 [1]。 它是世界性分布的木腐性真菌,
危害多种阔叶树木。 木质, 单生或群生, 半球形至马蹄形
或呈吊钟型, 无柄, 多呈灰色、 灰褐、 浅褐色至黑色 [2]。
作者简介: 姜丽, 硕士研究生, 从事木蹄层孔菌化学成分及抑菌活性研究。
* 通讯作者: 包海鹰, 教授, 博士生导师, 主要从事药用菌资源开发。 E-mail: baohaiying2008@126.com
收稿日期: 2011-01-29
中国食用菌 2011, 30 (2): 39~43
EDIBLE FUNGI OF CHINA
CN53-1054 / Q ISSN 1003-8310
在 18 世纪、 19 世纪, 曾被用来作为止血的膏药, 在一些
传统的药典中被用来作为针灸的工具, 其味微苦, 性平,
水煎服, 治疗小儿积食, 药用有消积化瘀的作用。 民间用
于治疗食道癌、 胃癌、 子宫癌等疾病[3]。文献报道其子实体
的粗提物具有消炎镇痛、 预防糖尿病和抗肿瘤作用[4-9]。 随
着广谱抗生素的广泛应用, 耐药致病真菌和致病细菌不断
增多, 医学界一直致力于寻找安全有效的抗菌药物。 我国
的药用真菌资源非常丰富, 药用真菌中存在很多活性强、
毒性低的有效成分, 对常见致病菌有一定的抑菌、 杀菌作
用, 对治疗和预防疾病起着重要作用。 本论文选用常见的
致病真菌白色念珠菌 (JLC31680、 JLC31681) 和致病细菌
大肠杆菌 ATCC8099、 金黄色葡萄球菌 ATCC6538, 对木
蹄层孔菌子实体的 6 种提取物进行体外抑菌活性的研究,
为进一步开发和研究新型临床抗菌药物奠定了基础。
1 材料和仪器
1.1 材料
木蹄层孔菌 (F. fomentarius) 子实体采自吉林省长白
山, 经吉林农业大学菌物研究所图力古尔教授鉴定并提
供。
白色念珠菌 (JLC31680、 JLC 31681) 来自吉林大学。
致病性大肠杆菌 (ATCC 8099)、 致病性金黄色葡萄球菌
(ATCC 6538), 来自吉林农业大学动物科学学院。
1.2 仪器
高压灭菌锅 (YXQ-LS-5OSⅡ), 上海博迅实业有限公
司医疗设备厂产品 ; 二氧化碳细胞培养箱 (HH·CP-
01W), 上海博迅实业有限公司医疗设备厂产品; 医用型
洁净工作台 (DL-CJ-1N), 北京东联哈尔仪器制造有限公
司产品; 水浴恒温振动器 (SHA-CA), 江苏省金坛市荣华
仪器制造有限公司产品。
2 实验方法
2.1 供试液的制备
将木蹄层孔菌粉末依次用石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、
丙酮、 甲醇、 水进行回流提取, 将得到的提取物浓缩后用
水浴锅蒸干。 将干品配置成以下浓度的水溶液。
石油醚提取物 : 50 mg·mL -1、 25 mg·mL -1、 12.5
mg·mL-1; 氯仿提取物 : 50 mg·mL-1、 25 mg·mL-1、 12.5
mg·mL-1; 乙酸乙酯提取物 : 50 mg·mL-1、 25 mg·mL-1、
12.5 mg·mL-1; 丙酮提取物 : 50 mg·mL-1、 25 mg·mL-1、
12.5 mg·mL-1; 甲醇提取物 : 50 mg·mL-1、 25 mg·mL-1、
12.5 mg·mL-1; 水提物: 100 mg·mL-1、 50 mg·mL-1、 12.5
mg·mL-1; 空白组: 水。
以上各组分别加吐温-80 (4‰) 助溶。
2.2 培养基的制备
沙氏培养基 (培养真菌): 葡萄糖 40 g、 蛋白胨 10 g,
用蒸馏水 1 000 mL 溶解, 121℃灭菌 30 min, pH 值 7.4~
7.6。
沙氏琼脂培养基 (培养真菌): 葡萄糖 40 g、 蛋白胨
10 g、 琼脂 20 g, 蒸馏水 1 000 mL 溶解混匀, 121℃灭菌
30 min, pH 值 7.4~7.6。
MH (Mueller-Hinton) 培养基 (培养细菌): 牛肉膏 5
g、 蛋白胨 10 g、 氯化钠 5 g, 蒸馏水 1 000 mL 溶解 ,
121℃灭菌 30 min, pH 值 7.4~7.6。
MHA 培养基 (培养细菌): 牛肉膏 5 g、 蛋白胨 10 g、
氯化钠 5 g、 琼脂 20 g, 蒸馏水 1 000 mL 溶解, 121℃灭菌
30 min, pH 值 7.4~7.6。
2.3 菌液的配制
将白色念珠菌 (JLC31680、 JLC31681), 在超净工作
台上接种于制备好的沙氏培养基中, 放入水浴恒温振动器
中培养 (转速 120 r·min-1), 菌液∶稀甘油=1∶1, 摇匀备用。
将大肠杆菌 (ATCC 8099)、 金黄色葡萄球菌 (ATCC
6538) 菌种 20 μL, 在超净工作台上接种于制备好的 MH
培养基 100 mL 中 , 放入水浴恒温振动器中培养 (转速
200 r·min-1~220 r·min-1), 16 h 后取出。 菌液∶稀甘油=1∶1,
摇匀备用。
2.4 阳性药的配置及筛选
2.4.1 缓冲溶液的配制
pH7.8 的磷酸盐缓冲溶液: 磷酸氢二钾 5.59 g、 磷酸
二氢钾 0.41 g, 蒸馏水 1 000 mL, 溶解并过滤, 121℃高压
灭菌 15 min 后, 室温冷却, 备用。
pH6.0 的磷酸盐缓冲溶液: 磷酸氢二钾 2.00 g、 磷酸
二氢钾 8.00 g, 蒸馏水 1 000 mL, 溶解并过滤, 121℃高压
灭菌 15 min 后, 室温冷却, 备用。
2.4.2 阳性药的配制
硝酸咪康唑乳膏 (达克宁): 无菌条件下, 分别称取
1.28 g、 0.64 g、 0.32 g 药膏, 加入适量的吐温-80、 蒸馏
水, 研磨均匀, 定容至 10 mL。 (其中的有效浓度分别为
2.56 mg·mL-1、 1.28 mg·mL-1、 0.64 mg·mL-1)
硝酸益康唑乳膏 (唯达宁): 无菌条件下, 分别称取
0.256 g、 0.128 g、 0.064 g 药膏, 加入适量的吐温-80、 蒸
馏水, 研磨均匀, 定容至 10 mL (其中的有效浓度分别为
2.56 mg·mL-1、 1.28 mg·mL-1、 0.64 mg·mL-1)。
盐酸特比萘芬乳膏 (康王): 无菌条件下, 分别称取
2.56 g、 1.28 g、 0. 64 g 药膏, 加入适量的吐温-80、 蒸馏
水, 研磨均匀, 定容至 10 mL (其中的有效浓度分别为
2.56 mg·mL-1、 1.28 mg·mL-1、 0.64 mg·mL-1)。
阿米卡星、 庆大霉素均在无菌条件下, 用 pH7.8 的磷
酸盐缓冲溶液稀释至 1.28 mg·mL-1。
氯霉素、 头孢曲松均在无菌条件下, 用 pH6.0 的磷酸
盐缓冲溶液稀释至 1.28 mg·mL-1。
2.4.3 阳性药的筛选
在无菌条件下将各菌液均匀涂在 MHA 培养基上, 用
纸片蘸取阳性药, 均匀放在涂有菌液的培养基上, 每种阳
性药做 5 个平行试验, 放入二氧化碳培养箱中 (37℃) 培
养 16 h~18 h。 观察并测量抑菌圈直径, 记录数据, 见表
1、 表 2。
根据实验所需, 阳性药的抑菌圈直径不可过大, 否则
抑菌圈会覆盖到相邻的纸片上, 亦或 2 个相邻的抑菌圈相
连且中间无间隔, 从而影响测量的准确度。 相反, 如果阳
性药的抑菌圈偏小, 同样会影响测量时的准确性, 使误差
变大。 所得数据均以均值 (X) ±标准差 (SD) 来表示 。
中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA Vol. 30 No.240
姜 丽等: 木蹄层孔菌子实体提取物体外抑菌活性研究
表 2 不同阳性药对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的抑菌直径 (n=5, X±SD)
因此, 抑菌圈直径在 15 mm~20 mm 左右时最适宜。 由表
1、 表 2 得知, 白色念珠菌 JLC31680 的最佳阳性药为硝酸
咪康唑乳膏 (1.28 mg·mL-1); 白色念珠菌 JLC31681 的最
佳阳性药为硝酸咪康唑乳膏 (1.28 mg·mL-1); 大肠杆菌
ATCC 8099 的最佳阳性药为阿米卡星 (1.28 mg·mL-1); 金
黄色葡萄球菌 ATCC 6538 的最佳阳性药为阿米卡星 (1.28
mg·mL-1)。
2.5 供试液抑菌作用的检验
在无菌条件下将白色念珠菌 JLC31680、 JLC31681 菌
液均匀涂在沙氏琼脂培养基上, 大肠杆菌 ATCC8099、 金
黄色葡萄球菌 ATCC6538 菌液均匀涂在 MHA 培养基上 ,
用直径为 7 mm 的圆形滤纸片蘸取供试溶液和阳性药, 间
隔并均匀放在涂有菌液的培养基上, 每组做 5 个平行, 放
表 1 不同阳性药对白色念珠菌的抑菌直径 (n=5, X±SD)
受试药
抑菌圈直径/mm
硝酸益康唑乳膏 (2.56 mg·mL-1) 18.4±0.96177 18.4±2.30217
硝酸咪康唑乳膏(0.64 mg·mL-1) 18.3±1.95576 17.8±0.83666
硝酸咪康唑乳膏(1.28 mg·mL-1) 19.3±1.82346 18.0±0.81650
硝酸咪康唑乳膏 (2.56 mg·mL-1) 19.6±1.59687 18.8±1.48324
硝酸益康唑乳膏(1.28 mg·mL-1) 18.4±1.29422 19.4±1.51658
盐酸特比萘芬乳膏 (0.64 mg·mL-1) 12.9±1.08397 11.8±0.83666
盐酸特比萘芬乳膏(1.28 mg·mL-1) - -
盐酸特比萘芬乳膏(2.56 mg·mL-1) - -
硝酸益康唑乳膏(0.64 mg·mL-1) 17.5±1.27475 17.8±2.04939
白色念珠菌
JLC31680
白色念珠菌
JLC31681
注: -为无抑菌圈或抑菌圈不明显。
受试药
抑菌圈直径/mm
阿米卡星 庆大霉素 氯霉素 头孢曲松
大肠杆菌 ATCC 8099 18.25±1.53516 12.38±2.06712 24.67±1.41781 29.58±2.57130
金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 20.51±2.01317 15.33±1.45791 25.46±3.11970 25.93±4.91301
入二氧化碳培养箱中 (28℃、 37℃) 培养 48 h、 16 h~18
h。 观察并采用十字交叉法测量抑菌圈直径, 记录数据,
实验数据采用 SPSS 方差分析, 列表统计。 所得数据均以
X±SD 来表示。 抑菌率 (E) 的计算公式为:
E = R1﹣R3R2﹣R3
×100%
式中: R1为供试样品抑菌圈直径; R2 为阳性药抑菌圈直
径; R3为滤纸片直径。
2.6 最低抑菌浓度 (MIC) 测定
采用试管二倍稀释法测 , 使用 MH 液体培养基 (2
mL·管-1) 将药物对倍稀释成系列浓度, 每个浓度 3 个重
复管, 然后加入 0.1 mL 菌液。 在培养箱 (28℃、 37℃) 中
培养 24 h, 以混浊度为指标检查该管中有无细菌生长, 眼
观选出不显示混浊试管, 分别取其液体涂布于琼脂平板培
养基上, 于恒温培养箱培养 24 h, 观察结果。 琼脂平板上
无细菌生长而含药液浓度最低者, 即为该种药物对该菌株
的最低抑菌浓度。
3 实验结果
3.1 各提取物对白色念珠菌 JLC31680 的抑菌作用
各提取物对白色念珠菌 JLC31680 的抑菌圈直径、 抑
菌率见表 3。
由表 3 可知 , 100 mg·mL-1 水提取物对白色念珠菌
JLC31680 的抑制作用最为明显, 抑菌率为 33.06%, 最小
抑菌浓度 (MIC) 12.5 mg·mL-1, 且呈量效关系, 与对照组
相比有极显著差异 (p<0.01)。 另外, 石油醚、 氯仿、 丙
酮、 甲醇提取物的抑制作用不成量效关系, 乙酸乙酯提取
物无抑制作用。
3.2 各提取物对白色念珠菌 JLC31681 的抑菌效应
各提取物对白色念珠菌 JLC31681 的抑菌直径、 抑菌
率见表 4、 表 5。
由表 4、 表 5 可知, 水提取物对白色念珠菌 JLC31681
的抑制作用不呈量效关系, 当浓度为 50 mg·mL-1时, 抑菌
率最高为 26.67%, 最小抑菌浓度 (MIC) 50 mg·mL-1, 与
对照组相比有极显著差异 (p<0.01)。
注: 与空白组相比, * 表示 p<0.05, ** 表示 p<0.01; -表示无抑菌作
用。 下同。
表 3 各提取物对白色念珠菌 JLC31680 的抑菌效应 (n=5, X±SD)
组别 浓度/(mg·mL-1) 抑菌圈直径/mm 抑菌率/%
空白组 - 7.00±0 -
12.5 8.17±0.28868** 13.76
25.0 8.33±0.28868** 15.65石油醚提取物组
50.0 7.00±0.00000 -
硝酸咪康唑乳膏组 1.28 18.00±1.00000** 100.00
氯仿提取物组
50.0 7.00±0 -
25.0 7.00±0 -乙酸乙酯提取物组
50.0 7.00±0 -
12.5 8.63±0.47871* 14.82
25.0 8.75±0.28868* 15.91
12.5 7.00±0 -
丙酮提取物组
50.0 7.30±0.44721 2.42
12.5 7.88±0.47871 7.93
50.0 9.70±1.30384** 24.32水提物
100.0 10.67±1.25831** 33.06
12.5 8.67±0.28868 13.36
25.0 9.33±2.36291* 18.64甲醇提取物组
50.0 8.33±0.76376 10.64
12.5 8.50±0.50000** 12.10
25.0 8.00±0.50000* 8.06
第 30 卷 第 2 期 41
组别 浓度/(mg·mL-1) 抑菌圈直径/mm 抑菌率/%
空白组 - 7.14±0.31711 1.59
12.5 8.20±0.27386** 13.64
25.0 8.20±0.27386** 13.64石油醚提取物组
50.0 8.33±0.28868** 15.11
硝酸咪康唑乳膏组 1.28 15.80±0.57009** 100.00
氯仿提取物组
50.0 8.33±0.57735* 17.05
25.0 7.00±0.00000 -乙酸乙酯提取物组
50.0 7.00±0.00000 -
12.5 7.75±0.28868* 9.67
25.0 7.83±0.57735* 10.64
12.5 7.00±0.00000 -
丙酮提取物组
50.0 7.80±0.75829 6.50
12.5 9.38±1.03078** 22.04
50.0 9.88±0.85391** 26.67水提物
100.0 8.50±0.35355* 13.89
12.5 8.33±0.76376* 11.77
25.0 9.00±1.32288** 17.67甲醇提取物组
50.0 8.33±0.28868** 11.77
12.5 9.30±1.09545** 18.70
25.0 9.20±1.60468** 17.87
另外, 石油醚、 氯仿、 丙酮、 甲醇提取物对白色念珠
菌 JLC31681均有抑制作用, 乙酸乙酯提取物无抑制作用。
3.3 各提取物对大肠杆菌 ATCC8099 的抑菌作用
各提取物对大肠杆菌 ATCC8099 的抑菌直径、 抑菌率
见表 6。
由表 6 可知, 木蹄层孔菌子实体甲醇提取物与其他 5
个层的提取物相比, 对大肠杆菌 ATCC 8099 的抑制作用
最强, 且成量效关系。 甲醇提取物的 3 个浓度对大肠杆菌
ATCC8099 的抑制作用与对照组相比均有极显著差异 (p<
0.01), 当浓度为 50 mg·mL-1 时, 抑菌活性最强, 抑菌率
为 99.39%, 最小抑菌浓度 (MIC) 25 mg·mL-1。
另外 , 石 油 醚 、 氯 仿 、 水 提 取 物 对 大 肠 杆 菌
ATCC8099 均有抑制作用, 丙酮、 乙酸乙酯提取物无抑制
作用。
3.4 各提取物对金黄色葡萄球菌 ATCC6538 的抑菌作用
各提取物对金黄色葡萄球菌 ATCC6538 的抑菌直径、
抑菌率见表 7、 表 8。
由表 7 可知, 浓度分别为 100 mg·mL-1的水提物、 50
mg·mL-1的甲醇提取物均对金黄色葡萄球菌 ATCC6538 有
较高的抑菌作用。 抑菌率分别为 95.54%、 95.10%, 最小
抑菌浓度 (MIC) 分别为 50 mg·mL-1、 25 mg·mL-1。 石油
醚提取物、 氯仿提取物、 乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球
表 4 各提取物对白色念珠菌 JLC31681 的抑菌效应 (n=5, X±SD)
表 5 各提取物对白色念珠菌的最小抑菌浓度 (MIC) 测定
石油醚提取物组 25.0 25.0
丙酮提取物组 12.5 12.5
乙酸乙酯提取物组 - -
氯仿提取物组 25.0 25.0
甲醇提取物组 12.5 25.0
水提物 12.5 50.0
供试溶液 白色念珠菌 JLC31680的 MIC/(mg·mL-1)
白色念珠菌 JLC31681
的 MIC/(mg·mL-1)
组别 浓度/(mg·mL-1) 抑菌圈直径/mm 抑菌率/%
空白组 - 7.19±0.67112 1.98
12.5 10.50±1.29099** 36.46
25.0 10.20±0.44721** 33.33石油醚提取物组
50.0 10.75±1.70783** 39.06
阿米卡星 1.28 16.60±0.82158** 100.00
氯仿提取物组
50.0 10.50±0.70711** 38.46
25.0 7.00±0 -乙酸乙酯提取物组
50.0 7.00±0 -
12.5 8.83±1.04083** 20.11
25.0 9.38±0.62915** 26.15
12.5 7.00±0 -
丙酮提取物组
50.0 7.00±0 -
12.5 7.00±0 -
50.0 11.38±0.94648** 43.80水提物
100.0 14.38±0.47871** 73.80
12.5 10.83±0.28868** 39.08
25.0 11.00±1.32288** 40.82甲醇提取物组
50.0 16.74±2.02073** 99.39
12.5 7.00±0 -
25.0 7.00±0 -
表 6 各提取物对大肠杆菌 ATCC8099 的抑菌效应 (n=5, X±SD)
表 7 各提取物对金黄色葡萄球菌 ATCC6538 的抑菌效应 (n=5, X±SD)
组别 浓度/(mg·mL-1) 抑菌圈直径/mm 抑菌率/%
空白组 - 7.00±0 -
12.5 7.83±0.28868 9.12
25.0 8.50±1.08012** 16.48石油醚提取物组
50.0 9.10±0.82158** 22.11
阿米卡星 1.28 16.50±0.93541** 100.00
氯仿提取物组
50.0 9.87±1.84278** 30.53
25.0 9.60±0.89443** 29.21乙酸乙酯提取物组
50.0 12.13±0.62915** 57.64
12.5 7.00±0 -
25.0 7.00±0 -
12.5 8.00±1.00000 11.24
丙酮提取物组
50.0 7.00±0 -
12.5 7.00±0 -
50.0 11.70±0.83666** 56.63水提物
100.0 14.93±1.45774** 95.54
12.5 7.00±0 -
25.0 12.17±0.76376** 53.85甲醇提取物组
50.0 16.13±1.31498** 95.10
12.5 7.00±0 -
25.0 7.00±0 -
中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA Vol. 30 No.242
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
石油醚提取物组 50.0 50.0
丙酮提取物组 - -
乙酸乙酯提取物组 - 12.5
氯仿提取物组 25.0 50.0
甲醇提取物组 12.5 25.0
水提物 25.0 50.0
供试溶液
大肠杆菌 ATCC8099 的
最小抑菌浓度/(mg·mL-1)
金黄色葡萄球菌 ATCC6538
的最小抑菌浓度/(mg·mL-1)
菌也有一定的抑制作用, 丙酮提取物无抑制作用。
实验结果表明, 木蹄层孔菌子实体水提物对白色念珠
菌 JLC31680、 JLC31681 及金黄色葡萄球菌 ATCC6538 抑
菌效果最佳, 最佳浓度分别为 100 mg·mL-1、 50 mg·mL-1
和 100 mg·mL-1, 并且与空白组比较有极显著性差异 (p<
0.01); 甲醇提取物对大肠杆菌 ATCC8099 抑菌效果最佳,
最佳浓度为 50 mg·mL-1, 与空白组比较有极显著性差异
(p<0.01)。 乙酸乙酯提取物对白色念珠菌 (JLC31681、
JLC31680)、 大肠杆菌 ATCC8099 都没有抑制作用, 丙酮
提 取 物 对 大 肠 杆 菌 ATCC8099 和 金 黄 色 葡 萄 球 菌
ATCC6538均没有抑制作用。
4 结论
本文选用了常见的致病菌白色念珠菌 JLC31680、 白
色念珠菌 JLC31681、 大肠杆菌 ATCC8099、 金黄色葡萄球
菌 ATCC6538, 对木蹄层孔菌 6 种提取物进行了抑菌活性
的研究。 结果表明不同浓度的木蹄层孔菌水提取物和甲醇
提取物, 对白色念珠菌 JLC31680、 白色念珠菌 JLC31681、
大肠杆菌 ATCC8099、 金黄色葡萄球菌 ATCC6538 均有抑
制活性, 与对照组相比均有极显著性差异 (p<0.01), 当
水提物浓度为 100 mg·mL -1 时 , 对金黄色葡萄球菌
ATCC6538 的抑制作用最强, 抑菌率为 95.54%。 当甲醇提
取物浓度为 50 mg·mL-1时, 对大肠杆菌 ATCC8099 抑菌作
用最强, 抑菌率为 99.39%, 可以确定木蹄层孔菌的抑菌
活性成分在水提取物中和甲醇提取物中。
白色念珠菌 JLC31680、 白色念珠菌 JLC31681 可侵犯
人体许多部位, 可引起皮肤念珠菌病、 粘膜念珠菌病、 内
脏及中枢神经念珠菌病等多种疾病。 大肠杆菌和金黄色葡
萄球菌分别为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌, 且大肠杆菌
是人和动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌, 主要寄
生在大肠内, 致病性大肠杆菌通过污染饮水、 食品等引起
疫病流行, 是最常见的泌尿道感染病原菌 [11]。 金黄色葡萄
球菌在自然界中无处不在, 在空气、 水、 灰尘及人和动物
的排泄物中都可以找到, 并且是人类化脓感染中最常见的
病原菌, 常引起疖、 痈和毛囊炎等皮肤感染 [10]。 选择以上
菌种具有代表性。 木蹄层孔菌的提取物对以上供试菌株均
有非常好的抑菌效果, 与空白组比较有显著性差异。 因
此, 木蹄层孔菌抑菌药物的研究开发是非常有意义的。 但
就木蹄层孔菌的有效抑菌成分和最大安全有效浓度有待于
日后进一步研究。
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表 8 提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)测定
北京食用菌协会召开了食用菌设施栽培技术研讨会
北京食用菌协会在门头沟区妙峰山镇丁家滩村召开了食用菌设施栽培技术研讨会。 来自门头沟、 延庆、 怀柔、 密
云、 房山、 顺义、 大兴、 海淀等区县的代表 30 余人出席了会议。 与会人员现场参观了设施食用菌新品种、 新技术示范
基地, 并对 “两网一板一灯一缓冲” 设施食用菌栽培模式进行了研讨。 大家一致认为此模式具有很好的推广应用前景,
当地有关部门的领导也希望将门头沟区丁家滩村这种新型的设施食用菌栽培模式推广到其它乡镇及周边地区, 为北京设
施食用菌产业的发展起到示范带动作用。
北京食用菌协会 2011.01.19
第 30 卷 第 2 期 姜 丽等: 木蹄层孔菌子实体提取物体外抑菌活性研究 43