全 文 ：［收稿日期］ 20120315(019)
［通讯作者］ * 张国庆，助理研究员，从事天然药物化学研究，
Tel: 022-81138026， E-mail: zhangguoqing-11
@ 163. com
地锦草乙醇提取物对白色念珠菌性阴道炎
大鼠模型的治疗作用
张国庆 * ，冯文茹，米沙
(天津市医药科学研究所，天津 300020)
［摘要］ 目的:观察地锦草乙醇提取物对大鼠白色念珠菌性阴道炎模型的治疗效果及其相关机制。方法:在卵巢切除加
乙烯雌酚联合氢化可的松注射的基础上予白色念珠菌感染法制备大鼠白色念珠菌性阴道炎模型。并给予地锦草乙醇提取物
治疗，连续 7d。治疗结束后，取阴道分泌物进行真菌培养;行阴道灌洗，ELISA 法测定灌洗液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、
巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)水平;切取阴道组织行组织病理学观察。结果:与正常组比较，模型组大鼠阴道分泌物培养出的
白色念珠菌落数显著增多(P ＜ 0. 001) ，地锦草乙醇提取物治疗组大鼠阴道分泌物培养出的白色念珠菌落数显著低于模型组
(P ＜ 0. 01) ;ELISA 检测显示模型组大鼠阴道灌洗液中 MCP-1 及 MIP-2 水平显著升高;(P ＜ 0. 001) ;地锦草提乙醇取物治疗组
大鼠阴道灌洗液中 MCP-1 及 MIP-2 水平显著低于模型组(P ＜ 0. 01) ;阴道组织病变在光镜下观察发现，实验动物造模成功后，
阴道充血、分泌物增多。给地锦草乙醇提取物治疗 7d 后，阴道局部充血病变显著减轻，分泌物显著减少。结论:地锦草可以通
过抑制真菌的生长，减少有关趋化因子的产生，从而发挥了对霉菌性阴道炎的治疗作用。
［关键词］ 地锦草醇提取物;白色念珠菌;霉菌性阴道炎;趋化因子
［中图分类号］ R ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)19-0191-04
Therapeutic Effects of Ethanol Extracts from Euphorbia humifusa
on Monilial Vaginitis in Rats
ZHANG Guo-qing* ，FENG Wen-ru，MI Sha
(Tianjin Institute of Medical and Pharmaceutical Sciences，Tianjin 300020，China)
［Abstract］ Objective: To study the effect of ethanol extracts from Euphorbia humifusa on monilial
vaginitis in rats． Method:After the candidal vaginitis model establishment，ethanol extracts from E． humifusa was
intragastrically administered daily for 7 days． Candida albicans of the vaginal exudates were cultured and analyzed．
The levels of MCP-1and MIP-2 in vaginal lavage fluid were detected by enzyme-linked immunosorbent assay
(ELISA)method． The pathological changes of vaginal tissue were examined under light microscope． Result:E．
hmuifusa ethanol extracts inhibited the C． albicans significantly (P ＜ 0. 001)and decreased the MCP-1and MIP-2
levels in vaginal lavage fluid remarkably． In addition，the ethanol extracts ameliorated the vaginal pathological
changes significantly (P ＜ 0. 001)． Conclusion:E． humifusa ethanol extracts has remarkable antifungal activity
by inhibiting the C． albicans．
［Key words］ Euphorbia humifusa ethanol extracts;Candida albicans;monilial vaginitis;chemokines
地锦草为常用中药材，也是一种传统的维吾尔
药材［1］。其化学成分主要有黄酮、三萜、香豆素、甾
醇、鞣质及酚酸类等化合物［2］。现代药理学研究证
明，地锦草及其复方具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗过
敏、免疫调节、保肝、止血等多种作用，尤其抗真菌作
用突出，广泛用于真菌感染性疾病的治疗［3-8］。白
色念珠菌性阴道炎又称霉菌性阴道炎，是一种常见
的妇科疾病，系由一种真菌-白色念珠菌感染引起的
生殖器疾病。采用西药抗霉菌治疗又容易复发，所
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第 18 卷第 19 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 19
Oct．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.19.057
以临床上多采用中西医结合治疗，取得了很好疗效。
本文通过动物实验，观察并研究了地锦草提取物对
大鼠白色念珠菌性阴道炎模型的治疗效果及及治疗
机制，为临床应用提供了依据。
1 材料
1. 1 动物 健康 SPF 级 Wistar 雌性大鼠，体重
200-220 g，购自医科院放射医学研究所实验动物中
心，许可证号 SCXK(津)2010-0001。
1. 2 药品及试剂 乙烯雌酚注射液(天津金耀氨
基酸有限公司，批号 0804231，规格 0. 5mg /mL)。注
射用氢化可的松琥珀酸钠粉剂(天津生物化学制药
有限公司，批号 20090325，规格 50mg /支) ，念珠菌
显色培养基(天津金章医用新技术研究所提供)。
大鼠单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞炎性
蛋白-2(MIP-2)ELISA 试剂盒(购自上海翔升生物科
技公司，批号为 20110723)。
1. 3 中药提取 地锦草 Euphorbia humifusa Willd
产地为新疆和田，由天津中医药大学中药学院生药
系马琳教授鉴定为大戟科(Euphorbiaceae)植物地锦
草，全草入药粗粉(20 目)1 000 g 加 75% 乙醇2 200
mL，浸泡 12 h，回流提取 1. 5 h，提取 3 次，合并提取
液，同收乙醇，加蒸馏水溶解并定容至 200 mL，配成
1mL 含生药 5g，即 5g 生药 /mL，以此作为给药浓度。
1. 4 菌种 白色念珠菌菌种由天津市医药科学研
究所免疫微生物学实验室提供。
1. 5 仪器 752 型紫外分光光度计、7230 型分光光
度计(上海分析仪器总厂) ，光学分析天平、FA160
电子天平(上海天平仪器厂)TGI-16 台式高速离心
机(上海安亭科学仪器厂) ，旋转蒸发器(上海青浦
沪西仪器厂) ，KHB ST-360 酶标仪(上海科华)。
2 方法
2. 1 模型制作 参考文献方法制备大鼠白念菌性
阴道炎模型［9］。大鼠 10%水合氯醛 ip 麻醉，无菌条
件下开腹，分离双侧卵巢，完全切除双侧卵巢，逐层
关腹。术后皮下注射青霉素 10 万 U /只，每天 1 次，
连续 3 d 防止感染。术后第 4 天开始做阴道涂片检
查，连续 3 d，未见阴道上皮角化细胞，造模大鼠均处
于动情间期，证明卵巢摘除完全。术后第 7 天开始
皮下注射乙烯雌酚 2 mg·kg － 1，每日 1 次，连续 4 d;
即日开始除注射乙烯雌酚外，加皮下注射氢化可的
松 60 mg·kg － 1，每日 1 次，连续 3 d，造成动物全身免
疫功能低下。术后第 11 天，用无菌小白鼠灌胃针
头，抽取白色念珠菌 0. 25 × 106 个 /mL 菌液，造模大
白鼠取头朝下位，将 0. 1 mL 白色念珠菌液注入阴道
内，原位停留 2 min，以防菌液溢出。24 h 后同法再
次阴道内注菌 1 次。感染后造模动物隔日交替皮下
注射乙烯雌酚或氢化可的松各 2 次。感染后第 4 天
(即术后 15 d) ，可见造模大白鼠外阴红肿，伴少量
白色分泌物，用无菌棉签蘸取分泌物，涂于沙氏培养
基表面，25℃ 培养 48 h，肉眼观察可见大小不等的
白色菌落，分泌物镜检可见假菌丝和成群孢子，证明
造模成功。
2. 2 分组及给药 健康雌性 Wistar 大鼠 30 只，随
机分为 3 组:假手术组、模型组、地锦草乙醇提取物
治疗组，每组各 10 只。假手术组只开腹，不进行卵
巢切除。中药治疗组按模型组方法造模，在白念菌
感染后第 4 天开始灌胃地锦草乙醇提取物(按生药
量计)10 g·kg － 1，每日 1 次，连续 7 d。
2. 3 阴道分泌物真菌培养 所有动物在手术或造
模后第 22 天(即治疗组在治疗后 7d) ，做阴道分泌
物细菌培养:以无菌棉签蘸取阴道分泌物，涂抹接种
于沙氏培养基，25℃培养 48 h，肉眼观察菌落形成情
况、拍摄照片及计数。以菌落数分级判定疗效。治
愈:不长菌落;显效:菌落 1 ～ 10 个;有效:菌落 11 ～
30 个;好转:菌落 31 个以下，分布稀疏;无效:菌落
31 个以上，分布密集，以等级序值法进行显著性
检验。
2. 4 阴道灌洗液 MCP-1，MIP-2 水平检测 阴道以
无菌生理盐水 2mL /每次，灌洗 2 次，合并灌洗液，3
000 r·min － 1，10 min，取上清，ELISA 法测定 MCP-1，
MIP-2 水平，测定方法按说明书进行。
2. 5 阴道病变光镜检查 大鼠处死后，剖取阴道标
本进行病理组织学观察。取阴道组织(1 cm ，厚约
0. 1 ～ 0. 3 cm)1 块做普通光镜标本，观察阴道黏膜
形态变化。阴道标本按充血、水肿、出血、浸润四项
基本指标进行评分［10］。无充血、水肿、出血、浸润评
0 分，轻度评 1 分，中度评 2 分，重度评 3 分。4 项评
分加和为病变总分。
2. 6 统计学方法 采用 SPSS 11. 0 统计软件进行
统计学处理，计量资料以 珋x ± s表示，采用 t 检验;等
级资料统计方法采用 Ridit 法，以 P ＜ 0. 05 为差异有
统计学意义。
3 结果
3. 1 大鼠阴道分泌物真菌培养及分析 模型组大
鼠阴道分泌物培养出的白色念珠菌落数显著增多
(P ＜ 0. 001) ，证明模型成功;地锦草提取物治疗组
大鼠阴道分泌物培养出的白色念珠菌落数显著低于
模型组(P ＜ 0. 01) ，因此可以判定该药对白色念珠
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第 18 卷第 19 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 19
Oct．，2012
菌所致大白鼠阴道炎模型真菌感染有显著抑制作
用，见表 1。
表 1 地锦草乙醇提取物对大鼠阴道分泌物白色
念珠菌菌落计数分布的影响(n = 10)
组别
剂量
/ g·kg － 1
菌落数 /个
0 1 ～ 10 11 ～ 30 ＜ 31 个 ＞ 31 个
假手术 － 10 0 0 0 0
模型 － 0 0 0 1 91)
地锦草乙醇提取物 10 8 2 0 0 02)
注:与正常组比1)P ＜ 0. 001;与模型组比2)P ＜ 0. 01(表 2 同)。
3. 2 阴道灌洗液 MCP-1，MIP-2 水平 模型组大鼠
阴道灌洗液中 MCP-1，MIP-2 水平显著升高(P ＜
0. 001) ;地锦草提取物治疗组大鼠阴道灌洗液中
MCP-1，MIP-2 水平显著低于模型组(P ＜ 0. 01) ，见
表 2。
表 2 地锦草乙醇提取物对阴道灌洗液单核细胞趋化蛋白-1、
巨噬细胞炎性蛋白-2 水平的影响(珋x ± s，n = 10) ng·L － 1
组别
剂量
/ g·kg － 1
MCP-1 MIP-2
假手术 － 8． 27 ± 2． 35 2． 39 ± 0． 98
模型 － 67． 38 ± 11． 361) 14． 21 ± 3． 171)
地锦草乙醇提取物 10 13． 23 ± 3． 312) 5． 21 ± 1． 542)
3. 3 阴道病变光镜检查及评分 动物造模成功后，
阴道充血、分泌物增多。给地锦草提取物治疗 7 d
后，阴道局部充血病变显著减轻，分泌物显著减少。
用等级序值法(Ridit 法)计算，地锦草治疗组与模型
对照组比较、模型组与正常组比较均有显著性差异
(P ＜ 0. 01)。见表 3。
表 3 地锦草乙醇提取物对大鼠阴道炎模型阴道
病变的影响(n = 10)
组别
剂量
/ g·kg － 1
各病变程度动物数 /只
－ +  
假手术 － 10 0 0 0
模型 － 0 0 1 9
地锦草乙醇提取物 10 9 1 0 0
注:－无变化;+轻度充血，少量分泌物;中度充血，分泌物较
多;重度充血，分泌多。
4 讨论
霉菌性阴道炎是妇女常见病之一，临床以带下
量多、质稠、外阴瘙痒、红肿热痛等炎症病变为主，抑
制病菌、消除炎症是治疗阴道炎的关键。本文重点
研究地锦草乙醇提取物对白色念珠菌引起的大鼠阴
道炎模型的影响。以往药理研究结果表明:地锦草
体外对石膏样毛癣菌、红色毛癣菌、絮状表皮癣菌、
石膏样小孢子菌等 4 种 30 株具有不同程度的抑菌
作用［8］。本研究显示地锦草提取物可显著减轻白
色念珠菌性阴道炎模型大鼠阴道分泌物中白色念珠
菌培养的菌落数，显示出对真菌的良好抑制作用。
白色念珠菌是引起霉菌性阴道炎最主要病菌，
选用白色念珠菌作为模型的诱发因素，符合阴道炎
的病因学。本研究结果显示地锦草提取物可显著减
轻白色念珠菌性阴道炎模型大鼠阴道充血、水肿、分
泌物增加等病变。关于地锦草抑制真菌的机制，目
前认为麦角甾醇是真菌细胞膜所特有的脂质，是真
菌细胞膜的重要结构组成成分，可以通过与磷脂结
合，稳定膜结构，具有调节真菌细胞膜流动性的功
能，在确保膜结构的完整性、膜结合酶的活性、细胞
活力以及物质运输等方面起着重要作用。一旦麦角
甾醇缺乏，必将引起真菌细胞膜功能异常，甚至发生
细胞破裂。而地锦草的作用机制可能与抑制真菌麦
角甾醇和蛋白质的生物合成，从而破坏真菌细胞膜、
细胞壁的结构有关［11］。
目前研究显示白色念珠菌的感染可激活诱导多
种炎性相关细胞产生趋化因子，加重炎症反应，这在
霉菌性阴道炎发病机制中具有重要作用。例如有研
究结果显示白念珠菌可诱导中性粒细胞产生 MIP-
1α 增加。还有研究表明与白念珠菌共培养后，小鼠
腹膜巨噬细胞合成 MIP-1，MIP-2 和角质细胞起源趋
化因子(keratinocyte-derived chemokine，KC)增加，
白念珠菌亦可有效刺激 PBMC 产生高水平的 MCP-
1;Kim 等则首次动态观察了正常人 PBMC 与白念
珠菌共培养后 18 h 内趋化因子及其受体的表达，结
果显示:白念珠菌可诱导正常人 PBMC 高表达 CC
趋化因子 MIP-1a，MIP-1p，MIP-3 a 和 MIP-4;趋化
因子受体 CCR1，CCR5，CCR7 和 CXCR5 的表达亦
增加了 3-53 倍［12］。这些趋化因子及其受体的表达
导致了感染炎症细胞在病变局部的募集。本研究显
示经地锦草提取物治疗后，阴道灌洗液中 MCP-1 及
MIP-2 水平显著降低，提示其对炎性细胞分泌这些
趋化因子有明显的抑制作用，进而减少了炎症细胞
在炎症局部的聚集，也就减轻了炎症反应。
总之，地锦草可以通过抑制真菌的生长，减少有
关趋化因子的产生，从而发挥了对霉菌性阴道炎的
治疗作用，这为临床上的进一步合理使用提供了
依据。
［参考文献］
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张国庆，等:地锦草乙醇提取物对白色念珠菌性阴道炎大鼠模型的治疗作用
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［责任编辑 聂淑琴］
［收稿日期］ 20120327(008)
［基金项目］ 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻 10124008-6)
［第一作者］ 何巧玲，硕士研究生，从事抗肝纤维化药物研究，Tel:0771-5358272，E-mail:lingqiaohe． 205@ 163． com
［通讯作者］ * 张士军，博士，副教授，从事抗肝纤维化药物研究，Tel:0771-5358272，E-mail:gxykdxzsj@ 163． com
六月青多糖对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响
何巧玲，罗秀，吕鹏，郭雪峰，黄仁彬，张士军 *
(广西医科大学药理教研室，南宁 530021)
［摘要］ 目的:研究六月青多糖(LYQP)对四氯化碳(carbon tetrachloride，CCl4)所致大鼠肝纤维化的干预作用及机制。
方法:SD 大鼠随机分成两组，模型组大鼠采用 50% CCl4 花生油溶液 1 mL·kg
－ 1 ig 造模，每周 2 次，连续 7 周，正常组用生理盐
水代替。将病理检查确认肝纤维化已形成的 SD 大鼠 60 只随机分为 LYQP(600，300，150 mg·kg － 1)组，秋水仙碱(0. 2 mg·
kg － 1)组，CCl4 模型对照组，每组 12 只。于造模的第 8 周开始给药。正常组和 CCl4 模型对照组 ig 生理盐水，药物组 ig LYQP
和秋水仙碱，每日 1 次，连续 ig 给药 4 周。检测大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷胱甘肽-过氧化物酶
(GSH-Px)活性以及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量，采用 Masson 染色观察肝组织纤维化程度。结果:LYQP(600，300，150 mg
·kg － 1)组 ALT 和 AST 活性为(13. 53 ± 2. 30) ，(19. 89 ± 2. 13) ，(26. 31 ± 2. 87)U·mL － 1，(17. 14 ± 2. 96) ，(24. 85 ± 3. 14) ，
(33. 63 ± 3. 91)U·mL － 1，与模型对照组比较，LYQP 可明显降低 CCl4 致大鼠纤维化血清 ALT 和 AST 活性;GSH-Px 活性为
(710. 4 ± 35. 98) ，(653. 8 ± 25. 36) ，(612. 0 ± 27. 96)U·mg － 1，Hyp 含量为(0. 382 ± 0. 017) ，(0. 446 ± 0. 022) ，(0. 517 ± 0. 024)
mg·g － 1与模型对照组比较，LYQP 可明显增高 GSH-Px 活性和降低 Hyp 含量;Masson 染色显示各药物组干预的大鼠肝脏胶原
纤维均有所减少。结论:六月青多糖可减轻 CCl4 诱导的肝纤维化。
［关键词］ 六月青;多糖;四氯化碳;肝纤维化
［中图分类号］ R285. 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)19-0194-04
Effect of Liuyueqing Polysaccharide on Liver Fibrosis Induced
by Carbon Tetrachloride in Rats
HE Qiao-ling，LUO Xiu，LV Peng，GUO Xue-feng，HUANG Ren-bin，ZHANG Shi-jun*
·491·
第 18 卷第 19 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 19
Oct．，2012