全 文 :昆 明学院学 报 2008, 30(4):73 ~ 74 CN53-1131/G4 ISSN1008-7958
JournalofKunmingUniversity
收稿日期:2008-09-12
基金项目:昆明学院重点学科建设项目(2004z002)
作者简介:沈放(1973—), 女(满族), 辽宁凤城人 ,讲师 , 硕士 ,主要从事生物化学 、天然产物开发和药理学教学研究.
海枫藤提取物镇痛抗炎功效的研究
沈 放 ,杨黎江 ,路 斌 ,仝向荣
(昆明学院 生命科学和技术系 ,云南 昆明 650031)
摘要:用醋酸致痛法和耳肿胀法研究海枫藤茎叶提取物镇痛和抗炎作用 , 确证其是否含有具镇痛抗炎作用的活
性成分.研究结果表明:海枫藤茎 、叶的水提取物均能明显降低小鼠扭体次数 , 且叶水溶性提取物的抑制效果最
好并具有剂量依存关系 ,同时叶水溶性提取物在较低剂量时就可达到良好的抑制耳肿胀效果 ,而且海枫藤中具
有镇痛抗炎的活性成主要存在于叶中.
关键词:海枫藤;镇痛;抗炎;药理作用
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1008-7958(2008)04-0073-02
Anti-inflammationandAnalgesicEffectsonExtractionsofMarsdeniaOficinalisTsiangetP.T.Li
SHENFang, YANGLi-jiang, LUBin, TONGXiang-rong
(LifeScienceandTechnologyDepartment, KunmingUniversity, YunnanKunming650031, China)
Abstract:Testedtheanti-inflammatoryandanalgesiceffectsofextractionsfromMarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Lionmice, to
provetheexistenceofsomeactiveingredients.Theresultshowedthatwaterextractionfromboththestemsandleavescoulddecrease
thetimesofwrithingofmicedistinctly.Water-solubilitysampledirectlyfromtheleavesshowedagoodinhibitionresultinanalgesiaac-
tivities, andhadadependentrelationwithdosage.Also, lowdosageofwaterextractionfromtheleaveshadagoodeffectofinhibition
onauriculartumesceneofmice.ExtractionofMarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Lishowedthehighactivitiesofanti-inflammationand
analgesicintheleaves.
Keywords:MarsdeniaofficinalisTsiangetP.T.Li;analgesic;anti-inflammatory;pharmacologicalefects
海枫藤 (MarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Li)
为萝藦科牛奶菜属藤木类植物 ,具有舒经通络 、除湿
止痛等功效 ,在彝族地区特别是哈尼族地区常用于治
疗风湿、关节炎等病症.海枫藤在临床上仅以配方中
药中的一味少量运用于关节炎的治疗 ,有关其活性物
质、药理药效等方面均未见报道.目前对少数民族医
药的开发和研究 ,对补充我国传统医药理论和少数民
族地区的经济发展和文化开发均具有较深远的影响.
因此 , 对海枫藤的研究及其进一步开发具有重要意
义.为确定海枫藤在抗炎镇痛方面的药理作用 ,我们
对其茎、叶提取物进行了抗炎镇痛功效的鉴定实验.
1 材料和方法
1.1材料
海枫藤(MarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Li),
由翟书华于 2006年夏秋两季在昆明市石林县圭山
野外采集而得 ,并分类鉴定.
1.2仪器和试剂
UV-1600双光束紫外可见分光光度计(北京
瑞利分析仪器公司), 旋转蒸发仪(东京理化), 水浴
锅 ,循环水式多用真空泵 ,低温离心机(eppendorf),
捣碎机 ,超低温冰箱(美国热电), 冷冻干燥仪(德国
ChristAlpha1-2),微量分析电子天平(瑞士梅特勒
公司 XS205DU),干燥箱 、试剂均为国产分析纯.
1.3实验动物
健康体重为 20 ~ 30g的昆明种小白鼠 ,雌雄不
限 , 将实验小鼠随机分组 , 分为给药组和空白组 , 每
组小鼠各 8 ~ 10只.
1.4实验样品处理
1.4.1海枫藤茎和叶中有机成分的提取分离流程
将海枫藤茎、叶经粉碎机粉碎过 20目筛得其粗
粉 ,分别称取一定量的茎或叶粗粉加入 95%的乙醇
室温浸泡两天 ,滤纸过滤 , 用旋转蒸发仪将滤液浓缩
至无醇味(a).然后将滤渣用 8倍量水煮提取 1h,过
滤 ,滤渣再用 6倍量水煮提 1h, 过滤 ,合并两次滤液 ,
用旋转蒸发仪浓缩至膏状(b).将 a、b液用冷冻干燥
机干燥 ,分别获得海枫藤茎或叶的醇 、水提取物.
1.4.2样品处理
称取海枫藤茎、叶的水、醇提取物 ,分别溶于一定
量的蒸馏水中 ,得 1.0, 0.5, 0.1mg/0.1mL样品注射液.
1.5实验步骤
1.5.1镇痛实验
对照组每只小鼠腹腔注射生理盐水 0.2mL/10g,
给药组每只小鼠分别腹腔注射一定浓度的样品注射
DOI :10.14091/j.cnki.kmxyxb.2008.04.016
液 0.1mL/10g, 30min后腹腔注射 0.6%冰醋酸
0.2mL/10g, 观察 15min内小鼠扭体次数.用以下
公式计算扭体抑制率:
扭体抑制率 =对照组扭体次数 -实验组扭体次数对照组扭体次数 ×100%.
扭体抑制率大于 50%的可确定其有镇痛作用 , 大于
70%的可确定其具有明显镇痛作用 [ 1].
1.5.2抗炎实验
每组取 10只小鼠 ,分别注射 0.1mL/10g的海
枫藤样品稀释液 ,给药后 30min分别在每只小鼠的
右耳廓两面均匀涂抹二甲苯致炎 , 致炎 30min后用
剪刀分别剪下小鼠的两耳并标记 “左” “右”, 用
8mm打孔器打下其中相同的部位 , 称重(实验室温
控制在 20℃左右),用以下公式计算肿胀度:
肿胀度 =致炎侧耳片重量 -对照侧耳片重量
1.6统计学处理
数据以平均数(x±s)标准差表示 , 两组间数据
差异比较采用 Student-t检验 , 当 P<0.05时认为差
异显著 , P<0.01时认为差异极显著.
2 结果
2.1海枫藤提取物对小鼠扭体反应的镇痛作用
将给药组小鼠分别注射一定剂量的海枫藤茎醇
提物、海枫藤茎水提物 、海枫藤叶醇提物和海枫藤叶
水提物后 ,检测其镇痛功效 ,实验结果如表 1所示.
表 1 海枫藤提取物对小鼠扭体反应的镇痛作用
组别 剂量/(mg/0.1mL)
动物数
/只
扭体次数
/次
扭体抑制率
/%
对照组 — 8 25.3±5.8 —
海枫藤茎水提液 1.0 8 8.1±5.0 67.8*
0.5 8 13.3±4.7 47.3
0.1 8 20.0±7.0 20.8
海枫藤茎醇提液 1.0 8 19.8±5.8 21.7
0.5 8 16.2±6.9 35.9
0.1 8 34.8±11.8 —
海枫藤叶水提液 1.0 8 2.4±4.7 90.5**
0.5 8 7.6±5.3 70.1**
0.1 8 12.0±5.5 52.4*
海枫藤叶醇提液 1.0 8 6.0±4.0 76.3*
0.5 8 16.5±7.3 34.8
0.1 8 36.5±12.6 —
注:*表示具镇痛作用 , **表示具明显镇痛作用
可以看出 ,海枫藤茎水提物 、叶醇提物和叶水提
物中含有较明显镇痛效果的活性物质.海枫藤叶水
溶性物质中所含有的具镇痛作用的活性物质 , 其剂
量与镇痛效果呈正相关.当叶水提物注射剂量为
0.1mg/10-1 mL时 ,就已表现出较好的镇痛效果 ,扭
体抑制率达 52.4%.
2.2海枫藤提取物的抗炎作用
将给药组小鼠分别注射一定剂量的海枫藤叶水
提物后 ,检测其抗炎作用 , 实验结果如表 2所示.
表 2 海枫藤提取物的抗炎作用
组别 剂量/(mg/0.1mL)
动物数
/只
耳肿胀度
/mg
对照 - 10 4.50±1.14
海枫藤茎水提液 1.0 10 2.56±1.22*
0.5 10 3.49±0.87*
0.1 10 3.95±1.26
海枫藤茎醇提液 1.0 10 2.29±0.73*
0.5 10 3.82±0.54
0.1 10 4.24±1.15
海枫藤叶水提液 1.0 10 0.75±0.69**
0.5 10 1.98±0.86**
0.1 10 2.34±0.52**
海枫藤叶醇提液 1.0 10 4.41±0.88
0.5 10 4.67±0.61
0.1 10 4.45±1.32
注:*表示P<0.05;表示**P<0.01
由实验结果可知 ,海枫藤茎和叶提取物中含有
抗炎活性物质 ,海枫藤叶水提物的抗炎活性物质具
有明显抗炎效果(浓度为 1mg/10-1 mL时 , 肿胀抑
制率高达 83.3%), 且叶水溶性物质的注射剂量与
抗炎效果呈明显正相关.
3 讨论
本实验将海枫藤茎、叶经过乙醇提取和水提取对
其有效成分初步分离后 ,我们对其茎叶提取物进行了
抗炎和镇痛功效鉴定.研究结果表明 , 海枫藤茎和叶
的水溶性物质中均含有具镇痛和抗炎作用的活性物
质 ,而醇提取物中没有发现具有明显镇痛活性的物质
存在 ,其效果与浓度呈正相关;且海枫藤具镇痛和抗炎
作用的高活性物质主要存在于叶中 ,注射较低含量的
叶水提物(0.1mg/10-1 mL)就能达到较好的镇痛效果
(扭体抑制率为 62.8%)和抗炎效果.因此 ,应进一步进
行海枫藤镇痛和抗炎活性成分的追踪研究及在人体上
的临床实验 ,以期获得高活性的镇痛抗炎新药.
海枫藤 (MarsdeniaoficinalisTsiangetP.T.Li)在
彝药中常用于治疗风湿、关节炎等病症.萝藦科植物富
含具镇痛作用的活性成分 ,如牛心朴子(Cynanchum
komanovi)[ 2] , 徐长卿(Cynachumpaniculatum(Bge.)
Kitag.)[ 3]等.目前海枫藤在临床上仅以复方药的形式
少量运用于关节炎的治疗 ,提取物成分和生理活性、药
理方面均未见报道.通过本研究可进一步补充对萝藦
科牛奶菜属植物和彝族药物的药用价值的认识 ,同时
从新药开发和民族药开发的角度上来说 ,对海枫藤进
行有效成分、生理活性和药理研究具有重要意义.
[参考文献]
[ 1]钱之玉.药理学实验与指导 [ M] .北京:中国医药科技出版社 ,
2003:32-33.
[ 2]张永康,何生虎 ,李勇.牛心朴子生物碱的镇痛抗炎作用试验 [ J] .
动物医学进展 , 2006, 27(11):99-100.
[ 3]孙奋治 ,蔡鸣 ,楼凤昌.徐长卿中 3-羟-4-甲氧苯乙酮的镇痛 、抑制
胃肠蠕动作用 [ J] .中国中药杂志 , 1993(6):362-363.
74 昆明学院学报 2008年 12月