全 文 ：反相高效液相色谱法测定元宝草中金丝桃素
和金丝桃苷的含量
李元宏，杨务彬，王启斌
(湖北医药学院附属太和医院药学部，湖北十堰 442000)
摘 要 目的 采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对元宝草中金丝桃素和金丝桃苷含量进行测定。方法
DiamonsilTMC18色谱柱(200 mm×4． 6 mm，5 μm) ，加装 Phenomenex保护柱。流动相分别是甲醇-乙腈-1． 0%磷酸二氢钠溶
液(340∶ 15∶ 5)和甲醇-0． 025 mol·L－1磷酸溶液(50∶ 50) ;检测波长分别是 588，360 nm。结果 金丝桃素和金丝桃苷
分别在 0． 02 ～ 0． 18 μg(r=0． 999 9，n=6)和 0． 05 ～ 0． 80 μg(r = 0． 999 7，n = 6)范围内呈良好线性关系，回收率分别为
98． 08%和 97． 58%，RSD分别为 1． 05%和 0． 89%。结论 该方法检测结果准确，重复性好，可用于元宝草的质量控制。
关键词 元宝草;金丝桃素;金丝桃苷;含量测定
中图分类号 R927． 2 文献标识码 A 文章编号 1004－0781(2012)04－0489－03
Content Determination of Hypericin and Hyperoside in Hypericum sampsonii Hance by
RP-HPLC
LI Yuan-hong，YANG Wu-bin，WANG Qi-bin(Department of Pharmacy，Taihe Hospital Affiliated with Hubei
Medical College，Shiyan 442000，China)
ABSTRACT Objective To determinate the contents of hypericin and hyperoside in Hypericum sampsonii Hance by
reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC)． Methods HPLC was performed on DiamonsilTMC18(200
mm×4． 6 mm，5 μm)with methanol-ethylactate-1． 0% sodium dihydrogen phosphate (340∶ 15∶ 5)and methanol-0． 025 mol·
L－1 phosphatic acid (50∶ 50)as mobile phase． Detection wavelengths were 588 nm and 360 nm respectively． Results The
linear ranges of hypericin and hyperoside were 0． 02－0． 18 μg and 0． 05－0． 80 μg，respectively． The recovery rates of them were
respectively 98． 08% (n=6)and 97． 58% (n=6) ，RSDs were 1． 05% and 0． 89%，respectively． Conclusion The method
was accurate and highly reproducible，and can be used for the quality control of Hypericum sampsonii Hance．
KEY WORDS Hypericum sampsonii Hance;Hyperici;Hyperoside;Content determination
元宝草(Hypericum sampsonii Hance)为金丝桃科
金丝桃属植物元宝草的全草，别名合掌草、对经草、对
月草、大叶对口莲、穿心草等［1］，具有清热解毒、通经
活络、凉血止血的作用，主治小儿高热、痢疾、肠炎、吐
血、鼻出血、月经不调、毒蛇咬伤等。近年研究表明其
主要活性成分金丝桃素和金丝桃苷具有较好的镇痛、
抗氧化、抗抑郁、抗病毒等作用［2-6］。笔者采用反相高
效液相色谱(RP-HPLC)法［7］对元宝草药材中金丝桃
素和金丝桃苷含量进行测定，为控制元宝草药材质量
提供依据。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 LC-10A 高效液相色谱仪，SPD-10A 紫外
检测器(日本岛津) ;HW-2000 色谱工作站(南京千
收稿日期 2011－08－02
作者简介 李元宏(1969－) ，男，湖北房县人，主管药师，学
士，主要从事医院药学工作。电话:0719 － 8801135，E-mail:
liskey99@ 163． com。
通讯作者 王启斌，男，主要从事临床药学工作。电话:
0719－8801157，E-mail:taihe321@ 163． com。
谱) ;电子分析天平。
1． 2 试药 金丝桃素对照品(购自 Sigma公司，纯度＞
98%) ，金丝桃苷对照品(中国食品药品检定研究院，
含量测定用，批号:111521-200303) ;甲醇、乙腈为色谱
纯，其他试剂均为分析纯;元宝草(采自房县桥上乡不
同地点)。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 DiamonsilTM C18色谱柱(200 mm ×
4． 6 mm，5 μm) ，加装 Phenomenex保护柱;金丝桃素测
定的流动相是甲醇-乙腈-1． 0% 磷酸二氢钠溶液
(340∶15∶5) ，测定波长为 588 nm。金丝桃苷测定的
流动相是甲醇-0． 025 mol·L－1磷酸溶液(50∶50) ，测
定波长为 360nm。柱温:30 ℃，进样量 10 μL。
2． 2 对照品溶液的制备
2． 2． 1 金丝桃素对照品溶液 精密称取经真空干燥
至恒重的金丝桃素对照品适量，用甲醇配成每毫升含
金丝桃素 0． 02 mg对照品贮备溶液。精密量取对照品
贮备溶液 5 mL 至 10 mL 棕色量瓶中，甲醇稀释至刻
度，摇匀，即得 0． 01 mg·mL－1对照品溶液。
·984·医药导报 2012 年 4 月第 31 卷第 4 期
2． 2． 2 金丝桃苷对照品溶液 精密称取经真空干燥
至恒重的金丝桃苷对照品 10 mg，置于 100 mL 量瓶
中，得金丝桃苷 0． 1 mg·mL－1的贮备溶液。精密量取
贮备溶液 5 mL至 10 mL 的量瓶中，甲醇稀释至刻度，
摇匀，即得 0． 05 mg·mL－1金丝桃苷对照品溶液。
2． 3 供试品溶液的制备 精密称取元宝草药材粉末
约 1． 0 g，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 50 mL，密
塞，称定质量，加热回流 1 h，放冷，再称定质量，用甲醇
补足减失的质量，摇匀，用孔径 0． 45 μm 的微孔滤膜
滤过，取续滤液，即得。
2． 4 线性关系考察 精密量取金丝桃素对照品贮备
溶液 1． 0，2． 0，4． 0，5． 0，7． 0 和 9． 0 mL，置 6 只 10 mL
量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取 10 μL，
注入高效液相色谱仪，每一浓度重复进样 3 次，求平均
峰面积。以平均峰面积(Y)为纵坐标，金丝桃素进样
量(X，μg)为横坐标，进行线性回归，得回归方程为:
Y=6． 14×104X+1 974(r=0． 999 9，n=6)。表明金丝桃
素进样量在 0． 02 ～ 0． 18 μg范围内线性关系良好。精
密量取金丝桃苷对照品贮备溶液 0． 5，1． 0，2． 0，5． 0，
6． 0 和 8． 0 mL，置 6 只 10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻
度，摇匀。精密吸取 10 μL，注入高效液相色谱仪，每
一浓度重复进样 3 次，求平均峰面积。以平均峰面积
(Y)为纵坐标，金丝桃苷进样量(X，μg)为横坐标，进
行线性回归，得回归方程为:Y = 2 847． 76X+48． 32(r =
0． 999 7，n = 6)。表明金丝桃苷进样量在 0． 05 ～
0． 80 μg范围内线性关系良好。
2． 5 精密度实验 分别精密吸取金丝桃素和金丝桃
苷对照品溶液 10 μL，重复进样 6 次，测定峰面积。结
果金丝桃素和金丝桃苷的 RSD 分别为 1． 21% 和
1． 33%。表明精密度良好。
2． 6 重复性实验 取同一批号的元宝草药材粉末
(约 1． 0 g)5 份，按“2． 3”项下方法制成供试品溶液，
进样 10 μL，测定峰面积，结果金丝桃素和金丝桃苷
RSD分别为 1． 46%和 1． 51%。
2． 7 稳定性实验 精密吸取同一供试品溶液，分别于
0，1，2，4，8，24 h 各进样 10 μL，测定峰面积。结果金
丝桃素和金丝桃苷的 RSD 分别为 1． 34%和 1． 57%，
表明供试品溶液在制备后 24 h内稳定。
2． 8 加样回收率实验 精密称取已知含量的同一批
元宝草药材粉末(约 1． 0 g)6 份，分别精密加入金丝桃
素贮备液 5 mL和金丝桃苷贮备液 4 mL，按“2． 3”项下
方法制成供试品溶液，按上述方法测定金丝桃素和金
丝桃苷含量，计算加样回收率，结果金丝桃素平均回收
率 98． 08%，RSD = 1． 05%;金丝桃苷平均回收率
97． 58%，RSD=0． 89%。见表 1。
2． 9 样品含量测定 取元宝草药材粉末约 1． 0 g，精
密称定，按“2． 3”项下方法制成供试品溶液。精密吸
取对照品溶液、供试品溶液各 10 μL，注入液相色谱
仪，测定峰面积，计算金丝桃素和金丝桃苷含量。3 个
不同采样点元宝草药材样品中金丝桃素和金丝桃苷含
量测定结果见表 2。
表 1 金丝桃素和金丝桃苷加样回收实验结果
Tab． 1 Result of recovery experiment of hypericin and
hyperoside mg，n=6
原有量 加入量 测得量
mg
回收率 /
%
金丝桃素 0． 301 4 0． 1 0． 400 3 98． 90
0． 300 5 0． 1 0． 399 0 98． 50
0． 297 6 0． 1 0． 396 2 98． 60
0． 286 9 0． 1 0． 383 1 96． 20
0． 289 6 0． 1 0． 387 2 97． 60
0． 292 1 0． 1 0． 390 8 98． 70
金丝桃苷 0． 803 7 0． 4 1． 198 4 98． 68
0． 801 3 0． 4 1． 189 7 97． 10
0． 793 6 0． 4 1． 178 5 96． 22
0． 765 1 0． 4 1． 154 6 97． 38
0． 772 3 0． 4 1． 165 1 98． 20
0． 778 9 0． 4 1． 170 4 97． 88
表 2 样品含量测定结果
Tab． 2 Result of content determination mg·g－1
样本号 金丝桃素 金丝桃苷
1 0． 301 2 0． 763 1
2 0． 276 3 0． 798 6
3 0． 211 7 0． 736 4
3 讨论
本实验以元宝草药材中金丝桃素和金丝桃苷作为
定量指标，利用 RP-HPLC法对药材样品中金丝桃素和
金丝桃苷含量进行测定，结果表明该方法稳定性和重
复性均较好，可用于元宝草药材的质量控制。
元宝草以全草或干燥地上部分入药，不同采样点元
宝草药材样品中金丝桃素和金丝桃苷含量测定结果表
明元宝草来源不同其所含有效成分存在较大差异，在药
材收购、使用过程中确保质量均一、稳定值得关注。
参考文献
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·094· Herald of Medicine Vol. 31 No. 4 April 2012
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有效成分金丝桃素和金丝桃苷的含量［J］． 药物分析杂
志，2000，20(1) :101－104．
DOI 10． 3870 /yydb． 2012． 04． 029
复方阿莫西林胶囊的制备与质量控制
周妮，宋金春
(武汉大学人民医院药学部，430060)
摘 要 目的 制备复方阿莫西林胶囊，并探讨其质量控制方法。方法 以湿法制粒制备复方胶囊，采用高效液
相色谱法测定复方胶囊的含量与溶出度。结果 阿莫西林与氨溴索回归方程的线性范围分别为 80 ～ 320 μg·mL－1和
4． 8 ～ 19． 2 μg·mL－1，加样回收率分别为 96． 72%和 104． 17%，RSD分别为 1． 84%和 0． 57%。3 批样品的含量均＞90%，
45 min溶出度＞80%。结论 复方阿莫西林胶囊的含量与溶出度均符合 2010 年版《中华人民共和国药典》要求，该检测
方法准确、简便，分离效果好，可用于该复方胶囊的质量控制。
关键词 阿莫西林;氨溴索;色谱法，高效液相;质量控制
中图分类号 R978;TQ460． 6 文献标识码 A 文章编号 1004－0781(2012)04－0491－04
Preparation and Quality Control of Compound Amoxicillin Capsules
ZHOU Ni，SONG Jin-chun(Department of Pharmacy，Renmin Hospital of Wuhan University，Wuhan 430060，
China)
ABSTRACT Objective To prepare compound amoxicillin capsules and investigate the method of quality control．
Methods Wet granulation was used to prepare the compound amoxicillin capsules and high performance liquid chromatography
(HPLC)was used to determine the content and dissolution． Results The calibration curves were linear in the ranges of 80－
320 μg·mL－1 for amoxicillin and 4． 8－19． 2 μg·mL－1 for ambroxol． Their average recovery rates were 96． 72% and 104． 17%;
RSDs were 1． 84% and 0． 57%，respectively． The content and dissolution of samples of three batches were all above 90% and
80% ． Conclusion The content and dissolution of the compound amoxicillin capsules are both consistent with the Standard of
Pharmacopoeia of China． This HPLC method is accurate，simple and effective for separation，and can be used for quality control
of the compound capsules．
KEY WORDS Amoxicillin;Ambroxol;High performance liquid chromatography;Quality control
阿莫西林(amoxicillin，AMO)是目前临床上应用
最为广泛的抗生素之一，抗菌谱广，可有效杀死引起呼
吸道疾病的各种致病菌。氨溴索(ambroxol，AMB)是
新一代的呼吸道黏液调节剂，对肺泡表面活性物质的
合成和分泌具有显著的促进效果。复方阿莫西林制剂
是由 AMO和 AMB两种成分组成的复方制剂，两药联
用具有协同增效作用，AMB 可以提高 AMO 在肺内及
支气管内的药物浓度［1］。目前已有国外公司生产的
收稿日期 2011－09－05 修回日期 2011－12－05
作者简介 周妮(1988－) ，女，湖北宜昌人，在读硕士，研究
方向:临床药学。电话: (0)15927357225，E-mail:zhouni758@
sohu． com。
通讯简介 宋金春(1964－) ，男，湖北孝感人，主任药师，博
士，研究方向:临床药物新剂型研究。电话: (0)13971608052，
E-mail:songjc1234@ 126． com。
AMO与 AMB的复方制剂上市，国内尚没有该复方制
剂的生产及上市。参考相关专利［2］，本实验室自制复
方胶囊含 AMO 250 mg、AMB 15 mg。通过查阅文献并
对不同色谱条件进行考察，建立高效液相色谱
(HPLC)法同时测定复方胶囊中两主药的含量及溶出
度。该法实用、准确，可用于该复方胶囊的质量控制。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 Agilent 1100 型高效液相色谱仪(美国
Agilent公司，配四元梯度泵，DAD 检测器，G137PA 自
动脱气机，标准自动进样器，柱温箱，色谱工作站) ;
TG328A型电子分析天平(上海天平仪器厂) ;SHE-Ⅲ
D型循环水真空泵(上海亚荣生化仪器厂) ;ZRS-8G
型智能溶出实验仪(天津市天大天发科技有限公司)。
1． 2 试药 AMO、AMB 标准品均由中国食品药品检
·194·医药导报 2012 年 4 月第 31 卷第 4 期