全 文 ：　ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ　ｔｏｄａｙ［Ｊ］．Ｊ　Ｅｕｒ　Ａｃａｄ　Ｄｅｒｍａｔｏｌ　Ｖｅｎｅｒｅｏｌ，２００９，
２３ （５）：５０５－５１６．
［８］ Ｓｉｎｇｈ　Ｊ，Ｓｉｎｇｈ　Ｓ．Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ　ｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｓｉｓ：ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｅｎｅｔｒａ－
ｔｉｏｎ　ｅｎｈａｎｃｅｒ　ａｎｄ　ｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｏｎ　ｄｒｕｇ　ｔｒａｎｓｐｏｒｔ　ａｎｄ　ｓｕｒｆａｃｅ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ　Ｐｒｏｂｌ　Ｄｅｒｍａｔｏｌ，
１９９５，２２：１７９－１８３．
［９］ Ａｌｖａｒｅｚ－Ｆｉｇｕｅｒｏａ　ＭＪ，Ｄｅｌｇａｄｏ－Ｃｈａｒｒｏ　ＭＢ，Ｂｌａｎｃｏ－Ｍｅｎｄｅｚ
Ｊ．Ｐａｓｓｉｖｅ　ａｎｄ　ｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｔｉｃ　ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ　ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｔｈｏ－
ｔｒｅｘａｔｅ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｐｈａｒｍ，２００１，２１２ （１）：１０１－１０７．
［１０］ 易鸿，梁光华，刘海乐，等．白藜芦醇三甲醚乳胶体外经皮
渗透研究［Ｊ］．中南药学，２０１１，９ （５）：３２４－３２８．
［１１］ 张玲玲，邓意辉，赵静，等．齐多夫定碳酸胆固醇酯脂质体
的制备及性质考察［Ｊ］．中国药剂学杂志，２００６，４ （５）：
１９８－２０５．
［１２］ 谢悦良，张毕奎．柔性纳米脂质体的研究进展［Ｊ］．中国药
房，２００８，１９ （２５）：１９８３－１９８５．
［１３］ Ｈｏｎｅｙｗｅｌ－Ｎｇｕｙｅｎ　ＰＬ，Ｂｏｕｗｓｔｒａ　ＪＡ．Ｔｈｅ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｔｒａｎｓｐｏｒｔ
ｏｆ　ｐｅｒｇｏｌｉｄｅ　ｆｒｏｍ　ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ－ｂａｓｅｄ　ｅｌａｓｔｉｃ　ｖｅｓｉｃｌｅｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｈｕ－
ｍａｎ　ｓｋｉｎ：ａ　ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　Ｒｅ－
ｌｅａｓｅ，２００３，８６ （１）：１４５－１５６．
（收稿日期：２０１２－０６－１９；修回日期：２０１２－０７－０５）
　　作者简介：毛晶磊，女，主管药师，主要从事中药材质量研究工作，Ｔｅｌ：１５３０４８６６９６０，Ｅ－ｍａｉｌ：ｔｎｘ７９＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ　　＊通讯作者：王
文凯，女，馆员，主要从事中医药文献信息检索工作，Ｔｅｌ：１８９４６１８７９５９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｗｋ＠１６３．ｃｏｍ
不同采收期及药用部位的长柱金丝桃中有效成分的含量变化
毛晶磊１，王文凯２ （１．大庆油田总医院，黑龙江　大庆　１６３０００；２．黑龙江中医药大学，哈尔滨　１５００３６）
摘要：目的　考察长柱金丝桃药用部位、采收期对金丝桃苷和金丝桃素的含量变化。方法　采用 ＨＰＬＣ法，色谱
柱为Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｚｏｒｂａｘ　Ｅｘｔｅｎｄ－Ｃ１８ （２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ），金丝桃苷的流动相为乙腈－０．４％磷酸梯度洗脱，柱温
为室温，检测波长３６０ｎｍ，流速１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；金丝桃素流动相为甲醇－０．１ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸二氢钠 （９０∶１０），柱
温为室温，流速为１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长５９０ｎｍ。结果　长柱金丝桃花中金丝桃苷及金丝桃素的含量最高；
长柱金丝桃在５月中旬其有效成分含量达到最高，后又逐渐降低。结论　长柱金丝桃中金丝桃苷和金丝桃素的含量
随着采收时间的不同而不同，而且不同器官中含量差异显著。
关键词：长柱金丝桃；采收季节；金丝桃苷；金丝桃素
中图分类号：Ｒ２８４　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１６７２－２９８１ （２０１２）０８－０５９４－０４
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－２９８１．２０１２．０８．０１１
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｉｎ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．
ｉｎ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐａｒｔｓｈａｒｖｅｓｔｅｄ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ
ＭＡＯ　Ｊｉｎｇ－ｌｅｉ　１，ＷＡＮＧ　Ｗｅｎ－ｋａｉ　２ （１．Ｄａｑｉｎｇ　Ｏｉｌｆｉｅｌｄ　Ｇｅｎｅｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｄａｑｉｎｇ　Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ１６３０００；２．Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈａｒｂｉｎ１５００３６）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ａｎｄ　ｈｙｐｅｒｆｏｒｉｎ　ｉｎ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｉｎ
ｍｅｄｉｃａｔｉｖｅ　ｐａｒｔｓ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａｎ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ．Ｔｈｅ　ａｓｓａｙ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ
ｏｎ　Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｚｏｒｂａｘ　Ｅｘｔｅｎｄ－Ｃ１８ （２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）ｃｏｌｕｍｎ　ｗｉｔｈ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－０．４％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｍｏ－
ｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ（ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ）ａｔ　１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１．Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　３６０ｎｍ　ａｎｄ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ
ｒｏｏｍ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．Ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　ｗａｓ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－０．１ｍｏｌ·Ｌ－１　ｓｏｄｉｕｍ　ｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（９０∶１０）
ａｔ　１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１．Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　５９０ｎｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　ｒｏｏｍ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ａｎｄ　ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｌｏｓｓｏｍ，ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ａｎｄ　ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　ｗａｓ
ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｉｎ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．ｈａｒｖｅｓｔｅｄ　ｉｎ　ｍｉｄ－Ｍａｙ，ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｇｒａｄｕａｌｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ａｎｄ　ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　ｉｎ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．ｃｈａｎｇｅｓ　ｗｉｔｈ　ｓｅａｓｏｎｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．；ｈａｒｖｅｓｔ　ｓｅａｓｏｎ；ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ；ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ
　　长柱金丝桃又名黄海棠、红旱莲，有抗菌消炎、收敛止 血的作用［１］。金丝桃属 （ＨｙｐｅｒｉｃｕｍＬ．）在我国有５５种，
４９５
Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｓｏｕｔｈ　Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ａｕｇｕｓｔ　２０１２，Ｖｏｌ．１０Ｎｏ．８　中南药学２０１２年８月第１０卷第８期
主要分布在华东、华西、陕甘、新疆、贵州等地［２］。目前，
中国药典２０１０年版一部［３］收录的金丝桃属植物为贯叶金丝
桃，主要分布在西南地区，以云南分布最广，在东北地区分
布较少，作为药用植物的仅有２种，即长柱金丝桃 （Ｈｙｐｅ－
ｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．）和乌腺金丝桃 （Ｈ．ａｔｔｅｎｕａｔｕｍ）［４］。近年
来，金丝桃属植物提取物显示出较强的抗抑郁、抗炎、抗菌
活性。主要化学成分为芦丁 （ｒｕｔｉｎ）、槲皮素 （ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）、
金丝 桃 苷 （ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ）和 贯 叶 金 丝 桃 素 （ｈｙｐｅｒｆｏｒｉｎ）
等［５］。近年来由于过度开采，使其资源锐减，为了扩大药用
金丝桃属植物药材开发，本文应用 ＨＰＬＣ法对长柱金丝桃
的主要成分金丝桃素、金丝桃苷进行测定，建立了该有效成
分的测定方法，摸索了黑龙江地区长柱金丝桃的采收期，确
定了药用部位，为东北产的金丝桃属植物的进一步开发提供
依据。
１　仪器与试药
ＬＣ－２０１０Ｃ型 ＨＰＬＣ仪，包括 ＬＣｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱工作站、
ＵＶ－２０１０Ａ检测器、自动进样器、柱温箱、四元低压梯度泵
（日本岛津公司）；ＫＱ－５００ＤＢ型超声波清洗器 （昆山市超
声仪器有限公司）。
甲醇为色谱纯，水为高纯水，其余试剂均为分析纯；金
丝桃苷、金丝桃素对照品 （均购买于成都瑞芬思生物制品公
司，纯度≥９８％）；长柱金丝桃全草于２０１１年从５月份开始
每隔１５ｄ左右采集１次样本，全株采回，直至１０月份。采
集于黑龙江省帽儿山山坡上，黑龙江中医药大学分析教研室
李彦冰老师鉴定为金丝桃属 （Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ）藤黄科长柱金丝
桃 （Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．）。
２　方法与结果
２．１　色谱条件与系统适用性
色谱柱为Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｚｏｒｂａｘ　Ｅｘｔｅｎｄ－Ｃ１８色谱柱 （２５０ｍｍ×
４．６ｍｍ，５μｍ）；金丝桃素流动相甲醇－０．１ｍｏｌ·Ｌ
－１磷酸
二氢钠 （９０∶１０）；检测波长５９０ｎｍ；金丝桃苷流动相乙腈
（Ａ）－０．４％磷酸 （Ｂ）梯度洗脱：０～１０ｍｉｎ，９％ Ａ，１１～
１５ｍｉｎ，９％～１５％ Ａ，１５～４０ｍｉｎ，１５％ Ａ，４１～４５ｍｉｎ，
９％Ａ，检测波长 ３６０ｎｍ；流速 １．０ ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温
３０℃，进样体积１０μＬ。在此条件下金丝桃素与其他成分的
分离度Ｒ＞１．５，保留时间适中，理论板数按金丝桃素计算
应≥３　０００，色谱见图１。
２．２　标准溶液的配制
分别取１．７２ｍｇ的金丝桃素、１．４７ｍｇ的金丝桃苷对照
品，分别加甲醇定容至１０ｍＬ容量瓶中，得到１７２μｇ·
ｍＬ－１的金丝桃素及１４７μｇ·ｍＬ
－１金丝桃苷对照品储备溶
液。取金丝桃苷储备液０、１、２、３、４ｍＬ分别置于５ｍＬ
容量瓶中，加甲醇定容至刻度，得浓度为０、２９．４、５８．８、
８８．２、１１７．６μｇ·ｍＬ
－１对照品溶液。取金丝桃素储备液０、
１、２、３、４ｍＬ分别置于５ｍＬ容量瓶中，加甲醇定容至刻
度，得浓度为０、３４．４、６８．８、１０３．２、１３７．６μｇ·ｍＬ
－１对
照品溶液 （加样回收试验所需金丝桃苷对照品另配，含量为
１．４３０ｍｇ·ｍＬ－１）。
２．３　供试品的制备
图１　长柱金丝桃高效液相色谱图
Ｆｉｇ　１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．
Ａ．金丝桃苷对照品 （ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）；Ｂ．金丝桃素对照品
（ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ）；Ｃ、Ｄ．长柱金丝桃样品 （ｓａｍｐｌｅ）；１．金丝桃苷 （ｈｙ－
ｐｅｒｏｓｉｄｅ）；２．金丝桃素 （ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ）
将长柱金丝桃６０℃烘干，粉碎过６０目筛，各精密称取约
１ｇ，６倍石油醚进行脱脂浸泡１２ｈ，滤过晾干药渣，２０ｍＬ
７５％甲醇超声提取３０ｍｉｎ，进行３次提取，合并提取液
６０℃蒸干，定容至２５ｍＬ容量瓶，过０．４５μｍ滤膜，即得。
２．４　线性关系的考察
分别精密吸取金丝桃苷和金丝桃素储备溶液１０μＬ，注
入高效液相色谱仪。以浓度 （Ｘ，μｇ·ｍＬ
－１）为横坐标，
峰面积积分值 （Ｙ）为纵坐标，分别绘制标准曲线，金丝桃
苷的回归方程为Ｙ＝２．１６０×１０４　Ｘ＋２．８１２×１０４ （ｒ＝
０．９９９　７），线性范围为０～１１７．６μｇ·ｍＬ
－１；金丝桃素的回
归方程为Ｙ＝６．８４８×１０４　Ｘ－２．７８６×１０３ （ｒ＝０．９９９　７），线
性范围为０～１３７．６μｇ·ｍＬ
－１。
２．５　精密度试验
分别取金丝桃苷和金丝桃素对照品溶液，连续进样５
次，每次１０μＬ，测定峰面积。结果金丝桃苷和金丝桃素峰
面积的ＲＳＤ分别为０．４９％和１．２％ （ｎ＝５），表明仪器精密
度良好。
２．６　稳定性试验
精密吸取室温放置的同一批次采集的长柱金丝桃供试品
溶液，分别于０、２、４、６、８、１０、１２ｈ进样１０μＬ，测定
峰面积。结果金丝桃苷和金丝桃素面积的 ＲＳＤ 分别为
２．５％和１．８％ （ｎ＝７），表明供试品溶液在１２ｈ内稳定。
２．７　重复性试验
精密称取同一批号样品６份，每份１．００ｇ，分别按
“２．３”项下方法制备供试品溶液，各进样１０μＬ，测定峰面
５９５
中南药学２０１２年８月第１０卷第８期　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｓｏｕｔｈ　Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ａｕｇｕｓｔ　２０１２，Ｖｏｌ．１０Ｎｏ．８
　积。结果金丝桃苷和金丝桃素峰面积的ＲＳＤ 分别为２．１％
和２．０％ （ｎ＝６），表明本方法重复性良好。
２．８　加样回收试验
精密称取８月２０日所采样品全草 （金丝桃苷、金丝桃素
含量见表３）粉末约１．００ｇ于２５ｍＬ容量瓶中，平行６份，
分别加入等体积的 “２．２”项下金丝桃苷和金丝桃素对照品溶
液，按 “２．３”项下方法制备供试品溶液，按 “２．１”项下色
谱条件分别测定质量分数，计算加样回收率，结果见表１。
表１　金丝桃苷和金丝桃素的加样回收试验结果 （ｎ＝６）
Ｔａｂ　１　Ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ａｎｄ　ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ （ｎ＝６）
成分
（ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）
取样量
（ｓａｍｐｌｅ）
／ｇ
样品含量
（ｃｏｎｔｅｎｔ）
／ｍｇ
加入量
（ａｄｄｅｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ）
／ｍｇ
测得量
（ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｖａｌｕｅ）
／ｍｇ
回收率
（ｒｅｃｏｖｅｒｙ）
／％
平均回收率
（ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ）
／％
ＲＳＤ／％
金丝桃苷 １．００２　５　 ６．１０　 ５．３２　 １１．１４　 ９４．７　 ９８．３　 ３．６
１．０１２　１　 ６．１５　 ５．３２　 １１．６７　 １０４．０
１．１０９　９　 ６．７４　 ５．３２　 １１．８８　 ９６．６
１．１４１　６　 ６．９４　 ５．３２　 １１．９９　 ９４．９
１．１０２　３　 ６．７０　 ５．３２　 １１．９４　 ９８．５
１．０５５　６　 ６．４２　 ５．３２　 １１．７９　 １０１．０
金丝桃素 １．００２　５　 ２．０３　 ２．５８　 ４．５５　 ９７．７　 ９７．５　 ２．７
１．０１２　１　 ２．０４　 ２．５８　 ４．６７　 １０２．０
１．１０９　９　 ２．２４　 ２．５８　 ４．６８　 ９４．６
１．１４１　６　 ２．３１　 ２．５８　 ４．８３　 ９７．７
１．１０２　３　 ２．２３　 ２．５８　 ４．６８　 ９５．０
１．０５５　６　 ２．１３　 ２．５８　 ４．６５　 ９７．７
２．９　样品测定与结果
将不同日期采集的样品 （Ｓ１～Ｓ９）以及８月份采集样本
的花 （Ｓ１０）、茎 （Ｓ１１）、叶 （Ｓ１２）、全草样品，按 “２．３”
项下样品制备方法制备，结果见表２、图２。
表２　金丝桃素及金丝桃苷样品测定结果 （ｎ＝３）
Ｔａｂ　２　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ａｎｄ　ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ
ｉｎ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．（ｎ＝３）
样品
（ｓａｍｐｌｅ）
日期
（ｄａｔｅ）
金丝桃苷
（ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ）
／ｍｇ·ｇ－１
金丝桃素
（ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ）
／μｇ·ｇ－１
Ｓ１　 ２０１１．５．７　 １１．０５ －
Ｓ２　 ２０１１．５．２１　 １２．４３ －
Ｓ３　 ２０１１．６．１０　 １１．２２ －
Ｓ４　 ２０１１．６．２４　 ８．７５　 ４．３２
Ｓ５　 ２０１１．７．１１　 ７．２２　 ３．０５
Ｓ６　 ２０１１．８．２０　 ６．０８　 ２．０２
Ｓ７　 ２０１１．９．５　 ５．８８ －
Ｓ８　 ２０１１．９．２１　 ４．３６ －
Ｓ９　 ２０１１．１０．６　 ４．２５ －
Ｓ１０　 ２０１１．８．２０　 １．１３　 ２．７４
Ｓ１１　 ２０１１．８．２０　 １．０３　 １．５３
Ｓ１２　 ２０１１．８．２０　 ０．１７　 ０．０２２
　　注 （Ｎｏｔｅ）：“－”表示未检出 （“－”ｎｏｔｄｅｔｅｃｔｅｄ）。
图２　长柱金丝桃中金丝桃苷的含量变化
Ｆｉｇ　２　Ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ｉｎ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ａｓｃｙｒｏｎ　Ｌ．
３　讨论
３．１　金丝桃素的含量问题
对于长柱金丝桃中是否含有金丝桃素的问题，本试验在
不同采收时间进行了测定，通过结果 （见表２）可见，在黑
龙江省帽儿山地区６月中旬到８月中旬所采集的长柱金丝桃
样品能够检测出金丝桃素，而其他样品均未检出，而对于能
够检出的样品分别测定不同器官，结果表明，金丝桃素的含
量花＞叶，茎中几乎不含有该成分，这与曾建国等对贯叶连
翘等不同器官的检测结论一致［６－７］。通过吕洪飞等［８］对贯叶
金丝桃的研究表明，金丝桃素的积累和分泌组织的形成有着
一定的联系。长柱金丝桃在生长旺盛的５～６月份，其金丝
桃素的分泌也可能处于其分泌的旺盛阶段，而后随着营养器
官增长的减慢，其分泌量也跟着减少。所以，不同季节的变
化规律及其机制，以及８份以后未检测出金丝桃素是否也和
花期的到来有关，还需一定的研究。对于采摘部位的问题，
虽然花中含有较高含量的金丝桃素和金丝桃苷，但由于花的
产量远小于叶，而叶中的含量仅次于花，因此笔者认为长柱
金丝桃最佳采收季节在６月末至７月初，采摘部位以叶
为宜。
３．２　流动相的考察
对于金丝桃苷的测定，笔者首先考察了中国药典２０１０
年版一部贯叶金丝桃中金丝桃苷含量测定的流动相条件，乙
腈－０．１％磷酸 （１６∶８４），检测波长３６０ｎｍ，但对照品对应
位置峰与其他成分峰不能较好的分离，重复性较差，后对该
方法进行改进，确定为本试验所示色谱条件。
对于金丝桃素的测定，本试验对流动相条件进行了考
察，分别用甲醇－０．４％ （４５∶５５）、磷酸甲醇－０．００６ｍｏｌ·
Ｌ－１磷酸氢二钠 （８７．５∶１２．５，用磷酸调ｐＨ至６．５）、甲醇－
０．１ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸二氢 （９０∶１０）等不同系统进行洗脱，结
果表明本试验所采用的方法为最佳，其相邻峰的分离度＞
１．５，符合分析要求，保留时间较短且分离效果好。
６９５
Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｓｏｕｔｈ　Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ａｕｇｕｓｔ　２０１２，Ｖｏｌ．１０Ｎｏ．８　中南药学２０１２年８月第１０卷第８期
３．３　样品提取条件的考察
本试验对长柱金丝桃的提取条件也进行了考察，分别采
用２５％、５０％、７５％、１００％甲醇对其进行提取，结果表明
７５％甲醇提取效果最佳；在考察７５％甲醇提取的基础上，
又对提取时间及提取方法进行了考察，结果显示超声提取
３０ｍｉｎ时，长柱金丝桃中金丝桃苷已经完全提取，因此采
用体积分数为７５％的甲醇水溶液，超声提取３０ｍｉｎ。


参考文献
［１］ 潘映红，郭宝林，彭勇 ．国产金丝桃属药用植物资源现状及利
用前景［Ｊ］．中药材，１９９３，１６ （３）：１４－１７．
［２］ 中国科学院植物志编辑委员会 ．中国植物志［Ｍ］．５０卷 ．第２
分册 ．北京：科学出版社，１９９０：２－７１．
［３］ 中国药典２０１０年版 ．一部［Ｓ］．２０１０：２１５．
［４］ 崔艳红，李晶 ．金丝桃属植物研究进展及黑龙江省的资源概况
［Ｊ］．东北农业学学报，２００６，３７ （１）：１０５－１１０．
［５］ 郑清明，秦路平，郑汉臣，等 ．国产１１种金丝桃属植物中化
学成分 的 含 量 分 析 ［Ｊ］．第 二 军 医 大 学 学 报，２００３，２４
（４）：４５７．
［６］ Ｚｅｎｇ　ＪＧ，Ｚｈａｎｇ　Ｓ，Ｃｈｅｎ　ＹＬ．Ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｓ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ
ＨＰＬＣ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ　ｏｆ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ｐｅｒｆｏｒａｔｕｍ ［Ｊ］．Ｎｏｒｔｈ－
ｗｅｓｔＰｈａｒｍ　Ｊ，２０００，１５ （４）：１５８－１６２．
［７］ Ｈａｎｇ　Ｑ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ　ｉｓ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ
ｏｆ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ　ｐｅｒｆｏｒａｔｕｍ ［Ｊ］．Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｊ　Ｉｎｔｅｇｒ　Ｔｒａｄｉｔ　Ｃｈｉｎ
Ｗｅｓｔ　Ｍｅｄ，２００４，１４ （１２）：７８０－７８２．
［８］ Ｌｕｈ　Ｆ，Ｈｕ　ＺＨ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ　ｓｔｒｕｃ－
ｔｕｒｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ａｃｃｕｍμＬａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ
ｐｅｒｆｏｒａｔｕｍ ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｂｏｔ　Ｂｏｒｅａｌｅ－Ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉａ　Ｓｉｎ，２００１，２１
（２）：２８７－２９２．
（收稿日期：２０１２－０４－２６；修回日期：２０１２－０５－１４）
　　基金项目：国家药典委员会国家药品标准提高行动计划 （编号２８８）。
作者简介：罗艳，女，硕士研究生，主要从事药品、保健食品质量控制研究，Ｔｅｌ：（０７３１）８２２７５８４７，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｕｏｙａｎ＿０１０３＠ｙａ－
ｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ　　＊通讯作者：钟庆元，女，主任药师，主要从事药品、食品、化妆品质量控制研究，Ｔｅｌ：（０７３１）８２２７５８３６，Ｅ－ｍａｉｌ：
ｙｊｓｚｈｏｎｇ＠１２６．ｃｏｍ
复方益肝灵片定性定量方法研究
罗艳，赵薇，雷玉萍，孟庆玉，李文莉，钟庆元＊ （湖南省食品药品检验研究院，长沙　４１０００１）
摘要：目的　建立复方益肝灵片定性定量方法。方法　采用薄层色谱法鉴别水飞蓟素和五仁醇浸膏；采用高效液相
色谱法测定水飞蓟宾和五味子醇甲的含量。结果　薄层色谱斑点清晰，分离度好，专属性强；水飞蓟宾在
０．０９８　８～１．９７６μｇ （ｒ＝０．９９９　９）与峰面积线性关系良好，平均加样回收率９９．７％，ＲＳＤ为１．７％；五味子醇甲在
０．０９５　１～１．９０２μｇ （ｒ＝０．９９９　９）与峰面积线性关系良好，平均加样回收率１０１．６％，ＲＳＤ为１．７％。结论　本法
简便、可靠、准确，可用于复方益肝灵片的质量控制。
关键词：复方益肝灵片；定性定量方法；薄层色谱法；高效液相色谱法
中图分类号：Ｒ９１７，Ｒ９２７．２　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１６７２－２９８１ （２０１２）０８－０５９７－０５
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－２９８１．２０１２．０８．０１２
Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　Ｆｕｆａｎｇ　Ｙｉｇａｎｌｉｎｇ　Ｐｉａｎ
ＬＵＯ　Ｙａｎ，ＺＨＡＯ　Ｗｅｉ，ＬＥＩ　Ｙｕ－ｐｉｎｇ，ＭＥＮＧ　Ｑｉｎｇ－ｙｕ，ＬＩ　Ｗｅｎ－ｌｉ，ＺＨＯＮＧ　Ｑｉｎｇ－ｙｕａｎ＊ （Ｈｕｎａｎ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｆｏｏｄ
ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　Ｆｕｆａｎｇ　Ｙｉｇａｎｌｉｎｇ　Ｐｉａｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｓｉｌｙ－
ｍａｒｉｎ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｖｅ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｆｒｏｍ　Ｆｒｕｃｔｕｓ　Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａｅ　Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　ｉｎ　Ｆｕｆａｎｇ　Ｙｉｇａｎｌｉｎｇ　Ｐｉａｎ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ＴＬＣ．
Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓｉｌｙｂｉｎ　ａｎｄ　ｓｃｈｉｓａｎｄｒｏｌ　Ａ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｂｙ　ＴＬＣ　ｗａｓ
ｃｌｅａｒ，ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｎｄ　ｗｅｌ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ．Ｔｈｅ　ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｓｉｌｙｂｉｎ　ｗａｓ　ｌｉｎｅａｒ　ａｔ　０．０９８　８－１．９７６μｇ （ｒ＝０．９９９　９），ｔｈｅ
ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９９．７％，ａｎｄ　ＲＳＤ ｗａｓ　１．７％．Ｔｈｅ　ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｓｃｈｉｓａｎｄｒｏｌ　Ａ　ｗａｓ　ｌｉｎｅａｒ　ａｔ　０．０９５　１－
１．９０２μｇ （ｒ＝０．９９９　９），ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　１０１．６％，ａｎｄ　ＲＳＤｗａｓ　１．７％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍ－
ｐｌｅ，ｒｅｌｉａｂｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｆｕｆａｎｇ　Ｙｉｇａｎｌｉｎｇ　Ｐｉａｎ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｆｕｆａｎｇ　Ｙｉｇａｎｌｉｎｇ　Ｐｉａｎ；ｑｕａｌｉｔｙ　ｓｔａｎｄａｒｄ；ＴＬＣ；ＨＰＬＣ
７９５
中南药学２０１２年８月第１０卷第８期　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｓｏｕｔｈ　Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ａｕｇｕｓｔ　２０１２，Ｖｏｌ．１０Ｎｏ．８