全 文 ：天然产物研究与开发 NatProdResDev2008, 20:129-130, 69
文章编号:1001-6880(2008)01-0129-03
　
　
　收稿日期:2006-11-14　　　接受日期:2006-12-27
＊通讯作者 Tel:86-21-54237564;E-mail:cqhu@shmu.edu.cn
针对 RXRα的元宝草抗肿瘤活性成分研究
亓建斌 1 ,王　力 2 ,陈　超 1 ,曾锦章 2 ,胡昌奇 1＊
1复旦大学药学院天然药物化学教研室 , 上海 200032;
2中科院上海生命科学院生茂集团联合研发中心 ,上海 200233
摘　要:在核受体 RXRα药理筛选模型指导下 , 对元宝草(HypericumsampsoniHance)进行抗肿瘤活性成分研
究 , 分离得到 3个化合物 ,利用 MS、NMR等波谱技术鉴定为槲皮素(1)、大黄素-6-甲醚(2)、叶绿素 a(3)。大黄
素-6-甲醚和叶绿素 a针对 RXRα有活性 ,有效浓度分别为 0.1、20 μg/mL, 两者均首次从该属植物中分离得到。
这也是首次以 RXRα为靶点对中草药进行的抗肿瘤活性成分研究。
关键词:RXRα;元宝草;抗肿瘤;大黄素 -6-甲醚;叶绿素 a
中图分类号:R284.2 文献标识码:A
Anti-tumorComponentsTargetingtoRXRαfromHypericumsampsoni
QIJian-bin1 , WANGLi2 , CHENChao1 , ZENGJin-zhang2 , HUChang-qi1＊
1DepartmentofChemistryofNaturalDrugs, SchoolofPharmacy, FudanUniversity, Shanghai200032 , China;
2TheSamostCenter, ShanghaiInstitutesforBiologicalSciencesChineseAcademyofSciences, Shanghai200233 , China
Abstract:Chemicalstudyontheanti-tumorcomponentsfromHypericumsampsoniiwasinvestigatedguidedbyRXRαbi-
oassay.Threecompoundswereobtainedandidentifiedasqucercetin(1), physcion(2), andchlorophylla(3).Physcion
andchlorophylla, isolatedforthefirsttimefromthegenusofHypericum, showedanti-tumoractivitieswiththeconcentra-
tionof0.1and20 μg/mL, respectively.ThisisthefirstreportconcerningtheisolationtargetingtoRXRαofnaturally
occurringanti-tumoragentsfromChineseherbalmedicine.
Keywords:RXRα;Hypericumsampsoni;anti-tumor;physcion;chlorophylla
　　元宝草(HypericumsampsoniHance)系藤黄科
金丝桃属多年生草本植物 ,全草入药 ,具有活血 、止
血 、解毒之功效 。我国长江流域南至台湾均有分
布 [ 1] 。同属植物贯叶连翘 [ H.perforatum(St.John s
wort)]抗抑郁作用的报道 [ 2]掀起了人们研究金丝桃
属植物的热潮 ,目前对元宝草化学成分的研究报道
较多[ 3-8] ,主要有口山酮类 、二蒽醌类 、简单二苯酮
类 、间苯三酚类化合物等 ,其中口山酮类[ 3]和间苯
三酚类 [ 7]化合物显示弱的抗肿瘤活性 。
近来研究发现 ,元宝草氯仿部位提取物能够诱
导核受体 RXRα由细胞核转移到细胞质 ,引起细胞
凋亡 ,具有广阔的抗癌前景 [ 9] 。作为核受体家族的
一员 , RXRα在细胞生长 、增殖 、分化和凋亡的调控
中发挥着重要的作用 。RXRα的特异性激动剂 Tar-
gretin已经通过美国 FDA批准 ,用于治疗皮肤 T细
胞淋巴瘤[ 10] ,并在肺癌 [ 11]和乳腺癌[ 12]的临床试验
中取得了良好的效果 ,所以针对 RXRα的抗肿瘤药
物的开发已引起了人们的广泛的关注。
在此背景下 ,我们利用 RXRα药理筛选模型 ,
对元宝草进行活性跟踪下的化学研究 ,并从中分离
得到一个蒽醌类化合物和卟啉环类化合物针对
RXRα有活性 ,分别鉴定为大黄素 -6-甲醚(2)、叶绿
素 a(3),两者均首次从该属植物中分离得到 ,而槲
皮素(1)针对 RXRα无活性。这是首次以 RXRα为
靶点对中草药进行抗肿瘤活性成分研究 。
1　仪器与材料
　　NicoletAVATAR 360型红外光谱仪;Varian
MercuryPlus400型核磁共振光谱仪;Agilent5973N
型质谱;层析用硅胶 200 ～ 300目(烟台市芝罘黄务
硅胶开发试验厂);预制硅胶板 HSG, HSGF254(烟
台市芝罘黄务硅胶开发试验厂);显色剂:20%硫酸
溶液 ,碘 ,紫外灯 。
元宝草药材购于四川省药材公司 ,采集于 2004
年 7月 ,经复旦药学院顾关云教授鉴定 ,样品标本
(HS-1)保存于本教研室 。
2　提取与分离
　　提取与分离是核受体 RXRα活性测试指导下
进行 ,取干燥的元宝草药材 150 g,用 95%乙醇回流
提取 2次(每次 800 mL)合并提取液 ,减压浓缩至
干 ,得 15.4 g浸膏;将浸膏悬浮于 100 mL水中 ,依
次用石油醚(60 ～ 90℃)、氯仿 、乙酸乙酯 、正丁醇等
体积萃取 3次 ,减压浓缩至干 ,得活性部位(氯仿浸
膏)4.8 g,有效浓度为 40μg/mL。将活性部位用硅
胶(200 ～ 300目)柱层析 ,以氯仿 /丙酮梯度洗脱 ,薄
层检测 ,分成 11个部分(Fr1 ～ Fr11)及化合物 1(15
mg);生物活性测试 , Fr2、Fr6有活性(40 μg/mL),
化合物 1无活性;将 Fr2(580 mg)进一步用硅胶
(200 ～ 300目)柱层析 ,以石油醚 /氯仿梯度洗脱 ,薄
层检测 ,分成 6个部分(Fr2-1 ～ 6),继续进行生物活
性测试 , Fr2-3有活性 (10 μg/mL);将 Fr2-3(6.7
mg)用丙酮重结晶 ,得化合物 2 (4.8mg),有效浓度
可达 0.1 μg/mL;将 Fr6(397 mg)进一步用硅胶
(200 ～ 300目)柱层析 ,以石油醚 /丙酮 10:1洗脱 ,
薄层检测 ,得化合物 3,有效浓度为 20μg/mL。
活性测试方法是利用免疫组织化学的原理 ,参
照文献 [ 9]进行 。
3　结构鉴定
　　槲皮素 (1)　黄色针状结晶(CH3OH)。 EI-MS
m/z:302(M+, 100)。1HNMR(400 MHz, CD3OD)δ:
6.18(1H, d, J=2.0 Hz, 6-H), 6.38(1H, d, J=2.0
Hz, 8-H), 6.88 (1H, d, J=8.6 Hz, 5′-H), 7.62
(1H, dd, J=8.61, 1.96 Hz, 6′-H), 7.73 (1H, d, J=
2.4Hz, 2′-H),与槲皮素的氢谱数据 [ 6]一致 。
大黄素 -6-甲醚 (2)　黄色针状结晶(CHCl3),
EI-MSm/z:284(M+, 100)。1H NMR(400 MHz,
CDCl3)δ:2.45 (3H, s, 3-Me), 3.94(3H, s, 3-OMe),
6.69 (1H, d, J=2.5Hz, 5-H), 7.08(1H, m, 2-H),
7.37 (1H, d, J=2.5Hz, 7-H), 7.63 (1H, d, J=1.2
Hz, 4-H), 12.13(1H, s, 1-OH或 8-OH), 12.33(1H,
s, 8-OH或 1-OH),与大黄素-6-甲醚的氢谱数据[ 13]
一致 , 用 TLC与已知标准品对照 Rf值相同。
　　叶绿素 a(3)　绿色粉末状固体 , 1HNMR(400
MHz, CDCl3)与叶绿素 a氢谱数据一致[ 14] ,用 TLC
与已知标准品对照 Rf值相同 。
4　结果与讨论
　　活性化合物的发现揭示了元宝草中能够诱导
RXRα出核 ,引起细胞凋亡可能的抗癌作用物质基
础。对大黄素 -6-甲醚的抗癌作用的报道不多 [ 15] ,而
对其进行抗癌机理的研究报道更是少之又少[ 16] 。
叶绿素及其衍生物在医药 、食品 、保健等方面都具有
极广泛的应用 ,关于其抗癌作用已有许多报道[ 17] ,
这一发现会加深对叶绿素抗癌作用机理的理解。
对于化合物如何能诱导 RXRα出核的作用机
理尚不清楚 ,这一发现必将会促进核受体 RXRα作
用机理的研究 。槲皮素被认为是一种钙调素拮抗
剂 ,其抗癌作用与钙 -钙调素复合物的直接作用有
关[ 18] ,但槲皮素针对 RXRα并没有活性。
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130 天然产物研究与开发　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　Vol.20
Fig.1　Compounds1-4isolatedfromAcanthopanaxsieboldianusformaaleofolium
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