全 文 :[分 析]
元宝草金丝桃素含量的分析
曾虹燕1 , 周朴华2 , 侯团章3
(1.湘潭大学化学化工学院 ,411105湖南 湘潭市;2.湖南农业大学理学院 , 湖南长沙 410128;3.湖南宏生堂
制药有限公司 湖南长沙 410014)
关键词:元宝草;金丝桃素;HPLC
摘要:目的:了解元宝草中不同部位金丝桃素含量。 方法:建立了用 HPLC 法测定元宝草和贯叶连翘不同部位中金丝桃
素含量的方法。 Novapak C18柱;流动相:甲醇∶乙醇∶0.1mmol·L -1NaH2SO4(200∶300∶100);流速 1.0mL·min-1;柱温 30
°C;检测波长 588nm。结果:元宝草有花植株和花中金丝桃素的含量与贯叶连翘基本相近。结论:有可能从之宝草中筛选
出金丝桃素含量更高的植株。
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2003)01-0058-02
Determination of hypericin in Hypericum sampsonii
ZENG Hong-yan , ZHOU Pu-hua2 , HOU Tuang-zang3
(1.S chool of Chem istry and Chemica l Engineering , X iangtan Universi ty 411105 , China;2 .Department of Natural S cience of Hunan Agr icu l-
ture U niversity 410128 , China;3 .Hunan Hong Sheng Tang Pharmaceutical Co., Ltd Changsha 410014 , China)
Key words:Hypericum sampsonii;hypericin;HPLC
Abstract:Objective:To explore the contents of hypericin f rom different parts of Hypericum sampsonii.
Methods:The hypericin in Hypericum sampsonii and H.Off icinalis were measured by HPLC with Novapak C18
column , mobile phase(methanol∶ethanol∶0.1mol·L-1NaH2SO4=200∶300∶100), f low rate 1.0mol·L-1 , col-
umn temperature at 30°C , wavelength at 588nm.Results:Contents of H.Sampsonii in flow er and flower itself
w ere equal content to H.officinalis.Conclusion:It is possible to sift out the plant of H.Sampsonii w ith mo re
Hypericin.
收稿日期:2002-01-12
作者简介:曾虹燕 ,女 ,博士 ,副教授 ,研究方向:天然产物有效成分分高 ,提取及植物组织培养。电话:0732-8293589。
元宝草(Hypericum sampsonii H.)为藤黄科金
丝桃属(Hypericum L.)的多年生药用植物 ,为中国
特有种[ 2] ,传统理论认为其有治内出血 、抗风湿 、调
经 、止血生肌 、治肝炎等功效。其有效成分金丝桃素
类还具抗忧郁 、抑制中枢神经等药理作用[ 1] 。Mi-
cali[ 4 , 5]等分别报道了测定金丝桃属贯叶连翘中金丝
桃素的含量的方法 ,但测定元宝草中金丝桃素的含
量的方法未见报道 ,本文采用 HPLC测定元宝草中
金丝桃素的含量 ,为开发该种资源和质检提供依据 。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
Perkin-Eimer 公司高效液相色谱仪 , LC-295 紫
外检测器 , Plus-1022色谱工作站 。乙腈为色谱纯 ,
其他试剂均为分析纯 ,水为重蒸水 。金丝桃素对照
品(Sigma 公司购入)。
样品:元宝草采自湖南农业大学校区 、试验田及
本人组培的试管苗 ,贯叶连翘试管苗(外植体来自湖
南宏生堂制药厂试验田)。
1.2 色谱条件
大连依利特公司 Novapak C18柱(200mm ×
4.6mm);流动相:甲醇-乙醇-0.1mol·L -1 NaH2SO4
(200∶300∶100);流速:1.0mL·min-1;柱温:30°C;检
测波长:588nm 。
1.3 线性关系
精密称取 2.5mg 的金丝桃素对照品于 25mL
量瓶中 ,用吡啶-甲醇液(1∶9)溶解并稀释至刻度。
用微量注射器吸取该溶液 2.5 , 10 , 15 , 20 , 25μL 进
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中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
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Vol.25 No.1
样 ,以进样量为横坐标 ,峰面积为纵坐标进行回归处
理 ,得回归方程:y =38707x-8804 , r=0.9991。说
明进样量在 25 ~ 250ng范围内呈良好线性关系。
1.4 回收率实验
取样品粉末 3份 ,分别加不同量的金丝桃素 ,按
样品测定方法操作 , 金丝桃素的平均回收率为
100.27%,RSD=3.01%。
1.5 精密度实验
取同一供试液连续进样 8次 , RSD =2.30%。
取干燥样品研细(45°C烘 4h),精密称取 0.5g ,
置 25mL 量瓶中 ,加吡啶-甲醇液(1∶9)20mL ,超声
提取 0.5h ,冷却至室温 ,再加吡啶-甲醇液至 25mL ,
滤膜过滤 ,即得供试品溶液 。取新鲜样品剪碎 ,精密
称取 2.0g ,置于 50mL 锥形瓶 ,加吡啶-甲醇液(1∶9)
25mL ,超声提取 0.5h ,趁热过滤至 50mL 量瓶中 ,再
用吡啶-甲醇液 10mL 洗涤 ,超声提取 2min ,趁热合
并滤液。再重复一次 ,冷却后定容。测定结果见表
1 ,供试品及对照品色谱图见图 1。
图 1 元宝草 、贯叶连翘不同部位金丝桃素含量的 HPLC 分析
Fig.1 HPLC analy sis on hypericin of H.sampsonii and H.per foratum in various par ts
表 1 元宝草和贯叶连翘不同部位金丝桃素的含量
Table 1 Hypericin contents of various parts of H.sampsonii
and H.perforatum
序号
No.
材料
Sample
贯叶连翘的百分含量
C ontent in weight of
H.per foratum(%)
元宝草的百分含量
Content in w eight of
H.sampsoni i(%)
1 幼株(12cm tall) 0.027[ 3] 0.020
2 有花植株 0.036~ 0.08[ 3] 0.047
3 花 0.09~ 0.12[ 3] 0.077
4 叶 0.019[ 3] 0.006
5 试管苗(9~ 10cm) 0.014 0.013
6 果实 - 0.020
7 愈伤组织 - 未检出
8 丛芽 - 0.005
2 结果与讨论
2.1 从表 1可知 ,元宝草与贯叶连翘幼株 、有花植
物和花中的金丝桃素含量基本相似;我们测定发现
元宝草叶的含量较低 ,可能与我们选材时采摘的季
节有关 ,同时其叶来自于结果植物 ,这可能也是叶含
量低的原因。
2.2 元宝草试管苗与贯叶连翘的试管苗中金丝桃
素含量几乎相同(约 0.014%),说明元宝草与贯叶
连翘在生长初期它们积累金丝桃素程度相同。Be-
nigni等[ 3]报道 ,不同地理位置贯叶连翘金丝桃素的
含量有较大差异 ,我们仅研究了长沙地区元宝草中
金丝桃素的含量 ,下一步应通过对我国元宝草的资
源调查找到更高含量的元宝草种质资源。
2.3 我们测定了元宝草中愈伤组织和丛芽中的金
丝桃素含量 ,愈伤组织未检出 ,丛芽的含量也比较
低 ,说明通过组织大培养诱导生产金丝桃素的可能
性较小 。
2.4 本测定方法简单易行 ,可作为药物中金丝桃素
成分鉴定和定量参考。
综上说述 ,长沙地区元宝草中金丝桃素的含量
还是较高的 ,具有开发价值 。
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