全 文 ：石榴皮炮制前后总鞣质及鞣花酸、安石榴苷含量变化研究
崔园园１，陈志敏１，张　美１，熊　瑞１，李文兵２，胡昌江１＊
（１．成都中医药大学，四川 成都６１１１３７；２．四川新绿色药业科技发展股份有限公司，四川 成都６１００８１）
摘　要：目的：比较石榴皮炮制前后总鞣质、鞣花酸、安石榴苷的含量变化，拟阐明炮制对石榴皮中鞣质
类成分的影响。方法：采用紫外可见分光光度计法测定鞣质的含量，高效液相色谱法测定鞣花酸、安石
榴苷的含量，对石榴皮生品、炒黄品和炒炭品进行比较。结果：不同批次石榴皮炮制前后鞣质的平均含
量分别为：生品１５．０３％、炒黄品１７．５４％、炒炭品１１．０７％；鞣花酸的平均含量分别为：生品４．３３％、炒
黄品４．２０％、炒炭品４．４８％；安石榴苷的平均含量分别为：生品３８．７６％、炒黄品５０．２３％、炒炭品
１６．４５％。结论：炮制对石榴皮中鞣质类成分的含量有显著影响。
关键词：石榴皮；炮制；鞣质；鞣花酸；安石榴苷
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１５）２１－００３８－０３
ＤＯＩ：１０．１１９５４／ｙｔｃｔｙｙ．２０１５２１０１６
收稿日期：２０１５－０５－３０
作者简介：崔园园（１９９１－），成都中医药大学硕士研究生，研究方向为中药炮制与制剂。
通讯作者：胡昌江（１９５２－），成都中医药大学教授、博士生导师，研究方向为中药炮制学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｈｃｃｊ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
　　石榴皮为石榴科植物石榴Ｐｕｎｉｃａ　ｇｒａｎａｍｍ Ｌ．的干燥
果皮，其性温，味酸、涩，具有涩肠止泻、止血、驱虫等作用，
在民族医药中得到广泛使用：石榴皮生品长于驱虫、涩精、
止带，多用于治疗虫积腹痛、滑精、白带、脱肛、疥癣［１］；炒后
收涩作用增强［２］，多用于指肠风下血。
石榴皮中鞣质类成分占总重量的１０％～２０％［３］，是石
榴皮的重要组成成分，是影响石榴皮质量的主要因素。国
内外研究［４－６］结果表明，安石榴苷、鞣花酸是石榴皮鞣质类成
分的主体，其含量远远高于没食子酸等其他鞣质成分，可用
来评价石榴皮的质量。而炮制后以上两种成分有何变化、
对石榴皮功效、质量有无影响目前尚无报道。为此，本实验
以总鞣质、安石榴苷和鞣花酸为指标，建立含量测定方法，
拟作为石榴皮饮片炮制后评价的质量标准。
１　仪器与试药
１．１　仪器
ＬＣ－２０ＡＴ型高效液相色谱仪（日本岛津），ＴＵ－１９５０型
紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司），
ＫＱ５２００ＤＢ型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公
司），ＢＰ２１１Ｄ型电子天平，高速粉碎机（永康市溪岸五金药
具厂）。
１．２　药材与试剂
３个批次的石榴皮生品、炒黄品和炒炭品购自四川国强
中药饮片有限公司，批号分别为１４１１０１、１４１１０２、１４１１０３，编
号１、２、３。没食子酸（批号ＴＯＯＰ－Ｚ８７１），鞣花酸（

批号
此，使用前的密闭性和流通性检查很重要。另外，由于大孔
吸附树脂和聚酰胺洗脱能力均随乙醇浓度的增加而增加，
因此，通过乙醇不同浓度由低到高进行梯度洗脱，能分离出
不同的化合物，在本实验中最终分离出大黄素－８－Ｏ－β－Ｄ－葡
萄糖苷。
５　结论
通常蒽醌类化合物的分离由于氧化铝可与其产生络合
而多采用硅胶柱色谱法，但从虎杖中分离大黄素－８－Ｏ－β－Ｄ－
葡萄糖苷的实验中发现，硅胶可破坏该成分，使分离复杂化
并使提取率降低，因此，通过本实验寻找到了适宜进行大黄
素－８－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷分离纯化的方法。
参考文献：
［１］　陈万生，徐江平，殷学平．大黄素－８－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷的新用
途：中国，９９１１９９５０２２６［Ｐ］．
［２］　张喜云．虎杖的化学成分、药理作用与提取分离［Ｊ］．天津药
学，１９９９，１１（３），１３－１４．
［３］　裴莲花，吴学，金光洙．虎杖化学成分及药理作用研究现状
［Ｊ］．延边大学医学学报，２００６，２９（２）：１４７－１４９．
［４］　黄远芬，李蓓蓓，罗霄山．虎杖及其有效成分药理研究进展
［Ｊ］．广东药学，２０００，１０（６）：１３－１５．
［５］　汤毅，邹恒琴．虎杖的化学及药理作用研究概况［Ｊ］．中药材，
１９９３，１６（１）：４２－４４．
［６］　冯雷．虎杖研究新进展［Ｊ］．医药论坛杂志，２００３，２４（９）：７８－
７９．
［７］　牟淑慧．大黄素－８－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷制备方法的探索［Ｄ］．北
京：北京中医药大学，２００７．
（责任编辑：魏　晓）
—８３—
１４６６８），安石榴苷（批号 Ｐ００２３）对照品，甲醇（色谱纯），水
（纯净水），其他试剂均为分析纯。
２　方法与结果
２．１　鞣质含量测定
按照２０１０年版中国药典一部石榴皮项下鞣质含量测
定法测定，结果见表１。
２．２　鞣花酸、安石榴苷含量测定
２．２．１　对照品溶液制备　分别精密量取鞣花酸、安石榴
苷对照品１．０７ｍｇ、５．４０ｍｇ，置５ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解并
稀释至刻度，摇匀，即得。
表１　石榴皮不同炮制品鞣质类成分的含量测定 （％）
样品号 鞣质含量 平均含量 鞣花酸含量 平均含量 安石榴苷含量 平均含量
生品１　 １８．５８　 ４．１３　 ３９．４７
生品２　 １１．１６　 １５．０３　 ４．１６　 ４．１７　 ３９．７４　 ３８．７６
生品３　 １５．３６　 ４．２０　 ３７．０８
炒黄品１　 １５．４３　 ４．１１　 ４９．２０
炒黄品２　 １８．５７　 １７．５４　 ４．２１　 ４．２０　 ４９．９９　 ５０．２３
炒黄品３　 １８．６２　 ４．２８　 ５１．５１
炒炭品１　 １１．１６　 ４．６６　 １６．７３
炒炭品２　 １１．１７　 １１．０７　 ４．５９　 ４．５８　 １５．９７　 １６．４５
炒炭品３　 １０．８７　 ４．４９　 １６．６７
２．２．２　供试品溶液制备　分别精密称定各样品粉末（过
３号筛）约０．２ｇ，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇５０ｍＬ盖塞称
重，超声３０ｍｉｎ（２５０Ｗ，２５ｋＨｚ），放冷，再次称重，补足重量，
摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
２．２．３　色谱条件　Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃ１８色谱柱（４．６ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μｍ），流动相甲醇－０．４％磷酸梯度洗脱，如表２所
示，流速１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测器检测波长２７０ｎｍ，柱温
２５℃。
表２　流动相梯度洗脱程序 （％）
时间ｔ（ｍｉｎ） 甲醇 ０．４％磷酸
０　 ５　 ９５
１５　 ３６　 ６４
２０　 ６０　 ４０
２３　 ２　 ９８
２７　 ５　 ９５
３０　 ５　 ９５
２．２．４　系统适应性试验　取对照品溶液和供试品溶液，
在上述色谱条件下进行分析，结果对照品色谱峰与其他峰
均能达到基线分离，供试品色谱峰的保留时间和峰形与对
照品一致，表明此分析条件可行。结果见图１。
Ａ．安石榴苷和鞣花酸混合对照品；Ｂ．供试品；１．α－安石榴苷；２．β－安石
榴苷；３．鞣花酸
图１　混合对照品和供试品溶液的液相色谱
２．２．５　线性关系考察　取上述混合对照品溶液适量，过
０．４５μｍ微孔滤膜，分别进样４、６、８、１０、１２、１４、１６μＬ，按上
述条件进行检测，测定各色谱峰的峰面积。以进样量为横
坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。鞣
花酸：Ｙ＝３９３　７３１ｘ＋４３１　７２１（ｒ＝０．９９９　４）；安石榴苷：Ｙ＝
１４　５４４ｘ＋７　４１５．５（ｒ＝０．９９９　５）和Ｙ＝１８　８３６ｘ＋３８　８６７（ｒ
＝０．９９９　５）。结果表明鞣花酸、安石榴苷分别在０．８５６～
３．４２４μｇ、４．３２～１７．２８μｇ线性关系良好。
２．２．６　精密度试验　取对照品溶液，按色谱条件重复进
样５次，进样量为１０μＬ，计算得 ＲＳＤ 分别为 ０．９９％、
１．１９％，表明仪器精密度良好。
２．２．７　稳定性试验　取石榴皮生品样品，按照供试品溶
液的制备方法制得供试品溶液，分别在０、２、４、８、１２、２４ｈ进
样，每次进样量１０μＬ，计算得ＲＳＤ分别为１．３４％、１．９１％，
表明样品溶液在２４ｈ内稳定。
２．２．８　重复性试验　取石榴皮生品０．２ｇ，精密称取５份，
按照供试品溶液的制备方法制备，分别按色谱条件进样，进
样量为１０μＬ，计算得ＲＳＤ分别为１．００％、１．０５％。表明本
方法的重复性良好。
２．２．９　加样回收率试验　取石榴皮生品样品５份，各
２０ｍｇ，精密 称 定，分 别 精 密 加 入 混 合 对 照 品 鞣 花 酸
０．９６３ｍｇ，安石榴苷７．９６０ｍｇ，按“２．２．２”项下供试品溶液的
制备方法制备，按含量测定方法测定含量，计算回收率，结
果见表３、表４。
２．２．１０　样品含量测定　取３批石榴皮不同炮制品样品，
分别按“２．２．２”项下方法制备供试品溶液，照上述色谱条件
进样１０μＬ测定，计算含量，结果见表１。由表１可见，石榴
皮不同炮制品中鞣质和安石榴苷的含量显著不同，炒黄品
中鞣质、鞣花酸和安石榴苷的总百分含量较炒炭品高，说明
加热炮制对石榴皮中鞣质类成分含量有显著影响。
３　结论
中国药典规定石榴皮中所含鞣质不得低于１０．０％［７］。
本试验所得：石榴皮３种炮制规格饮片中鞣质的含量都达
到药典要求，且炒炭品中鞣质含量降低，鞣花酸含量升高。
这与文献［８－９］报道的在加热炮制过程中，石榴皮可水解鞣
质的苷键或酯键断裂，分解产生游离的鞣花酸等成分的试
验结果相吻合。中药炒炭主要发挥止血的作用，传统认
—９３—
为：鞣质是“炭药止血”的物质基础，鞣质增加则止血作用
增强；有研究［１０］表明鞣花酸具有凝血作用，是一种有效的
凝血剂，且小分子的鞣花酸更有利于人体吸收。石榴皮炒
炭后止血作用增强是鞣质和鞣花酸等成分共同作用的结
果，但石榴皮炭炮制加工到何种程度时止血作用最强还有
待研究。
表３　鞣花酸加样回收率 （ｍｇ）
Ｎｏ 样品重量 样品含量 加入对照品量 实测值 回收率（％） 平均回收率（％） ＲＳＤ（％）
１　 ２０．０７０　 ０．９０２　 ０．９６３　 １．８３０　 ９６．３７０
２　 ２０．０５０　 ０．９０１　 ０．９６３　 １．８１６　 ９５．０２０
３　 ２０．０５０　 ０．９０１　 ０．９６３　 １．８１５　 ９４．８７０　 ９６．６１０　 ２．６４０
４　 ２０．０２０　 ０．８９９　 ０．９６３　 １．８２１　 ９５．７７０
５　 ２０．０７０　 ０．９０２　 ０．９６３　 １．８７５　 １０１．０４０
表４　安石榴苷加样回收率 （ｍｇ）
Ｎｏ 样品重量 样品含量 加入对照品量 实测值 回收率（％） 平均回收率（％） ＲＳＤ（％）
１　 ２０．０７０　 ８．０７９　 ７．９６０　 １５．５３９　 ９３．７２０
２　 ２０．０５０　 ８．０７１　 ７．９６０　 １６．０４７　 １００．２００
３　 ２０．０５０　 ８．０７１　 ７．９６０　 １５．９１３　 ９８．５２０　 ９７．０２０　 ２．８２０
４　 ２０．０２０　 ８．０５９　 ７．９６０　 １５．５９１　 ９４．６２０
５　 ０．２００７　 ８．０７９　 ７．９６０　 １５．８８２　 ９８．０３０
　　大量现代药理研究表明石榴皮鞣质类成分可有效预防
和治疗心脑血管疾病，在抗菌、抗病毒，治疗肿瘤、胃肠道疾
病，调节免疫等方面具有显著效果［１１］。本次实验结果显示，
以总鞣质、安石榴苷和鞣花酸为指标，石榴皮炒黄品中鞣质
类成分含量较炒炭品高。而两种炮制品在主治、功效上有
何差异，还需进一步实验研究。本实验建立同时测定石榴
皮中安石榴苷和鞣花酸含量的高效液相色谱方法，灵敏度
高，分离度好，测定迅速，结果准确，为石榴皮饮片的炮制和
质量控制提供了实验依据。
参考文献：
［１］　贾天柱．中药炮制学［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，２００８：
１４５．
［２］　福建省卫生厅．福建省中药炮制规范［Ｓ］．福建：福建科学技
术出版社，１９８８：１２５．
［３］　杨丽平，杨永红．石榴皮的研究进展［Ｊ］．云南中医中药杂志，
２００４，２５（３）：４５．
［４］　ＪＩＭＥＮＥＺ　ＤＥＬ　ＲＩＯ　Ｍ，ＲＡＭＡＺＡＮＯＶ　Ａ，ＳＩＫＯＲＳＫＩ　Ｓ，ｅｔ
ａ１．Ａ　ｎｅｗｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｓｔａｎｄａｒｔｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅａｌｔｈ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ
ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ　ｆｒｕｉｔ（Ｐｕｎｉｃａ　ｇｒａｎａｔｕｍ）ｅｘｔｒａｃｔ［Ｊ］．Ｊ　Ｇｅｏｒｇｉａｎ
Ｍｅｄ　Ｎｅｗｓ，２００６（１４０）：７０．
［５］　刘振平，陈祥贵，杨潇，等．ＲＰ－ＨＰＬＣ同时测定石榴皮提取
物中的３种鞣质成分［Ｊ］．中国中药杂志，２０１１，３６（１９）：２６４７．
［６］　蔡霞，刘悦，张芳芳，等．石榴的化学成分与质量控制研究进
展［Ｊ］．世界科学技术———中医药现代化，２０１４，１６（１）：１２３－
１２８．
［７］　国家药典委员会．中华人民共和国药典［Ｍ］．北京：化学工业
出版社，２０１０：８７．
［８］　崔翠翠，张学兰，李慧芬．炮制对石榴皮中没食子酸、鞣花酸
和鞣质含量的影响［Ｊ］．中成药，２０１０，３（４）：６１５．
［９］　周倩，戴衍朋，孙立立．石榴皮在炒炭过程中没食子酸和鞣花
酸含量变化规律的研究［Ｊ］．中国中药杂志，２０１４，３９（２２）：
４３５１．
［１０］　ＴＡＫＵＯ　Ｋ，ＩＳＨＩＤＡ　Ｈ，ＹＯＫＯＴＡ　Ｍ　ｅｔ　ａｌ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ａｎｔｉ－
ｈｅｍｏｒ　ｈａｇｉｃ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ｉｎ　ｈｅｒｂｓ　ｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ　ａｓ　ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃｓ　ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｈｅｍｏｒｒ　ｈａｇｉｃ　ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ　ｉｎ　ｓａｎ－
ｇｕｉｓｏｒｂａ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ　Ｌ［Ｊ］．Ｃｈｅｍ　Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｅｔｉｎ，１９８４（３２）：
４４７８－４４８１．
［１１］　付军，李正．石榴皮鞣质的药理学研究进展［Ｊ］．中国药业，
２０１１，２０（２４）：９３－９４．
（责任编辑：余　婷）
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｔａｎｎｉｎｓ、Ｅｌａｇｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　Ｐｕｎｉｃａｌａｇｉｎ
ｉｎ　Ｇｒａｎａｔｕｍ　Ｂｅｆｏｒｅ　ａｎｄ　Ａｆｔｅｒ　Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ
Ｃｕｉ　Ｙｕａｎｙｕａｎ，Ｈｕ　Ｃｈａｎｇｊｉａｎｇ，Ｃｈｅｎ　Ｚｈｉｍｉｎ１，Ｚｈａｎｇ　Ｍｅｉ　１，Ｘｉｏｎｇ　Ｒｕｉ　２，Ｗｅｎ　Ｊｉａｎｘｉａ１＊
（Ｃｈｅｎｇｄｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ　６１１１３７，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　Ｇｒａｎａｔｕｍ　ｂｅｆｏｒｅ　ａｎｄ　ａｆｔｅｒ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔａｎｎｉｎｓ，ｅｌａｇｉｃ　ａｃｉｄｓ，ｐｕｎｉｃａｌａ－
ｇｉｎｓ，ｉｎｔｅｎｄｓ　ｔｏ　ｃｌａｒｉｆｙ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｏｎ　Ｇｒａｎａｔｕｍ　ｉｎ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＵＶ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉ－
ｎｉｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔａｎｎｉｎｓ，ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｅｌａｇｉｃ　ａｃｉｄ，ｐｕｎｉｃａｌａｇｉｎｓ，ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｒａｗ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｆｏｒ
Ｇｒａｎａｔｕｍ，ｔｈｅ　ｆｒｉｅｄ　ｙｅｌｏｗ　ｇｏｏｄｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｒｉｅｄ　ｃａｒｂｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂａｔｃｈｅｓ　ｏｆ
Ｇｒａｎａｔｕｍ　ｂｅｆｏｒｅ　ａｎｄ　ａｆｔｅｒ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ａｒｅ　ａｓ　ｆｏｉｏｗｓ：Ｒａｗ　ｐｒｏｄｕｃｔ　１５．０３％，Ｆｒｉｅｄ　ｙｅｌｏｗ　ｐｒｏｄｕｃｔ　１７．５４％，Ｆｒｉｅｄ　ｃａｒｂｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ
１１．０７％；Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｅｌａｇｉｃ　ａｃｉｄｓ：Ｒａｗ　ｐｒｏｄｕｃｔ　４．３３％，Ｆｒｉｅｄ　ｙｅｌｏｗ　ｐｒｏｄｕｃｔ　４．２０％，Ｆｒｉｅｄ　ｃａｒｂｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　４．４８％；Ｔｈｅ
ａｖｅｒａｇｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｐｕｎｉｃａｌａｇｉｎｓ：Ｒａｗ　ｐｒｏｄｕｃｔ　３８．７６％，Ｆｒｉｅｄ　ｙｅｌｏｗ　ｐｒｏｄｕｃｔ　５０．２３％，Ｆｒｉｅｄ　ｃａｒｂｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　１６．４５％。Ｃｏｎｃｌｕ－
ｓｉｏｎ：ｔｈｅｒｅ　ｉｓ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｎ　Ｇｒａｎａｔｕｍ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｇｒａｎａｔｕｍ；Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ；Ｔａｎｎｉｎ；Ｅｌａｇｉｃ　Ａｃｉｄ；Ｐｕｎｉｃａｌａｇｉｎ
—０４—