全 文 ：收稿日期:2005-07-01;　修订日期:2006-01-20
作者简介:刘志国(1980-),男(汉族),吉林蛟河人 ,现在读长春中医学院
2004级硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事中药药剂学工作.
青风藤中青藤碱的提取工艺及分析方法研究进展
刘志国 , 王艳艳
(长春中医学院 ,吉林 长春　130117)
摘要:目的 介绍青藤碱主要的提取方法和分析测定方法。方法 通过查阅近年来国内外有关青藤碱的文献资料 ,对不同
的提取方法和分析测定方法进行综述。结果 青藤碱作为一种重要的抗炎 、抗心律失常药物 ,已得到国内外学者的广泛关
注 , 并已建立起较为完善的提取和分析检测方法。结论 对于青藤碱的研究 ,必将产生深远的意义和广阔的市场前景。
关键词:青风藤;　青藤碱;　提取;　分析方法
中图分类号:R284.2　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2006)05-0831-01
　　青藤碱为防己科植物青风藤药材中的主要有效成分 [ 1] 。具
有抗炎 、镇痛 、抗风湿及免疫抑制等作用 [ 2] 。是目前所知的植物
中最强的组胺释放剂之一。近年来 , 又通过现代药理与中医病机
的汇通思维 , 把青藤碱开发试用于红斑性狼疮 、肾病综合征 ,均取
得了显著疗效。本文拟对青风藤中青藤碱的提取工艺及分析测
定方法研究进展作综述性报道。
1　提取工艺研究
由于青藤碱具有较强的药理作用 [ 3] , 国内学者为提取青风
藤中青藤碱进行了一系列的实验研究。目前 ,已经形成了比较完
善的提取工艺 , 较为常用的提取方法简要概括如下:
1.1　回流提取法 青风藤中青藤碱含量较高 , 其基本母核为吗
啡烷 , 有较好的脂溶性。侯文峰等 [ 4]采用正交实验设计 , 优选出
青风藤中青藤碱最佳提取工艺为:用 8倍量 70%乙醇 ,回流提取
2次 ,每次 1.5 h。结果表明:乙醇浓度对青藤碱提取率有极显著
影响 , 而提取次数和提取时间对青藤碱提取率无明显影响。潘林
梅等 [ 5]通过对一常用抗风湿性关节炎的验方中同时含有的青风
藤 、雷公藤 、稀莶草等 3种中药进行了含量测定研究 , 并考察了复
方中青风藤单提及与雷公藤 、稀莶草共提时青藤碱提取率的变
化。结果表明:不同药味与青风藤共提时对青藤碱提取率有不同
影响。张晓伟等 [ 6]改进了盐酸青藤碱的提取工艺 , 通过在提取
青藤碱过程中 , 碱化和精制两个关键步骤方面进行实验 , 得出盐
酸青藤碱最优化提取工艺为:以 7.5 ～ 10%的熟石灰 , 1.8倍量水
进行碱化 , 用 15倍量乙醚回流提取 , 所得粗品在 pH=2.5 ～ 3.5,
密度 =1.05 ～ 1.10 g/cm3的条件下进行精制。经测定 , 青藤碱含
量大于 95%。此工艺进一步提高了青藤碱的产品纯度 , 为我国
制药企业提供了可靠的青风藤提取工艺流程。
1.2　 超声提取法 超声提取法与常规提取法相比具有:设备简
单 、提取时间缩短 、产率高 、成本低等诸多优点。潘娓婕等 [ 7]报
道了在最佳提取条件下 ,以苯为溶剂采用超声法对青风藤根进行
提取。在实验过程中确定了 3次超声提取时间分别为:45, 35和
30 min。由于超声法不会影响青藤碱的分子结构 ,所以本方法与
常规提取法相比 , 青藤碱提取率较高 , 并在一定程度上节约了苯
的用量。
2　分析测定方法
早期的青藤碱测定方法主要有非水滴定法和容量法等。但
由于其操作繁琐 , 检测条件较难控制 , 因此作者主要介绍近年来
应用较广泛 , 方法较可靠的青藤碱含量测定方法。
2.1　肟化法 由于青藤碱结构中存在一个环己酮式的羰基 , 还
有一个酚羟基以及一个杂环氨原子。成凤桂等 [ 8]首先探索应用
了肟化法测定羰基进而对青藤碱进行含量测定的方法。该方法
精确度较高(RSD<0.7%), 适用于中小型实验室进行青藤碱含
量测定。
2.2　薄层扫描法(TLCS) 含青藤碱的样品经适宜的展开系统
(一般为甲苯 -醋酸乙酯 -甲醇 -水)取上层溶液体系(并每 10
ml上层溶液中加 0.04ml氨水)上行展开, 喷以碘化铋钾显色。与
对照液色斑相比可用于测定青藤碱含量。王隶书等 [ 9]用双波长扫
描法测定了复方青风藤片中青藤碱的含量。扫描方式:双波长反
射式锯齿扫描;测定波长 λs=510 nm, 参比波长 λR=700 nm, 狭
缝:0.4mm×0.5 mm.Sx= 3。测定结果:平均回收率为 99.63%,
RSD=1.07%。本实验方法可靠, 重现性好。库尔班江等 [ 10]采用
硅胶高效薄层色谱双波长扫描法对青风藤中青藤碱进行了含量测
定。扫描条件为:锯齿反射扫描λs=275nm, h=320nm, Sx=3。测
定结果:平均回收率 99.77%, RSD=1.28%。该实验为青风藤中
青藤碱含量测定提供了可靠的方法及质量控制依据。
2.3　电泳法 青藤碱在弱酸性溶液中以阳离子形式存在 , 溶液
pH值越低 ,青藤碱形成阳离子的比例越大。故可利用电泳法将
青藤碱与其他物质分离并检测出来。成凤桂 [ 11]采用等速电泳法
(Isotachophoresis, ITP)技术 , 测定了不同产地 、不同采收期采集
的青风藤中青风藤的含量。 选用分离系统为:K+为前导离子
(CH3COO-为其对离子)、甜菜碱为尾随离子(Cl-为其对离子)。
此方法线性检测范围为 0.5 ～ 12 μg/ml, 平均回收率 97% ～
101%。测定效果良好。近年来 ,翟海云等 [ 12]开发利用了毛细管
电泳高频电导法测定青风藤及其制剂中青藤碱的含量。此项技
术可在 4 min内分离并检测出样品中青藤碱及其含量。其检出
限为 0.20μg/ml, 线性检测范围 1.0 ～ 36 μg/ml。 该法回收率
96% ～ 102% , 检测时间缩短 ,值得进一步研究推广。
2.4　旋光法 盐酸青藤碱为青藤碱的盐酸盐 , 易溶于水 ,性质稳
定 , 具有良好的旋光度。马延升等 [ 13]根据盐酸青藤碱的这一特
性 , 首先建立了利用旋光法测定盐酸青藤碱含量的方法。实验结
果表明:青藤碱浓度在 10 ～ 50 mg/L范围内 , 浓度与旋光度呈良
好线性关系。该实验平均回收率为 99.96%, RSD=0.19%,与传
统非水滴定法比较 ,测定结果无明显差异。该方法也可在不同温
度下测定 , 通过换算公式即可求得规定下的数值 , 从而为生产和
制剂提供青藤碱含量测定标准。
2.5　HPLC法
2.5.1　正相 HPLC法 HPLC由于分离效果高及定量准确而在
中药分析研究方面的应用日益广泛。张转平等 [ 14]选用自装不锈
钢柱 50mm×2.6 mm, 填料为 YGW-8010硅胶。以甲醇:乙二胺
(100∶0.125)为流动相 , 在 260 nm波长处 , 外标法测定了 19批
青风藤样品中青藤碱的含量.本实验取得了较好结果 , 回收率为
100.7±1.7%, RSD=0.9%。茅向军等 [ 15]用 Shim-packvp-ODS(5
μm, 150mm×4.6 mm)色谱柱 , 以甲醇-水-乙二胺(500∶ 500∶
0.05)为流动相 , 检测波长为 264 nm。测定了追风活络胶囊中青
藤碱的含量。实验结果表明:青藤碱在 0.247 6 ～ 1.238 μg范围
内有良好线性关系。平均回收率为 99.8%, RSD<2.1%。刘梅
等 [ 16]用以 Hypersi100s2(250 mm×4.6 mm)色谱柱 、甲醇-乙腈-
水-二乙胺(18∶14∶58∶0.1)为流动相。在波长 265 nm处测定
芪麝颈康丸中青藤碱的含量。实验结果:平均回收率 99.44%,
RSD=1.82%。青藤碱浓度在 0.378 ～ 1.89 μg范围内线性关系
良好。该法简便 、准确 ,适于推广。
2.5.2　反相 HPLC法 随着高效液相色谱技术的发展 , 杨广德
等 [ 17]使用 ODSC18色谱柱 , 乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钾(55∶
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.5 时珍国医国药 2006年第 17卷第 5期
45),在 263 nm波长处 ,内标法测定了血浆中青藤碱的含量。本实
验青藤碱最小检出量为 0.03 μg, 平均回收率(96.95±1.62)%,
RSD=1.6%,实验结果准确可靠。张钰泉等 [ 18]利用 ODSC18色谱柱 ,以乙腈-水-二乙胺(25∶75∶:0.2)为流动相 ,在 262 nm波长处
测定青风藤中青藤碱的含量。平均回收率 97.8%, RSD=1.05%。
该法可用于青风藤药材的质量控制。蒋学斌等 [ 19]采用 C18 46 mm×250 mm不锈钢柱 10 μm,以甲醇- 0.01 mol/LNaH2PO4 ,以 263nm处为检测波长 , 用内标法测定青藤碱缓释片的含量。该法简
便 、结果准确 ,平均回收率 99.8%, RSD=0.9%。
3　结语
综上所述 , 青藤碱作为临床上一种重要的抗炎 、抗心律失常
药物 , 已引起国内外学者的广泛关注 , 现已建立了比较成熟可靠
的提取方法和分析检测方法。然而 , 由于目前青风藤中青藤碱的
研究报道尚不多见 , 所以摆在国内外医药工作者面前的任务是:
扩大药源;准确可靠的控制其质量 , 全面了解其体内过程及药理
机制;寻找新型的青藤碱检测方法。以上工作必将有着深远的意
义和广阔的市场前景 。
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收稿日期:2005-08-15;　修订日期:2006-02-10
中医药治疗过敏性鼻炎进展
吴家 , 林其得 , 林　晃 , 严道南
(南京中医药大学 ,江苏 南京　210029)
关键词:过敏性鼻炎;　中医药治疗;　进展
中图分类号:R276.1　　文献标识码:C　　文章编号:1008-0805(2006)05-0832-02
　　过敏性鼻炎(alergicrhinifis, AR), 又称变应性鼻炎 , 是由免
疫球蛋白(IgE)介导通过释放组织胺或其它化学活性物质诱发
的鼻黏膜Ⅰ型变态反应 , 属中医 “鼻鼽”范畴 , 占鼻科疾病首位。
目前治疗过敏性鼻炎的方法有:药物(中药和西药)疗法 、针灸疗
法 、穴位注射疗法 、特异性脱敏疗法 、免疫疗法 、冷冻疗法 、激光疗
法及热疗法等 , 各种疗法均有各自优缺点。本文就近年有关中药
治疗过敏性鼻炎的临床研究概况综述如下。
1　辨证分型治疗
吴氏 [ 1]将本病分为 3型:①肺虚饮停型 , 治以补肺固卫 、温化
水饮 , 用小青龙汤合玉屏风散化裁;②脾阳虚弱型 , 治以温阳健
脾 、化饮利水 , 用理中汤合苓桂术甘汤化裁;③肾阳虚弱型 , 治以
温肾助阳 , 化气行水 ,用金匮肾气汤化裁。
李氏 [ 2]将本病分为 3型:①肺气不足型 , 治以玉屏风散加辛
夷 、薏苡仁 、桔梗等;②脾气虚弱型 ,治以玉屏风散合补中益气汤;
③肾阳亏虚型 , 治以玉屏风散合金匮肾气丸加减。
徐氏 [ 3]将本病分为 3型:①肺气虚寒型 , 拟温肺散寒 、益气固
表 、调和营卫 , 方用温肺汤或玉屏风散 、桂枝汤加减;②脾肺两虚
型 , 拟温肺益气 ,辅以健脾补中 ,方用温肺汤合补中益气汤加减;
③肺肾两虚型 , 拟温肺补肾 、益气固表 ,方用细辛散 、右归丸 、地黄
饮子等加减。 60例中 ,发作停止 14例 , 显效 22例 , 有效 18例 ,无
效 6例。冯氏 [ 4]用辨证施治结合中药塞鼻法治疗 120例。肺气
虚寒型:用玉屏风散合苍耳子散加减;脾气虚弱型:用补中益气汤
加减;肾元亏损型:用金匮肾气丸加减;并用干棉球蘸药粉(辛夷
花 、白芷 、防风 、乌梅 、五味子 、甘草各 2份 , 苍耳子 、鹅不食草各 1
份 , 共研细粉)塞入鼻内 , 结果;显效 47例 , 有效 57例 , 无效 16
例 , 总有效率 86.7%。
2　基本方加减治疗
王氏等 [ 5]用小青龙汤合玉屏风散加减(以麻黄 、桂枝 、细辛 、
防风 、黄芪 、白术 、半夏 、五味子 、白芍 、生姜 、甘草为基本方)治疗
78例 , 治愈(症状体征完全消失 , 随访 1年未复发)48例 , 显效
(主要症状体征消失 ,但感冒后调理数日方愈)21例 , 无效(服药
后无明显好转)9例 ,总有效率 88.4%。吴氏 [ 6]以苍耳子散加减
治疗 80 例 , 治愈 64例 , 好转 10例 , 无效 6 例 , 总有效率为
92.5%。王氏 [ 7]观察益气解表类中药治疗儿童过敏性鼻炎的疗
效。两组均常规使用雷诺考特喷鼻水剂 ,治疗组加用中药温肺止
流丹(细辛 、荆芥 、麻黄 、党参等), 治疗 37例。经观察比较 ,两组
差别有显著意义(P<0.05)。提示:中药温肺止流丹加味佐治儿
童过敏性鼻炎有良好效果。刘氏 [ 8]用附桂芷桔补中汤(附片 、桂
枝 、白芷 、桔梗 、党参 、黄芪 、当归 、炒白术 、炙升麻 、陈皮 、柴胡 、甘
草 、生姜)治疗 138例 , 痊愈 69例 , 显效 67例 , 无效 2例 , 总有效
率 98.6%。徐氏 [ 9]用泽泻汤加减治疗本病 ,均取得了一定的疗
效。高氏等 [ 10]采用麻黄附子细辛汤和干姜甘草汤加减治疗本病
80例。 7 d为 1个疗程 , 服 3个疗程评定疗效。显效(6个月以上
未发病或半年内发病但症状较前明显减轻)61例 ,好转(用药后
明显减轻 ,停药后发作 , 但喷嚏减少)15例 , 无效(治疗期间或疗
程结束症状无改善)4例。总有效率 75%。
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 5期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2006VOL.17NO.5