全 文 ：ＨＰＬＣ法测定四川朱砂莲生品及不同炮制品中
马兜铃酸Ａ含量
任华忠
（乐山职业技术学院 药学系，四川 乐山６１４０００）
摘　要：目的：研究不同炮制方法对四川朱砂莲中马兜铃酸Ａ含量的影响。方法：采用４种不同的炮炙
去毒方法对朱砂莲样品进行处理后，采用 ＨＰＬＣ法对其马兜铃酸 Ａ的含量进行检测，并与生品中所含
马兜铃酸Ａ的含量进行分析比较。色谱条件：色谱柱为Ａｇｉｌｅｎｔ－Ｃ１８柱（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，３．５μｍ），流动
相：０．１％碳酸铵溶液－乙腈（７２∶２８），流速：１ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长２５０ｎｍ，柱温为２８℃。结果：除蒸制
组外，经蜜炙、甘草汁炙、碱水炙处理的四川朱砂莲样品与生品比较，马兜铃酸Ａ的含量差异显著，有统
计学意义（Ｐ＜０．０１），变化率超过８０％。结论：蜜炙、甘草汁炙、碱水炙在四川朱砂莲的炮制处理中起到
了很好的减毒作用。
关键词：朱砂莲；炮制；马兜铃酸；高效液相色谱
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１５）１１－００２３－０２
ＤＯＩ：１０．１１９５４／ｙｔｃｔｙｙ．２０１５１１０１０
收稿日期：２０１５－０１－１２
基金项目：乐山职业技术学院科研课题（ＫＹ２０１３０３４）；乐山市科技局重点研究计划（１４ＳＺＢ２４８）
作者简介：任华忠（１９８１－），男，乐山职业技术学院讲师，研究方向为天然活性产物和中药质量标准。
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉｃ　Ａｃｉｄ－Ａｉｎ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　Ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉａ　Ｃｉｎｎａｂａｒｉｎａ　ｂｙ　ＨＰＬＣ
Ｒｅｎ　Ｈｕａｚｈｏｎｇ
（Ｌｅｓｈａｎ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　＆Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　ｃｏｌｅｇｅ，Ｌｅｓｈａｎ　６１４０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　Ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉｃ　Ａｃｉｄ－Ａ　ｉｎ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　Ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉａ　Ｃｉｎｎａｂａｒｉｎａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：
Ｃｏｌｕｍｎｈｙｐｅｒｓｉｌ　Ａｇｉｌｅｎｔ－Ｃ１８（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，３．５μｍ）．Ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ：Ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ　ａｎｄ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｃａｒｂｏｎａｔｅ（７２∶２８），ｄｅ－
ｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ：２５０ｎｍ，ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ：１．０ｍＬ／ｍｉｎ，ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　２８℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｅｘｃｅｐｔ　ｂｙ　ｓｔｅａｍｅｄ　ＡｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉａＣｉｎ－
ｎａｂａｒｉｎａ，ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｔｈａｔ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　ｂｙ　ｈｏｎｅｙ，ｓｕｃｃｕｓ　ｌｉｑｕｉｒｉｔｉａｅ　ｏｒ　ｓｏｄｉｕｍ　ｃａｒｂｏｎａｔｅ　ａｎｄ　ｒａｗ
ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｏｆ　ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉｃ　ａｃｉｄ　Ａ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　８０％（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　ｂｙ　ｈｏｎｅｙ，ｓｕｃｃｕｓ　ｌｉｑｕｉｒｉｔｉ－
ａｅ　ｏｒ　ｓｏｄｉｕｍ　ｃａｒｂｏｎａｔｅ　ｐｌａｙｅｄ　ａ　ｇｏｏｄ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｄｉｓｉｎｔｏｘｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉａ　Ｃｉｎｎａｂａｒｉｎａ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉａ　Ｃｉｎｎａｂａｒｉｎａ；Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ；Ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉｃ　Ａｃｉｄ－Ａ；ＨＰＬＣ
　　朱砂莲为马兜铃科马兜铃属植物四川朱砂莲Ａｒｉｓｔｏｌｏ
ｃｈｉａｃｉｎｎａｂａｒｉｎａＣ．Ｙ．Ｃｈｅｎｇ　ｅｔ　Ｊ．Ｌ．Ｗｕ的干燥块根，是我
国西南各省民间习用的一种止痛中药［１，２］。传统医学认为
朱砂莲性味苦、辛、寒，具清热解毒、消炎止痛之功效，在民
间广泛用于治疗牙痛、胃痛、关节痛，现代药理研究表明其
具有镇痛、抗炎、解热等作用。但近年来时有关于朱砂莲肾
毒性的报道［３］，朱砂莲使用安全性的质疑越来越大。其安
全性问题的根源在于所含的马兜铃酸类物质［４］，同时也跟
超剂量使用等不合理用药方法有关［５］，有研究指出可以通
过合理配伍和炮制方法减轻和控制其毒性［６，７］。基于此，笔
者采用传统中药炮制去毒方法处理朱砂莲，并以 ＨＰＬＣ法
测定生品及各个炮制品中马兜铃酸 Ａ的相对含量，为朱砂
莲的炮制去毒及合理使用提供参考依据。
１　仪器与试药
Ｗａｔｅｒｓ２６９５高效液相色谱仪，包括自动脱气机、自动进
样器、二元泵、柱温箱、９９６型二极管阵列检测器、Ｍｉｌｅｎｎｉ－
ｕｍ３２色谱工作站（美国 Ｗａｔｅｒｓ公司）；ＵＶ－３０１０型紫外－
可见分光光度计（日本日立公司）；ＰＨＳ－２Ｆ型台式ｐＨ 计
（上海雷磁公司）；ＫＳ１５０Ｄ型超声波清洗器（深圳洁威公
司）。
—３２—
马兜铃酸Ａ对照品购于中国食品药品检定研究院（批
号１１０７４６－２００４０６）。乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
朱砂莲药材购于四川省峨眉山市中药材集市，经香港
浸会大学邬家林教授鉴定为马兜铃科马兜铃属植物四川朱
砂莲（Ａ．ｃｉｎｎａｂａｒｉｎａ　Ｃ．Ｙ．Ｃｈｅｎｇ　ｅｔ　Ｊ．Ｌ．Ｗｕ）的块根。
２　方法与结果
２．１　样品处理
生品：取净制后的朱砂莲晒至完全干燥，为１号样品。
蒸制品：取净制后的朱砂莲蒸至透心，烘干，为２号样品。
蜜炙品：取净制朱砂莲按照《中药药典》附录药材炮制通
则［７］记载的方法进行蜜炙（１００ｇ净药材，用炼蜜２５ｇ），为３
号样品。碱水炙品：取净制朱砂莲按照文献［８］方法进行碱
水炙（１００ｇ净药材，用碳酸钠２ｇ），为４号样品。甘草汁炙
品：取净制朱砂莲，按照文献［８］方法进行甘草汁炙（１００ｇ净
药材，用甘草６ｇ），为５号样品。１～５号样品各设３个平行
组。
２．２　马兜铃酸Ａ含量测定
２．２．１　对照品溶液制备　精密称取马兜铃酸 Ａ对照品
适量，加乙醇溶解，制成０．０５２ｍｇ·ｍＬ－１的对照品溶液，备
用。
２．２．２　供试品溶液制备　取样约１ｇ，精密称定，置于圆
底烧瓶中，加入乙醇１００ｍＬ，称定重量，回流提取２ｈ，放冷，
再次称定重量，分别用溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取
续滤液，离心，取上清液，即得。
２．２．３　色谱条件　色谱柱为 Ａｇｉｌｅｎｔ－Ｃ１８柱（４．６ｍｍ×
１５０ｍｍ，３．５μｍ），流动相：０．１％碳酸铵溶液－乙腈（７２∶
２８），流速：１ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长为２５０ｎｍ，柱温为２８℃。
在此色谱条件下，各样品溶液中马兜铃酸 Ａ与其他组分能
达到基线分离，见图１。
２．２．４　线性关系　精密吸取浓度为０．０５２ｍｇ·ｍＬ－１的对
照品溶液１、２、３、４、５、６、７ｍＬ，用乙醇稀释并定容至１０ｍＬ。
在上述色谱条件下进样１０μＬ进行测定，记录色谱图，测定
其峰面积，以峰面积（ｙ）为纵坐标，马兜铃酸Ａ量（ｘ）为横坐
标，进行线性回归，得回归方程为ｙ＝１４１　０９９ｘ＋３５　１７４，ｒ＝
０．９９９　８（ｎ＝７），线性范围为５２～３６４ｎｇ／ｍＬ。
２．２．５　精密度试验　精密量取马兜铃酸Ａ对照品溶液，
加乙醇稀释至０．２６ｍｇ·ｍＬ－１。精密吸取该对照品溶液
１０μＬ，连续进样６次，测定马兜铃酸Ａ峰面积，结果ＲＳＤ为
１．３２％，表明仪器精密度良好。
２．２．６　稳定性试验　取该对照品溶液，在室温下自然放
置，分别于０、１、４、８、１２、２４ｈ进行测定。结果６次测得马兜
铃酸Ａ峰面积的ＲＳＤ为１．３５％，表明对照品溶液在２４ｈ内
稳定。
２．２．６　重复性试验　取样品约１ｇ，共６份，精密称定，照
“２．２．２”项下方法制备供试品溶液并测定。结果６次测得
马兜铃酸Ａ含量的ＲＳＤ为１．４３％。表明测定方法重复性
良好。
２．２．７　加样回收率试验　取本品约１ｇ，共６份，精密称定，
分别置圆底烧瓶中，各精密加入一定量的马兜铃酸Ａ对照品，
照“２．２．２”项下方法制备供试品溶液并测定，结果见表１。
图１　马兜铃酸Ａ对照品（Ａ）、供试品（Ｂ）ＨＰＬＣ图谱
表１　加样回收率试验结果
编号
样品中的
含量（μｇ）
加入量
（μｇ）
测得量
（μｇ）
回收率
（μｇ）
平均回收
率（％）
ＲＳＤ
（％）
１　 １９８８．２　 ２１８４　 ４１２５．９　 ９７．９
２　 １９１６．８　 ２１８４　 ４１４５．７　 １０２．１
３　 ２１６０．１　 ２０８０　 ４２０９．８　 ９８．５
９９．７　 ２．０８
４　 ２０２７．４　 ２０８０　 ４０３９．５　 ９６．７
５　 ２０４０．３　 １９７６　 ４０５２．１　 １０１．８
６　 １９８６．８　 １９７６　 ３９８７．３　 １０１．２
２．２．８　样品含量测定　分别精密吸取对照品溶液和供试
品溶液各１０μＬ，注入液相色谱仪，测定，用外标法计算含量，
结果见表２。
表２　朱砂莲生品与不同炮制品马兜铃酸含量测定结果
（ｎ＝３）
序号 样品
测得值 （‰）
Ｘ１ Ｘ２ Ｘ３
平均值
（‰）
变化率
（％）
１ 生晒 ２．４５７１　 ２．４３５４　 ２．４２５７　 ２．４３９４
２ 蒸制 ２．３４５４　 ２．３７９２　 ２．３６２７　 ２．３６２４　 ３．１６
３ 蜜炙 ０．４４１５　 ０．４３７１　 ０．４３７３　 ０．４３８６　 ８２．０１
４ 碱水炙 ０．１５９４　 ０．１５７９　 ０．１６５２　 ０．１６０８　 ９３．４１
５ 甘草汁炙 ０．３８６１　 ０．３９０７　 ０．３８９２　 ０．３８８７　 ８４．０７
３　讨论
四川朱砂莲的使用受到很大限制的根本原因是其所含
马兜铃酸可造成肾损害，而据目前的文献资料，马兜铃科中
药的肾毒性受剂量高低、疗程长短、个体差异、炮制方法等
—４２—
湖北产葛根药材及提取物指纹图谱分析
刘慧敏１，徐惠芳１，邵贝贝２
（１．武汉市中医医院 药学部，湖北 武汉４３００１０；２武汉联合药业，湖北 武汉４３００１１）
摘　要：目的：建立湖北产葛根药材及提取物的指纹图谱检测方法，为确保葛根药材、提取物及其制剂的
内在质量提供依据。方法：采用ＴＩＡＮＨＥ　Ｋｏｒｍａｓｉｌ　Ｃ１８柱；流动相Ａ：甲醇，流动相Ｂ：１％醋酸溶液；流
速１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长为２５０ｎｍ；柱温为３５℃。梯度洗脱程序：０～１０ｍｉｎ　２２％Ａ，１０～４０ｍｉｎ　２２％
～４５％Ａ，４０～４５ｍｉｎ　４５％Ａ。对湖北省十堰竹溪、恩施州和黄冈罗田三个产地的葛根药材及提取物进
行指纹图谱研究。结果：湖北省三个产地葛根药材及提取物的指纹图谱基本一致。结论：湖北三个产地
的葛根药材质量差异不大。葛根药材、提取物相关性良好，各产地指纹图谱基本一致，制备工艺稳定可
行。
关键词：葛根药材；葛根提取物；指纹图谱；质量控制
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１５）１１－００２５－０５
ＤＯＩ：１０．１１９５４／ｙｔｃｔｙｙ．２０１５１１０１１
收稿日期：２０１５－０１－２０
作者简介：刘慧敏（１９８７－），女，武汉市中医医院中药师，研究方向为中药新制剂与新技术。
　　葛根为我国常用中药，始载于《神农本草经》，为豆科植
物野葛Ｐｕｅｒａｒｉａ　ｌｏｂａｔａ （Ｗｉｌｄ．）Ｏｈｗｉ的干燥根［１］。葛根
性凉、气平、味甘，主要含异黄酮成分葛根素、葛根素木糖
苷、大豆苷、大豆苷元及β－谷甾醇、花生酸等多种生理活性
物质，尤以葛根素含量最高［２，３］。葛根素具有解肌退热、透
发麻疹、生津止渴、升阳止泻、通经活络、解酒毒等功效［４］，
临床上主要用于治疗外感发热头痛、颈项强痛、口渴、麻疹
不透、热痢、泄泻、眩晕头痛、中风偏瘫、酒毒伤中等症［５，６］。
现代医学研究表明葛根中的异黄酮类化合物葛根素对高血
压、高血脂、高血糖和心脑血管疾病有很好的疗效［７，８］。
葛根喜生长于山坡草丛中或路旁及疏林中较阴湿的地
方。我国的葛根资源主要分布在陕西、湖北、四川［９］和安徽
等地［１０－１２］，其中湖北为葛根产量最大的省市之一。湖北葛
根资源主要集中在十堰市、黄冈市、恩施州，被广泛用于食
品和医药等行业［１３］。由于不同产地的葛根药材外形相似，
在市场流通和使用阶段存在混杂现象，目前对葛根的质量
控制主要是检测葛根素的含量［１］，单一指标难以反映中药
多成分、多靶点的特点［１４］。为了更有效地控制葛根质量，

葛
因素影响。本研究中，蒸制品与生品相比，马兜铃酸Ａ含量
差异较小，而三组炙品与生品之间比较，马兜铃酸Ａ含量差
显著异，有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。另外，不同的炮制去毒
方法对马兜铃酸含量影响十分明显。其中蜜炙、甘草汁炙、
碱水炙三种炮制方式起到了较好的去毒作用。近年来不断
有四川朱砂莲毒性反应报道，应该采取谨慎使用的态度，可
通过炮制去毒和改变用药途径等方面的研究来探索其合理
使用的可能性。
参考文献：
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上海科学技术出版社，１９９８．
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［４］　徐晓月，张陆勇，江振洲．马兜铃酸Ｉ肾毒性的实验研究［Ｊ］．
中国生化药物杂志，２００６，２７（６）：３３６．
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中国药房，２００６，１７（７）：５５４．
［６］　刘雅婧．细辛中马兜铃酸的炮制脱毒研究［Ｄ］．吉林：吉林农
业大学，２００８．
［７］　中国中医科学院中药研究所．一种去除中药中马兜铃酸的方
法及其限量标准：中国，ＣＮ　１Ｏ１２６４１１６Ａ［Ｐ］．２００７－３－１４．
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［９］　唐廷猷．中药炮制学［Ｍ］．北京：中国医药科技出版社，１９９７：
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［１０］　路金才，韩娜，杜晓曦，等．马兜铃酸的测定方法现状分析
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［Ｊ］．时珍国医国药，２００９，２０（３）：６７２．
（责任编辑：魏　晓）
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