全 文 ：白花败酱草（Patrina villosa Juss,PVJ）系败酱科植
物，药用其全草，味辛，性寒［1］。白花败酱出自《本草纲
目》［2］，败酱草来源为黄花败酱（Patrinia scabiosaef olia F
isch）和白花败酱（Patrinia villosa Juss），以全草入药，应
称为白花败酱草［3］，具有清热解毒、利湿排脓、活血化
瘀、镇心安神的功效，近年来白花败酱草的抗肿瘤作用
备受关注［4］。实验通过MTT法和细胞形态观察，考察
白花败酱草有效部位对 Siha 细胞的体外抑制作用。
1 材料
1.1 药材与试剂
白花败酱草有效部位（本实验室自制,含有总皂苷
61.81%，总黄酮 8.69%）；顺铂注射液，江苏豪森。
1.2 细胞株与试剂
人子宫颈鳞癌细胞 Siha、RPMI-1640 培养基、胎
牛血清（均购自上海佛雷堡）；噻唑蓝（购自 Sigma）；二
甲基亚砜（购自 Amresco）。
1.3 仪器
酶标仪（上海热电）；CO2 培养箱（NAPCO）；
Olympus倒置显微镜；生物洁净工作台（苏州安泰）。
2 方法
2.1 药液的配制
本实验分为不同浓度的白花败酱草有效部位组、
顺铂组、空白组，共八组。分别精密移取储备液
（6.4mg/mL） 用培养液稀释为 20μg/mL、40μg/mL、
白花败酱草抗妇科肿瘤有效部位
对 Siha 细胞体外抑制作用研究
朴成玉 1,房 城 1,张 颖 2,陈婷婷 2,周忠光 2
（1.黑龙江中医药大学药物安全性评价中心，哈尔滨 150040；
2.黑龙江中医药大学，哈尔滨 150040）
摘要：为研究白花败酱草抗妇科肿瘤有效部位对体外培养的人子宫鳞癌细胞Siha的抑制作用，采用
MTT法和细胞形态观察，考察白花败酱草抗妇科肿瘤有效部位对Siha细胞体外抑制作用发现：不同浓度
的白花败酱草抗妇科肿瘤有效部位作用于Siha细胞24h、48、72h后，均出现显著的生长抑制作用，其
中，药物浓度640μg/mL、作用时间48h和72h，药物浓度320μg/mL、作用时间 72h的抑制率均大于
90%，得出，白花败酱草抗妇科肿瘤有效部位对Siha细胞的体外生长有显著的抑制作用，其抑制作用分
别与药物浓度和作用时间呈依赖性。
关键词：白花败酱草；抗肿瘤；Siha；MTT法；细胞形态
中图分类号：S721 文献标志码：A 文章编号：1674-8646（2015）02-00010-02
Study on the inhibitory effect ofPat inia vill sact ve composition on Siha cells in
vitro
PIAOCheng-yu,FANGCheng,ZHANGYing,CHENTing-ting,ZHOUZhong-guang
(1CenterforSafetyEvaluationofDrugs,HeilongjiangUniversityofChineseMedicine,Harbin150040,China；
2HeilongjiangUniversityofChineseMedicine,Harbin150040,China)
Abstract:Objective:TostudytheinhibitoryactionofPatr iav llosactivecompositi nagainstgynecologytumor
in treating Siha. Methods: MTT and cell morphology were used to observe the inhibitory action ofPatrinia villosa
active composition against gynecology tumor in treating Siha. Results: Different concentrations ofPatrinia villosa
active composition against gynecology tumor were given to Siha and the action period was 24,48and 72h,
respectively. The results showed that the inhibition ratio was more than 90% when the concentration was
640μg/ml, theaction period was both 48h and 72h, and the concentration was 320μg/mL with the acti period
was72h.Conclusion:Patrin avillosaactivecompositionagainstgynecologytumorcouldevidentlyinhibitthegrowth
ofSihaandtheinhibitoryactionmayrespectivelyrelatetoconcentrationandactionperiod.
Key words:Patriniavillosa;ant tumor;Siha;MTT;cellmorphology
收稿日期：2014-12-10
基金项目：黑龙江省中医管理局科研项目（ZHY10-Z43）；黑龙江中医药大学科研基金项目（200920）
作者简介：朴成玉（1980-），女，黑龙江五常人，助理研究员，生药学博士，主要从事药物安全评价及中医药防治风湿疾病的实验研究。
通讯作者：周忠光（1957-），男，黑龙江哈尔滨人，教授，博士研究生导师，主要从事中医药防治老年痴呆及药物安全评价研究。
第6卷 第2期
2015年2月
黑龙江科学
HEILONGJIANGSCIENCE
Vo1.6 No.2
February 2015
10
80μg/mL、160μg/mL、320μg/mL、640μg/mL六种不
同浓度的白花败酱草有效部位溶液；顺铂注射液用培
养液稀释制得浓度为 5μg/mL的阳性药药液。
2.2 细胞生长抑制实验
采用MTT法检测。选取对数生长期的 Siha 细胞，
调整细胞浓度至 1×105个 /mL，分别接种于 96 孔板
培养，每孔 100μL。培养 24h加不同浓度的白花败酱
草有效部位药液、顺铂药液、RAPM1640培养液继续培
养 24h、48h、72h。培养结束前 4h，每孔加入 5μg/mL
的 MTT20μL。培养结束后弃去培养液，每孔加入
DMSO150mL，轻轻震荡 10min，用酶标仪测定每孔吸
光度（A），检测波长为 570nm。抑制率（%）=（1-A药液
组 /A空白对照组）×100%。
2.3 对细胞形态的影响
选取对数生长期的 Siha 细胞，调整细胞浓度至
2×105个 /mL，分别接种于 6 孔板培养，每孔 100μL。
培养 24h 后分别加白花败酱草有效部位药液
（320μg/mL）、顺铂药液（5μg/mL）、RAPM1640 培养
液 200μL继续培养，分别于 0h、6h、12h、24h 用光学显
微镜观察。
3 结果
3.1 细胞生长抑制实验
不同浓度的白花败酱草有效部位对 Siha 细胞的
生长均有不同程度的抑制作用，40μg/mL、80μg/mL、
160μg/mL、320μg/mL、640μg/mL 剂量组与空白组
相比均有显著性差异（P＜0.05），并呈剂量依赖关系；
各浓度组对细胞的抑制率随时间延长而增高，呈时间
依赖关系，详见表 1。
表1 白花败酱草有效部位对Siha细胞生长的抑制作用（X±SD-）
Tab.1 InhibitoryeffectofPatriniavillosaact vecomposition
onSihacell
3.2 对细胞形态的影响
倒置显微镜下观察空白组细胞呈上皮型贴壁生长，
细胞呈延展、扁平，细胞均质而透明，细胞一般有 2～4
个核仁，核膜、核仁轮廓明显，细胞间结构紧密，细胞生
长旺盛，给药组细胞轮廓增强、反差增大，变圆浮起，细
胞间接触变松，增殖减慢，胞质中颗粒增多，见图 1。
A正常细胞；B顺铂阳性药组；C白花败酱草有效部位组
Anormalcells;BCisplatin;CPatrini v llosaac vecomposition
图1白花败酱草有效部位及顺铂阳性药对Siha细胞凋亡形态的影响
Fig.1StudyoninfluenceofPatriniavillosaact vecompositionand
cisplatintoSihacellsapoptosismorphology
4 讨论
近年来，宫颈癌的发病率逐渐上升，严重危害妇女
健康，其治疗费用昂贵且治愈率低，给家庭和社会带来
沉重的负担。本实验结果表明，白花败酱草有效部位对
Siha 细胞有显著的生长抑制作用，其抑制率与药物的
作用浓度和作用时间呈依赖关系。其中作用时间为
48h时，药物浓度在 20～640μg/mL范围内量效关系
变化比较均一，作用时间为 72h，药物浓度超过
320μg/mL时，抑制率的变化较缓慢。白花败酱草有效
部位对 Siha 细胞的抑制作用明确，但其作用机制尚不
清楚，需要进一步研究。
参考文献：
［1］ 宋立人.现代中药大辞典［M］.北京:人民卫生出版社，2001：1268.
［2］ 卢寅熹.败酱草的本草考证［J］.时珍国药研究，1996，7（3）：129.
［3］ 王立军，李运景.败酱草的本草考证［J］.中草药，2004，35（6）：696-697.
［4］ 宋婷，孙晖，路娟，等.白花败酱草体外抗肿瘤活性部位筛选［J］.时珍国医
国药，2012，23（10）：2410-2412.
48h
13.32±5.6
34.56±4.5※
47.81±6.5※
69.85±5.1※
77.95±5.9※
90.91±4.8※
56.61±4.2※
抑制率（%）
24h
11.12±3.6
23.41±10.8※
33.56±10.2※
40.59±9.1※
47.60±8.6※
73.90±6.6※
32.43±4.5※
药物浓度（μg/mL）
72h
25.35±4.8※
45.18±3.5※
67.32±4.2※
78.89±2.9※
90.34±4.0※
93.45±3.7※
67.35±4.3※
20
40
80
160
320
640
顺铂组（5）
注：与空白对照组比较，※P＜0.05。
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