全 文 ：青风藤中青藤碱的提取工艺研究
康红钰 ,任丽平　(漯河医学高等专科学校 ,河南漯河 462002)
摘要　[目的 ]优选青风藤中青藤碱的提取工艺。 [方法]采用正交试验法 ,考察固液比(A)、碱化时间(B)、提取液pH值(C)、碱化pH
值(D)对提取率的影响 ,用紫外分光光度标准曲线法测定含量。 [结果 ]所考察的因素中 , 对青风藤中青藤碱的提取影响大小顺序为提
取液pH值>碱化时间>碱化pH值>固液比 ,最佳提取工艺条件:固液比 1∶20,碱化时间 2h,提取液pH值为 3,碱化pH值为 8。在最佳
提取工艺条件下 ,测得青藤碱平均提取率为 3.7%。 [结论 ]该研究为青风藤中青藤碱工业生产提供了科学依据 。
关键词　青风藤;青藤碱;提取工艺;正交试验法
中图分类号　R284.2　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2010)09-04578-01
StudyontheExtractionTechnologyofSinomeninefromCaulisSinomeni
KANGHong-yuetal　(LuoheMedicalColege, Luohe, Henan462002)
Abstract　[ Objective] TooptimizeextractionconditionforsinomeninefromCaulisSinomeni.[ Method] Theeffectsofratioofmaterialtowa-
ter(A), Alkalizationtime(B), extractpH(C), alkalinepH(D)weredeterminedbyorthogonaldesign.Thecontentofthestandardcurve
withUVspectrophotometricwasdetermined.[ Result] ThestudyoftheextractionfactorsofSinomeninefromCaulisSinomeniasfolows:ex-
tractpHvalue>alkalizationtime>alkalinepHvalue>solid-liquidratio, theresultsshowedthatsolid-liquidratio1∶20, alkalizationtimeof
2 h, extractpHvalue3, alkalinepHvalue8.Inthebestextractionconditions, theaverageextractionrateofsinomeninefromCaulisSinomeni
was3.7%.[ Conclusion] ItprovidedthescientificbasisofindustrialproductionforSinomenine.
Keywords　CaulisSinomenii;Sinomenine;Extractiontechnology;Orthogonaltest
作者简介　康红钰(1964-),女 ,河南许昌人 ,副教授 ,从事中药化学与
药理研究。
收稿日期　 2009-12-23
　　青藤碱(Sinomenine)是从传统治疗风湿性疾病中药青风
藤中提取的一种有效成分 。最早由 Ishiwari等从日本青风藤
中分离得到 , 20世纪 60年代我国学者朱任宏从国产青风藤
中也发现青藤碱。临床上常用其盐酸盐制剂 ,疗效显著。近
10年来国内外学者对其的研究取得了新的进展 [ 1] 。青藤碱
具有显著的镇痛 、镇静 、消炎 、抑制免疫 、降血压等作用 [ 2] ,是
一种效果好 、副作用小的非甾体消炎止痛药 ,并有望成为一
种良好的戒毒药 [ 3] 。笔者主要从青藤碱的提取工艺入手 ,以
期为青藤碱的开发提供经济 、实用的工艺路线。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　供试材料。青风藤采集于贵阳花溪 ,经漯河市农业
科学院鉴定为防己科植物青藤(Sinomeniumacutum)。
1.1.2　仪器。RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);
SH2-D(Ⅲ)循环水式真空泵(郑州长城科工贸易有限公司);
GU-1901双光束紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责
任公司)。
1.1.3　试剂。石油醚 、碘化钾 AR(成都金山化学试剂有限
公司);氯仿(分析纯 ,重庆川江化学试剂有限公司);次硝酸
铋(分析纯 , 广东汕头市西陇化工厂)。
1.2　方法
1.2.1　青藤碱的提取。准确称取 50 g过 40目的青风藤根
茎碎末 ,石油醚处理 24 h,过滤 ,用 pH值 2.5 ～ 3.5的酸水提
取 12 h,提取 3次 ,过滤 ,浓缩 ,甲醇溶解 ,氨水处理 ,过滤 ,保
留浸膏 ,甲醇溶解 ,氯仿萃取 ,得青藤碱粗提物 。
1.2.2　青藤碱的定性。利用生物碱沉淀试验 [ 4] ,滴加碘化
钾 、苦味酸 、磷钼酸 ,确定提取过程中的滤液中含有生物碱 。
1.2.3　标准品溶液制备。取青藤碱标准品 5 mg置于 5 ml
容量瓶中 ,加无水乙醇超声辅助溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即
得 1 mg/ml的标准品溶液。
1.2.4　青藤碱标准曲线 。分别吸取标准品溶液 1.0、2.0、
3.0、4.0、5.0 ml定容至 25 ml容量瓶 ,于波长 260 nm处测定
相应的吸光度 ,吸光度(Y)对应浓度(X)线性回归 ,得回归方
程:y=0.016 8 x+0.008 3, R=0.999 8,表明在 0.04 ～ 0.20
mg/ml范围线性关系良好。
1.2.5　正交试验设计。根据工作经验及预试验 ,对提取率
影响显著的因素为固液比(A)、碱化时间(B)、提取液 pH值
(C)、碱化 pH值(D)。采用正交试验的方法 L9(34 ),每个因
素选取 3个水平进行试验(表 1)。
表 1　因素水平
Table1　Factorsanlevels
水平Levels
因素 Factors
固液比(A)Solid-liquidratio
碱化时间∥h(B)
Alkalizationtime
提取液pH值(C)ExtractpHvalue
碱化pH值(D)
AlkalizationpHvalue
1 1∶10 2 2 8
2 1∶20 4 3 9
3 1∶30 6 4 10
2　结果与分析
2.1　正交试验分析　由表 2可知 ,影响青藤碱提取诸因素
的大小顺序为 C>B>D>A,即提取液 pH值 >碱化时间 >
碱化 pH值 >固液比 ,提取液 pH值对试验结果影响最大。
最佳组合为 A2 B1C2D1 ,即最佳提取条件:固液比为 1∶20,碱化
时间为 2h,提取液 pH值为 3,碱化 pH值为 8。
2.2　最佳工艺验证试验　取已干燥粉碎的青风藤 ,按最佳
工艺条件提取样品(n=3),结果青藤碱平均提取率为 3.7%,
RSD为 1.23%。
(下转第 4582页)
责任编辑　熊章琴　责任校对　卢瑶安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(9):4578, 4582
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.09.142
中 、低剂量组)、100 mg/kg阿斯匹林组和生理盐水对照组 ,每
组 12只。另设正常体温大白鼠给予浓度 10 g/kg青蒿组 。
试验组给药体积均为 5 ml/kg(按大白鼠重量计),生理盐水
对照组给予等体积生理盐水。药后每隔 1 h测体温 1次 ,连
续 6次。
2　结果与分析
2.1　青蒿水煎剂灌胃对正常体温大白鼠体温的影响　由表
1可知 , 10 g/kg青蒿水煎剂灌胃对正常体温大白鼠无降温
作用。
2.2　青蒿水煎剂灌胃对致热大白鼠体温的影响　由表 1可
知 ,青蒿水煎剂对皮下注射干酵母混悬液引起发热的大白鼠
有明显的解热作用 ,并有一定的剂量依赖关系 。经方差分析
可知 ,药后不同测定时间 , 10.0 g/kg青蒿组和阿斯匹林 100
mg/kg组的大白鼠体温与生理盐水对照组相比差异极显著
(P<0.01);5.0、2.5 g/kg青蒿组的大白鼠体温与生理盐水
对照组相比差异显著(P<0.05)。药后 1 ～2 h, 10 g/kg青蒿
组的降温作用与 100 mg/kg阿斯匹林相当;药后 3 h开始 ,
10.0 g/kg青蒿组的降温作用强于 100mg/kg阿斯匹林。
表 1　青蒿水煎剂灌胃对致热大白鼠体温的影响
Table1　EffectsofArtemisiaapiaceaHancewaterdecoctionpouringstomachonbodytemperatureoffeverrat ℃
组别
Groups
药后时间∥hTimeaftertreatment
致热后 1 2 3 4 5 6
生理盐水组 Salinegroup 39.7±0.1 39.7±0.1 39.2±0.1 39.0±0.01 39.5±0.1 39.0±0.1 38.8±0.1
低剂量组Low-dosegroup 39.7±0.1＊ 39.0±0.1＊ 39.0±0.1＊ 38.7±0.1＊ 38.5±0.1＊ 38.3±0.1＊ 38.5±0.1＊
中剂量组Middle-dosegroup 39.7±0.1＊ 38.8±0.1＊ 38.6±0.1＊ 38.5±0.1＊ 38.5±0.1＊ 38.0±0.1＊ 38.0±0.1＊
高剂量组High-dosegroup 39.0±0.1＊＊ 38.5±0.1＊＊ 38.0±0.1＊＊ 37.7±0.1＊＊ 37.5±0.1＊ 37.5±0.1＊＊ 37.5±0.1＊＊
阿斯匹林组 Aspiringroup 39.0±0.1＊＊ 38.8±0.1＊＊ 38.4±0.1＊＊ 38.2±0.1＊＊ 38.1±0.1＊＊ 38.0±0.1＊ 38.0±0.1＊＊
　注:＊、＊＊分别表示与生理盐水对照组相比在 0.05、0.01水平上有差异。
　Note:＊, ＊＊ standfordiferencesat0.05and0.01levelcomparedwithsalinecontrolgroup.
3　结论与讨论
该研究结果表明 ,青蒿水煎剂灌胃给药对正常体温大白
鼠的体温无明显影响 ,但 10.0、5.0、2.5 g/kg青蒿对皮下注
射干酵母混悬液引起的发热大白鼠均有明显的解热作用 ,并
有一定的剂量依赖关系。药后 1 ～ 2 h, 10 g/kg青蒿组的降
温作用与 100 mg/kg阿斯匹林相当;药后 3 h开始 , 10 g/kg
青蒿组的降温作用强于 100 mg/kg阿斯匹林组。这证明青
蒿水煎剂灌胃给药有较好的解热作用。易成华等分别用青
蒿和阿司匹林对人工致热的家兔进行解热 ,比较了青蒿和阿
司匹林的解热效果 ,探讨了青蒿的解热功效及其药理作用 ,
结果表明 ,青蒿作为中医临床上解热的传统用药 ,确有非常
明显的解热作用 ,能使致热的家兔体温降至正常水平 ,其解
热作用甚至优于阿司匹林 [ 6] 。这与该研究的结果一致 。但
青蒿解热作用的有效成分及作用机理有待于进一步研究 。
参考文献
[ 1] 于船.中兽医学 [ M].北京:中国农业出版社 , 1997:163.
[ 2] 江苏新医学院.中药大辞典 [ M].上海:上海人民卫生出版社 , 1977:
1228, 783.
[ 3] 钱信忠.中国本草彩色图鉴:常用中药篇:中卷 [ M] .北京:人民卫生出版社, 1996:367-368.
[ 4] 季宇彬.抗癌中药药理与应用[ M].哈尔滨:黑龙江科学技术出版社,
1999:748-749.
[ 5] 李仪奎.中药药理实验方法学 [ M] .上海:上海科学技术出版社, 1991:
12.[ 6] 易成华 ,罗金梅 ,张志文,等.青蒿解热作用的研究 [ EB/OL] .htp://
myweb.gzsums.edu.cn/yl/syslkx/99pages/context/9907058.htm.
[ 7] SHIKM, ZHOUYF.AnimprovedmethodofextractingArtemisiaabrota-numGenomicDNA[J].AgriculturalScience＆Technology, 2008, 9(2):36
-38.[ 8] 张伟.超临界萃取技术在类胡萝卜类色素提取中的应用 [ J] .安徽农业
科学, 2007, 35(13):3773-3774.[ 9] 何熹,韩宁.CO2超临界萃取法提取玫瑰类黄酮及其保健功能研究
[ J].安徽农业科学, 2009, 37(26):12699-12700.
(上接第 4578页)
表 2　正交试验结果
Table2　 Orthogonaltestresults
试验号
TestNo A B C D
得率∥%
Yield
1 1 1 1 1 3.1
2 1 2 2 2 2.7
3 1 3 3 3 2.1
4 2 1 2 3 3.5
5 2 2 3 1 2.5
6 2 3 1 2 2.3
7 3 1 3 2 2.7
8 3 2 1 3 2.1
9 3 3 2 1 3.4
K1 7.9 9.3 7.6 9.0K2 8.3 7.3 9.6 7.7K3 8.2 7.8 7.3 7.7R 0.4 2.0 2.3 1.3
3　结论与讨论　
通过试验研究得到的最佳提取工艺条件:固液比为
1∶20,碱化时间为 2h,提取液 pH值为 3,碱化 pH值为 8,在
最佳提取工艺条件下测得青藤碱平均提取率为 3.7%。验证
试验结果表明 ,该工艺具有提高产率 、缩短提取时间 、节约能
耗等优点 ,为进一步开发利用青藤碱奠定了坚实基础 ,而它
是否影响青藤碱的生理活性有待进一步研究。
参考文献
[ 1] 黄量,于德泉.紫外光谱在有机化学中的应用(下册)[M].北京:科学
出版社 , 1997:102.
[ 2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典 [ M] .北京:化学工业出版社,
2005:155-158.[ 3] LEIHM, ZHUR, WEILX.ChemicalconstituentsofPatriniaheterophyl-
la[J].ChinPharmJ, 1997, 32(5):2712-2731.
[ 4] 刘小平 ,李湘南 ,徐海星.中药分离工程 [ M] .北京:化学工业出版社,
2005:20-22.
4582 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2010年