全 文 ：第 9 卷 第 3 期
19 9 1年 9 月
贵 州 科 学
G U I Z HO U S C IE K C E
\ 01
.
9 N
o
.
3
S eP t
.
199 1
贵州高乌头的生物碱成分
不兴 民 郝小
( 贵川 _左学 佬学系 ,
丫一
{
一 王夭 `忍
贵用 , 5 32 0 2二 )
摘 要 从 』臀高产 乌头根中分离得到 二个二枯类生 物碱八 、 B 。 经 鉴定 , A 和 B
分别为 1 : 、 p l〕 a e o o i t i 了l e 和 r a ,、 a c o : i t i n e 。 本文首次报道 用 ’ “ 二`卜叭 I R一 D F P T
谱证实 l a p p a e o n i t i n e 和 r a 。 : e o n i t i n e 的分 子 结构 。
关键词 高乌头 ; 二 枯生 物碱 ; 拉把乌头碱 : 毛菠乌头碱
毛莫科 心R a n u n e u l a c o a e ) 乌头属 ( 、 理e口 : `矛“ m ) 药用植物高乌头 ( 月 。 o : i才u : ` 5 1, o -
二 on at 、 。 N a ka i ) , 又名穿心莲乌头 、 破骨七 、 麻布袋等 , 在贵州分布较广 泛 。 以 根 ,
入药 。 性温 , 味辛 、 苦 , 有毒 。 具有理气 比痛 、 祛风除湿 、 活血散疥之功效 , 民间用于
治疗跌打损伤 、 胃气疼痛 、 风 湿 、 菌痢 、 心作 、 凛窃和疮疖 等症 ! ’ , 2 了。 为探讨 贵 州 产
高乌头中的生理活性成分 , 我们对其生物碱成分进行了研究 , 现将结果报告如下 。
1 实验部分
m p用W C 一 1 型显微测熔仪测定 ( 温度计未校正 ) , 〔 a 」启用 W戈 G 一 4 型小型 圆盘旋
光仪测定 , U V用 S h i nr a d z u 2 6 5 型分光光度计测定 , I R 用 P e r k i n 一 E l 二 e r一 1 7 3 0 型仪
测定 , ’ H N M R 、 ’ “ C N M R及 ’ “ C N M I之一 D E P T 谱用 B r u ke r A C 一 ￡。 ( ￡c M -IJ ) 型仪测
定 , M S用英产 G C 一 M S联用仪测定 。
1
.
1 提 取
l o k g 产于贵州赫 章县的高乌头 ( 且。二 ?it 、。 万i朋 二。 、 沁 ;洲 ; N 川、 ia ) 干 煤根粉 用 5形
N a Z C O 3 润湿碱化 , 凉干水分后 , 用 苯浸泡提取一次 , 苯提取液以 2州 H C I萃取 建次 , 萃
取液用氨水调节 p H S 、 9 , 析出白色沉淀 , 沉淀经过滤 、 水洗 、 抓的忿和干澡 、 得总 生 物
碱 6 5夕 , 得率为 0 . 6 5拓 。
1
.
2 分 离
总碱 30 9 , 经 1 5 0 0夕 中性氧化铝 ( 1 0 ~ 2 0 0 目 ) 柱层析 , 依次 用 3。~ 叨 ℃ 石油醚 -
M e 2 C O ( 9 : 1
,
8
:
2
,
7
:
3 ) 梯度洗脱 , 洗脱液浓缩后 , 经硅胶 G / C M C 薄 层 层 析 , 以
C H C 1 3
一
M e O H ( :4 1 ) 或氨饱和气氛中的 C H C 1 3为展开剂 , D r a 学 二 d盯 f 试剂显 色 ,
检查各流分 , 合 并相同部分 , 自 3 0 、 叨 ℃ 子; 油醚 一 M e Z C O ( 7 : 3 ) 部分分别得碱 A 、 B
2
.
2 9 和 2 . 69 。
1
.
3 结构则定数据
碱 A 自M e ZC O 中得六边形片晶 。分子式 C : Z H , 4 N : (一 ) 、 ; 。 p 2 2 8~ 2沁 ℃ ; 〔 a 〕D ’ “
木 文 1 9 91 一吧一 n 收积 。 承陈志明教授市阅 . 洋致谢念 。 夕二小江 , 中 科院是明植物研究所 。
陈兴 良等 :责州高乌头的生物碱成分 24 5
+ 2 1
.
5 9
’
( e =1
.
05 4
,
C H C 1 3 ) ; U V [几三二望H , n m ( 10 9 8 ) 」: 2 2 2 . 0 ( 4 . 4 7 6 ) , 2 5 2 . 0
( 4
.
1 7 4 )
,
3 0 9
.
4 ( 3
.
7 4 0 )
; I R ( K B r
,
V e m
一 ` ) : 3 5 6 1
、
3 5 3 7
,
3 2 6 3
,
2 7 0 2
,
1 6 8 6
,
16 0 4
、
1 5 8了、 1 5 2 4 , 1 2 6 4 、 1 0 8 8 , 7 6 4 ; ’ H N M R ( T M S , C D C 1 3 , 占p p m ) : 1 . 1 5 (
3 H
,
t )
,
2
.
2 6 ( 3 H
, s )
,
3
.
3 0 ( 6 H
, s )
,
3
.
4 2 ( 3 H
,
s )
,
7
.
0 1
、
7
.
5 1 ( 各 I H ,
t )
,
7
.
9 2
、
8
.
6 7 ( 各 I H , d ) , 1 1 . 0 8 ( I H , 宽单峰 , D Z O 交换消失 ) ; ` ” C N M R 数
据及 D E P T 谱见表 l 和图 1 ; M S ( E l , 7 o e v , 直接进样 , m / z ) : 5 8 4 ( M + ) , 5 6 9 ,
5 6 6
,
5 5 3
,
5 3 5
,
4 0 5 ( 基峰 ) , 3 9 0 , 2 7 8 , 1 36 , 一2 9 ( 基峰 ) 。
表 1 碱 A 、 B的 D E P T 及 与 l a p p a e o n i t i n e和 r a n a e o n i t i n e 相对照的 ` 3 C N M R化学位移份
匕口5八bJ性,1OlLl4`九任O口nolfnéJ.,自ō8326145790CHCzH
C。O今`白甘月`八bCōbē六hJ性n”,曰nU20J口5SC勺ó842631759叨
1 碱碳 {—— 一…月E里 一1 一 C H2 , C H Z3 C H Z4 一 C
} 碱 B !
Ia P p a e o n i t i n e
碱 B
r a n a e o n i t i n e
D E P T 各 1 3 C
q`,上n“O“61了乃J一`”l[J肠片。Ot工一匀l0a`J任ln[11Odg白ō`Qù门nUJ. .…ē衬ùb呀i一匀0内n”生刀口“孟ō,曰畜山伪J任,白内性`叮口J工匕9自n沙onDlaLù洲CHC阳c阴
J性OJn”é3tO`口C左`叹U内b工匕145687203的
54638729朋018326147509朋巧
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巴JSQ口1ùà口Rt`3通`noln.…Odùb叮口内匕ō`úó11八“ó J口ōq`,工n沙,工5ú匕一匀ǎ,上孟ùn`八J,白ē J丹b
J.1弓五,工月, .上J ,土d
2 5
.
5
OJQànoCOnU工了`产ū遥J甘00J性nJCOU六0OU七,ó几乙nlO,月
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5
6
7
8
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19
N 一 CH Z
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C H
。
l
’
14
’
1 6
’
0一 c = O
A r 一 1
2
3
4
5
6
N H一 C O
l
C H
CH
3
C H 3
C H
3
C H
3
C
C
C
CH
C H
C H
C H
C
C H
3
* 2 0
.
1 5 M H Z
、
C D C 1
3 为溶剂 . T M S内标 , 己值 ( p P m ) 。
碱 B 自 M e C O 一 3 0 ~ 6 0 ℃ 石油醚中得针状晶 。 分 子 式 C 3 2 H 4 ` N Z O , ; m p 1 3 1~
2 53℃ ; [ a 」D ` “ + 3 2 . 2 2 ’ ( e = 一 0 6 3 , C H C 1 3 ) ; U V L久万二望H , n m ( 10 9 。 ) 〕: 2 2 2 . 6 (
4
.
4 2 9 )
,
2 5 1
.
8 ( 4
.
1 6 1 )
,
3 0 9
.
0 ( 3
.
7 2 7 ) ; I R ( K B
r , v e m
一 ’ )
: 3 4 7 6
、
3 4 3 3
、
16 8 3
,
26 0 6
、
1 5 2 7
,
1 2 7 0
、
1 0 8 9
,
7 5 9 , ’ H N M R ( T M S
,
C D C 1 3
,
a p p m )
:
1
.
1 3 ( 3 H
,
t )
,
2 4 6 贵 州 科 学 第 3期 1 9 91年
2
.
2 7 ( 3 H
,
s )
,
3
.
2 1 ( 3 H
,
s )
,
3
.
3 2 ( 3 H
, s )
,
3
.
4 3 ( 3 H
,
s )
,
7
.
0 3
、
7
.
5 2 (各 I H , t ) ,
7
.
9 3
、
8
.
6 7 ( 各 I H , d ) , , 一 0 4 ( x H , 宽单峰 , D : 0 交换 消 失 ) ; ` 3 C N M R 数 据 及
D E P T谱 ( 表 z和图 1 ) : M S ( E l , 7 0 e v , 直接进 样 , m / z ) : 6 0 0 (M ` ) , 5 8 5 , 5 5 2 ,
5 6 9
,
5 5 1
,
4 2 2 ( 基峰 ) ,
2
、 结构鉴定
4 0 6
,
2 7 8
,
1 3 6
,
1 1 9 ( 基峰 ) 。
2
.
1 碱 A 的分子结构鉴定
对照文献资料 , 碱 A的各
项结构测定数据均与陈洒英等
从云南高乌头中鉴定的拉把头
碱 ( l a p p a e o n i t i n e )一致 f 3 一 了 ] 。
M S中的 m / : 5 8 4 为 M + , 与其
分 子 式 C 3 : H 4 连N : 0 8 相符 。
各种波谱数据所对应的部分结
构为 : U V 中的 2 2 2 . 0 、 3 0 9 . 4
三个吸收峰为苯 甲酞 ( ,仁李一
C O一 ) 电子跃迁所致 ; I R 中 ,
仁 H今 仁H ; + C H ,
C + 亡H + C H , + C H ,
~ , 尸沪~ ~ , ~ ~ ~ , - - 一 , 尸
17口 1 60 15 0 [4 0 13 0 120 11 0 10 0 ,目 8 0 70 6 0 50 40 3 仙 20 t O O
、
* 为溶剂峰 乏 p p口
图 1 碱 B 的 ` “ C N M R 一 D E P T 谱
3 5 6 2
、
3 5 3 7 ( O H )
,
3 2 6 3 ( N H )
,
1 7 0 1 (
e 一 o ) , 1 6 8 6 ( e 一 o ) , 16 0 4 、 1 5 8 7 、 1 5 2 4 ( A r ) ,
1 2 6 4
、
1 0 8 8 (一 o一 ) , 7 6 4 (邻 一取代苯环 C H ) ; ` H N M R中 , 1 · 1 5 ( 3 H , t , N 一 C H Z C H : ) ,
2
.
2 6 ( 3 H
, 。 , N H C O C丝3 ) , 3 . 3 0 ( 6H , s , O C丝, ~ X Z ) , 3 · 4 2 ( 3H , s , O C选 ) , 7 . 0 1
~ 8
.
6 7 ( 4 H
, 两个二重峰 , 两个三重峰 , 邻二取代苯环质子 ) , 1 1 . 08 ( I H , 宽单 峰 ,
D Z O交换消失 , N丝C O C H 。 ) ; ` 3 C N M R的化学位移亦完全与文献值相 符 ; M S 中主要
碎片离子归宿为 : 5 6 9 (M 斗一 C H 3 ) , 5 6 6 (M + 一 H Z O ) , 5 5 3 ( M +一 C H 3 O ) , 5 3 5 (M + 一
C H 3 O一 H Z O ) , 4 0 5 (基峰 , M + 一 C H 3 C O N H一 C 。H ; 一 C O O H )等 。 故鉴定碱 A 为拉
把乌头碱 。
顺便指出 , 对于 l a p p a c o n i t i n e 的结构 , 迄今在少数文献 f ” ’ ” J中 , 仍将 N C H Z C H 3
误为 N C H 3 , C ; 一邻 乙 酞 氨
苯 甲酸氧基误为甲氧甲基 ( 邻
乙酞氨苯 甲酞氧基误接在 C , 5
上 ) , C S 、 C g一 ZO H 误 为
C 1 3
、
C l `一 Z O H , C 一4一 O C H 3
误为 C , ; 一 O H , C , 。一 O C H 3
误为 C 6一 O C H 3 。 ’ “ C N M R中
的 D E P T谱 ( 表 1 和图 2 ) 则
有力地证实 了 l a p p a c 。 n i t i n e
中各种类型碳的归宿 。 碱 A的
, ” C N M R一 D E P T 谱 表 明 ,
其分子中的 32 个 碳 , 有 5 个
口}
C H + C H 含 + C H ,
C + C H + C H 盖+ C H ,
沐厂盖下箭 ~下篇爪厂丁篇门厂了篇飞犷犷百气厂百一下丁。 为溶荆峰 乙 , p门
图 2 碱 A 的 ’ ” C N M R一 D E P T 谱
陈兴 良等 :贵州高乌头的生物碱成分 4 2 7
H C3碳 、 7个 CH Z碳 、 1 2个 CH碳和 8个季碳 , 与 la p p ac o in it en 的正确结 构 完 全 相
符 。 若误为上述结构 , 则其预期的 ’ “ C N M R一 D E P T谱 与碱 A 的实验结果不相符 ( 5 个
CH 3碳 、 6 个 C H z碳 、 1 4个 C H 碳和 7 个季碳 ) 。 因此 , 碱 A , 亦即 l a p p a e o n i t i n e 的
分子结构中 , 只能是 N C H Z C H 3 , C 4一邻乙酞氨苯 甲酸氧基 , C : , C I ; , C , 6一 3 O C H 3
和C S , C 。一 Z O H 。
2
.
2 碱 B的分子结构鉴定
对照碱 A 和碱 B的 M S , 碱 B 的分子离子和主要碎片离子的 m / z 均较碱 A 递增 1 6 , 分
子中多一个 0 原子 即多一个 O H , 裂解观律相似 , 而其它各项结构数据均 与陈洒 英 、 蒋
山好等 〔“ 一 ’ 〕从云南高乌头和赣皖乌头中分离鉴定的毛莫乌头碱 ( ar n ac o in it en ) 一致 ,
故碱 B鉴定为毛食乌头碱 。 碱 B , 分子式 C 3 : H ` 4 N Z O g , 各种光谱数据所对应的 部 分结
构为 : U V 中的 2 2 . 6~ 30 9 . o n m 为苯甲酞 (《…身一 C O 一 )电子跃迁的特征吸收 ; I R中 ,
3 47 6
、
3 4 3 3 ( O H和 N H ) , 16 8 3 ( e = o ) , 16 0 6 、 1 5 2 7 ( A r ) , 12 7 0 、 1 0 8 9 (一 。一 ) ,
7 59 ( 邻二取代苯环 C H ) ; `H N M R中 , 2 . 1 3 ( 3 H , t , N C H Z C H 3 ) , 2 . 2 7 ( 3 H , s ,
N H C O C H 3 )
,
3
.
2 2 ( 3 H
,
s
,
O C也 ) , 3 . 3 2 ( 3 H , s , O翅 3 ) , 3 . 4 3 ( 3 H , s ,
O C H 3 )
,
7
.
03 ~ 8
.
6 7 ( 4 H
, 两个二重峰 , 两个三重峰 , 邻二取代苯环 质 子 ) , 1 1 . 08
( I H
, 宽单峰 , D Z O 交换消失 , N旦C O C H 3 ) ; M S中各主要离子归宿为 : 6 0 0( M + ) ,
5 5 5 ( M
千一 C H 3 ) , 5 8 2 (M + 一 H Z O ) , 5 6 9 ( M + 一 C H 3 O ) , 5 5 1 (M + 一 C H 3 0 一 H ZO ) ,
4 2 1 ( 基峰 , M + 一 C H 3 C O N H 一 C 6 H 4一 C O ZH ) 等 。 ` ” C N M R数据与碱 A 比 较 , 除了
C ? 上因 O H 取代 , 使其本身的化学位移移
向低场 ,对周围的一些碳 , 如 C 6 、 C S 等 产
生经基效应 , 向低场化学位移 (去屏蔽 ) ,
C , 。 向高场位移 ( 屏蔽 ) 外 , 其余各碳均
与碱 A一致 。 碱 B的 D E P T 谱表明 , 其分
子中有 5 个 C H 3碳 、 7 个 C H : 碳 、 1 个
C H碳和 9 个季碳 , 亦说明碱 B 比碱 A 多一
个 O H , 从 而 进 一 步 证 实 , 碱 B 即 是
r a n a c o n i t i n e
。
C月 . 曲 O C H s
碱 A ( l a p p a e o n it i n e ) H
厂…
碱 B ( r a n a e o n i t in e ) 0 H
孰 N H co C H ’
参 考 文 献
【1〕 江苏新医学院编 . 中药大辞典 ( 缩印本 ) . 下册 , 2 225 ~ 2 226 , 上海科学技术出版社 , 1 9860
〔2 〕 贵州省中医研究所编 。 贵州 中草药名录 。 145 . 贵州人民出版社 , 1988
〔3 1 陈洒英 , 刘玉青 杨崇仁 , 云南植物研究 , 2 ( 4) , 473 . 1980
[ 4 ] 蒋山好 , 朱元龙 , 朱仁宏 。 药学学报 . 17 ( 4 ) . 2 8 3 、 2 88 , 1988
[ 5 ] 5
.
W
.
P
e
l l
e t i e r
,
N
a r e s h V
.
M o d y
.
A t
a n a s P
.
V e n k
o v
,
T e t r a h e d r o n L e t t
. ,
N o
.
5 0
.
1 97 8
[6〕 V i s h w a p a u l a n d K . L . H a n d a P la n t a M e d . , 1 2 ( 2 ) , 1 77 . 1 96 4
〔7 ] N . K h a i m o v a . T e t r a h e d r o n L e t t . , N o . 3 8 . 2 7 1 1 , 1 964
[ 8〕 T h e M e r e k I n d e x , g t h e d . , 7 05 ( 52 1 4 ) , p u b l i s h o d b y M e r e k & C o . I n e . R a h w a v ,
5
.
A
,
19 7 6
[ g ]同 [ 8〕 . I Ot h e d , 7 7 2 ( 5 1 98 ) , 1 98 3
5 0 4 0
.
N
.
J
.
U
,
2 4 8贵 州 科 学 第 3期 1 9 9 x年
DE I R TPE N! O DA LK A L0 l DSC ON S T! E NU T TO SF
AC ON! TU MSN I O O MN A TU M
C hn eX n gl an g
,
H a o X i a o j i a n g
苦
W
a n g T i a n e n
( D e P a r 才m e n才 o f C h e m `s t r夕 , G u i二声: o u U 。 ` v e r s 云t夕 )
A b s t r a e t
T w o d i t e r p e n o i d a l k a l o i d s w e r e i s o l a t e d f r o m t h e r o o t s o f A e o n i t u m
s i n o m o n t a n u m N a k a i
, a f o l k d r u g i n G u i z h o u
,
C h i n a
.
T h e i r s t r u e t u r e s
h a v e b 。 e n i d e n t i f i e d a s l a p p a e o n i t i n e ( A ) a n d r a n a e o n i t i n e ( B ) o n t h e
b a s i s o f s p e e t r o s e o p i e d a t a ( U V
,
I R
, ’ H N M R
, ` “ C N M R a n d M S )
.
I n
a d d i t i o n
,
t h e y w e r e a l s o e o n f i r m e d b y D E P T s p e e t r o s e o p i e t e e h n i q u e s
f o r t h e f i r s t t i m e
.
K e y w o r d s A e o n i t u m s i n o m o n t a n u m N a k a i ; d i t e r p e n o i d a l k a l o i d s ;
l a p p a e o n i t i n e ; r a n a e o n i t i n e ; D E P T一 1 3 C N M R t e e h n i q u e s
上接 2 37 页
AT OM IC A B SO RP T ! ON S P E C T R AL AN AL Y S IS
F O R G LU C O S IN O LA T E IN R AP E S E E D
2 il u Z h a o y a n g W
a n g C h a n g l u n Q i n g Y i n g l i n
( G u f z h o u P h夕 s玄e a l T e s t 沦 C h e优 i e a l A o a l夕5 15 R e s e a r e h C e n t e r )
A b s t r a e t
T h e a n a l y t i e m e t h o d o f d e t e r m i n i n g g l u e o s i n o l a t e i n d i r e e t l y w i t h i t s
h y d r o l y s i s p r o d u e t s h a s b e e n u s e d f a r a n d w i d e
.
B u t s e n s i t i v i t y a n d
a e e u r a e y e a n n o t s a t i s f y t h e n e e d s w h i l e w e u s e s o m e i n d i r e e t m e t h o d
t o d e t e r m i n e g l u e o s i五o l a t e , s p e e i a l l y l o w g l u e o s i n o l a t e .
B y u s i n g a t o m i e a b s o r p t i o n s p e e t r o m e t r y
,
t h e s e f e a t u r e s a r e f o u n d
:
h i g h s e n s i t i v i t y
,
g o o d s e l e e t i v i t y a n d s t r o n g a b i l i t y o f a n t i i a m m i n g
.
B y
e o m b i n g e h e m i e a l p r o e e d u r e t o r e m o v e i n t e r f e r e
,
t h e l o w g l u e o s i n o l a t e
i n r a P e s e e d 15 d e t e r m i n e d
.
T h i s p a p e r p r e s e n t s i n t e r f e r e f a e t o r s a n d s t u d y t h e m e t h o d o f h o w t o
r e m o v e t h e i n t e r f e r e
.
B y a d d i n g h e a v y m e t a l t o p r e e i t i e a t e a n d s e p a r a t e
h y d r o p r o t e i n
,
p h y t i e a e i d
, a n d b y r e m o v i n g b a e k g r o u n d s u l f a t e f r o m t h e
s a m P l e s o l u t i o n
,
D
.
L
.
o f t h i s m e t h o d 15 1
.
0 7环m o l / 9 . W h e n t h e e o n t e n t
15 l e s s t h a n 7
.
3产m o l / g , S . D 15 e q u a l t o 0 . 0 9一 0 . 2 3 .
K e y W
o r d , g l u e o s i n o l a t e ; a t o m i e a b s o r p t i o n s p e e t r o m e t r y ; i n t e r f e r e
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