全 文 ：青风藤醇提液及其有效成分防治吗啡
戒断症状的实验研究
张国梅 1 ,莫志贤2 ,王彩云 2
(1.广州军区联勤部药品仪器检验所 ,广东 广州 510500;2.南方医科大学 ,广东 广州 510515)
　　摘要　目的:观察青风藤醇提液及其有效成分青藤碱对吗啡成瘾后催促戒断症状 、单胺类神经递质及吗啡依
赖神经细胞内 Ca2+的影响 ,研究青风藤和青藤碱的吗啡依赖戒断症状作用并探讨其机制。方法:通过吗啡依赖豚
鼠离体回肠实验及吗啡依赖小鼠催促戒断实验 ,观察青风藤醇提液及青藤碱预先作用对吗啡依赖豚鼠离体回肠及
吗啡依赖小鼠戒断症状的影响。以剂量递增法形成吗啡依赖大鼠模型 , 采用 Rf5000双波长荧光测定法观察青风
藤醇提液及青藤碱对吗啡依赖大鼠下丘脑单胺类神经递质去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA)、 5-羟色胺(5-HT)的
影响。建立吗啡依赖神经细胞模型 , Fluo-3着染细胞后 , 应用流式细胞仪测定青风藤醇提液及青藤碱对神经细胞内
Ca2+浓度的影响。结果:青风藤醇提液及青藤碱均能不同程度地抑制吗啡依赖豚鼠回肠的戒断性收缩反应 , 作用
呈剂量依赖性 , 能显著抑制吗啡依赖小鼠的戒断反应 , 降低吗啡依赖大鼠戒断后骤增的单胺类神经递质。青风藤
醇提液及青藤碱能使神经细胞内 Ca2+浓度显著升高 , 抑制纳洛酮催促戒断引起的吗啡依赖神经细胞内 Ca2+降低。
结论:青风藤醇提液及青藤碱对吗啡依赖戒断症状具有一定治疗作用 , 其作用机理可能是抑制单胺类神经递质释
放和调节细胞内 Ca2+浓度。
关键词　青风藤;青藤碱;吗啡依赖;戒断症状;单胺类神经递质;细胞内钙
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2009)09-1414-05
StudyontheDetoxificationofAlcoholExtractsfromOrientvineandItsEfective
ComponentonWithdrawalSyndromesofMorphine
ZHANGGuo-mei1 , MOZhi-xian2 , WANGCai-yun
(1.InstitutefordrugandinstrumentcontrolofGuangzhouMilitaryArea, Guangzhou510500, China;2.SouthMedicalUniversity,
Guangzhou510515, China)
Abstract　Objective:Toobservetheeffectofalcoholextractsfromorientivneanditseffectivecomponentsinomenineonwith-
drawalsyndromesandneurotransmiterofmorphine-abstinentmiceandonintracellularcalciumlevelinmorphine-dependentneuronal-
celsline.Tostudythedetoxificiationofalcoholextractsfromorientvineandsinomenineonmorphine-dependentanimalandexplorethe
mechanismofitseffect.Methods:Theeffectofalcoholextractsfromorientivneandsinomenineononabstinentsyndromeswasobserved
byexperimentstudyonmorphine-dependentexvivoileumfromguineapigsandmorphine-dpendentmice.Themorphine-dependent
modelmicewereestablishedbyinjectionondosageincreasingbydegrees.ThehypothalamicmonomineneurotrasmiterssuchasNA,
DA, 5-HTweretestedbyfluorospectrophotometry.Morphine-dependentcellinewasestablishedbyadministeringmorphineatdiferent
dosesintotheculturemedium.Thecellswerestainedwithfluo-3andtheintracelularcalciumlevelwasmeasuredbyflowcytometry.
Results:Alcoholextractsfromorientvineandsinomeninecouldaleviatewithdrawalcontractileresponseofmorphine-dependentexvivo
ileumfromguineapigsandwithdrawalsyndromesofmorphine-dependentmice, decreasetheconcentrationoftheneurotransmiters,
andelevatetheintracelularcalciumlevelandinhibitthedecreasingofCa2+inducedbynaloxone.Conclusions:Alcoholextractsfrom
orientvineandsinomeninehavesomeeffectsonwithdrawalsyndromeswhichmayberelatedtoinhibitingneurotransmittersandtheregu-
lationofintracellularcalciumconcentration.
Keywords　Orientvine;Sinomenine;Morphine-dependence;Withdrawalsyndromes;Neurotransmiter;Intracellularcalcium
收稿日期:2008-10-24
　　中药戒毒是具有中国特色的一种药物戒毒方
法 。目前许多用于戒毒的中药制剂已投入临床使
用 。中药复方扶正驱邪 、整体调理 、标本兼治 、低毒
无瘾等优点是西药无法比拟的 。但多数中药制剂对
戒断综合症的治疗尚不能达到快速 、肯定的效果 ,尤
其在戒断的早期 ,单用中药还不能完全控制戒断症
状及完全解除躯体依赖 。当今国内使用的戒毒中药
均为复方制剂 ,成分复杂 ,有效成分与无效成分混
杂 ,既影响了疗效的发挥 ,也使质量难以控制 ,同时
也难以对药物进行深入的机理研究 ,妨碍了戒毒中
药的开展及进入国际市场。
笔者在多年中药戒毒研究的基础上 ,致力于寻
·1414· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 9期 2009年 9月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2009.09.022
找对戒断症状针对性强 、疗效肯定 、低毒无瘾的天然
药物或有效成分 。在研究中笔者发现 ,中药青风藤
及其有效成分青藤碱对阿片类戒断症状有较好的治
疗作用 ,现将实验结果报告如下 。
1　材料与仪器
1.1　动物及细胞　SPF级雄性豚鼠 ,体质量 280 ～
350g,合格证号:粤检证字第 08A047,实验前禁食
12 h。SPF级昆明种小鼠 ,雌雄各半 ,体质量 18 ～ 25
g,合格证号:粤检证字第 2008A058。 SPF级雄性
Wistar大鼠 ,体质量 170 ～ 230 g,合格证号:粤检证
字第 08A046均由南方医科大学实验动物研究中心
提供。 SK-N-SH细胞系由中科院上海细胞生物研究
所细胞库提供。
1.2　实验药品　青风藤 ,购于广州市药材公司 ,经
南方医科大学中医系中药教研室专家朱玲鉴定为防
已植物青藤 [ Sinomeninmacutum(Thunb)etWils.]
的干燥藤茎;青藤碱 ,广州白云山制药总厂提供 ,批
号:200822;盐酸吗啡 ,总后勤部药品供应站提供;纳
洛酮 ,北京四环药厂提供 ,批号:071006;尼莫地平 ,
山东新华制药股份有限公司提供 ,批号:0008036;丁
丙诺啡 ,青海制药厂生产 ,批号:081102;去甲肾上腺
素(NA)、多巴胺(DA)、5-羟色胺硫酸肌酐 , Fluka公
司提供;Hepes、Fluo-3-AM由 Sigma公司提供;RPMI-
1640、胰蛋白酶由 Gibcol公司提供;胎牛血清由杭州
四季青公司提供 。
1.3　主要仪器　PCLAB生物信号采集系统 , JZ100
型张力换能器 ,北京微信斯达科技发展有限责任公
司提供;DW-5A自供液式恒温平滑肌槽 ,广东汕头
教育医学仪器厂提供;TGL-16G型台式低温高速离
心机 ,北京微信斯达科技发展有限责任公司提供;
RF5000荧光分光光度计 ,日本岛津;倒置相差显微
镜 , OlympusIME-Ⅱ;CO2 培养箱 , PRECISIONSCI-
ENTIFICLtd;流式细胞仪 ,型号 Elite,美国 Couter公
司 。
2　方法
2.1　吗啡依赖豚鼠离体回肠催促戒断实验 〔1, 2〕
2.1.1　豚鼠离体回肠标本的制备:取禁食 12 h的
豚鼠 ,击头处死 ,立即剪开腹腔取出回肠 ,弃去近盲
肠部约 10 cm回肠后 ,置于冰冷的 Krebs液中 ,用
Krebs液冲去肠腔内容物 ,将回肠剪成 3 ～ 4 cm数
段 ,将回肠段悬挂于恒温平滑肌槽内含 30 mLKrebs
液的麦氏浴管中 ,通入混合气体(95%O2 、5%CO2),
将回肠段下端固定于麦氏浴管底部沟上 ,上端轻轻
地挂在张力换能器的金属片上 ,通过张力换能器与
计算机连接 ,采用 PCLAB生物信号采集系统记录回
肠段张力的变化。水浴温度 37.5 ℃,每 15 min更
换一次 Krebs液。实验开始前 ,先使回肠标本在 1 g
静止张力下平衡 15 min。
2.1.2　吗啡依赖回肠标本的制备:取制备好的离
体回肠段悬挂于 10 mL含 3 μmol/L吗啡的 Krebs
液中 ,通人混合气体(95%O2 、5%CO2), 37 ℃孵育
4h,即得吗啡依赖回肠标本 。
2.1.3　豚鼠回肠的测定:将回肠分为正常对照组 、
吗啡依赖模型组 、青风藤醇提液组 、青藤碱系列剂量
组及尼莫地平阳性对照组。将各组标本段移入恒温
平滑肌槽内的麦氏浴管中 ,平衡 15 min后进行实
验。在含吗啡依赖回肠标本的浴管中 ,加入纳洛酮
至 1 μmol/L,即可引起催促收缩反应。青风藤醇提
液(生药含量 2、4 mg/mL)、青藤碱 (50、250 μmol/
L)或尼莫地平(0.3μmol/L)分别在加入纳洛酮前 1
min加入 ,观察药物对回肠催促戒断收缩的影响 。
2.2　吗啡依赖小鼠催促戒断实验 〔3〕
2.2.1　吗啡依赖小鼠模型的建立:本实验采用皮
下注射剂量递增法形成吗啡依赖模型。取昆明种小
鼠 100只 ,随机分成造模组(80只)及正常对照组
(20只),造模组皮下注射盐酸吗啡 ,每日给药 2次
(8∶00、20∶00),连续给药 6 d,剂量依次递增 ,分别
为 25、50、75、100、125、150mg/kg,第 4天开始 ,维持
在 150mg/kg,第 7天只在晨 8∶00给药 1次 ,末次给
吗啡后 2 h给予纳洛酮(6 mg/kg,腹腔注射)催促。
正常对照组逐日皮下注射等容积生理盐水 ,给药时
间及次数同造模小鼠。
2.2.2　给药方法:将造模组小鼠 80只 ,在末次注
射吗啡后随机分为 4组 ,即吗啡依赖模型组 ,青风藤
醇提液组 、青藤碱组及丁丙诺啡阳性对照组 ,每组
20只。各组动物分别在给予纳洛酮前 30min给药。
青风藤醇提液组腹腔注射青风藤醇提液 20 g/kg(生
药量);青藤碱组腹腔注射青藤碱 60 mg/kg;模型组
腹腔注射等容积生理盐水;阳性对照组腹腔注射丁
丙诺啡 0.4 mg/kg, 1次 /天 ,共 3d。
2.2.3　戒断症状观察指标:小鼠腹腔注射纳洛酮
后立即放入 3 000mL的大烧杯中 ,记录 30min内小
鼠的跳跃次数以及 30 min内各组小鼠跳跃反应的
动物数。连续观察小鼠停用吗啡后 4 d的催促戒断
症状 。
2.3　吗啡依赖大鼠单胺类神经递质的测定
2.3.1　吗啡依赖大鼠模型的建立〔4〕:本实验采用
皮下注射剂量递增法形成吗啡依赖模型 。取 Wistar
大鼠 50只 ,随机分成造模组(40只)及正常对照组
(10只),造模组皮下注射盐酸吗啡 ,每日给药 2次
·1415·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 9期 2009年 9月
(8∶00、20∶00),连续给药 6 d,剂量依次递增 ,分别
为 25、50、75、100、125、150 mg/kg,第 4天开始 ,维持
在 150mg/kg,第 7天只在晨 8∶00给药 1次 ,末次给
吗啡后 2 h给予纳洛酮(6 mg/kg,腹腔注射)催促 。
正常对照组逐日皮下注射等容积生理盐水 ,给药时
间及次数同造模大鼠 。
2.3.2　给药方法:将造模组大鼠 40只 ,在末次注
射吗啡后随机分为 4组 ,即吗啡依赖模型组 、青风藤
醇提液组 、青藤碱组及丁丙诺啡阳性对照组 ,每组
10只 。青风藤醇提液组腹腔注射青风藤醇提液 , 20
g/kg;青藤碱组腹腔注射青藤碱 60mg/kg;模型组腹
腔注射等容积的生理盐水;阳性对照组腹腔注射丁
丙诺啡 0.4mg/kg, 1次 /天 ,共 7天 。
2.3.3　单胺类神经递质的测定〔5〕:于治疗第 7天 ,
腹腔注射纳洛酮后 30min,将大鼠迅速断头 ,取下丘
脑 ,液氮冷冻 ,称量质量 ,并用酸化正丁醇制匀浆 ,稀
释至 4.0 mL,振摇 5min,离心 5 min,取上清液 2.5
mL加正庚烷 5.0 mL、0.1 mol/L盐酸 1.2 mL,振摇
5 min,离心 5 min,取水相 0.5mL加 1 /15mol/LpH
7.2磷酸盐缓冲液 1.7 mL加碘试剂 0.1 mL,静置 2
min,加碱性亚硫酸钠 0.5 mL,静置 2min,加 6 mol/
L醋酸 0.6 mL,沸水浴 2 min,冷水冷却 ,日本岛津
RF5000荧光分光光度计测定 NA荧光强度(测定波
长为激发光 365nm,发射光 480nm);测定后液体加
45%磷酸 0.1 mL,沸水浴 15 min后冷却 ,测定 DA
荧光强度(测定波长为激发光 310 nm,发射光 370
nm)。另取水相 0.5mL,加 0.5%半胱氨酸 0.1mL,
加 0.004%邻苯二甲醛 3 mL沸水浴 10 min,冷水冷
却 ,测定 5-HT荧光强度 (测定波长为激发光 365
nm,发射光 480nm)。
2.4　吗啡依赖细胞内 Ca2+浓度的测定 〔6, 7〕
2.4.1　吗啡依赖细胞培养:细胞培养用 RPMI-
1640培养基(含谷胱酰胺),并加入 10%胎牛血清 ,
40 unit/mL青霉素和链霉素 , 5%CO2 、37 ℃培养 , 2 ～
3 d换液 , 2 ～ 3 d传代 。进行实验分为:正常对照
组 、吗啡戒断组 、吗啡依赖组 、青风藤醇提液组 、青藤
碱组及丁丙诺啡阳性对照组。除正常对照组外 ,其
余各组培养中加入吗啡 ,建立吗啡依赖模型 ,培养基
吗啡浓度为 105 mol/L。培养 4 d后 ,正常对照组与
吗啡戒断组用正常培养基 ,青风藤醇提液组 、青藤碱
组分别用含青风藤醇提液 、青藤碱的培养基培养 ,药
物终浓度为 20μmol/L,丁丙诺啡阳性对照组 ,用含
丁丙诺啡的培养基培养 ,终浓度为 10 μmol/L。孵
育 12 h后 ,各组培养基中加入纳洛酮至终浓度 10
nmol/L孵育 5 min后 ,取各组细胞 ,用 0.25%胰蛋
白酶消化 ,待细胞收缩变圆后 , 用无钙缓冲液 PBS
终止反应制成细胞悬液 ,低速离心 (500 r/min, 5
min),弃上清 ,再用 PBS冲洗 2次 。收集细胞重悬
于 PBS中 ,调整细胞浓度为 5×105 /mL备用 。
2.4.2　细胞内 Ca2+浓度测定:荧光探针导入:取
SK-N-SH细胞悬液 1 mL,加 Fluo3-AM至终浓度为
10 μmol/L, 5%CO2 、37 ℃避光孵育 1h,其间轻轻振
荡几次。测定:取出细胞悬液 ,离心 ,去掉多余染料 ,
再用无钙缓冲液 PBS反复洗涤 3次 ,最后用 PBS重
悬至 1 mL,加入纳洛酮终浓度为 10 nmol/L,以流式
细胞仪检测 ,激发波长为 506 nm,发射波长为 526
nm,随机检定单个 SK-N-SH细胞的荧光强度值 ,取
1×105个细胞的荧光强度值的平均值为各组测定
值。
2.5　统计学处理　实验数据以 x±s表示 ,以 SPSS
13.0统计软件进行处理 。
3　结果
3.1　对豚鼠离体离体回肠戒断性收缩的影响　离
体豚鼠回肠在含吗啡的 Krebs液中温孵 4 h,即制成
吗啡依赖离体回肠模型 ,加入纳洛酮催促后 , 20秒
内 ,即可引起收缩 ,肠管张力显著增加 ,该戒断性收
缩维持 5 min以上。正常豚鼠回肠加入纳洛酮后 ,
不引起收缩 ,表明模型制作成功 。预先给青风藤醇
提液或青藤碱处理 1 min后再用纳洛酮催促 ,吗啡
依赖的豚鼠回肠的戒断性收缩显著减弱 ,与正常对
照组比较 ,肠管收缩张力峰值下降 ,张力降低 ,吗啡
依赖豚鼠离体回肠的戒断性收缩受到显著的抑制 ,
药物的作用呈剂量依赖性。阳性对照药尼莫地平在
0.3 μmol/L亦能显著抑制吗啡依赖豚鼠回肠的戒
断性收 ,与文献报道一致 〔8〕。见表 1。
　表 1 　各组肠管的收缩幅度( x±s, n=10)
组别 剂量 肠管的收缩幅度/mm
正常对照组 　　- 　　0
吗啡模型组 　　- 29.3±5.4
青风藤醇提液组 　2mg/mL 14.1±3.2＊＊
青风藤醇提液组 　4mg/mL 8.2±2.3＊＊
青藤碱组 50μmol/mL 18.7±2.5＊＊
青藤碱组 250 μmol/mL 10.0±3.3＊＊
尼莫地平组 0.3 μmol/L 7.8±1.9＊＊
　　注:与吗啡模型组比较 , ＊＊P<0.01
3.2　对小鼠戒断反应的影响　以剂量递增法形成
吗啡依赖小鼠模型 ,用纳洛酮进行催促戒断 ,观察小
鼠的戒断反应 。实验结果表明 ,与模型组比较 ,青风
藤醇提液生药含量 20g/kg及青藤碱 60mg/kg连续
3d给药均能显著抑制吗啡依赖小鼠纳洛酮催促后
·1416· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 9期 2009年 9月
产生的跳跃反应 。阳性对照药丁丙诺啡 0.4 mg/kg
亦能显著抑制吗啡依赖小鼠纳洛酮催促后产生的跳
跃反应 。见表 2。
　表 2 　各组小鼠跳跃次数( x±s)
组别 小鼠跳跃次数 /次第 2天 第 3天
吗啡模型组 31.87±10.39 20.76±6.56
(n=18) (n=15)
青风藤醇提液组 20.36±8.78＊＊ 13.28±7.46＊
(20g/kg, ig) (n=10) (n=8)
青藤碱组 24.55±9.43＊ 15.27±6.41＊＊
(60mg/kg, ip) (n=13) (n=9)
丁丙诺啡组 17.85±5.94＊＊ 0
(0.4 mg/kg, ip) (n=8)
　　注:与吗啡模型组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
3.3　对成瘾大鼠下丘脑单胺类递质的影响　治疗
7 d后 ,吗啡模型组大鼠脑组织中 NA、5-HT含量显
著高于其他各组(P<0.05或 P<0.01),吗啡模型
组大鼠脑组织中 DA含量显著高于青风藤醇提液
组 、青藤碱组(P<0.01)。结果表明:大鼠戒断时 ,
脑组织中 DA、NA、5-HT含量显著升高 ,青风藤醇提
液和青藤碱能使其改变趋于正常 ,见表 3。
　表 3　　　　　各组大鼠单胺类神经递质
含量(μg/g, x±s, n=10)
组别 NA DA 5-HT
正常对照组 1.0464±0.3347＊＊ 1.6811±0.3334＊＊ 1.2149±0.2031＊＊
吗啡模型组 2.0859±0.2908 2.6942±0.3795 1.7302±0.1076
青风藤醇提液组 1.2818±0.2605＊＊ 2.0651±0.3610＊＊ 1.3306±0.2330＊＊
青藤碱组 1.3560±0.3430＊＊ 2.1941±0.2948＊＊ 1.4082±0.2045＊＊
丁丙诺啡组 1.6113±0.1765＊＊ 2.4388±0.3090 1.5224±0.2183＊
　　注:与吗啡模型组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
3.4　药物对吗啡依赖细胞内 Ca2+浓度的影响　
与正常对照组比较 ,吗啡依赖细胞内 Ca2+浓度显著
升高(P<0.05),以纳洛酮催促戒断后 ,神经细胞内
Ca2+浓度迅速降低 。青风藤醇提液 、青藤碱及丁丙
诺啡均能抑制纳洛酮的作用 ,维持细胞内 Ca2+浓度
显著高于吗啡模型组(P<0.05)。各组细胞内 Ca2+
浓度荧光值见表 4。
　表 4　各组细胞内 Ca2+浓度荧光值( x±s, n=1×105)
组别 细胞内 Ca2+浓度荧光值
正常对照组 5.17±0.59
吗啡依赖组 7.06±1.04#
吗啡戒断组 5.88±0.83
青风藤醇提液组 9.03±1.26＊#
青藤碱组 7.77±1.18＊#
丁丙诺啡组 7.35±0.91＊#
　　注:与正常对照组比较, #P<0.05;与吗啡依赖组比较 , ＊P<
0.05
4　讨论
中药青风藤是防已科植物青藤 [ Sinomeninm
acutum(Thunb.)etWils.]及毛青藤 [ Sinomenium
acutum(Thunb.)etWils.VarcinereumRehd.et
Wils.]的干燥藤茎 ,具有祛风湿 ,通经络 ,利尿等功
效。临床上主要用于治疗风湿痹痛 、关节肿胀 ,麻痹
搔痒等病症〔9, 10〕。笔者以前的中药戒毒复方中 ,将
青风藤作为主要药物之一 〔11, 12〕。尽管青风藤用于
戒毒治疗已有不少报道 〔13〕 ,但关于青风藤抗阿片类
戒断反应的实验研究尚未见报道 。本研究采用最常
用的药物依赖性实验方法 ,从体内及体外两个方面
观察青风藤及其有效成分青藤碱对吗啡依赖动物戒
断症状的影响 。结果表明 ,青风藤醇提液对离体豚
鼠回肠的戒断性收缩及小鼠的催促戒断反应均有显
著的抑制作用 ,提示青风藤有较强的戒毒作用。
青藤碱 (Sinomenine)是青风藤的主要化学成
分 , 化学名为 7 , 8-didehydro-4-hydroxy-3, 7-dime-
thoxy-17-methyl-(9α, 13α, 14α)-morphinan-6-ome,从
化学的结构上看 ,青藤碱由氢菲核和乙胺桥组成 ,母
核为吗啡烷。本实验结果表明 ,青藤碱的戒毒作用
与青风藤相似 ,在体内外均能显著的抑制吗啡依赖
的戒断症状的作用 。青藤碱可能是青风藤治疗戒断
综合症的有效成分 ,由于其化学结构与吗啡相类似 ,
它可能通过作用于阿片受体而发挥作用 ,也可能通
过其他途径起作用 ,确切的机理尚有待进一步的研
究。从本实验结果看 ,青风藤醇提取液的体内外作
用均较青藤碱作用显著 ,表明青风藤中可能还有其
它成分在起作用或协同作用 。青风藤及青藤碱是具
有研究价值的天然戒毒药物 ,它们对戒断综合症疗
效确切 ,药物本身无成瘾性。笔者实验还观察了青
风藤醇提液及青藤碱对吗啡依赖大鼠下丘脑单胺类
神经递质去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA)、5-羟色
胺(5-HT)的影响以及对吗啡依赖神经细胞内 Ca2+
的影响 ,实验结果表明其作用机理可能与抑制单胺
类神经递质释放及调节细胞内 Ca2+浓度有关。其
抗吗啡依赖作用的机理还有待进一步深入研究 ,以
为全面评价该药在戒断方面的应用及研制高效无成
瘾性的戒毒药物提供依据。
参 考 文 献
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木瓜发酵液对环磷酰胺所致小鼠免疫抑制的保护作用
史继静1 ,刘朝奇 1＊ ,李　斌 1 ,覃晓琳1 ,陈　晶 2 ,王锦江 2 ,杨　凡1
(三峡大学 1.分子生物学研究所;2.医学院 ,湖北 宜昌 443002)
　　摘要　目的:探讨木瓜发酵液的免疫调节作用。方法:昆明种小鼠腹腔注射环磷酰胺 , 建立小鼠免疫抑制模
型 , 同时灌胃高 、低剂量木瓜发酵液 ,分别观察其对小鼠血清溶血素 、淋巴细胞转化功能及 foxp3等基因表达的影
响。结果:与模型组比较 ,木瓜发酵液高 、低剂量均可显著提高小鼠血清溶血素含量 、增强淋巴细胞转化功能及下
调 foxp3、TGF-β、PD1、Fas、Bax等基因的表达。结论:木瓜发酵液可显著改善环磷酰胺对小鼠免疫功能的抑制。
关键词　木瓜发酵液;环磷酰胺;免疫抑制;基因表达
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2009)09-1418-04
ProtectingEffectofChaenomelesspeciosaBrothonImmunesuppressive
MiceInducedbyCyclophosphmide
SHIJi-jing1 , LIUChao-qi1 , LIBin1 , QINXiao-lin1 , CHENJing2 , WANGJin-jiang2 , YANGFan1
(1.InstituteofMolecularBiology;2.MedicalColege, ChinaThreeGorgesUniversity, Yichang443002, China)
Abstract　Objective:ToinvestigatetheeffectsofChaenomelesspeciosabrothonimmunoregulationforanti-tumorchemotherapy.
Methods:Immunosuppressivemodelwasinducedbycyclophosphamide(CTX)inmice.Themiceweretreatedwiththebrothfor15
days.Theserumhemolysinwasobservedinmousesera.Spleenlymphocytetransformationandgenetranscriptionrelatedtotheimmu-
noregulationinspleenlymphocytesweredetected.Results:Afteradministratedthebroth, theserumhemolysinandlymphocytetransfor-
mationratessignificantlyincreasedandthemRNAexpressionoffoxp3、TGF-β、PD1、Fas、BaxweredownregulatedcomparedwithCTX-
groug.Conclusion:ChaenomelesspeciosabrathhasprotectiveeffectsontheimmunosuppressivemouseinducebyCTX.
Keywords　Chaenomelesspeciosa(Sweet)Nakaibroth;Cyclophosphmide;Immunesuppression;Geneexpression
收稿日期:2008-10-21作者简介:史继静(1983-),女,硕士研究生 ,主要从事分子药理学研究;E-mail:annashijijing@yahoo.com。＊通讯作者:刘朝奇 , E-mail:ctgulcq@yahoo.com。
　　木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠 [ Chaenomelesspe-
ciosa(Sweet)Nakai]的干燥成熟果实 ,主产于安徽 、
山东 、浙江 、湖北 、云南 、贵州 、四川等地 ,其中产于湖
北长阳资丘地区的道地药材 ,称为资木瓜。木瓜性
味酸温 ,无毒 ,有舒筋活络 、健脾开胃 、疏肝止痛 、祛
风除湿等功效 ,具有较广泛的药理作用 ,可用于防治
·1418· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 9期 2009年 9月