全 文 ：青风藤中总生物碱的气相色谱-质谱联用分析
吴振启1，郭剑明2，陈琴华3，李慧峰1，李伟亮1，张菊根1，王国民2
(1．复旦大学附属中山医院青浦分院泌尿外科，上海 201700;2．复旦大学中山医院泌尿外科，上海 200032;3．武
汉大学药学院，430070)
摘 要 目的 采用索氏提取法对青风藤中总生物碱进行提取分离，并利用气相-质谱联用(GC-MS)方法，对其化
学成分进行分析。方法 采用 90%无水乙醇提取，盐酸酸化后，氨水碱化后三氯甲烷萃取，利用 GC-MS对总生物碱中的
化学成分进行分离分析，并对其中的 15 种化学成分进行鉴定。结果 该方法提取时青藤碱含量高，达到 80． 18%，安贝
灵碱 3． 44%，光千金藤碱 3． 05%。采用峰面积归一化法计算各成分相对百分含量，所鉴定的成分占总流出峰面积的
95． 1%。结论 实验结果为进一步开发研究青风藤中生物碱提供依据。
关键词 青风藤;青藤碱;总生物碱;气相色谱-质谱联用
中图分类号 R927 文献标识码 A 文章编号 1004－0781(2012)04－0495－03
Analysis of Total Alkaloids in Sinomenium acutum by Gas Chromatography-Mass
Spectrometry
WU Zhen-qi1，GUO Jian-ming2，CHEN Qin-hua3，LI Hui-feng1，LI Wei-liang1，ZHANG Ju-gen1，WANG
Guo-min2(1． Department of Urinary Surgery，Qingpu Hospital，Qingpu Branch of Zhongshan Hospital，Fudan
University，Shanghai 201700，China;2． Department of Urinary Surgery，Zhongshan Hospital，Fudan
University，Shanghai 200032，China;3． Department of Pharmacy，Wuhan University，Wuhan 430070，
China)
ABSTRACT Objective To extract total alkaloids of Sinomenium acutum by Soxhlet extractor and analyze them by gas
chromatography-mass spectrometry (GC-MS)． Methods The Sinomenium acutum was extracted by 90% alcohol，acidified by
hydrochloric acid，alkalinized by ammonia water，and then extracted by chloroform． Fifteen peaks were separated and identified
by GC-MS． Results The relative content of sinomenine，ambelline and stepharine was up to 80． 18%，3． 44% and 3． 05%，
respectively． The compounds were quantitatively determined by normalization method，and the identified compounds represented
95． 1% of total GC peak area． Conclusion The results provide important foundation to further study and exploit Sinomenium
acutum．
KEY WORDS Sinomenium acutum;Sinomenine;Total alkaloids;Gas chromatography-mass spectrometry
青风藤是防己科植物青藤和毛青藤［Sinomenium
acutum(Thunb)Rehd et Wils］的干燥藤茎［1］。青风藤味
苦性平，归肝、脾经，具有祛风湿、通经络、镇痛、利小便
之功效，用于治疗风湿痹痛、关节肿痛、麻痹瘙痒、水肿、
脚气等。文献报道青风藤生物碱具有显著的镇痛、镇
静、抗炎、抑制免疫、降血压等作用。研究发现青风藤生
物碱总提取物具有很好的对抗纳洛酮引起的戒断作
用［2-3］。笔者采用索氏提取法提取青风藤中总生物碱，
用 气 相 色 谱-质 谱 (gas chromatography-mass
spectrometry，GC-MS)联用技术对其成分进行分离鉴定，
为进一步开发利用青风藤资源提供科学的实验依据。
1 材料与方法
1． 1 仪器和试剂 GC-MS-QP2010 气相色谱-质谱联
收稿日期 2011－07－05 修回日期 2011－09－14
作者简介 吴振启(1964－) ，男，湖北蕲春人，博士，研究方
向:泌尿外科肿瘤。电话:021－69719190－4313，E-mail:wzq0719
@ hotmail． com。
用仪(日本 Shimadzu 公司) ;GC-MS solution 色谱工作
站和 NIST质谱数据库(日本 Shimadzu 公司) ;DB-5MS
毛细管柱(30 m×0． 25 mm，0． 25 μm，美国 Agilent 公
司) ;索氏提取器;PHS-3C 酸度计;SHZ-D 循环水式真
空泵;RE-52 型旋转蒸发器;电热恒温干燥箱;电子天
平 AEU-210(日本岛津) ;无水乙醇、三氯甲烷和乙醚
(分析纯，西安试剂厂) ;其他试剂均为分析纯。青风
藤药材购自十堰市中药材公司，经湖北医药学院附属
东风医院胡碧波主任中药师鉴定。
1． 2 供试品的制备 准确称取青风藤 2． 0 g，装入索
氏提取器中，用 90%无水乙醇 50 mL进行提取。加热
提取 6． 0 h后，将提取物用纯化水稀释到 100 mL，然后
用 6 mol·L－1的盐酸调节其 pH 为 3． 0 ～ 3． 5，搅拌均
匀后，抽滤，再往所得滤液中加入体积分数为 10%氨
水调节其 pH 至 8 ～ 9，用三氯甲烷萃取 2 次，每次 25
mL。三氯甲烷萃取液蒸馏后所得的液体即为溶有生
物碱的粗品。将生物碱粗品溶于纯化水 100 mL中，用
·594·医药导报 2012 年 4 月第 31 卷第 4 期
6 mol·L－1盐酸溶液调节其 pH为 3． 0 ～ 3． 5，然后用乙
醚洗涤 2 次，每次 5 mL，弃去乙醚层，然后在水层用体
积分数 10%氨水调节 pH 约为 10。再用三氯甲烷萃
取 2 次，方法同上。所得三氯甲烷液进行蒸馏即可得
总生物碱精品，将其定容 1． 0 mL，GC-MS分析。
1． 3 GC-MS分析条件 以 DB-5MS(30 m×0． 32 mm，
0． 25 μm)石英毛细管柱为分析柱，高纯氦气为载气;
进样口温度 280 ℃，进样方式为分流进样，分流比为
30∶1，进样量为 1 μL，流速 2． 0 mL·min－1;程序升
温:起始温度 200 ℃，保持 2 min，以 20 ℃·min－1速率
升温至 280 ℃，保持 5 min。质谱接口温度 280 ℃，EI
源温度 200 ℃，电子轰击能量为 70 eV，扫描范围 m/z
40 ～ 500 amu，全离子扫描，采集延时 3． 0 min。归一化
法计算含量。
2 结果
取青风藤提取物适量，用乙酸乙酯溶解，即得样品
溶液。精密吸取 1 μL，注入 GC /MS 仪分析，总离子流
图见图 1。经气相色谱-质谱联用仪的计算机软件 N
IST谱图库自动检索，并查阅相关文献［2］与标准图谱
对照分析，得出相应的化学成分。结果见表 1。
图 1 青风藤中总生物碱的 GC-MS总离子流图
Fig． 1 The GC/MS total ion-current chromatogram of
Total Alkaloids in Sinomenium acutum
表 1 青风藤提取物的化学成分及相对含量
Tab． 1 The constituents and relative contents in the essential oil of Sinomenium acutum
序号
保留
时间 /min
化合物 符合度 /% 分子式
相对分
子质量
相对
含量 /%
1 7． 544 3-(氮-乙酰基-氮-甲氨基)-20-氨基-孕甾烷 62 C24H42N2O 374 0． 53
2 7． 702 光千金藤碱 81 C18H19NO3 297 3． 05
3 8． 029 安贝灵碱 72 C18H21NO5 331 3． 44
4 8． 255 青藤碱 90 C19H23NO4 329 80． 18
5 8． 358 (-)-6＇-甲基-氮-牛心果碱 56 C19H23NO4 329 1． 28
6 8． 443 3-甲氧基-氮-可待因 52 C18H25NO 271 1． 01
7 8． 670 7-甲基-4-苯基亚氨基-芴酮 56 C19H14N2 270 0． 92
8 8． 749 6α-3-甲氧基-6，17-二甲基-左吗南-6-醇 51 C19H27NO2 301 0． 31
9 9． 424 7，8-二羟基-3，7-二甲氧基-氮-甲基-左吗南-4 醇-6-酮 70 C19H23NO4 329 0． 28
10 9． 863 4-(6-甲基-3-环己烯羧基)-吗啉 57 C12H19NO2 209 2． 14
11 10． 176 L-防己碱 72 C20H21NO4 339 0． 10
12 10． 345 蒽-9-羧酸癸酯 45 C25H30O2 362 0． 24
13 10． 492 5-苄基-2，3-二-(4-甲氧苯基)-1，4-二甲基胡椒嗪 77 C27H32N2O2 416 0． 42
14 10． 705 (+ /－)-3，10-二甲氧基-小檗因-2，9-二醇 73 C19H21NO4 327 0． 37
15 11． 559 4-［［4-［2-(4-甲氧苯基)乙烯基］苯基］偶氮］苯基］苯基-
甲酮 48 C28H22N2O2 418 0． 83
实验结果表明，由该提取方法提取得青风藤总生
物碱中活性生物碱青藤碱的含量较高，占鉴定总化合
物的 80． 18%，其次经 GC-MS 鉴定的生物碱为安贝灵
碱、光千金藤碱、4-(6-甲基-3-环己烯羧基)-吗啉、(-)-
6＇-甲基-氮-牛心果碱和 3-甲氧基-氮-可待因分别占鉴
定总化合物的 3． 44%，3． 05%，2． 14%，1． 28% 和
1． 01%，该 6 种生物碱占鉴定总化合物的 91． 1%。采
用峰面积归一化法计算各成分相对百分含量，所鉴定
的成分占总流出峰面积的 95． 1%。
3 讨论
笔者在本研究建立了 GC-MS 测定中草药青风藤
中总生物碱的化学成分的方法，依据 GC-MS 软件谱
库，根据相关参考文献、保留时间、化合物相似度，鉴定
15 种化合物。由结果可以看出在青风藤总生物碱中
成分中大多为吗啡类、吲哚类、吖啶酮类、吡喃酮类和
氨基化合物，其次为脂类、醇和稠环化合物。实验结果
为建立青风藤的指纹图谱、质量标准以及合理开发青
风藤资源奠定了一定的基础。
·694· Herald of Medicine Vol. 31 No. 4 April 2012
参考文献
［1］ 吴宗群．中药青风藤的药理作用及临床应用［J］．中国药
师，2006，9(9) :857－858．
［2］ 李海滨． 青藤生物碱成分的研究［J］． 贵阳医学院学报，
2006，31(4) :344－345．
［3］ 宋永彬，程维明，曲戈霞，等．青风藤化学成分的分离与鉴
定［J］．沈阳药科大学学报，2007，24(2) :79－81．
DOI 10． 3870 / yydb． 2012． 04． 031
气相色谱法测定檀香通脉胶囊中冰片与薄荷脑含量
刘宇1，程璐2
(1．华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部，武汉 430030;2．武汉市第一医院药剂科，430022)
摘 要 目的 建立气相色谱法同时测定檀香通脉胶囊中冰片、薄荷脑两组分的含量。方法 以萘为内标物质，乙
酸乙酯作为溶剂，岛津 CBP-M25-025(25 m×0． 22 mm，0． 25 μm)为色谱柱;载气氮气，柱温 130 ℃，进样口和检测器温度
均为 180 ℃，氢火焰离子化检测器，进样量 1 μL。结果 测定各组分达到良好分离，冰片的线性范围为 0． 26 ～
2． 55 mg·mL－1(r=0． 999 9) ，薄荷脑的线性范围为 0． 26 ～ 2． 62 mg·mL－1(r = 0． 999 8) ;冰片的平均回收率为 97． 5%
(RSD=1． 77%) ，薄荷脑的回收率为 96． 8%(RSD=1． 28%)。结论 该方法灵敏、快速、简便、可用于檀香通脉胶囊的质
量控制。
关键词 檀香通脉胶囊;冰片;薄荷脑;色谱法，气相
中图分类号 R286;R927． 2 文献标识码 A 文章编号 1004－0781(2012)04－0497－03
Simultaneous Determination of Borneol and Menthol in Tanxiang Tongmai Capsule by
Gas Chromatography
LIU Yu1，CHENG Lu2(1． Department of Pharmacy，Tongji Hospital，Tongji Medical College，Huazhong
University of Science and Technology，Wuhan 430030，China;2． Department of Pharmacy，the First Hospital
of Wuhan City，Wuhan 430022，China)
ABSTRACT Objective To establish gas chromatography (GC)method for separating and determining both borneol and
menthol in tanxiang tongmai capsule． Methods Naphthalene served as an internal standard，acetic ether as a solvent，10%
PEG-20M as separation，nitrogen as the carrier gas． Column temperature was set at 130 ℃，and injector and detector temperature
was 180 ℃ ． Sample size was 1 μL by using flame ionization detector． Results The linear ranges of borneol and menthol were
0． 26－2． 55 mg·mL－1(r = 0． 999 9)and 0． 26 – 2． 62 mg·mL－1(r = 0． 999 8) ，respectively． Recovery rates of borneol and
menthol were 97． 5% (RSD=1． 77%)and 96． 81% (RSD=1． 28%) ，respectively． Conclusion This method is convenient，
rapid，accurate and reproducible，and can be used for quality control of tanxiang tongmai capsule．
KEY WORDS Tanxiang tongmai capsule;Borneol;Menthol;Gas chromatography
檀香通脉胶囊(批准文号:鄂药制字 Z20082996)
由檀香、延胡索、冰片、薄荷脑等成分组成，主要功效为
活血化淤。临床上用于治疗冠心病、心绞痛。冰片可
以通过改善组织的血氧供应，进而改善该区域的能量
代谢，对抗急性心肌缺血，增加冠脉流量，减慢心
率［1］;薄荷脑内服可缓解局部炎症，并有健胃、驱风的
作用［2］。檀香通脉胶囊中冰片和薄荷脑的含量均为
80 mg·g－1，原标准中仅有薄层色谱鉴别。为更好控
制产品质量，笔者建立毛细管气相色谱法测定檀香通
脉胶囊中冰片和薄荷脑的含量。
收稿日期 2011－09－15 修回日期 2011－10－25
作者简介 刘宇(1980－) ，男，江苏连云港人，主管药师，硕
士，主要从事药动学研究与医院药学工作。电话:027 －
83665464，E-mail:liuyu_tj2004@ 126． com。
1 仪器与试药
气相色谱仪(日本岛津 GC-14C) ，浙大 N2000 色
谱工作站;电子天平(德国 Sartorius ME215S，d =
0． 01 mg) ;冰片对照品(中国食品药品检定研究院，含
量测定用，批号:110743-200504) ;薄荷脑对照品(中国
食品药品检定研究院，批号:110728-200506) ;萘(中国
食品药品检定研究院，批号:111673-200602) ;檀香通
脉胶囊(武汉市第一医院生产，批号 100520，100711，
101124) ;试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 色谱柱:岛津 CBP-M25-025(25 m×
0． 22 mm，0． 25 μm) ;载气:氮气;流速:45 mL·min－1;
柱温:130 ℃;进样口温度:180 ℃;检测器温度:
180 ℃;氢气:30 mL·min－1;空气:400 mL·min－1;氢
·794·医药导报 2012 年 4 月第 31 卷第 4 期