全 文 ：北京中医药 2008年8月 第27卷 第8期 BeijingJournalofTraditionalChineseMedicine,August,2008.Vol.27,No.8
中药戒毒是具有中国特色的一种药物戒毒方
法,目前许多用于戒毒的中药制剂已投入临床使
用。中药复方扶正驱邪、整体调理、标本兼治、安全
无瘾的特点是西药无法比拟的。但目前国内使用的
戒毒中药均为复方制剂,成分复杂,有效成分与无
效成分混杂,既影响了疗效的发挥,也使质量难以
控制,同时也难以对药物进行深入的机理研究。笔
者在多年中药戒毒研究的基础上,致力于寻找对戒
断症状针对性强、疗效肯定、低毒无瘾的天然药物
或天然有效成分。中药青风藤是防己科植物青藤及
毛青藤的干燥藤茎,具有祛风湿、通经络、利小便之
功效,临床主要用于治疗风湿痹痛、关节肿胀、麻
痹、瘙痒等病症[1,2]。目前青风藤已做为中药戒毒复
方的主要药物之一[3,4]。临床研究表明青风藤及其复
方对阿片类戒断综合征及稽延性戒断症状有较明
显的治疗作用[5,6]。本研究采用目前国内外公认的药
物依赖性实验方法,从体内及体外两个方面观察青
风藤及有效成份青藤碱对吗啡依赖动物戒断症状
的影响,为该中药及活性成分在戒毒医学中的应
用提供科学的实验依据。
1材料
1.1药物
青风藤,购于广州市药材公司,经本校中药鉴定
室刘传明副教授鉴定为防己科植物青藤 Sinomeni-
umacutum(Thunb.)Rehd.etWils.的干燥藤茎。用
75%乙醇回流提取2次,减压回收乙醇后,浓缩至
1g/ml药液备用。实验时用蒸馏水配至所需浓度。盐
酸青藤碱(Sinamine),广州白云山制药总厂提供,批
号2000822。盐酸吗啡(粉剂,Morphine),解放军总
后勤部药材供应站提供,批号710303。盐酸纳洛酮
(Naloxone),美国Sigma公司生产,批号:111K1379。
尼莫地平,山东新华制药股份有限公司提供,批号
0708036。丁丙诺啡,青海制药厂生产,批号:
20050012。
1.2器材
PCLAB生物信号采集系统 及 JZ100型张力换
能器,北京微信斯达科技发展有限责任公司产品。
DW-5A自供液式恒温平滑肌槽,广东汕头教育医学
仪器厂产品。
1.3动物
豚鼠,雄性,体重280～350g。昆明种小鼠,雌雄各
半,体重18～25g,均由本校实验动物研究中心提供。
2方法
2.1吗啡依赖豚鼠离体回肠催促戒断试验
2.1.1豚鼠回肠标本的制备:豚鼠回肠标本的制备参
照文献[7-9]的方法,取禁食12h的豚鼠脱颈椎处死,立
即剪开腹腔取出回肠,弃去近盲肠部约10cm回肠
后,将回肠剪成 3～4cm数段,然后将回肠段悬挂于
恒温平滑肌槽内含30mlKrebs液的麦氏浴管中,通
·实验研究·
青风藤及青藤碱在体内外对吗啡依赖模型
戒断反应的影响 *
蔡红兵 莫志贤 李 欣
【摘要】目的 通过吗啡依赖豚鼠离体回肠实验及吗啡依赖小鼠催促戒断实验,观察青风藤醇提液及有效成份青藤碱在体
外及体内对吗啡成瘾后催促戒断反应的影响。方法 将豚鼠离体回肠标本段在含吗啡(3μmol/L)的37.5℃Krebs液中孵育4h,
形成吗啡依赖回肠,加入纳洛酮(1μmol/L)引起戒断性收缩,观察青风藤或青藤碱预先作用对其影响。以剂量递增法形成吗啡依
赖小鼠模型,用纳洛酮进行催促戒断,观察小鼠的戒断反应。结果 青风藤醇提液(1、2、4mg/ml)以及青藤碱 (10、50、250μmol/L)
均可不同程度地抑制吗啡依赖豚鼠回肠的戒断性收缩反应,作用呈剂量依赖趋势。青风藤醇提液20g/kg或青藤碱60mg/kg,连
续3天体内给药,能明显抑制吗啡依赖小鼠纳洛酮催促后产生的跳跃反应。结论 青风藤及其主要成分青藤碱在体内外均能有
效抑制吗啡依赖引起的戒断症状。
【关键词】青风藤;青藤碱;吗啡依赖;纳洛酮;戒断症状
*国家自然科学基金资助项目(30271610)
作者单位:510515,南方医科大学
通讯作者:李欣,Tel:020-61648244;E-mail:chbing2008@126.com
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DOI:10.16025/j.1674-1307.2008.08.029
北京中医药 2008年8月 第27卷 第8期 BeijingJournalofTraditionalChineseMedicine,August,2008.Vol.27,No.8
表1药物对吗啡依赖豚鼠离体
回肠戒断性收缩的影响 (n=10,x±s)
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
入混合气体(95%O2+5%CO2),将回肠段下端固定于
麦氏浴管底部钩上,上端轻轻地挂在JZ100型张力换
能器上,通过张力换能器与计算机连接,采用PCLAB
生物信号采集系统记录回肠段张力的变化。水浴温
度37.5℃,每15min更换一次Krebs液。实验开始
前,先使回肠标本在1g静止张力下平衡30min。
2.1.2吗啡依赖回肠标本的制备及收缩张力测定:取
制备好的离体回肠段悬挂于10ml含3μmol/L吗啡
的Krebs液中,通入混合气体(95%O2+5%CO2),37℃
孵育4h,即形成吗啡依赖回肠标本。将这些吗啡依
赖回肠标本段分为8个不同的实验组:吗啡依赖模
型组、青风藤组及青藤碱系列剂量组、尼莫地平组。
将各组标本段移入恒温平滑肌槽内的麦氏浴管中,
平衡30min后进行实验。加入纳洛酮1μmol/L即可
引起催促收缩反应。青风藤醇提液(1、2、4mg/ml),青
藤碱 (10、50、250μmol/L)或尼莫地平(0.3μmol/L)
分别在加纳洛酮前1min加入,观察药物对回肠催
促戒断收缩的影响。另取未经吗啡做用的正常豚鼠
回肠段做为空白对照组,加入同容量生理盐水,然后
给予纳洛酮催促。
2.2吗啡依赖小鼠催促戒断试验
2.2.1吗啡依赖小鼠模型的建立 [10]:采用皮下注射
(sc)剂量递增法形成吗啡依赖动物模型。取昆明种小
鼠80只,sc盐酸吗啡,每日给药2次(8:00,20:00),
连续给药7天,剂量依次递增,起始剂量为25mg/kg,
每天增加25mg/kg,第6天开始,维持在150mg/kg,
第 7天只在晨8:00给药1次。另取20只小鼠做为
正常对照组,逐日 sc同容积的生理盐水,给药时间
及次数同造模小鼠。
2.2.2给药方法:将造模组小鼠 80只,在末次注射
吗啡后随机分为4组,即吗啡模型组、青风藤组、青
藤碱组及阳性药对照组,每组20只。各组动物分别
在给予纳洛酮前 30min给药。 青风藤组灌胃(ig)
给予青风藤醇提液 20g/kg;青藤碱组注射(ip)青藤
碱 60mg/kg;吗啡依赖模型组 ig同体积的生理盐
水;阳性对照组ig丁丙诺啡 0.4mg/kg。各组动物连
续给药3天(从第7天至第9天)。
2.2.3戒断症状观察指标:在末次给予吗啡后2h,给
各小鼠注射纳洛酮(6mg/kg,ip),立即观察小鼠的催
促戒断症状,记录30min内各组小鼠跳跃反应的动物
数及体重变化(给纳洛酮后1h)。连续观察小鼠停用
吗啡后4天的催促戒断症状(从第7天至第10天)。
2.3统计学方法
应用SPSS11.0统计软件进行完全随机设计资
料的单因素方差分析,实验数据以x±s表示。组间多
重比较方差齐时用 LSD方法,不齐时用 Games-
Howel方法。P<0.05表示差异有统计学意义。计数
资料用χ2检验。
3结果
3.1药物对吗啡依赖豚鼠离体回肠戒断性收缩的
影响
离体豚鼠回肠在含吗啡的 Krebs液中温孵4h,
即形成吗啡依赖离体回肠模型,加入纳洛酮催促后,
20s内 ,即可引起 收缩,肠管张力明显增加,该戒
断性收缩可维持5min以上。正常豚鼠回肠加入纳
洛酮后,不引起收缩,表明模型制作成功。预先给青
风藤醇提液或青藤碱处理 1min后再用纳洛酮催
促,吗啡依赖的豚鼠回肠的戒断性收缩明显减弱,与
空白对照组相比较,肠管收缩张力峰值下降,张力降
低,吗啡依赖豚鼠离体回肠的戒断性收缩受到明显
的抑制,药物的作用呈剂量依赖趋势。阳性对照药尼
莫地平在0.3μmol/L浓度亦显著抑制吗啡依赖豚鼠
回肠的戒断性收缩,与文献报道一致[9]。见表1。
3.2药物对吗啡依赖小鼠催促跳跃反应的影响
χ2检验结果表明,在第 7～9天,5个实验组之
间比较,差异有统计学意义(P=0.000),其中吗啡
依赖模型组小鼠跳跃个数最多,青风藤组和青藤碱
组小鼠的跳跃个数明显减少。各组成瘾小鼠的催促
戒断症状在停用吗啡后的第 3天逐渐减少。用阳性
对照药丁丙诺啡治疗 3天,在第 8天和第 9天,小
鼠经纳洛酮催促,未出现跳跃反应。但在停用丁丙
诺啡后 (第 10天),ip纳洛酮可引起小鼠出现轻度
的跳跃反应,而青风藤及青藤碱停药后均无反跳现
象。见表 2。
组别 收缩张力/g(峰值)
空白对照组 0.46±0.09
吗啡依赖模型组 2.49±0.45
青风藤醇提液1mg/ml组 1.04±0.15*
青风藤醇提液2mg/ml组 0.56±0.14**
青风藤醇提液4mg/ml组 0.47±0.09**
青藤碱10μmol/L组 2.23±0.21*
青藤碱50μmol/L组 1.19±1.93**
青藤碱 250μmol/L组 0.75±0.11**
尼莫地平0.3μmol/L组 0.99±0.16**
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北京中医药 2008年8月 第27卷 第8期 BeijingJournalofTraditionalChineseMedicine,August,2008.Vol.27,No.8
30
28
26
24
22
20
18
小
鼠
体
重
( g
)
1 7 8 9 10
观察时间(天)
生理盐水对照组
吗啡模型组
青风藤组
青藤碱组
丁丙诺啡组
图1各组小鼠的体重变化
表2药物对吗啡依赖小鼠催促跳跃反应的影响 (n=20,个)
组别
观察时间
第7天 第8天 第9天 第10天
生理盐水对照组 1 0 0 0
吗啡依赖模型组 18 15 10 4
青风藤组(20g/kg,ig) 10 8 4 1
青藤碱组(60mg/kg,ip) 13 9 5 2
丁丙诺啡组(0.4mg/kg,ip) 2 0 0 4
χ2 42.776 37.960 22.355 6.537
P 0.000 0.000 0.000 0.162
3.3药物对吗啡依赖小鼠体重变化的影响
生理盐水对照组小鼠的体重随时间逐渐增加,
表现正常。其它组小鼠在给予吗啡造模的7天时间
内,体重明显降低。停用吗啡后,小鼠的体重逐渐恢
复,在实验的第9、10天,小鼠体重有所增加。青风藤
组和青藤碱组小鼠体重恢复较快。在实验的第 10
天,丁丙诺啡组小鼠体重较青风藤组和青藤碱组明
显减少,差异有统计学意义 (t=5.871,P<0.01;t=
2.819,P<0.05)。各组小鼠的体重变化见图1。
4讨论
豚鼠离体回肠和吗啡依赖小鼠催促戒断是研究
阿片类药物依赖的两种简单而有效的体外和体内动
物模型[7-9]。这两种模型产生的戒断症状具有类似于
人类药物依赖戒断综合征的药理学特性。在吗啡依
赖小鼠的整体实验中,小鼠的跳跃反应和体重减轻
是两项主要的观察指标。本实验结果表明,用纳洛酮
催促后,吗啡依赖的离体豚鼠回肠出现明显的戒断
收缩,而吗啡依赖小鼠表现显著的跳跃反应和体重
下降,表明吗啡依赖的体外及体内模型已建立。青风
藤体外用药,能明显抑制吗啡依赖离体豚鼠回肠的
戒断性收缩,体内用药对吗啡依赖小鼠的催促戒断
反应也表现显著的抑制效应。青风藤的这些作用提
示其对阿片类戒断症状具有明显的治疗作用,并能
更有效地促进药物戒断后的身体恢复,这些结果与
该中药的临床戒毒效果基本一致[5-6]。
青藤碱(Sinomenine)是青风藤的主要化学成分,
青藤碱的化学名为 7,8-didehydro-4-hydroxy-3,7-
dimethoxy-17-methyl-(9α,13α,14α)–morphinan-6-
one,从化学结构上看,青藤碱由氢菲核和乙胺桥组
成,母核为吗啡烷[1]。本研究结果表明,青藤碱的戒毒
作用与青风藤相似,在体内外均有明显的抑制吗啡依
赖的戒断症状的作用。青藤碱可能是青风藤治疗戒断
综合征的天然有效成分,由于它的化学结构与吗啡相
类似,它可能通过作用于阿片受体而发挥其药理作
用,也可能通过其它途径起作用,确切的机理尚有待
进一步的研究。从本实验结果看,青风藤的醇提取液
的作用较青藤碱作用明显,表明青风藤中可能还有其
它成分在起作用或协同作用。青风藤醇提液具有中药
整体作用的性质,故它比单体成分青藤碱的作用强。
丁丙诺啡是一个常用的戒毒西药,对吗啡依赖小鼠具
有明显的治疗作用,能有较抑制纳洛酮催促戒断症
状。但在停用丁丙诺啡后,小鼠会出现轻度的戒断反
应。这些发现提示丁丙诺啡做为吗啡的替代药物,本
身也可能有潜在的成瘾性。与此相反,中药青风藤用
于临床戒毒能完全避免阿片类替代药物的副作用。
总之,青风藤及青藤碱是很有研究价值和前景
的天然戒毒药物,它们对阿片类戒断综合征疗效确
切,而药物本身无成瘾性。对其抗吗啡依赖作用及机
理的深入研究,将有助于全面评价青风藤和青藤碱
在戒毒方面的应用,为研制新型的天然戒毒药物提
供科学依据。
参考文献
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作者简介:蔡红兵,男,32岁,博士,讲师,主治
医师,主要从事中西医结合基础研究。
(收稿日期:2008-05-09)
患者,女,74岁。2007年 10月出现腰背部疼
痛,服止痛药物好转,未予重视。2008年 2月疼痛
加重,在卫生部中日友好医院行影像学及全身骨
扫描检查,诊断为右肺癌,多发骨转移。 遂行帕米
磷酸二钠止痛治疗 1次,疼痛缓解。3月 6日出现
双下肢瘫痪无力,大便失禁,小便导尿,腰背疼痛
加重,接受胸椎放疗 2Gy×4周,疼痛大为缓解,但
截瘫症状无改善。4月 11日无明显诱因出现发热,
夜间明显,影响睡眠,体温 37.6℃～38.4℃,晨间降
至正常。发热时伴少量汗出,出汗后热势稍有好
转。化验血常规:白细胞(WBC)5.2×109/L,中性粒
细胞(NEUT)3.7×109/L,NEUT%72.3%。遂予
喹诺酮类抗生素治疗 4天,发热无好转,乃停用。4
月 15日查体:被动体位,神清,精神倦怠,乏力明
显,面色无华,少气懒言,纳差,寐不安,时有咳嗽,
二便失禁;发热情况同前;舌暗红,苔薄白、中后部
稍黄,脉沉数。中医诊断:肺积,证属气虚发热;治
以甘温益气,方用补中益气汤加味。处方:炙黄芪
20g,党参 20g,麸炒白术 15g,茯苓 10g,炙甘草
6g,当归 15g,陈皮 15g,柴胡 10g,肉桂 10g,升
麻5g。2剂,每日 1剂,水煎,分 2次服。4月 18日
查房:夜间发热缓解不明显,仍影响睡眠,特点同
前。治以甘温益气,清热凉血,于原方基础上加丹
皮 10g、赤芍 10g、生地黄 10g、生石膏 20g、地骨
皮 10g、青蒿 6g、川芎 10g。2剂,水煎,每日 1
剂,分 2次服。4月 20日查房:精神悦,夜间无发
热,寐安,乏力、纳差、咳嗽均有好转。遂停用该方,
至患者 4月 30日出院,未再发热。
按:《素问·宣明五气篇》云:“久卧伤气。”本例病
人,老年女性,肺癌晚期,长期卧床。4月15日查房
时考虑为气虚发热,以甘温除热法治疗,效果不显。4
月18日查房时发热特点为夜热早凉,考虑乃邪入营
血,卫气昼行阳分,夜行阴分,入夜与邪相争则发热,
清晨复行阳分,不与邪相争则热退。虽有气虚,但甘
温除热法主入气分,不能入营血清热,故效果不显,
遂加用清热凉血之药,凉血与益气同用,共奏退热之
效。癌性发热一般指直接与恶性肿瘤有关的非感染
性发热,常见于癌症晚期,其中医病机复杂,治法各
异。此例晚期肿瘤病人,发热特点夜热早凉,与温病
后期发热病机相似,故运用温病之卫气营血辨证,谨
守病机,对证施治,两剂获效。
作者简介:吴孝雄,男,2002级七年制研究生,
研究方向:肿瘤的中西医结合诊治。
(收稿日期:2008-05-06)
·医案医话·
益气凉血法治疗晚期肺癌发热验案1则
吴孝雄 1 朱世杰 2
【关键词】发热;肺癌;益气凉血法;医案
作者单位:1.100029,北京中医药大学基础医学院2002级七年制研究生
2.100029,卫生部中日友好医院中医肿瘤科
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