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陕西产辣蓼的品质鉴定



全 文 :2014年8月 甘 肃 农 业 大 学 学 报 第4 9卷
第4期73~77 JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY 双 月 刊
陕西产辣蓼的品质鉴定
田怡涛1,高扬2,陈千良3,郭晔红1
(1.甘肃农业大学农学院 ,甘肃 兰州 730070;2西安理工大学水利水电学院,陕西 西安 710048;
3.西北大学生命科学学院,西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室,陕西 西安 710069)
摘要:为制定陕西产辣蓼药材质量标准及更好地开发利用提供科学依据,采用生药学研究方法、水分测定法、
灰分测定法、浸出物测定法、薄层色谱法、挥发油测定法、比色法对陕西产辣蓼药材进行了研究.结果表明:陕西产
辣蓼药材水分含量7.42%~8.61%,总灰分含量8.06%~8.65%,酸不溶性灰分含量0.23%~0.74%,醇溶性浸
出物含量19.86%~23.62%,挥发油含量0.13~0.17mL/g,总黄酮含量2.01%~4.59%.其中,洋县、柞水县辣蓼
的醇溶性浸出物较高,略县、柞水县辣蓼的黄酮含量较高,蓝田县辣蓼的醇溶性浸出物和黄酮含量都最低,其他地
区的辣蓼介于中间.陕西柞水辣蓼药材品质最好,而蓝田辣蓼的品质最差;建立了以性状描述、显微特征描述、指标
有效成分芦丁的薄层定性鉴别及水分含量不得过于9%、总灰分含量不得过于9%、酸不溶性灰分不得过于1%、醇
溶性浸出物不得少于15%、总黄酮含量不得少于2%为主要内容的陕西辣蓼质量标准.
关键词:辣蓼;品质鉴定;陕西;
中图分类号:R 282.5    文献标志码:A     文章编号:1003-4315(2014)04-0073-05
第一作者:田怡涛(1984-),男,硕士研究生,研究方向为药用植物资源与利用.E-mail:tianyitao5117@163.com
通信作者:郭晔红,女,博士后,副教授,主要从事药用植物资源与利用研究.E-mail:guoyh@gsau.edu.cn
基金项目:甘肃省高等学校基本科研业务费“特色药材羌活引种驯化与保护利用技术研究”.
收稿日期:2013-10-26;修回日期:2014-01-17
Quality identification of Polygonum hydropiper
from Shanxi Province
TIAN Yi-tao1,GAO Yang2,CHEN Qian-liang3,GUO Ye-hong1
(1.Colege of Agronomy,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China;2.Colege of Water
Resources and Hydraulic Power,Xi′an University of Technology,Xi′an 710048,China;3.Key
Laboratory of Resource Biology and Biotechnology in Western China of Ministry of
Education,Colege of Life Sciences,Northwest University,Xi′an 710069,China)
Abstract:To provide scientific basis for the development and utilization of P.hydropiperfrom Shanxi,
TLC,essential oil and UV-vis spectra determination methods were employed to analyze moisture,total ash
,acid-insoluble ash,content of the extraction.The results showed that moisture content was 7.42%to
8.61%,total ash content was 8.06%to 8.65%,acid-insoluble ash content was 0.23%to 0.74%,content
of ethanol extraction was 19.86%to 23.62%,essential oil content was 0.13%to 0.17%and total fla-
vonoids content was 2.01%to 4.59%.The content of ethanol extraction from Yang County and Zhashui
County was higher than the other production areas.Total flavonoids content from Lue County and Zhashui
County was higher.The content of ethanol extraction and total flavonoids from Lantian County showed the
lowest.It is suggested that the quality of P.hydropiper from Zhashui County is best and the one from
Lantian County is the worst.The quality identification of P.hydropiperfrom Shanxi was finaly confirmed
as folow:the morphological and histological characters were described.Rutin content was chosen as the
DOI:10.13432/j.cnki.jgsau.2014.04.013
甘 肃 农 业 大 学 学 报 2014年
mark constituent in qualitative identification analysis of the crude drug by TLC method.Moisture was be-
low 9%,total ash was below 9%,acid-insoluble ash was below 1%,content of ethanol extraction was above
15%and total flavonoids was above 2%.
Key words:Polygonum hydropiper;quality identification;Shanxi
  辣蓼为蓼科植物水蓼Polygonum hydropiper
的干燥地上部分,始载于《唐·本草》,具有通关窍、
散瘀、解毒、杀虫、止血等功效.辣蓼于夏、秋二季开
花时采收,除去杂质,晒干.现代生药学研究表明,辣
蓼全草含蛋白质、有机酸、糖类、鞣质、黄酮、挥发油,
还可能含有蒽醌类物质[1].辣蓼在陕西省大面积分
布,主要以秦岭北坡的蓝田县、眉县和秦岭南坡的丹
凤县、洋县、勉县、略阳等地为主[2],但到目前为止尚
未有陕西产辣蓼药材品质鉴定的研究.为了对陕西
产辣蓼药材进行品质鉴定并使其在应用上有统一标
准,本文对陕西辣蓼药材性状、显微特征进行了研
究,对浸出物、水分、总灰分、酸不溶性灰分进行了测
定,并在TLC定性鉴别及挥发油与总黄酮含量测定
的基础上,制订了陕西辣蓼药材的质量标准,以期对
陕西辣蓼药材质量的规范以及资源的进一步开发奠
定基础.
1 材料与方法
1.1 试验材料
在陕西辣蓼的5个主要生长地采集水蓼地上部
分,除去杂质,晒干.经高扬老师鉴定为辣蓼Polyg-
onum hydropiper L.药材的具体采集地和时间见
表1.
表1 辣蓼的采集地和采集时间
Tab.1 Colecting area and time of Polygonium hydropiper
编号 产地 采集时间
1 西安市蓝田县三里镇灞河边 2012年10月8日
2 商洛市柞水县牛背梁山 2012年10月28日
3 汉中市略阳县仙台坝乡 2012年10月23日
4 汉中市洋县关帝乡秦岭南坡 2012年10月19日
5 宝鸡市眉县营头乡 2012年10月13日
1.2 仪器与药剂
Laica DML光学显微镜、Nikon 50i照相机、
WS70-1型红外线快速干燥器、UV-22550型紫外-
可见分光光度计、SX-2.5-12型箱式电阻炉、KSW-
6-12型电炉温度控制器、恒温水浴锅、TB-114电子
天平、挥发油测定器、KQ-100E型超声波清洗器;硅
胶薄层板(用硅胶G自制,厚0.2mm)、市售聚酰胺
薄膜、乙醇、甲醇、石油醚、乙酸乙酯、甲苯、丙酮、丁
酮、正己烷、六水合三氯化铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、
乙醚等试剂均为国产分析纯.芦丁和槲皮素对照品
为自制.
1.3 试验方法
1.3.1 性状和薄层鉴别研究 性状和薄层鉴别研
究均参照《中国药典》2010年版[3]中药材和饮片检
定通则(附录IIB)进行.随机取各产地辣蓼全株10
株,研究其形状、大小、色泽、表面、质地、断面及气味
等性状特征[4-5].
在薄层鉴别中,对比了辣蓼中芦丁的薄层及紫
外光谱鉴别[6]、中药志·4册[7]、辽宁省中药材标准
(2009年版)[8]中的薄层鉴别方法和1种根据文献
设计的鉴别方法[9-11].取辣蓼粉末1.0g,置于50mL
锥形瓶中,加60%乙醇溶液30mL,在45℃下超声
(100Hz)30min,放至室温,振摇后过滤,滤液挥干,
残渣加乙醇1mL使溶解,作为供试品溶液.取芦丁
为对照品,加乙醇制成每1mL含1mg的溶液,作
为对照品溶液.分别吸取供试品溶液及芦丁对照品
溶液各6μL分别点于同一聚酰胺薄上,以乙酸乙
酯-甲酸-水(8∶1∶1)为展开剂,展开,晾干,喷5%三
氯化铝乙醇溶液,于紫外光灯(365nm)下观察.
1.3.2 显微鉴别与检查项目的测定 显微鉴别、醇
溶性浸出物、总灰分、酸不溶性灰分和水分测定分别
参照《中国药典》2010年版[3](一部)附录ⅡC显微
鉴别法、附录IXH水分测定法测定、附录IXK灰分
测定法、附录XA浸出物测定法检查和测定.
1.3.3 挥发油含量测定 参照《中国药典》2010年
版[3]一部附录XD挥发油测定法测定.称取辣蓼药
材粉末110g,按甲法测定各地药材的挥发油含量.
1.3.4 总黄酮含量测定
1.3.4.1  标准溶液的制备   精确称取干燥
(120℃)至恒质量的芦丁标样适量,以60%乙醇溶
解,制成0.2mg/mL的溶液.
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第4期 田怡涛等:陕西产辣蓼的品质鉴定
1.3.4.2 供试品溶液的制备 取辣蓼粉末1g,精确
称定,置于100mL量瓶中,加入60%乙醇30mL,浸
泡12h,超声(100Hz)30min后,静置冷却,用60%
乙醇定容,摇匀过滤,滤液即为供试溶液.
1.3.4.3 显色方法 取标准溶液和供试品溶液各
3mL,分别置25mL 容量瓶中,加60%乙醇至
6mL,加入5% NaNO2溶液1.0mL,摇匀,放置
6min,加 10% AlCl3 溶液 1.0 mL,摇匀,放置
6min,再加入4% NaOH 溶液10.0mL,最后用
60%乙醇溶液稀释至刻度,摇匀,放置15min.
1.3.4.4 测定波长的选择 取标准溶液和供试品
溶液各3mL,分别置25mL容量瓶中,用60%的乙
醇定容,以相应空白试剂为参比溶液;另取标准溶液
和供试品溶液各3mL,分别置25mL容量瓶中,按
显色方法项下方法,自加60%乙醇至6mL起,显色
后,以不含标准和供试品溶液的空白试剂为参比溶
液,在波长300~700nm区间扫描,确定最大吸收
波长.
1.3.4.5 标准曲线的制备 准确移取芦丁标准液
1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL分别置于25mL容
量瓶中,按显色方法项下的方法显色后,照紫外-可
见分光光度法(中国药典2010年版一部附录V A),
在最大波长处测定吸光度.以吸收度为纵坐标,浓度
为横坐标,绘制标准曲线.
1.3.4.6 样品含量测定 取供试品溶液1mL,置
25mL容量瓶中,照显色方法项中的方法,自加
60%乙醇至6mL起,依法测定吸光度,根据标准曲
线计算.
1.3.4.7 科学性考察 精密性试验:精密吸取对标
准溶液5份,按上述方法显色后,测定吸光度,计算
RSD.稳定性试验:对同1份样品溶液,显色后测定
吸光度,每15min测试1次,共测试5次,计算
RSD.重复性试验:取洋县的辣蓼药材粉末,按上述
方法制备成供试品溶液5份,测定总黄酮含量,计算
RSD.加样回收率试验:准确从已知含量为0.201%
的蓝田辣蓼药材制成的供试品溶液中取1mL转移
到25mL容量瓶中,共取9份,再按低、中、高系列
浓度分别加人标准溶液0.2、0.4、0.6mL,每种浓度
3份,按以上方法测定吸收度,计算平均回收率和
RSD.
2 结果与分析
2.1 不同产地辣蓼形态指标比较
对不同产地辣蓼形态比较研究结果表明形态上
无差异,都表现为:茎圆柱形,有分枝,长 20~
80cm,直径约至2mm;表面红棕色或灰绿色,有棱
线,节膨大;质脆,较易折断,断面绿白色或黄白色,
中空.叶互生,有短柄;叶片皱缩或破碎,完整者展平
后呈披针形或椭圆状披针形,长3.5~11cm,宽5~
19mm,全缘,灰绿色、黄棕色或紫褐色,两面有半透
明的腺点及非腺毛,尤以叶缘及中脉处为多;托叶鞘
筒状,膜质,紫褐色或灰黄白色,长6~11mm,睫毛
长1.5~10mm.穗状花序长2~10cm,下部花簇间
断,灰绿色或棕黄色;苞片钟形,缘毛长1.5~5cm;
花被5裂,裂片具腺点.有淡淡的辛辣气味.
2.2 不同产地辣蓼显微结构比较
不同产地辣蓼的叶片显微结构特征均为:上表
皮细胞类多角形,下表皮细胞垂周壁波状弯曲.上、
下表皮均有多列性非腺毛、腺毛及气孔,以下表皮为
多.多列性非腺毛大多稍弯曲.腺毛头部2~5个细
胞,顶面观呈类圆形或椭圆形;侧面观腺毛生于叶表
皮的凹陷处,头部1~3个细胞,柄部由2个细胞并
列而成.气孔椭圆形,多为平轴式,少数为不定式或
不等式,副卫细胞2~4个.海绵组织中有众多草酸
钙簇晶,棱角大多长而尖.
不同产地辣蓼的茎横切面结构特征均为:表皮
细胞1列,外皮层窄,由数层厚角细胞组成.中柱鞘
纤维束断续排列成环,韧皮部狭窄,部分细胞含棕黄
色块状物.形成层不明显,木质部导管单个或数个相
聚,呈放射状排列,壁微木化;木纤维和木薄壁细胞
壁较薄,微木化;木射线甚宽,髓周薄壁细胞类圆形,
壁薄,髓中细胞萎缩呈空洞(图1).本品皮层、髓部
图1 辣蓼茎的横切面
Fig.1 Cross-section detail diagram of stem
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甘 肃 农 业 大 学 学 报 2014年
薄壁细胞内含草酸钙簇晶.
不同产地辣蓼的粉末特征均为:滴加水合氯醛
的载玻片上可以明显看到薄壁细胞和草酸钙簇晶
(图2).
图2 辣蓼粉末中的薄壁细胞和草酸钙簇晶
Fig.2 Powder diagram of Polygonum hydropiper
2.3 不同产地辣蓼薄层鉴别结果
药材供试品色谱中,在与芦丁对照品色谱相应
的位置上,显相同颜色的荧光斑点,结果见图3.

1~5:5批供试品;d:对照品
图3 薄层鉴别
Fig.3 TLC chromatogram of Polygonum hydropiper
  薄层鉴别试验考察了3个文献报道的方法和一
个根据文献设计的方法,将这些方法进行了对比.在
所对比的方法中,包括以槲皮素作对照,将药材提取
物水解后进行鉴别的,这种方法较复杂,不便于质量
控制操作,故不可取.在以芦丁为对照的方法中,甲
醇-水-乙腈-冰醋酸(30∶57.5∶10∶2.5)分离效果很
不理想,以乙酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)为展开剂分离
效果较好.试验中对超声提取和温浸效果做了比较,
发现温浸不但费时而且提取效果也不如超声提取.
2.4 不同产地辣蓼醇溶性浸出物、总灰分、酸不溶
性灰分和水分比较
5个产地药材醇溶性浸出物、总灰分、酸不溶性
灰分和水分测定结果见表2.不同产地辣蓼水分含
量在7.42%~8.61%之间,平均值为7.72%,总灰
分含量在8.06%~8.65%之间,平均值为8.36%,
酸不溶性灰分含量在0.23%~0.74%之间,平均值
为 0.53%,醇 溶 性 浸 出 物 含 量 为 19.86% ~
23.62%,平均值为21.48%.现有以水蓼作为辣蓼药
材基源的标准中,只有辽宁省2009年标准有检查项
和醇溶性浸出物含量测定项,陕西产辣蓼药材检查
项中水分、灰分、酸不溶性灰分含量都低前者,并且
醇溶性浸出物与前者含量差异性不显著,说陕西辣
蓼药材品质好于前者.故参照文献[12]拟定辣蓼药水
分含量不得过9.0%,总灰分含量不得过9.0%,酸
不溶性灰分含量不得过1%,醇溶性浸出物含量不
得少于15%.
表2 辣蓼的水分、灰分、醇溶性浸出物和总黄酮含量
Tab.2 Results of determination of alcohol-soluble extractives,ash,moisture and
total flavonoids of Polygonum hydropiper %
产地 含水量 总灰分含量
酸不溶性
灰分
醇溶性浸出
物含量
总黄酮含量
柞水 7.42  8.32  0.23  21.54  4.30
蓝田 7.58  8.33  0.74  19.86  2.01
略县 7.53  8.45  0.71  20.87  4.59
眉县 7.48  8.06  0.65  21.50  3.26
洋县 8.61  8.65  0.31  23.62  3.02
  浸出物测定时,对辣蓼水溶性溶剂和醇溶性溶
剂浸提效果进行了对比,并对醇溶性溶剂浸提测定
条件进行优化.溶剂选择时,用水和浓度分别为
30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇8类
溶剂进行浸提,测定结果为40%乙醇提取的浸出物
含量最高,所以用40%乙醇测定醇溶性浸出物.在
选择具体方法的时候,使用40%乙醇分别按照2010
版药典(附录ⅩA)中醇溶性浸出物测定法中的冷浸
法和热浸法进行测定,结果测出冷浸法测定的浸出
物含量远低于热浸法测定的浸出物含量,所以采用
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第4期 田怡涛等:陕西产辣蓼的品质鉴定
热浸法测定醇溶性浸出物的含量.
2.5 不同产地辣蓼挥发油含量测定结果
挥发油含量测定结果见表3.研究表明,所采集
的药材样品,挥发油含量最高仅为0.17%.由于含
量低,测定误差很大,故挥发油含量不列入质量
标准.
表3 不同产地辣蓼挥发油含量
Tab.3 Results of determination of content of volatile
oil of Polygonum hydropiper
产地 柞水 蓝田 略阳 眉县 洋县
含量/
(mL·g-1)
0.15  0.13  0.13  0.17  0.16
2.6 不同产地辣蓼总黄酮测定结果
2.6.1 测定波长选择结果 波长扫描结果如图4,
结果发现显色后,在波长为500nm处有最大吸收,
确定测定波长为500nm.
图4 标准溶液和供试品溶液显色后的光谱图
Fig.4 Spectrogram of sample solution and standard
solution which were colored
2.6.2 样品含量测定结果 从陕西省内收集到的
5个批次样品中总黄酮的含量,结果见表2.由表2
可见陕西各地辣蓼黄酮含量在2.01%~4.59%之
间,其中柞水和略阳的样品黄酮含量较高,蓝田样品
的黄酮含量最低.运用SPSS软件进行黄酮含量分
析,分析结果显示各地黄酮含量差异显著.因此确定
陕西辣蓼总黄酮以干燥芦丁计,不得少于2%.
2.6.3 科学性研究结果 对此方法的科学性分析
分结果如下:精密性分析结果的RSD为1.83%,稳
定性结果计算RSD为2.01%,重复性测定结果的
RSD为3.92%,加样回收率结果RSD为1.70%,表
明本方法精密度、重复性、加样回收率良好,1h内
稳定性,方法科学可靠.
3 讨论与结论
陕西各地区辣蓼药材水分含量在7.42%~
8.61%之间,总灰分含量在8.06%~8.65%之间,
酸不溶性灰分含量在0.23%~0.74%之间,醇溶性
浸出物含量为19.86%~23.62%,现有以水蓼作为
辣蓼药材基源的标准中,只有辽宁省2009年标准有
检查项和醇溶性浸出物含量测定项,陕西产辣蓼药
材检查项中水分、灰分、酸不溶性灰分含量都低前
者,并且醇溶性浸出物与前者含量差异性不显著,说
明陕西辣蓼药材品质好于前者.目前的质量标准都没
总黄酮含量测定,为更好的控制辣蓼药材质量,本研
究测定了辣蓼的总黄酮.陕西各地辣蓼黄酮含量在
2.01%~4.59%之间,其中柞水和略阳的黄酮含量较
高,蓝田的黄酮含量最低.陕西柞水辣蓼药材醇溶性
浸出物和总黄酮含量都较高,品质最好,蓝田的两者
含量都最低,品质最差,其他地方介于两者之间.
文献报道辣蓼中所含鞣质、黄酮、挥发油等具有
药理活性,尤其黄酮类成分活性与药材功效较为一
致.本文挥发油含量研究表明,所采集的药材样品,
含量最高仅为0.17mL/g.由于含量低,测定误差很
大,故挥发油含量不列入质量标准.另外,没食子酸
和单一成分芦丁、槲皮素含量都很低[11,13-14],如果作
为指标也不能很好地控制辣蓼质量.所以综合考虑,
选定总黄酮为辣蓼的质量控制指标.
研究所用的样品都是亲自在陕西辣蓼的5个主
要分布区中有代表性的采集的,并按照辣蓼药材加
工方式对样品进行处理.参照本研究辣蓼样品的测
定结果,确定了陕西产辣蓼的标准为药材总灰分含
量不得过9.0%,酸不溶性灰分含量不得过1.0%,
水分量不得过9.0%,醇溶性浸出物含量不得少于
15%,总黄酮含量不得少于2%.
(下转第82页)
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甘 肃 农 业 大 学 学 报 2014年
则氮、磷、钾肥每株施用量分别为48.76~51.87g、
5.40~6.60g、21.44~23.41g.此结论可为发酵柠
条基质栽培番茄科学施肥提供依据.
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(责任编辑 赵晓倩


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(责任编辑 李辛)
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