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鸡血藤血清联合顺铂对人肺癌PG细胞增殖及周期影响的研究



全 文 :中国肿瘤 2016 年第 25 卷第 3 期 ChinaCancer,2016,Vol.25,N o.3
鸡血藤血清联合顺铂对人肺癌 PG细胞增殖
及周期影响的研究
收稿日期:2015-10-11;修回日期:2015-11-19
基金项目:北京市自然科学基金项目(7122152);国家自然科学基金项目(81173450)
通讯作者:张培彤,E-mail:zhangpeitong@sohu.com
郭秀伟 1,张培彤 1 ,杨 栋 2,乔路敏 3,马雪曼 4, 王耀焓 1, 韩海英 1
(1.中国中医科学院广安门医院,北京 100053;2.北京大学第六医院,北京 100086;3.宁夏医科大学附属银
川市中医医院,宁夏 银川 750004;4.北京中医药大学临床医学院,北京 100029)
摘 要:[目的] 探讨鸡血藤血清对人肺癌 PG 细胞株的增殖抑制及周期阻滞作用。 [方法] 将肺癌 PG 细
胞分为空白组、鸡血藤组、鸡血藤+顺铂组、顺铂组,四唑盐比色法(MTT)实验中各组根据血清浓度的不同
分为 20%、10%、5%、2.5%、4 组,观察各组 PG 细胞的增殖抑制作用;HE 染色法、免疫荧光法和流式细胞术
实验中各组血清浓度为 20%,采用光镜和激光共聚焦显微镜观察各组 PG 细胞形态,流式细胞仪检测细胞
周期。 [结果] MTT 法中 5%、10%、20%鸡血藤组细胞的增殖抑制明显,具有时间和剂量依赖性,但低于顺
铂组和鸡血藤+顺铂组,鸡血藤+顺铂组 PG 细胞的增殖抑制率与顺铂组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
光镜和激光共聚焦显微镜下鸡血藤组细胞的凋亡程度明显,但低于顺铂组和鸡血藤+顺铂组。 与空白组比
较,鸡血藤组 PG 细胞的 G2/M 期比例增加(P<0.05);顺铂组和鸡血藤+顺铂组的 S 和 G2/M 期比例增加(P<
0.01),G0/G1期降低(P<0.01)。 顺铂组和鸡血藤+顺铂组较鸡血藤组的 S 期和 G2/M 期比例增加(P<0.01),G0/
G1期降低(P<0.01)。 鸡血藤+顺铂组 PG 细胞的各期与顺铂组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。 [结论] 鸡
血藤血清通过引起细胞周期 G2/M 期阻滞,从而抑制细胞增殖,这与顺铂阻滞细胞于 G2/M 和 S 期不同。
关键词:鸡血藤;血清;MTT;细胞周期;顺铂;肺癌
中图分类号:R73-3;R734.2 文献标识码:A 文章编号:1004-0242(2016)03-0219-07
doi:10.11735/j.issn.1004-0242.2016.03.A013
Effect of Caulis Spatholobi Containing Serum and Cisplatin on
the Proliferation Cycle of Human Lung Cancer Cell Line PG
GUO Xiu-wei1, ZHANG Pei-tong1,YANG Dong2,et al.
(1.Guang’anmen Hospital,China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100053,China;
2.The Sixth Hospital of Peking University,Beijing 100086,China)
Abstract:[Purpose] To investigate the effect of Caulis Spatholobi (JXT) containing serum on the proliferation
cycle of human lung cancer cell line PG. [Methods] The lung cancer PG cells were divided into four groups:
the blank control group, the JXT group, the JXT plus cisplatin group, and cisplatin group. The inhibiting ef-
fect of cell proliferation in 20%,10%,5%,2.5% serum concentration groups was observed by MTT method. The
morphology of PG cells in 20% serum concentration group was observed using light microscope and laser scan -
ning confocal microscope.The cell cycle arrest was observed using flow cytometry in 20% serum concentration
group.[Results] Under the MTT method, the inhibiting effect of PG cells in the 5%,10%,20% JXT group was
significant and had a time-dose dependence, but was less than that of the JXT plus cisplatin group as well as
the cisplatin group.Compared with the cisplatin, proliferation inhibiting rate of PG cells in the JXT+DDP group
had no significant differences (P>0.05). Under the light microscope and laser scanning confocal microscope,the
apoptosis degree of PG cells in the JXT group was significant,but was less than that of the JXT plus cisplatin
group as well as the cisplatin group. Compared with the blank control group,the proportion of PG cells in-
creased at G2/M phases (P<0.05) in the JXT group;the proportion of PG cells increased at G2/M and S phases
(P<0.05,P<0. 01) and decreased at G0/G1 phase (P<0.01) in the JXT plus cisplatin group as well as the cis-
platin group.Compared with the JXT group,the proportion of PG cells increased at G2/M and S phases (P<0.01)
and decreased at G0/G1 phase (P<0.01) in the JXT plus cisplatin group as well as the cisplatin group.There was
no statistical difference in PG cells at each phase between the cisplatin group and the JXT plus cisplatin group
(P>0.05) .[Conclusion] JXT containing serum inhibit PG cell proliferation by G2/M phase arresting, which is
different from the manner of arresting PG cells at G2/M and S phases in cisplatin.
Key words:Caulis Spatholobi;serum;MTT;cell cycle;cisplatin;lung cancer
论 著219
中国肿瘤 2016 年第 25 卷第 3 期 ChinaCancer,2016,Vol.25,N o.3
肺癌已成为我国发病率第一位的恶性肿瘤,且
其发病率和死亡率呈现快速上升趋势。 中医药治疗
肺癌有自己独特的理论体系和确切疗效, 为肺癌综
合治疗中不可或缺的治疗方法。研究表明,血瘀证是
肺癌的主要证候要素,占 48.23% [1],据此活血化瘀
法成为肺癌中医治疗的主要法则。 鸡血藤作为活血
化瘀药物,具有体外和体内抗肿瘤活性 [2,3]。 本研究
采用鸡血藤含药血清联合顺铂作用于肺癌 PG 细
胞,观察体外抑瘤效应及对细胞周期的影响。
1 材料与方法
1.1 动 物
60 只 SD 大鼠,雄性,体重为 200±30g,清洁级,
由北京华阜康生物科技股份有限公司提供, 许可证
号:SCXK(京)2009-0007;中国中医科学院广安门医
院动物室喂养,许可证号:SYXK(京)2009-0034。
1.2 细胞株
人肺癌 PG 细胞株由中国中医科学院广安门医
院肿瘤研究室提供。
1.3 主要试剂与仪器
鸡血藤由中国中医科学院广安门医院制剂中心
提取并浓缩成膏后消毒备用, 批号:20120514;10%
水合氯醛(国药集团化学试剂有限公司)由生理盐水
配制, 批号:20120522; 顺铂: 规格 2ml:10mg,由
1640培养液配制至浓度为 1μg/ml,云南个旧生物药
业有限公司提供,批号:121101;二甲基亚砜即 DM-
SO[江苏无锡医疗器械经销公司分装(分析纯)];甲
基噻唑基四唑蓝粉末即 MTT(AMRESCO 公司);细胞
DNA 含量检测试剂盒[南京凯基生物科技发展有限
公司(KGA512)];抗荧光淬灭封片剂[碧云天生物技
术研究所(P0126)];4%的多聚甲醛溶液(北京索莱
宝科技有限公司);免疫荧光封闭液[碧云天生物技
术研究所 (P0102)];DAPI 染色液 [武汉博士德
(AR1177)];TritonX-100/曲拉通 X-100(碧云天生物
技术研究所);HE 染色试剂盒 (南京建成科技有限
公司);无毒环保封固剂(南京建成科技有限公司)。
QB-9006型恒温微孔板快速振荡器 (江苏海门其林
贝尔仪器制造有限公司);960 型多功能酶标仪 (美
国贝斯特公司);FACSCalibur 流式细胞仪(美国 BD
公司 );FV1000 激光共聚焦显微镜 (奥林巴斯 );
TE2000-U荧光显微镜(日本尼康公司)。
1.4 实验方法与步骤
1.4.1 含鸡血藤的大鼠血清制备
60 只 SD 大鼠按随机区组法 [4]分为 2 组,即空
白组和鸡血藤等效剂量组,每组 30只。 大鼠适应性
喂养 24h 后,鸡血藤膏生药含量每克 3.33g,按大鼠
的等效剂量相当于人的 6.3 倍 (鸡血藤溶液正常成
人的口服剂量为 30g)量给药,每组均以每次 10ml/kg
灌胃,空白组灌以生理盐水。共灌胃 5次,前 2d每天
灌 2 次, 第 3d 灌胃 1 次后 1h, 以 10%水合氯醛按
0.3ml/100g 浓度麻醉大鼠,腹主动脉取血。 将已采动
脉血室温静置 4h 后,以 3000r/min 离心 15min,然后
用 10 ml 注射器吸取上清液, 即含鸡血藤的大鼠血
清(简称鸡血藤血清),装入相应标号的 50ml 离心管
中, 在 56°C 水浴锅中灭活 30min, 在超净台下用
0.2μl小滤器过滤除菌后分装于 1.5ml离心管中(0.5~
1.5ml/管),用封口条封口于-80°C冰箱保存备用。
1.4.2 细胞培养及分组
PG细胞常规培养于含 10%FBS 的 1640 培养基
中,经胰蛋白酶溶液消化传代,在 37℃、5%CO2培养
箱中进行培养。 本实验共分为 4组,即空白组、鸡血
藤组、鸡血藤+顺铂组、顺铂组,分别用 20%空白血
清的 1640 培养液、20%鸡血藤血清的 1640 培养液、
20%鸡血藤血清的 1640培养液加 1μg/ml顺铂、20%空
白血清的 1640培养液加 1μg/ml顺铂培养 PG细胞。
1.5 MTT法检测细胞增殖抑制作用
PG 细胞以 3000 个/孔接种于 6 个 96 孔板第 2
到第 9 列内做细胞爬片,每板 4 周加 PBS,第 10、11
列加无 FBS 的 1640 培养液。 常规培养 PG 细胞,待
细胞贴壁后,弃去 2~9 列培养液,取 3 个板 2~9 列
中每列分别加入浓度梯度的含药血清的培养液 (鸡
血藤血清:20%、10%、5%、2.5%, 空白组血清:20%、
10%、5%、2.5%)。 另外 3 个板分别加入浓度梯度的
含药血清的培养液 (鸡血藤血清:20%、10%、5%、
2.5%,空白组血清:20%、10%、5%、2.5%),并向每孔
加 1μg/ml顺铂。 分别于 24h、48h、72h时,加入 5mg/
ml的 MTT溶液 20μl/孔,继续培养 4h。弃去培养液,
每孔加入 150μl 的 DMSO 溶液,恒温震荡器轻微震
荡 10min, 于酶标仪 490nm 处测定各孔的吸光值
(OD 值), 按照以下公式计算细胞增殖抑制率:1-
(给药组 OD 值-调零孔 OD 值)/(空白组 OD 值-调
论 著 220
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零孔 OD值)。
1.6 HE染色观察细胞形态
PG细胞以 1×105个/孔接种于 24孔板内做细胞
爬片,常规培养 PG 细胞,待细胞贴壁后,弃去培养
液,分组及加药同步骤“1.4.2”,每组 4 孔。 培养 24h
后弃去培养液,用 95%乙醇固定 20min,以 PBS 洗 2
次,每次 1min;然后向每孔中加入核染液 1ml,染色
5min;吸除核染液,水洗约 5s;向每孔中加入浆染液
1ml,染色 1min;吸除浆染液,取出爬片,用增色液冲
洗 2次;封片;光镜观察。
1.7 激光共聚焦显微镜拍摄细胞核形态变化
PG细胞以 1×105个/孔接种于 24孔板内做细胞
爬片,分组及加药同步骤“1.4.2”,每组 4孔。 继续培
养 24h,吸除培养液,每孔用 PBS 洗 1 次;4%的多聚
甲醛溶液固定 10min;吸除多聚甲醛,用 PBS 洗涤 3
次,每次洗涤 5min;向每孔加入 0.5%的 Triton-100
溶液,通透 10min,PBS 洗涤 3 次,每次洗涤 5min;加
入封闭液,室温封闭 1h;吸除封闭液,用 PBS 洗涤 2
次,每次 1min;加入细胞核染色液(DAPI),室温染色
5min;吸除 DAPI,洗涤液洗涤 3 次 ,每次 5min;封
片;于激光共聚焦成像系统拍照。
1.8 流式细胞仪分析细胞周期
PG细胞以 1×106个/瓶接种于 25cm2培养瓶内,
分组及加药同步骤 “1.4.2”, 每组 3 瓶; 继续培养
24h, 消化收集细胞, 用 PBS 洗涤细胞 1 次 (离心
2000r/min,5min),收集并调整细胞浓度为 1.5×106/ml;
取 1ml 单细胞悬液离心后,去上清,用 75%冷乙醇
固定,4℃保存;上机前 PBS 洗去固定液,加 100μl-
RNase A 在 37℃水浴 30min, 再加入 400μl PI 染液
混匀,4℃避光 30min; 上机检测 , 记录激发波长
248nm处的红色荧光。
1.9 统计学处理
数据采用 SPSS17.0 软件进行统计,计量资料用
x±s 表示,多组间比较进行单因素方差分析,组间两
两比较采用 LSD法,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 鸡血藤血清联合顺铂对 PG细胞增殖的影响
与空白组相比, 同一组别不同浓度鸡血藤组血
清相关各组均可抑制 PG细胞增殖。24h时除鸡血藤
组血清浓度为 2.5%时外,5%、10%、20%鸡血藤组、
顺铂组和鸡血藤+顺铂组的增殖抑制作用明显且具
有统计学意义 (P<0.05);48h、72h 时除鸡血藤组血
清浓度为 2.5%时外,5%、10%、20%鸡血藤组、 顺铂
组、 鸡血藤+顺铂组的增殖抑制作用明显且具有统
计学差异(P<0.05)。 鸡血藤血清相关各组对 PG 细
胞增殖的抑制作用均具有作用时间和剂量依赖性。
同一时间点同浓度的 4 组对 PG 细胞增殖的抑
制作用强度排序为:鸡血藤+顺铂组>空白+顺铂组>
鸡血藤组>空白组,其中鸡血藤组、空白+顺铂组、鸡
血藤+顺铂组较空白组抑制作用明显且有统计学意
义(P<0.05)。 鸡血藤+顺铂组和空白+顺铂组较鸡血
藤组抑制作用明显,且有统计学意义(P<0.05)。鸡血
藤+顺铂组较空白+顺铂组数值上有所增加,但两者
比较无统计学意义(P>0.05)(Table 1,Figure 1)。
2.2 鸡血藤血清对 PG细胞的形态影响
光镜下空白组的 PG 细胞数量明显增多, 体积
较大,外形呈多角形,相邻细胞生长晕融合成片,胞
质丰富, 胞核较大, 颜色较浅, 分裂细胞偶尔出现
(Figure 2A);鸡血藤组与空白组比较,细胞数相对较
少,细胞体积相对较小,膜表面似触角的突起较少,
胞浆减少,核固缩,有时可见少量的核碎裂(Figure
2B);顺铂组 (Figure 2C)和鸡血藤+顺铂组 (Figure
2D)干预后的细胞数明显减少,细胞间接触松弛,细
胞体积缩小,细胞膜表面似触角的突起基本消失,细
胞质和胞核浓缩, 颜色深染, 核碎裂的出现更加明
显;鸡血藤+顺铂组和顺铂组在形态上相差不多。
激光共聚焦显微镜下空白组细胞核多呈圆形,
少量细胞核体积较大, 呈弥漫均匀的荧光(Figure
2E)。 鸡血藤组细胞核多为半月形,胞浆浓缩,可见
少量的核浓缩和和核碎裂出现,细胞体积变小(Fig-
ure 2F)。 顺铂组(Figure 2G)和鸡血藤+顺铂组(Fig-
ure 2H)细胞核浓缩,核碎裂成多个块状,出现典型
的凋亡小体和较多的凋亡细胞, 细胞体积较鸡血藤
组变小,细胞核可见致密的颗粒状强荧光。 鸡血藤+
顺铂组和顺铂组在形态上相差不多。
2.3 鸡血藤血清对 PG细胞周期的影响
与空白组比较,鸡血藤组 PG 细胞的 G2/M 期比
例增加(P<0.05);顺铂组和鸡血藤+顺铂组 PG 细胞
的 S 和 G2/M 期比例增加(P<0.01),G0/G1期降低(P<
0.01)。与鸡血藤组比较,顺铂组和鸡血藤+顺铂组PG
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Group Serumconcentration
24h 48h
OD Inhibition(%) OD
Inhibition
(%)
Control 20% 0.457±0.0031 — 0.800±0.0008 —
10% 0.413±0.0013 — 0.763±0.0007 —
5% 0.377±0.0010 — 0.734±0.0009 —
2.5% 0.346±0.0010 — 0.711±0.0011 —
JXT 20% 0.397±0.0025* 13.08 0.652±0.0009* 18.48
10% 0.361±0.0011* 12.64 0.633±0.0008* 17.13
5% 0.332±0.0015* 11.79 0.622±0.0007* 15.23
72h
OD
1.358±0.0006
1.222±0.0006
1.111±0.0007
0.100±0.0018
0.955±0.0014*
0.948±0.0023*
0.922±0.0010*
Inhibition
(%)




29.63
22.40
17.02
2.5% 0.314±0.0033 8.99 0.603±0.0007 15.16 0.913±0.0068 16.97
Control+DDP 20% 0.378±0.0007*Δ 21.02 0.483±0.0011*Δ 39.59 0.480±0.0010*Δ 64.65
10% 0.333±0.0009*Δ 19.36 0.472±0.0009*Δ 38.14 0.443±0.0014*Δ 63.71
5% 0.327±0.0019*Δ 13.25 0.456±0.0010*Δ 37.94 0.411±0.0029*Δ 63.00
2.5% 0.299±0.0008*Δ 13.44 0.444±0.0007*Δ 37.50 0.399±0.0015*Δ 63.64
JXT+DDP 20% 0.358±0.0015*Δ 21.77 0.466±0.0013*Δ 41.78 0.438±0.0008*Δ 67.76
10% 0.332±0.0007*Δ 19.75 0.463±0.0008*Δ 39.30 0.422±0.0016*Δ 65.48
5% 0.321±0.0013*Δ 14.69 0.463±0.0004*Δ 36.99 0.401±0.0010*Δ 63.90
2.5% 0.300±0.0007*Δ 13.23 0.461±0.0013*Δ 35.15 0.400±0.0010*Δ 63.64
*P<0.05,corresponding concentration JXT, Control+DDP, JXT+DDP vs. Control;
Δ:P<0.05, corresponding concentration Control+DDP, JXT+DDP JXT
Table 1 Effect of Caulis Spatholobi containing serum and cisplatin on the proliferation of cell line PG(x±s;n=6)
Note:JXT:Caulis Spatholobi;DDP:Cisplatin.*P<0.05, corresponding concentration JXT, Control+DDP, JXT+DDP vs Control;
Δ:P<0.05, corresponding concentration Control+DDP, JXT+DDP vs JXT
24h
Control
JXT
Control+DDP
JXT+DDP
20% 10% 5% 2.5%
25
20
15
10
5
0
In
hi
bi
tio
n(
%
)
48h
Control
JXT
Control+DDP
JXT+DDP
20% 10% 5% 2.5%
50
40
30
20
10
0
In
hi
bi
tio
n(
%
)
Concentration Concentration
72h
Control
JXT
Control+DDP
JXT+DDP
20% 10% 5% 2.5%
80
60
40
20
0
In
hi
bi
tio
n(
%
)
Concentration
Figure 1 The effect of Caulis Spatholobi containing serum on the proliferation of PG cells
论 著 222
中国肿瘤 2016 年第 25 卷第 3 期 ChinaCancer,2016,Vol.25,N o.3
细胞的 S 期和 G2/M 期比例增加 (P<0.01),G0/G1期
降低(P<0.01)。 与顺铂组比较,鸡血藤+顺铂组 PG
细胞的各期差异无统计学意义 (P>0.05)(Table 2,
Figure 3)。
Note:Optical microscope:A control;B JXT;C DDP;D JXT+DDP;
Laser scanning confocal microscope:E control;F JXT;G DDP;H JXT+DDP
(A~D:HE, ×100;E~H:IFL,×1000).
Figure 2 The effect of Caulis Spatholobi containing serum on the morphology PG cells
A B C D
E F G H
Note:A:Control;B:JXT;C:DDP;D:JXT+DDP.
Figure 3 Effect of Caulis Spatholobi containing serum on the cycle of PG cell lines
论 著223
中国肿瘤 2016 年第 25 卷第 3 期 ChinaCancer,2016,Vol.25,N o.3
Groups G0/G1 S G2/M
Control 46.303±0.453 38.457±0.322 15.240±0.166
JXT 39.757±2.813 36.583±3.147 23.870±1.037*
DDP 3.870±1.991**ΔΔ 58.117±2.692**ΔΔ 38.013±4.677**ΔΔ
JXT +DDP 4.040±2.016**ΔΔ 62.147±0.755**ΔΔ 33.813±2.109**ΔΔ
Note:G0/G1:F =127.864, P <0.001;**:vs control,P <0.001;ΔΔ:vs JXT,P <
0.001;S:F=38.992, P<0.001;**:vs Control,P<0.001;ΔΔ:vs JXT,P<0.001;
G2/M:F =15.251, P <0.05;*:vs Control,P =0.048;**:vs Control,P <0.001;
ΔΔ:DDP vs. JXT,P= 0.005;ΔΔ:JXT +DDP vs JXT,P=0.028.
3 讨 论
中医学认为,瘀血与癌毒胶结不解,产生癌瘤。
血瘀证是恶性肿瘤患者临床常见的中医证候, 根据
观其脉证,随证治之的原则,对于以血瘀证为主证的
恶性肿瘤患者,应当以活血化瘀为主要治疗原则。鸡
血藤是一味沿用千年的活血化瘀中药, 具有 “去瘀
血,生新血”的功效,并称之为“血分之圣药”[5]。 现代
研究发现鸡血藤可以用于治疗大肠癌、急性白血病、
胃癌、肝癌、鼻咽癌、宫颈癌等病症[6~8]。 近年来研究
发现给每只小鼠灌胃鸡血藤提取物 3g/0.3ml, 连续
14d, 对小鼠移植性 Lewis 肺癌抑制率为 30.65%[9]。
本课题组前期研究通过建立 C57BL/6 小鼠移植性
Lewis肺癌肺转移模型, 分别给予川芎、 鸡血藤、苏
木、水蛭单药灌胃,分 3个时间点与模型对照组进行
比较,动态观察各组抑瘤率情况,结果发现第 5 天、
第 10天,鸡血藤组的瘤重与对照组相比差异有统计
学意义(P<0.05), 说明鸡血藤组对 Lewis发挥一定的
抗瘤作用[3]。
本研究采用鸡血藤含药血清进行体外抗肿瘤研
究,MTT 结果发现, 不同浓度鸡血藤含药血清均有
抑制肿瘤细胞增殖效应,并具有时间和剂量依赖性,
而这种抑制作用不及顺铂组和鸡血藤+顺铂组。 鸡
血藤+顺铂组并未协同顺铂组发挥抗肿瘤作用,从
实验操作角度分析其原因, 顺铂为体外添加的直接
作用于 PG 细胞的细胞毒药物, 其细胞增殖抑制作
用较强, 从而掩盖了鸡血藤的抑制增殖作用。 在细
胞形态方面,不论是光镜还是激光共聚焦显微镜,鸡
血藤组细胞凋亡程度较空白组明显增加, 虽不及顺
铂组和鸡血藤+顺铂组, 但从形态上印证了鸡血藤
的增殖抑制作用。
随着分子肿瘤学的发展, 人们发现细胞周期
失控是癌变的重要原因。 富琦采用小鼠移植性
Lewis肺癌模型发现鸡血藤提取物 SSCE 高、中、低
各组肿瘤细胞 G1期增多,说明其作用周期主要在
G1期 [10]。 高珊等 [11]研究发现鸡血藤提取物 SSCE
通过下调 CDK1mRNA 转录水平及蛋白表达量引
起 A549 细胞 G2/M 期阻滞 ; 通过下调 CDK2、6
mRNA 转录水平及蛋白表达量引起 A549 细胞 G1
期阻滞。
本研究发现鸡血藤组较空白组 G2/M 期肿瘤
细胞增多, 说明鸡血藤含药血清可以将 PG 细胞周
期阻滞在 G2/M 期,从细胞周期方面证明了鸡血藤含
药血清对人肺癌 PG 细胞的抑制作用。 顺铂作为细
胞周期非特异性药物,可杀伤细胞周期中各期细胞,
从而促使癌细胞凋亡,而发挥抗癌作用。 本研究中,
顺铂组 S、G2/M 期肿瘤细胞较空白组明显增多,说明
顺铂组人肺癌 PG 细胞被阻滞在 S 和 G2/M 期,与鸡
血藤组不同的是,顺铂组 G2/M 期肿瘤细胞增加更加
明显, 印证顺铂组的细胞增殖抑制作用强于鸡血藤
组。 鸡血藤+顺铂组与顺铂组细胞比较阻滞周期比
例无统计学意义,并未出现预料的叠加效果。这就从
细胞周期角度验证了MTT 实验中鸡血藤并未增加
顺铂的细胞增殖抑制作用的原因。
综上所述,鸡血藤含药血清通过阻滞人肺癌 PG
细胞于 G2/M 期,从而诱发其凋亡,阻滞其增殖,而鸡
血藤作为抗肿瘤中药的最终作用靶点仍有待进一步
阐释。
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