全 文 ：湖北农学院学报 , 15( 2): 86～ 90, 1995
Journal of Hubei Agricultural College
克线磷在珠兰植株中的残留测定
张 修 军　　　　　　　　程 瑚 瑞
(湖北农学院农学系 , 荆沙市 434103)　　 (南京农业大学线虫研究室 南京 210042)
摘　要　设计了利用气相色谱双火焰光度检测器测定克线磷及其有毒代谢产物在珠兰植
株中残留量的方法。 该方法的回收率为 86% ～ 92. 5%。 对二次施药法培育脱线虫珠兰苗试验
中的珠兰叶片的残留检测表明:在距最后一次施药后的第 120 d,其残留为 3 mg /kg ,第 230 d
的残留降为 1. 81～ 1. 85 mg /kg ,第 350 d的残留为 0. 8～ 0. 9 mg /kg.残留在 4个月后 ,以大约
每 4个月衰减一半左右的速度递减。
关键词　克线磷 ;珠兰 ;残留测定
中图法分类号: S 482. 3
克线磷 ( Nemacur )的通用名为 fenamiphos,是高效高毒广谱性农药 ,对各种自由习居
线虫和植物内、外寄生线虫有效 ,同时对各种刺吸式口器害虫如蚜虫、蓟马和叶螨科害虫
有明显的作用 [1, 2 ]。 克线磷具有内吸性 ,除经根基进入植物体外 ,还经叶吸收 ,并作向顶和
向基双向传导。若有足够的水份存在 ,可在土壤中充分分布。 此外 ,克线磷还能刺激作物
的生长 ,促进早熟 ,改进产品质量和提高产量。克线磷非常稳定 ,其药效不随土壤类型和气
候条件而变化 ,使用后数月仍然有效 [1～ 6 ]。
克线磷自植物根部和叶吸收后 ,上下传导到植株各部位 ,在植物体内先较快地被氧化
成亚砜 ,进而被缓慢氧化成砜 ,最后水解成多种无毒的水溶性产物 ,其中亚砜是在植物体
内产生杀虫活性的主要物质。克线磷及其氧化产物亚砜和砜的毒性都很高 ,因此 ,亚砜和
砜均被认为是毒理学上有重要性的代谢产物。研究药剂的残留时 ,必须同时考虑以上 3
个化合物 [7 ]。
作者在珠兰叶斑线虫病的防治中 ,通过施用高剂量的克线磷成功地获得了脱线虫珠
兰苗 [8 ]。 为监测药剂在珠兰苗体内的残留 ,保证安全用花 ,进行克线磷残留方面的研究十
分必要。用气相色谱分析方法检测克线磷在作物中的残留在国内尚未见报导。因此作者
设计了克线磷在珠兰体内残留的测定方法 ,并在不同时期对珠兰体内残留克线磷进行了
测定 ,本文报导部分结果。
1　材料与方法
1. 1　仪器、试剂和材料
国产 GC- 6A型气相色谱仪 ,配有双火焰光度硫磷检测器。
丙酮、二氯甲烷均为分析纯 ,重蒸。另备无水硫酸钠 , 20% Mg SO4溶液 , 0. 1 mol· L- 1
收稿日期: 1994- 09- 25
KMnO4溶液和 4%的 NaCl溶液。 残留测定用标准克线磷 (德国产 , 87%工业品 ) ,由农牧
渔业部药检所提供。测定用的珠兰材料皆为用克线磷处理后培育出的脱虫苗及对照 ,整个
试验期间按常规方法管理。
1. 2　测定方法
采用过量高锰酸钾将克线磷和克线磷亚砜完全氧化成克线磷砜 [6 ] ,以测出克线磷砜
量作为克线磷的残留总量。 提取方法和色谱条件分别依据文献 [9]和 [7, 10]制定。
1. 2. 1　提取
称取新鲜待测样本 (叶片 ) 50 g ,加入 60 mL蒸馏水 ,在搅碎机中剪碎匀浆 ,换入 500
m L具塞三角瓶 ,加 130 mL丙酮 ,振荡提取 4 h后浸渍过夜 ( 12 h)。 用纱网滤去粗残渣。
滤液经布氏滤器加双层滤纸减压抽滤 ,收集滤液。残渣加 60 mL丙酮浸渍 ,重复上述过程
抽滤 ,进入萃取。萃取时将滤液转移到 1 000 m L的分液漏斗中 ,加 4% 250 mL的 NaCl
溶液 ,用 2× 30 mL二氯甲烷重复萃取 ,收集二氯甲烷层 ,使其通过填有无水硫酸钠粉末
的玻璃柱干燥过滤 ,随后加入二氯甲烷淋洗 ,合并二氯甲烷液 ,经 K- D浓缩器在 40℃下
减压蒸馏至干 ,再用 2～ 4 mL丙酮溶解 ,供氧化用。
1. 2. 2　氧化
将上述丙酮溶液转入 100 mL园底烧瓶中 ,加入 5 mL20% Mg SO4溶液和 20 mL0. 1
mol· L- 1 KMnO4溶液。 加入时沿烧瓶壁洗下 ,混匀 ,在室温下放置 15 min,转移至 125
m L分液漏斗中 ,用 3× 20 mL二氯甲烷重复萃取 ,萃取液经无水硫酸钠柱干燥过滤 ,在
40℃下减压蒸发至干。加 2 mL丙酮溶解 ,供上机测定用。
1. 2. 3　标准克线磷溶液
称取 10 mg标准克线磷加 10 m L丙酮溶解 ,取 2 m L通过上述氧化过程氧化 ,稀释后
备用。
1. 2. 4　回收率的测定
取上述 10 mg /10 mg的标准克线磷 1 mL稀释 4倍 ,取 1 mL淋混于 50 g未施用过
克线磷的对照苗叶上 ,阴干后 ,按上述提取和氧化方法与待测样品同时提取。
1. 2. 5　气相色谱检测
　检测器:双火焰光度检测器 (测磷用 )。
　色谱柱: 1 m× 4 mm的玻璃色谱柱。
　载体: 60～ 80目 Chromo rb W- Acid W DMCS。
　固定液: 2% OV- 101。
　色谱条件: 柱温 200℃ ,气化温度 230℃ ,检测器温度 230℃ ,载气 ( N2 ) 40 mL /
min,氢气 100mL /min,空气Ⅰ 400 mL /min,空气Ⅱ 300 m L /min。
1. 2. 6　结果计算
以峰高和含量的对应关系在双对数坐标纸上作标准曲线 ,以样品峰高在曲线上求得
对应含量 [9, 10 ]。 计算公式如下:
　　样品含量= 峰高对应值进样量 ×定容量
　　回收率= 标样加入量回收含量值× 100%
·87·2期　　　　　　　　　张修军等:　克线磷在珠兰植株中的残留测定　　　　　　　　　　　
　　残留量 ( mg /kg)= 样品含量× 87%回收率 × 106　　 (式中 87%系标准样的纯度 )
2　结果与分析
1987年 1月、 5月和 1988年 1月分三次对采用克线磷重施药培育的脱线虫苗叶中克
线磷的残留量进行了检测。 三次检测中的回收率分别为 86%、 92. 5%和 90% 。这表明本
测定方法获得的结果相当可靠。克线磷砜在气相色谱图出现显著的峰 ,标样与检测样品峰
的保留时间一致 ,均为 2 min,未发现有明显的杂质峰干扰。未施药对照无峰出现 ,表明上
述保留时间为 2 min的峰确系克线磷砜。色谱图上出现单一的峰也表明克线磷和克线磷
亚砜的氧化是彻底的 ,否则二者将在与克线磷砜不同的保留时间上出现。故以测得克线磷
砜的量作为残留量是准确的。克线磷砜的进样量与峰高的关系如表 1,它在双对数座标纸
上表现为完全的线性关系。在上述测定方法和条件下 , 1987年 1月 (距苗钵施药 120 d)测
得珠兰叶片中的药剂残留为 3 mg /kg , 5月 (距苗钵施药 230 d)测得两个重复样本分别为
1. 85 mg /kg和 1. 81 mg /kg , 1988年 1月 (苗钵施药第 350 d)测得残留为 0. 8 mg /kg和
0. 9 mg /kg。因此 ,药剂在施用后的 4个月内维持了很高的浓度 ( 3 mg /kg ) ,而在其后的 8
个月内 ,按大约每 4个月衰减一半左右的速度递减。
表 1　标准曲线之进样量与峰高的关系
标准进样量 /g· μL- 1 峰　高 /cm
7× 10- 8 4. 1
8× 10- 8 7. 0
9× 10- 8 7. 4
1× 10- 7 10. 7
1 /2× 10- 8 20. 0
表 2　克线磷在珠兰叶内的气相色谱
检　测
时　间
样本量
/g
残留量
/mg· kg- 1
回收率
(% )
1987年 1月 50 3。 0 87。 0
1987年 5月 80 1。 85 92。 5
80 1。 81
1988年 1月 80 0。 8 90。 0
80 0。 9
3　讨论与小结
本试验的测定材料取自药剂处理培育的无虫珠兰苗 ,前后共接受过两次施药处理 ,第
一次的为压条繁殖前 30 d,在母钵内用药 14. 8mg (有效成份 ) /单株 ,第二次为压条后的第
15 d于繁殖成活的苗钵内用药 16mg (有效成份 /压条 )。 虽然压条苗在成活后脱离了母
钵 ,但由于这类内吸性药剂以叶片吸收最多 [ 1, 6] ,所以试验测出的药剂残留为两次施药的
共同残留 ,而不只是后一次施药的残留。在上述高剂量施药条件下 ,停药后的第 120 d,其
残留为 3mg /Kg ,第 230 d为 1. 85～ 1. 81mg /Kg ,第 350 d为 0. 8～ 0. 9mg /Kg。因此 ,克线
磷在珠兰体内的残留以大约每 4个月衰减一半的速度递减。 张修军报导距第一次施药后
的第 75 d,即第二次用后的第 30 d,成功地根除了病原线虫 [8 ]。假定克线磷在植物体内的
衰减速度大致均匀的话 ,我们可以推测此时克线磷及其有毒代谢物在叶内的浓度为 5～ 6
mg /kg左右 ,而这一浓度足以导致线虫麻痹 [ 8, 11 ]。可以认为药剂法培育无虫苗之所以成
功 ,正是克线磷在珠兰体内保持了 75天以上的持续高浓度 ,造成线虫长期麻痹中毒 ,最终
·88·　　　　　　　　　　　　　　　湖　北　农　学　院　学　报　　　　　　　　　　　　　 15卷
致其死亡、灭绝的结果。
珠兰的茶用部份为花 ,珠兰苗压条育成后于第三年进入产花盛期。同样按上述残留速
度递减推测 ,用药两年后 ,株兰体内的克线磷残留为 0. 01 mg /kg左右。需要指出的是 ,本
试验测定的材料是叶片而非花 ,主要是因为前期难以有足够样本量的花。按文献 ,克线磷
用后以叶片积累最高 [1 ]。因此我们认为花中残留不会超过叶片。当叶中残留降到允许水平
时 ,花中残留应可以不再考虑。克线磷在珠兰上的残留允许量无标准可循。但联合国粮农
组织规定克线磷在食用作物中的残留量都在 0. 05～ 0. 1 mg /kg之间 ,如咖啡豆为 0. 1,菠
萝为 0. 05[1 ]。参照这一标准 ,药剂法培育的珠兰苗在第三年的产花将是安全可用的。 所
以 ,药剂法培育珠兰苗不失为一种经济、有效和安全的根治珠兰叶斑线虫病的方法。
上述关于克线磷在珠兰体内的残留匀速衰减的假定和推测是否正确 ,还有待进一步
的工作来证实。无论如何 ,随着时间的推移 ,克线磷在珠兰体内的残留都将消失 ,药剂法培
育脱线虫苗根治珠兰叶斑线虫病将会在生产上发挥巨大的作用。
致　谢　作者感谢南京农业大学谭福杰先生、章元寿教授和陈进老师在整个残留过程中给以的热
忱指导、支持和帮助。
参　考　文　献
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·89·2期　　　　　　　　　张修军等:　克线磷在珠兰植株中的残留测定　　　　　　　　　　　
Determination of Residues of Fenamiphos in Chulan
(Chloranthus spicatus ) Plants
Zhang Xiujun
(Department of Agronomy , Hubei Agricultural Col lege ,J ingsha 434103)
Chen Hurui
( Sect ion of Nematology , N anjing Agricultural University , Nanjing 210042)
Abstract　 A specific g as chr oma to g raphic pr ocedure using a two flame pho tometric detecto r was
designed fo r the de termina tion of Fenamipho s and its toxic metabolites in chulan plants. The recover y of
the me thod ranged f rom 86% to 92. 5% . Determination o f th e r esidues of ch ulan leaves fr om the experi-
ment of breeding nematode-free Chulan seedling by a tw o tim es fenamiphos trea tment indicated tha t: the
r esidue w as 3 mg /kg a t the 120th day a fter the fina l fenamiphos tr eatment , 1. 81 to 1. 85 mg /kg at the
230th day and 0. 8 to 0. 9 mg /kg at th e 350th day . The r esidue declined about a half in ever y four month
4 month after the final trea tment.
Key words　 Fenamipho s; Chloranthus spicatus; Determination of Residues
(审稿: 王清锋 ;编辑: 汤厚宽 )　　　
第一作者简介: 张修军 ,男 , 32岁 ,湖北农学院农学系讲师 ,现为华中农业大学博士研究生。
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