全 文 ：西北林学院学报 2010 , 25(3):87 ～ 89
Journal o f No r thw est Fo restry Univer sity
长柄扁桃试管苗诱导生根的初步研究
　收稿日期:2009-05-14　修回日期:2009-06-28
　基金项目:陕西省科技攻关项目(2005K01-G12-02)
　作者简介:孙占育 ,男 ,讲师 ,硕士研究生 ,主要从事农业生物技术的教学与科研工作。
孙占育1 ,郭春会2 ,孙志强1 ,曹　斌1
(1.渭南职业技术学院 ,陕西渭南 714000;2.西北农林科技大学 园艺学院 ,陕西杨陵 712100)
摘　要:应用均匀正交设计 U L9(34)方案 ,对长柄扁桃试管苗诱导生根进行研究 。分析了 IBA(吲
哚丁酸)、AC(活性炭)、蔗糖 3种不同浓度及其组合对长柄扁桃试管苗诱导生根培养的影响 。结果
表明:3种因素的作用大小为 AC>IBA >蔗糖 ,适于诱导长柄扁桃试管苗生根的培养基为1/2M S
+IBA 40 mg ·L-1 +AC0.5 g ·L-1 +蔗糖 40 g ·L-1 。
关键词:长柄扁桃;试管苗;诱导生根;均匀正交设计
中图分类号:S722.37　　　文献标志码:A　　　文章编号:1001-7461(2010)03-0087-03
A Preliminary Study on in v itro Rooting of Amygdalus pedunculata
SUN Zhan-yu1 ,GUO Chun-hui2 ,SUN Zhi-qiang1 ,CAO Bin1
(1.Weinan Voca tiona l an d Technolog y Co llege , Weinan , Shaanxi 714000 , Ch ina;
2.Col lege o f Hort icul tu re , Northwest A&F Un iver sity , Yang ling , Shaanxi 712100 , China)
Abstract:Induction in vi tro root ing of Amygdalus pedunculata was studied by using uniform o rthogonal
design UL 9(34).The effects of indole-3-buty ric acid (IBA), act ivated carbon (AC)and sucro se in di ffer-
ent concentrat ions and combinat ions on the induct ion of culture in v itro roo ting w ere analy zed.The re sults
show ed that the ef fectiveness of three factors w as in the o rder of AC>IBA >Sucrose.The 1/2M S supple-
mented w ith IBA 40 mg ·L-1 +AC 0.5 g ·L -1 +Sucro se40 g ·L-1 were suitable for roo t inducing.
Key words:Amygdalus pedunculata ;in v it ro shoot;root induce;unifo rm orthogonal design
　　长柄扁桃(Amygdalus ped unculatus)是蔷薇
科扁桃亚属的落叶灌木[ 1] ,又名野樱桃 、柄扁桃 、毛
樱桃 ,是我国特有的扁桃属野生种 。长柄扁桃具有
抗旱 、抗风 、固沙能力强等特性 ,具有很好的生态效
益。长柄扁桃果仁的营养价值高 ,适于加工保健品 ,
其含油量高达 45.2%～ 52.0%,可做工业原料 ,是
一种极具开发潜力的野生果树资源树种 。长柄扁桃
作为适应我国西北干旱 、半干旱地区山地和沙地生
态条件而自然分布的一种落叶灌木 ,由于沙漠淹没
和人为破坏 ,已成为濒危植物[ 2] 。
目前 ,长柄扁桃自然繁殖困难[ 3] ,急需开展长柄
扁桃组织培养快繁技术的研究 ,而长柄扁桃试管苗
难生根已成为一项重大技术障碍。本研究通过均匀
正交设计[ 4] 试验 ,分析 IBA 、AC 及蔗糖 3种不同浓
度配比对长柄扁桃试管苗诱导生根的影响 ,寻找最
优的配方组合。
1　材料与方法
1.1　材料
供试材料来自西北农林科技大学园艺学院组培
室的长柄扁桃试管苗。在组培室挑选生长相对整齐
的健壮试管苗 , 接种在含不同浓度的吲哚丁酸
(IBA)、活性炭(AC)、蔗糖的 1/2M S 培养基上 ,暗
培养诱导生根。培养基的 pH5.8 ,琼脂粉含量为
6.5 g ·L-1 。每瓶接种 3个嫩茎 ,每个处理 10瓶 ,
重复 3次。
1.2　试验设计
采用 U L9(34)均匀正交设计 。研究 IBA 、AC 、
蔗糖 3个因素对长柄扁桃试管苗诱导生根的影响
(表 1)。每个因素取 3个水平(表 2)共 9个处理 ,每
处理重复 3次。
1.3　数据记录与处理
暗培养 6 d 诱导生根 ,然后转入不含激素的
1/2M S培养中进行光培养 , 20 d后统计生根苗数 、
每株生根数及愈伤状况。数据处理采用 SAS8.0软
件分析。
表 1　UL9(34)因素水平
Table 1　U L9(34)f actors and levels
水平 IBA/(mg· L-1)
蔗糖
/(g· L -1)
AC
/(g· L-1)
1 30 20 0
2 40 30 0.5
3 50 40 1
2　结果与分析
2.1　平均生根率
由表 2、表 3可以看出 , IBA和 AC对平均生根率
有极显著的影响 ,蔗糖的影响也达到显著水平。3种
因素对平均生根率的诱导作用为 AC>IBA>蔗糖 ,
三者均为影响生根率的主要因素。由多重比较可看
出 ,当 ê=0.05时 , IBA 的 2水平生根率显著高于 1
水平 ,蔗糖的 3水平生根率明显高于其他 2个水平 ,
AC的2 、3水平的生根率显著高于 1水平。由此可
见 ,高浓度的 IBA和蔗糖有利于提高生根率 ,加入一
定浓度的AC有利于诱导生根。3种因素诱导长柄扁
桃试管苗生根率高的最优水平分别是 IBA 40 mg ·
L-1 、蔗糖40 g ·L-1 、AC0.5 g·L-1 。
2.2　平均生根数
由表 4可以看出 , IBA 和 AC 对生根数有极显
著的影响 ,蔗糖的影响也达到显著水平 。3个因素
对生根数的影响程度为 AC >IBA >蔗糖 。当 ê =
0 .05时 , IBA的2 、3水平显著高于1水平 ,蔗糖和
表 2　UL9(34)均匀正交试验方案与试验结果
Table 2　UL9(34)uni form orthogonal design tes t plan and resul ts
试验号 IBA/(mg· L -1)
蔗糖
/(g· L-1)
AC
/(g· L-1)
平均生根率/ %
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
平均生根数
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
愈伤组织(等级)①
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
1 30 20 0.0 71.4 71.4 80.0 5 7 8 5 4 5
2 30 30 1.0 100.0 80.0 100.0 3 3 3 1 1 1
3 30 40 0.5 100.0 97.5 100.0 5 5 6 2 2 2
4 40 20 1.0 100.0 100.0 100.0 6 4 5 1 1 1
5 40 30 0.5 100.0 100.0 100.0 14 14 13 3 3 3
6 40 40 0.0 85.7 100.0 100.0 4 6 8 3 4 3
7 50 20 0.5 100.0 100.0 100.0 10 8 7 3 2 2
8 50 30 0.0 76.7 83.3 86.0 7 6 7 4 5 5
9 50 40 1.0 100.0 100.0 100.0 8 6 5 2 2 2
①1-基本无愈伤组织 , 2-有少量愈伤组织 , 3-愈伤组织一般 , 4-愈伤组织较多 , 5-严重愈伤化。
表 3　平均生根率方差分析及多重比较①
Table 3　Variance analysis and mu ltiple com pari sons of
average rooting rate
因素 F 值 水平 平均生根率/%
多重比较
(ê =0.05)
IBA 7.27＊＊ 2 98.41 a
3 94.00 ab
1 88.92 b
蔗糖 4.60＊ 3 98.13 a
2 91.78 b
1 91.42 b
AC 24.23＊＊ 2 99.72 a
3 97.78 a
1 83.83 b
①＊＊表示极显著水平;a 、b 、c表示各水平间显著差异。下表同。
AC的 2 水平均显著高于其他 2 个水平。由此可
见 ,高浓度的 IBA 、一定浓度的蔗糖和 AC 有利于生
根数的增加。因此 , 3 种因素诱导长柄扁桃试管苗
生根的最优水平均为 2水平 ,即 IBA 40 mg ·L -1 、
蔗糖 30 g ·L-1 、AC0.5 g ·L-1 。
表 4　平均生根数方差分析及多重比较
T able 4　Variance analysi s and mul tiple comparisons of
average num ber of root s
因素 F值 水平 平均生根数 多重比较(ê=0.05)
IBA 24.11＊＊ 2 8.22 a
3 7.11 a
1 5.00 b
蔗糖 5.62＊ 2 7.78 a
1 6.67 b
3 5.89 b
AC 29.77＊＊ 2 9.11 a
1 6.44 b
3 4.78 c
2.3　愈伤组织(等级)
AC对愈伤组织有极显著的影响(表 5), IBA 的
影响达到显著水平 。3种因素诱导愈伤组织的作用
大小为 AC >IBA >蔗糖。当 ê =0.05 时 , IBA 的
1 、2水平愈伤化程度显著低于 3水平 ,蔗糖的 3水
88 西北林学院学报 25 卷　
平愈伤化程度显著低于其他 2个水平。AC 的 3 个
水平愈伤化程度差异显著 ,其中 3水平的愈伤化程
度最低 ,基本无愈伤组织。由此可见 ,高浓度的 AC
和蔗糖可减少愈伤组织的发生 ,而高浓度的 IBA 则
导致愈伤增多 ,诱导生根效果差。3种因素诱导长
柄扁桃试管苗生根愈伤化程度低的水平为 IBA30 、
40 mg ·L -1 ,蔗糖 40 g ·L-1 , AC1.0 g ·L-1 。
表 5　愈伤组织(等级)方差分析及多重比较
Table 5　Variance analysis and m ult iple com pari sons of callu s class
因素 F 值 水平 愈伤组织(等级)
多重比较
(ê =0.05)
IBA 5.25＊ 3 3.00 a
1 2.56 b
2 2.44 b
蔗糖 3 2 2.89 a
1 2.67 a
3 2.44 b
AC 129.00＊＊ 1 4.22 a
2 2.44 b
3 1.33 c
综合以上对生根率 、生根数和愈伤化的分析 ,
IBA 、AC 、蔗糖 3种因素诱导长柄扁桃试管苗生根
效果最佳的条件为 IBA 40 mg · L-1 、蔗糖 40 g ·
L-1 、AC0.5 g · L-1 。并进一步通过对适于诱导生
根的培养基(1/2MS+IBA 40 mg · L-1 +AC0.5 g
·L-1 +蔗糖 40 g · L-1)进行了试验验证 ,平均生
根率达 100%,平均生根数达 10 条以上 ,基本无愈
伤组织 ,诱导生根效果好 。
3　结论与讨论
在根原基的发生阶段 , IAA 可作为基因的活化
剂 ,促进早期根原基的形成[ 5] 。IBA 促生根的效果
高于 IAA [ 6] 。长柄扁桃试管苗诱导生根的培养基
中加入 IBA 40 mg · L-1诱导的生根率高 、生根数
多 ,而且愈伤组织少 ,诱导生根效果佳。另外 ,高浓
度的生长素诱导生根时 ,暗处理时间不宜过长 ,否则
会使试管苗出现黄化 、落叶甚至顶梢枯死。
组织培养最常用的碳源是蔗糖 ,浓度一般为
2%～ 5%[ 7] 。在培养基中加入 40 g · L-1蔗糖 ,生
根率达 97%,而且愈伤组织少[ 8] 。
活性炭在组织培养中诱导生根有两面性 ,一方
面因吸附培养基中的非极性物质和色素等有害物质
而促进生根 , 另一方面也因吸收生根所必须的生长
激素和其他营养物质而抑制生根。另外 , AC 在诱
导生根过程中可提供暗环境 ,降低光照 ,为培养基中
光敏性生长素的积累提供合适的环境[ 9] ,一般 AC
和生长素同时使用[ 10] 。试验表明 ,在生根培养基中
加入 AC0.5 g · L-1 ,生根数和生根率都有显著提
高[ 1 1] 。同时 ,加入 AC 后可减少愈伤组织的发生 ,
防止褐变 ,有利于诱导生根 。
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