作 者 :张百成;沙伟;宋璐;Organ-单位: 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院;
期 刊 :北方园艺 2012年 12期 页码:113-116
关键词:毛尖紫萼藓;抗旱;T-PCR;基因克隆;载体构建;
摘 要 :利用PCR技术,以毛尖紫萼藓总RNA为模板,扩增出上、下游分别加入BamHI、SacⅠ酶切位点的GH394(657 bp)基因CDS区全长序列,采用pMD18-T Vector、pRI 101-AN Vector构建了该基因克隆、表达载体,并将重组载体质粒转化到大肠杆菌(Escherichia coli)DH 5α和根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)工程菌株GV3101中,并选用X-gal、IPTG和利福平(Rifampicin,Rif)、卡那霉素(Kanamyein,Km)筛选阳性菌株。结果表明:已成功构建pMD-GH394克隆载体和pRI 101-AN-GH3...