全 文 ：作者简介:李依信，男，副主任中药师，研究方向:药物分析，E － mail:955859115@ qq． com
HPLC法测定铁扫帚药材中槲皮苷含量的方法研究
李依信
( 云浮市食品药品药检所，广东 云浮 527300)
摘要:目的 建立铁扫帚药材中槲皮苷含量的高效液相色谱测定法。方法 采用 C18色谱柱( 4． 6 mm × 150
mm，5 μm) ，以甲醇 － 0． 01 mol·L －1磷酸二氢钾 －冰醋酸( 35∶63． 5∶1． 5) 为流动相，流速 1． 0 mL·min －1，柱温 30
℃，检测波长 254 nm。结果 槲皮苷进样量在 0． 084 2 ～ 0． 842 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系( r = 0．
999 9) ，该方法平均回收率为 97． 8%，RSD为 1． 2% ( n = 6) 。结论 该方法具有简便、准确、重复性好的特点，可用
于测定铁扫帚药材中槲皮苷的含量。
关键词:高效液相色谱法;铁扫帚;槲皮苷;含量测定
中图分类号:R927． 2 文献标识码:A 文章编号:2095 －5375(2013)05 －0269 －002
Determination of quercitrin in lespedeza cuneata by HPLC
LI Yi-xin
(Yunfu Institute for Food and Drug Control，Yunfu 527300，China)
Abstract:Objective To establish an HPLC method for the determination of quercitrin in lespedeza cuneata． Methods
The method was performed on C18 column (4． 6 mm × 150 mm，5 μm)，with the mobile phase consisting of methanol － 0．
01 mol·L －1 potassium phosphate monobasic solution － glacial acetic acid (35∶63． 5 ∶1． 5)，the flow rate was 1． 0 mL·
min －1，the column temperature was 35 ℃，detection wavelength was 254 nm． Results The linear range of quercitrin was
0． 084 2 ～ 0． 842 μg· mL －1(r = 0． 999 9)，the average recovery was 97． 8% and the RSD was 1． 2%(n = 6)． Conclusion
The method was simple，accurate and better repeatable，which can be used for the determination of quercitrin in lespedeza
cuneata．
Key words:HLPC;Lespedeza cuneata;Quercitrin;Determination
豆科蝶形花亚科植物截叶铁扫帚 Lespedeza cu-
neata (Dum － Cours．)G． Don以地上部分入药，6 ～
9 月采割，除去杂质后晒干。主要用于小儿疳积，消
化不良，胃肠炎，细菌性痢疾，胃痛，黄疸型肝炎，肾
炎水肿，白带，口腔炎，咳嗽，支气管炎。铁扫帚所含
成分主要有槲皮苷，香草酸，山柰素等，以前的报道
中多为测定铁扫帚药材中的水解产物如槲皮素和山
柰素的含量，含量测定的结果容易受到干扰。本实
验采用高效液相色谱法测定铁扫帚中槲皮苷的含
量，方法简便、稳定、快速、重现性好。
1 仪器与试药
岛津 LC －20AT高效液相色谱仪，梅特勒 XS －
205DU电子天平，KQ － 500 型超声仪。甲醇为色谱
纯，冰醋酸为分析纯，水为超纯水，其他试剂均为分
析纯;槲皮苷对照品(中国食品药品检定研究院，批
号为 111538 － 201106) ;铁扫帚药材(广东远大药业
提供，批号分别为 20120901，20121001，20121101)。
2 方法与结果［1 ～ 4］
2． 1 色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充
剂;以甲醇 － 0． 01 mol·L －1磷酸二氢钾溶液 －冰醋
酸(40∶63． 5∶1． 5)为流动相;检测波长为 254 nm，流
速为 1． 0 mL·min －1，进样量为 10 μL;理论板数按
槲皮苷峰计算应不低于 2 000，分离度 R 应大于
1． 5，色谱图见图 1、图 2。
2． 2 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的
槲皮苷对照品 0． 016 84 g，置于 100 mL 容量瓶中，
加甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，作为对照品储备
液;精确吸取储备液 5 mL 到 20 mL 容量瓶，加甲醇
稀释至刻度，即得对照品溶液(槲皮苷浓度为 42． 1
μg·mL －1)。
·962·药学研究·Journal of Pharmaceutical Research 2013 Vol． 32，No． 5
DOI:10.13506/j.cnki.jpr.2013.05.011
图 1 槲皮苷对照品溶液液相色谱图
图 2 供试品溶液色谱图
2． 3 供试品溶液的制备 取本品粉末约 2 g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25 mL，
密塞，称定重量，水浴加热回流 60 min，放冷，再称定
重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤
液，即得。
2． 4 方法学考察
2． 4． 1 线性关系考察 分别精密吸取槲皮苷对照
品储备液 1、3、5、10 mL，置 20 mL量瓶中，加甲醇至
刻度;照上述色谱条件进样测定其峰面积值，以对照
品峰面积积分值为纵坐标，对照品进样量为横坐标
绘制标准曲线，得槲皮苷对照品的回归方程:Y = 2
× 106X + 9 728． 9，r = 0． 999 9。结果表明，槲皮苷
的进样量在 0． 084 2 ～ 0． 842 μg 范围内具有良好的
线性关系。
2． 4． 2 精密度试验 分别精密吸取上述对照品溶
液 10 μL，连续重复进样 6 次，结果 6 次测定值之间
的 RSD为0． 43%(n = 6) ，表明本法精密度较好。
2． 4． 3 重复性试验 取同一批号铁扫帚样品共 5
份，每份 2． 0 g，精密称定，按供试品溶液的制备方法
平行制备 5 份，计算 RSD为 0． 3%(n = 5)。
2． 4． 4 加样回收率试验 取已知含量(20120901)
为 0． 085%的铁扫帚药材混合粉末 1 g，精密称定，
精密加入一定量的槲皮苷对照品，依法制成供试品
溶液;分别精密吸取各供试品溶液 10 μL，注入液相
色谱仪，依法测定，结果见表 1。
表 1 槲皮苷加样回收试验结果(n = 6)
样品含量
(g)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1． 002 2 0． 40 1． 240 97． 0
1． 000 8 0． 40 1． 236 96． 3
1． 003 6 0． 85 1． 680 97． 2
1． 003 0 0． 85 1． 672 96． 4
1． 012 3 1． 70 2． 540 98． 7
1． 005 0 1． 70 2． 528 98． 4
97． 3 1． 0
2． 4． 5 稳定性试验 分别于 0、6、12、18、24 h 精密
吸取同一供试品溶液 10 μL 进样，测定其峰面积积
分值，计算峰面积的 RSD 为 1． 1%，结果表明，供试
品溶液在常温下保存，24 h内槲皮苷含量稳定。
2． 5 样品含量的测定
取铁扫帚药材样品粉末 2 g，分别精密称定重
量，按供试品溶液的制备方法制备，分别精密吸取对
照品溶液和样品溶液各 10 μL，照上述方法试验，测
量三批样品的峰面积，按外标法计算，结果见表 2。
表 2 铁扫帚样品中槲皮苷含量测定结果
样品批号 称样量(g) 测得槲皮苷的含量(%) 平均值(%)
20120901 2． 001 6 0． 085
20121001 2． 025 0 0． 086
20121101 2． 002 1 0． 088
0． 086
3 讨论
槲皮苷是一种重要的具有天然抗氧化活性的黄
酮苷类成分。试验中考察了铁扫帚药材叶和其中槲
皮苷的含量，结果叶中槲皮苷的含量(0． 096%)大
于茎中槲皮苷的含量(0． 080%)。供试品提取方法
考察表明，采用加热回流对槲皮苷的提取率优于超
声波处理。
对于槲皮苷的含量测定，有人曾采用聚酰胺薄
层扫描法，此法受薄膜表面光洁度、均匀度、厚薄等
因素影响而不太稳定。查阅文献，还未曾有人用过
HPLC法测定铁扫帚中槲皮苷的含量。本试验采用
HPLC法测定铁扫帚中槲皮苷的含量，结果表明，该
试验具有简便快速、结果准确可靠的特点，可作为铁
扫帚药材中槲皮苷含量的测定方法。
参考文献:
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部)［S］．北京:中国医药科技出版社，2010．
［2］ 江波，孙立立，杨书斌，等． HPLC测定侧柏炭中槲皮苷
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［3］ 龙飞，卫莹芳，文小伊，等． HPLC法测定厚朴叶中槲皮
苷的含量［J］．中药与临床，2010，1(2):23 － 25．
［4］ 宋志钊，刘元，李文琪． HPLC法测定亮叶杨桐叶中槲皮
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·072· 药学研究·Journal of Pharmaceutical Research 2013 Vol． 32，No． 5