全 文 ：莱菔子饮片中萝卜苷测定方法的研究
吕文海1， 任 涛2， 孟祥红1， 苏永汶1
(1．山东中医药大学，山东 济南 250355;2．寿光市中医院，山东 寿光 262700)
收稿日期:2010-12-14
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30672665)
作者简介:吕文海(1955—) ，男，教授，研究方向:饮片炮制理论与制备规范化。Tel:(0531)89628081，E-mail:luwenhaitcm@ 163． com
摘要:目的 建立莱菔子饮片的专属性质量控制方法。方法 以萝卜苷为指标，用 HPLC建立其定量测定方法。结果
莱菔子炮制适中，萝卜苷量是生品的 8． 55 倍，炒过后则检测不到萝卜苷。结论 莱菔子饮片中萝卜苷量，可以反映莱菔
子的炮制程度，控制饮片炮制质量。
关键词:莱菔子;炮制;质量控制;萝卜苷;HPLC
中图分类号:R284． 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2011)09-1563-03
莱菔子是具“生熟异治”、“生升熟降”药性特点
的常用中药，炒后长于消食除胀、降气化痰［1］。经
系统分析，发现莱菔子生、炒品中气味和挥发性部位
存有明显的质变与量变成分，但两者含量很微［2］。
在水溶性部位中发现并分离鉴定了两个含硫新化合
物 A209 与 B221，HPLC含测证明，二者主要存在于
生莱菔子中，炒制后 A209 量显著降低，B221 未检测
到。A209 系 S-6-甲亚砜基甲基-1，3-噻嗪烷-2-硫
酮，S-6-(methylsulfinyl)methyl-1，3-thiazinane-2-thio-
ne，CCDC号:742902;B221 为 N-(E)-(4-甲亚砜基-
3-丁烯基)胺基硫代甲酸乙酯，O-ethyl N-(E)-4
(methylsulfinyl)but-3-enylcarbamothioate，CCDC 号:
742907［3］。莱菔子生、炒品成分群 HPLC 图谱分析
表明 A209 与 B221 是化合物 C3 在不同条件下的转
化产物，进一步证明 C3 为莱菔子素，莱菔子素是硫
代葡萄糖苷类成分萝卜苷的酶解产物［4-5］。在尚未
分离到萝卜苷对照品的情况下，以烯丙基硫苷为内
标物，以 HPLC图谱中莱菔子硫苷与内标物峰面积
之比为指标，比较不同炮制品中的硫苷相对质量分
数并用均匀设计优选炮制工艺，证明炒莱菔子有利
于硫苷类成分的保存［6］。
基于上述工作，本实验建立了莱菔子水煎剂中
萝卜苷的 HPLC测定方法，并证明了该方法在反映
莱菔子生、制品特征方面的专属性。
1 实验材料
1． 1 供试饮片
莱菔子 购于鄄城良海中药饮片有限公司，经
山东中医药大学药学院生药系周凤琴教授鉴定为十
字花科植物萝卜 Raphanus sativus L． 的干燥成熟种
子，符合《中国药典》(2010 年版)药用规定。按确
定的净制工艺净选后作生莱菔子样品。
炒莱菔子 按参考文献［6］确定的工艺参数炒
至质地鼓起，易脱皮，富油性并有爆裂声和特有香气
溢出时，取出，晾凉。
莱菔子炒过品 在炒品的基础之上继续炒制，
炒至颜色加深、表面焦糊时，取出，晾凉备用。
上述供试饮片，粉碎成粗粉，置干燥器内平衡水
分后备用。
1． 2 仪器与试剂 Agilent 1100 高效液相色谱仪
(美国 安捷伦科技有限公司) ;SB2200 超声波清洗
机(上海必能信超声有限公司)。
乙腈为色谱纯(山东禹王实业有限公司) ，其他
试剂为分析纯。
1． 3 萝卜苷对照品 自制。为淡黄色半固体油状
物，易溶于水，微溶于甲醇等极性较大的有机试剂。
经 MS、1H-NMR、13 C-NMR 检测，相关数据与文献
［7］对照，确定为萝卜苷。HPLC 面积归一化法测定
其纯度大于 92%。
2 实验方法与结果
2． 1 色谱条件 色谱柱为 Phenomenex-C18(4． 6 mm
×250 mm，5 μm) ;以乙腈-0． 1%的磷酸水溶液(5 ∶
95)为流动相;设定体积流量 1． 0 mL /min，柱温 30
℃，进样量 20 μL;经萝卜苷全波长扫描(见图 1) ，
以 225 nm为检测波长，360 nm为参比波长。
2． 2 供试品溶液的制备 根据萝卜苷的溶解性，按
照中医主用汤剂入药的实际，采用水回流提取制备
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图 1 萝卜苷紫外吸收光谱图
Fig． 1 UV spectra of glucoraphenin
莱菔子供试样品:取供试品粉末 0． 1 g，精密称定。
置 50 mL烧瓶中，精密加水 25 mL，浸泡 30 min，称
定质量。回流提取 1． 0 h，补足损失质量，抽滤，滤液
经 0． 45 μm微孔滤膜过滤后备用。
2． 3 对照品溶液的制备 精密称取萝卜苷对照品
0． 007 55 g，纯净水溶解，定容至 10 mL。依次稀释
配制成质量浓度为 0． 755、0． 604、0． 453、0． 302、
0． 151、0． 075 5、0． 037 8 mg /mL的对照品溶液。
2． 4 萝卜苷 HPLC检测方法学考察
2． 4． 1 线性关系考察 用 2． 3 项中的对照品溶液，
按 2． 1 项下色谱条件测定，以峰面积(Y)对萝卜苷
质量浓度(X)进行线性回归，得回归方程为 Y = 12
428X + 38． 398(r = 0． 999 8)。实验表明萝卜苷质量
浓度在 0． 755 ～ 0． 037 8 mg /mL范围内，峰面积与质
量浓度呈良好的线性关系。
2． 4． 2 精密度实验 取 2． 3 项下质量浓度为0． 302
mg /mL的萝卜苷对照品溶液，按 2． 1 项下色谱条件
连续进样 5 次，测定萝卜苷的峰面积为:3 729． 8、
3 746． 8、3 760． 4、3 772． 3、3 789． 8，平均值为
3 758． 8，RSD为 0． 61%，表明仪器精密度良好。
2． 4． 3 稳定性实验 按 2． 2 项下方法制备炒莱菔
子供试品溶液，分别于 0、0． 5、1、2、4、6、8 h时按 2． 1
项下色谱条件进样，根据萝卜苷的峰面积计算其质
量分数(%) ，分别为:8． 13%、8． 08%、8． 11%、
8． 13%、8． 12%、8． 20%、8． 13%，平均值为 8． 13%，
RSD为 0． 44%，表明供试品溶液在制备后 8 h 内稳
定性良好。
2． 4． 4 重现性实验 按 2． 2 项下方法平行制备炒
莱菔子供试品溶液 5 份，按 2． 1 项下色谱条件进样，
根据萝卜苷的峰面积计算其质量分数，分别为:
8． 08%、7． 78%、8． 02%、8． 21%、8． 05%，平均质量
分数为 8． 03%，RSD =1． 96%，表明方法的重现性良
好。
2． 4． 5 加样回收率实验 精密称取 5 份已知量的
炒莱菔子样品各 0． 1 g，用减重法加入与待测样品萝
卜苷量近似的萝卜苷对照品，按样品测定方法处理，
测定，计算加样回收率。结果见表 1，实验表明本方
法回收率符合测定要求。
表 1 炒莱菔子供试品加样回收率实验结果
Tab． 1 Results of plus sample Recovery in Raphani Semen
编号
样品中的
含量 /mg
加入量
/mg
实测量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
1 8． 10 8． 39 16． 39 98． 7
2 8． 05 8． 54 16． 37 97． 4
3 8． 02 8． 30 16． 41 101． 1 99． 8 1． 65
4 7． 99 8． 28 16． 36 101． 1
5 8． 12 8． 21 16． 38 100． 5
2． 5 莱菔子不同炮制品中萝卜苷的测定 分别取
莱菔子生、炒、炒过品各 0． 1 g，精密称定。按 2． 2 项
下要求制备供试品溶液，并按 2． 1 项下色谱条件进
样，进行测定。结果见表 2，实验表明，莱菔子炒品
中萝卜苷是生品的 8． 55 倍，如炒过则萝卜苷损失殆
尽。实验证明萝卜苷量可以客观反映莱菔子的炮制
程度，具有质量控制上的专属性。HPLC图见图 2。
表 2 莱菔子不同炮制品中萝卜苷测定结果 (n =3)
Tab． 2 Determination of glucoraphenin in different
processed Raphani Semen (n =3)
样品 萝卜苷 /% RSD /%
生品 0． 95 1． 67
炒品 8． 12 0． 91
炒过品 未检出 未检出
图 2 莱菔子不同炒制品图谱
Fig． 2 Spectra of different roasted Raphani Semen
3 小结与讨论
建立能反映中药炮制过程中相关成分变化，控
制饮片炮制程度的专属性质控方法，是中药炮制机
理研究的重要内容，是使饮片炮制规范化的关键技
术。本实验首次从炒莱菔子中分离纯化了其所含硫
苷类化合物的主成分萝卜苷，并建立了莱菔子水提
液中萝卜苷的 HPLC测定方法。
实验结果表明，在莱菔子炒制达到优选工艺中
形、色、气、味、质要求的前提下，其水煎剂中萝卜苷
量是生莱菔子的 8． 55 倍，如炒过，萝卜苷则无法检
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出。结合炮制品性状要求，萝卜苷定量测定可作为
有效反映莱菔子炮制程度的专属性质量控制方法。
实验中发现，莱菔子如仅微炒，在达不到传统要
求的形体鼓起，种皮易捻脱，富含油性，具浓郁特殊
香气等性状要求时，萝卜苷的量要高于优选工艺炮
制品。但中药饮片是为中医临床服务的，炮制中特
有的“火候”要求，是在长期临床验证中形成的，在
饮片入药的形式下，饮片的特有性状要求必须得到
充分的继承。否则，仅以萝卜苷量为标准，获得的将
是临床不认可的炒莱菔子，性状与萝卜苷定量测定
相结合的方法，可以更客观有效地保证莱菔子的炮
制质量。这在中药炮制机理和质量控制方法研究中
必须引起足够的重视。
参考文献:
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HPLC法测定峨参中峨参内酯
王岳峰， 刘苡菡， 耿 耘， 马超英
(西南交通大学峨眉校区，四川 峨眉山 614202)
收稿日期:2011-01-17
基金项目:四川省应用基础项目“峨眉山道地中药材质量标准的研究”(07JY029-062)
作者简介:王岳峰(1957—) ，男，副教授，从事中药化学成分研究。
摘要:目的 建立测定峨眉山特色资源植物峨参中峨参内酯的反相高效液相色谱测定法，为峨参药材的质量控制提供方
法。方法 使用大连中汇达-C18色谱柱(4． 6 mm × 200 mm，5 μm) ，流动相为甲醇-水(52 ∶ 48) ，体积流量 1． 0 mL /min，柱
温 35 ℃，检测波长 293 nm。结果 测得峨参内酯在0． 187 5 ～ 1． 125 0 μg 的范围内，线性良好，r = 0． 999 8，峨参药材的
峨参内酯质量分数范围为0． 040 4% ～ 0． 053 1%。结论 根据对 10 批次峨参中峨参内酯测定的结果，建议峨参中峨参
内酯的量不应低于0． 040%。
关键词:峨参;峨参内酯;高效液相色谱法
中图分类号:R284． 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2011)09-1565-03
峨参为伞形科峨参属植物峨参 Anthriscus sylves-
tris (L．)Hoffm．的根，与峨蕊、雪磨芋，历来被人们
认为是峨眉山的三大特产而闻名远近。中医认为峨
参有补中益气，祛瘀生新之功效［1］。性甘、味辛、微
苦，入脾、胃、肺三经。分布于峨眉山地区的神殿附
近的峨山沟、九老洞、金顶，野生于灌木林缘、草坡。
峨参中主要含有峨参内酯，具有杀虫、抑制癌细胞增
殖，抗病毒、抗癌和抗有丝分裂的作用［2］。峨参属
植物生长迅速，资源丰富。峨参在我国用作滋补强
壮药，沿用历史悠久。国外学者对峨参、刺果峨参、
东北峨参等植物做了部分研究，研究部位主要包括
根，叶，花和种子等，从峨参中分离出杀虫、抗癌、抗
有丝分裂、抗病毒的有效物质。峨参的化学成分主
要有峨参内酯、异峨参内酯、水芹酮以及紫花前胡
苷、东莨宕苷等。文献《Volatile components from An-
thriscus sylvestris (L．)Hoffm．》是关于峨参化学成分
研究的最新(2002 年)的一篇报道，从峨参中用水蒸
气蒸馏法分离得到数十种挥发性成分。国内有关峨
参的研究，多是从生态学［3-4］、栽培学［5-6］等方面进
行的。关于峨参化学成分方面的研究，国内文献报
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