全 文 ：京大戟醋制前后总三萜类成分的含量比较
李兴华，陈侨，姜杉(中国药科大学中药学院，江苏 南京 211198)
摘要:目的 比较京大戟醋制前后总三萜类成分的含量变化，探讨炮制对于京大戟中药效成分的影响。方法 以大戟二烯醇
为对照品，采用香草醛-冰醋酸-浓硫酸显色，建立京大戟中总三萜类成分的含量测定方法，并分别测定京大戟和醋京大戟样品
中总三萜类成分的含量。结果 大戟二烯醇的线性范围为 21．6 ～ 108 μg( r = 0．999 3) ，平均加样回收率为 96．62% ( ＲSD =
1. 65%) 。京大戟生品和醋制品中总三萜类成分的平均含量分别为 1．72%和 1．35%。结论 本法准确可靠，可用于京大戟及
其炮制品的质量控制;京大戟醋制后，总三萜类成分含量下降 21．51%。
关键词:京大戟;炮制;总三萜
中图分类号: Ｒ283 文献标志码: A 文章编号: 1673-4610( 2015) 10-0691-03
基金项目:中央高校基本科研业务费专项资金青年项目( JKQZ2013014) ; 中国药科大学人才引进项目( 211153)
作者简介:李兴华，博士，讲师，Tel: 13915977295，E-mail: lixh@ cpu．edu．cn
Contents Comparison of Total Triterpenes in Euphorbiae Pekinensis Ｒadix before and after Processing with
Vinegar
LI Xinghua，CHEN Qiao，JIANG Shan(School of Chinese Pharmacy，China Pharmaceutical University，Nanjing，Jiangsu
211198，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To compare the contents of total triterpenes in Euphorbiae Pekinensis Ｒadix and its processed products．
METHODS Euphol was chosen as the reference substance，vanillin-glacial acetic acid solution and sulferic acid was chosen as color-
developing agent，a method was established for the quantitative determination of total triterpenes in Euphorbiae Pekinensis Ｒadix and its
processed products．ＲESULTS The linear response range for euphol was 21． 6-108 μg (r = 0． 999 3)． The average recovery was
96. 62% (ＲSD= 1．65%)． The content of total triterpenes in Euphorbiae pekinensis Ｒadix before and after processing with vinegar was
1．72% and 1． 35%，respectively． CONCLUSION The method was accurate and reproducible for quality control of Euphorbiae
Pekinensis Ｒadix and its processed products． After processing with vinegar，the contents of total triterpenes decreased 21．51%．
KEY WOＲDS:Euphorbiae pekinensis;processing;total triterpenes
京大戟为大戟科植物大戟 Euphorbia pekinensis
Ｒupr．的干燥根，是一味中医临床常用的峻下逐水
药。因其苦寒有毒，作用峻猛，历来强调醋制以确保
用药安全。历版《中国药典》都收载京大戟和醋京
大戟 2种饮片，并规定内服必须醋制，外用方可生
用［1］。现代研究表明，萜类化合物是京大戟的主要
活性成分，其中二萜类与其毒性和刺激性密切相关，
而三萜类化合物，如甘遂甾醇、大戟二烯醇和 24-亚
甲基-环阿尔廷醇等，具有利尿降压，镇痛抗炎等作
用，不仅是大戟属植物的特征性成分，也被认为是主
要的药效成分［2］。《中国药典》就是以大戟二烯醇
为指标成分，制定了京大戟药材的含量限度。目前
醋制对京大戟中单一三萜类成分含量的影响已有多
篇报道［3-5］，但对总三萜类成分含量的影响尚不明
确。本文以大戟二烯醇为对照品，采用香草醛-冰醋
酸-浓硫酸显色，建立了总三萜类成分的含量测定方
法，并分别测定京大戟和醋京大戟样品中总三萜类
成分的含量，以探讨炮制对于京大戟药效成分的影
响，为其炮制机理研究和饮片质量控制提供参考。
1 仪器和试药
1．1 仪器
TU-1901型双光束紫外可见分光光度计(北京
普析通用仪器有限责任公司)，BSA124S型电子天平
(赛多利斯科学仪器有限公司)，KQ-500型超声波清
洗器(昆山市超声仪器有限公司)，HH-4 数显恒温
水浴锅(国华电器有限公司)。
1．2 试药
京大戟药材购自安徽省亳州市药材总公司，经
中国药科大学张勉教授鉴定为大戟科植物大戟
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Euphorbia pekinensis Ｒupr．的干燥根。京大戟(取京
大戟药材，除去杂质，洗净，润透，切厚片，干燥);醋
京大戟(取净京大戟，照《中国药典》醋煮法煮至醋
吸尽。每 100 g京大戟用醋 30 g ［1］)。
大戟二烯醇对照品为实验室自制(经核磁和质
谱确定结构，经 HPLC 归一化法测定其纯度大于
98%)，乙醇、香草醛、冰醋酸和浓硫酸等试剂均为分
析纯。
2 方法和结果
2．1 对照品溶液的制备
精密称取大戟二烯醇对照品 5．4 mg，置 10 mL
量瓶中，加乙醇溶解并稀释到刻度，摇匀，即得每 1
mL含大戟二烯醇 0．54 mg的对照品溶液。
2．2 供试品溶液的制备
取京大戟粉末(过 3号筛)约 0．25 g，精密称定，
置 100 mL具塞锥形瓶中，加入乙醇 20 mL，超声(功
率 250 W，频率 50 kHz)提取 30 min，放冷，滤过，并
用少量乙醇洗涤滤渣，滤液收集于 25 mL量瓶中，加
乙醇定容即得。
2．3 测定波长的确定
精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 0．2 mL，
分别置于具塞试管中，加入新鲜配置的 5%香草醛-
冰醋酸溶液 0．6 mL和浓硫酸 1．2 mL，混匀，密塞，置
70 ℃恒温水浴锅中加热 30 min，取出，冷却至室温，
加入冰醋酸 5 mL，摇匀。以空白溶液为参照，在 450
～800 nm范围内进行扫描，结果二者均在 550 nm处
有最大吸收。
2．4 方法学考察
2．4．1 线性关系考察 精密吸取对照品溶液 0．2、
0. 4、0．6、0．8、1．0 mL，分别置于 1 mL量瓶中，加乙醇
稀释至刻度，摇匀，作为系列对照品溶液。精密吸取
系列对照品溶液各 0．2 mL，按“2．3”项下显色后，在
550 nm处测定吸光度。以大戟二烯醇质量(C)为横
坐标，以吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线。计算
回归方程为:A= 0．010 5C + 0．040 4(r = 0．999 3)，结
果表明大戟二烯醇在 21．6～108 μg 范围内与吸光度
呈良好线性关系。
2．4．2 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液 5
份，每份 0．2 mL，分别按“2．3”项下显色后，在 550
nm处测定吸光度。结果吸光度 ＲSD为 2．37%，表明
精密度良好。
2．4．3 稳定性试验 精密吸取供试品溶液 0．2 mL，
按“2．3”项下显色后，分别在 0、15、30、45、60 min 测
定 550nm处吸光度。结果各时间点吸光度 ＲSD 为
0．50%。
2．4．4 重复性试验 取同一京大戟样品 6 份，每份
0．25 g，精密称定，按“2．2”项下制备供试品溶液。分
别精密吸取各供试品溶液 0．2 mL，按“2．3”项下显色
后，在 550 nm处测定吸光度。结果测得样品中总三
萜类成分平均含量为 1．69%，ＲSD为 2．41%。
2．4．5 加样回收试验 取已知含量(1．69%)的京大
戟样品 6份，每份 0．125 g，精密称定，按“2．2”项下制
备供试品溶液。分别精密吸取各供试品溶液
0．2 mL，分别加入含大戟二烯醇 16．20 μg 的对照品
溶液，按“2．3”项下显色后，在 550 nm 处测定吸光
度，计算回收率。结果见表 1，平均加样回收率为
96．62%，ＲSD为 1．65%。
表 1 加样回收试验结果(n= 6)
称样量
(g)
样品含量
(μg)
加入量
(μg)
测得量
(μg)
回收率
(%)
0．125 3 16．940 6 16．200 0 32．422 5 95．57
0．125 4 16．954 1 16．200 0 32．383 8 95．25
0．125 0 16．900 0 16．200 0 32．792 2 98．10
0．125 3 16．940 6 16．200 0 32．581 6 96．55
0．125 1 16．913 5 16．200 0 32．951 0 99．00
0．125 2 16．927 0 16．200 0 32．360 7 95．27
平均回收率= 96．62%;ＲSD= 1．65%
2．5 样品测定
分别取 3批京大戟生品和醋制品样品，按“2．2”
项下制备供试品溶液。分别精密吸取各供试品溶液
0．2 mL，按“2．3”项下显色后，在 550 nm 处测定吸光
度，采用标准曲线法利用回归方程计算总三萜类成
分含量。测定结果见表 2。
表 2 京大戟醋制前后总三萜类成分含量比较(n= 3)
样品编号 总三萜类成分含量(%) 平均值(%)
生品 1 1．70 1．72
生品 2 1．68
生品 3 1．77
醋制品 1 1．35 1．35
醋制品 2 1．26
醋制品 3 1．45
3 讨论
京大戟首载于《神农本草经》，列为下品，“其根
·296· Pharmacy Today，2015 Oct，Vol．25 No．10 今日药学 2015年 10月第 25卷第 10期
辛苦，戟人咽喉”，其毒烈之性古人早已认识。从南
北朝时期《雷公炮炙论》开始，就记载采用炮制的方
法来降低毒性以防中毒。在长期用药实践中，醋制
一法逐渐成为主流，为现行《中国药典》和各省《炮
制规范》普遍采纳。然而京大戟和醋京大戟的质量
标准研究相对滞后，难以保证临床应用时的安全和
有效。本文建立了京大戟中总三萜类成分的含量测
定方法，可为这 2种法定饮片的质量控制提供参考。
京大戟中所含萜类成分复杂，已经分离鉴定的
化合物达十几种之多，例如二萜类的 pekinenin A ～
F、euphpekinensin、pekinenal 等，三萜类的甘遂甾醇、
大戟二烯醇、24-亚甲基-环阿尔廷醇和 neomotiol 等
等。随着现代化学分离分析技术的应用，新的化合
物还在不断被发现。据报道，京大戟醋制后多种单
一三萜类成分的含量下降幅度约 12． 92% ～
18．17%［3-5］。本文测定结果表明，醋制后总三萜类
成分含量减少 21．51%，与文献报道近似。这提示，
尽管临床经验和药学实验均证实京大戟醋制后确能
降低其毒性和刺激性，但是醋制对其药效的影响如
何，即减毒的同时能否增效或者存效，仍值得进一步
研究。
参考文献
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国医药科技出版社，2010:209-210．
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炮制品中 3种三萜类成分含量［J］． 中国实验方剂学杂志，
2013，19(22):141-144．
(收稿日期: 2015-07-30)
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( 上接第 690页)
6 结论
据相关文献报道鱼腥草有效成分主要为挥发油
和黄酮类、苯炳素类物质，鱼腥草水溶性浸出物约
10%，因此选择 90%甲醇作为提取溶剂，基本能将有
效成分充分提取。
参考鱼腥草药材、饮片、注射剂指纹图谱研究相
关文献［5-10］，分别考察了乙腈-水、乙腈-0．1%磷酸缓
冲液、甲醇-0．1%磷酸缓冲液作为洗脱系统的分析效
果，结果显示:乙腈－0．1%磷酸缓冲液作为洗脱系统
所得谱图基线平稳，峰分离度较高。
考察了流速(0．6、0．8、1．0、1．2 mL /min)的分析
效果，结果显示:流速为 1．2 mL /min 时，各峰的分离
度及峰形最佳。
分别用 Thermo Hipersil C18、agilent zorbax C18和
Waters Symmetry C18三支色谱柱考察本方法柱子适
用性，结果显示:三支柱子分析样品所得谱图的相似
度高，说明本研究建立的方法柱子的适用性广。
分别在戴安 U3000UHPLC和 Agilent 1200ＲＲLC
液相色谱仪上，按照本研究建立的方法进行样品分
析，结果显示:2个不同仪器测得的鱼腥草破壁饮片
指纹图谱基本一致，表明本方法仪器的适用性广。
参考文献
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医药科技出版社，2010．
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(收稿日期: 2015-08-03)
·396·今日药学 2015年 10月第 25卷第 10期 Pharmacy Today，2015 Oct，Vol．25 No．10