全 文 ：— 46 — 现代中药研究与实践2015年第29卷第5期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.5
基金项目：江西省卫生厅课题（2013A198），江西中医药大学校级课题（2013ZR0053）（2012ZR0033）
作者简介：曾 贤（1987-）, 女 , 硕士研究生 , 主要从事中药生化研究。E-mail: 584614937@qq.com
通讯作者：黄佩蓓（1964-）, 女 , 硕士 , 教授，主要从事中药生化研究。E-mail: 504853478@qq.com
山香圆总黄酮提取工艺的研究
曾 贤，陈世华，黄佩蓓 *，曹 岚
（江西中医药大学，江西 南昌 330004）
摘 要：目的 优化山香圆总黄酮提取工艺。方法 采用乙醇回流浸提法，在单因素分析的基础上，
通过 L16（45）正交试验，优选出山香圆总黄酮的提取工艺。结果 山香圆总黄酮的最佳提取工艺为：提取
温度 60℃、时间 1.5 h、乙醇体积分数 90%、料液比 1 : 50、提取次数 4次。结论 该法适用于山香圆总黄
酮的提取制备。
关键词：山香圆；总黄酮；提取工艺
中图分类号：R927.11 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2015)05-046-03
doi:10.13728/j.1673-6427.2015.05.015
Study on the Extaction of Total Flavones from Turpinia arguta Seem
ZENG Xian, CHEN Shi-hua, HUANG Pei-bei*, CAO Lan
(Jiangxi University of traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004,China)
Abstract: Objective To optimize the extraction process of total flavonids from Turpinia arguta Seem.
Methods The total flavones were extracted with alcohol as the solvent from Turpinia arguta Seem. On the
basis of single test the extraction process was optinizde through L16(4
5) orthogonal test. Results The optimum
extraction process was as follows: the extraction temperature was 60℃,the extraction time was 1.5 h, the
concentration of ethanol was 90%, the ratio of puerariae to solution of ethanol was 1 : 50, and the extraction times
was 4. Conclusion The extracting method is fi t for the total fl avonids from Turpinia arguta Seem.
Key words: Turpinia arguta Seem; total fl avones; extraction process
山香圆为我国传统中草药，具有较好的抗菌消炎
作用，临床上多用于扁桃体炎、咽喉炎和扁桃体脓肿
的治疗 [1]。近年的研究表明，黄酮类化合物是山香圆
的主要化学成分之一，也是其发挥抗炎、增强免疫功
能作用的有效成分 [2]。赖闻玲等 [3] 采用超声、微波、
热回流三种方法以不同溶剂提取山香圆片中的总黄
酮，结果表明以乙醇做溶剂加热回流的方法，提取效
率最高。本文采用乙醇为溶剂，进一步通过正交试
验，优选出山香圆总黄酮的最佳提取工艺，为山香圆
总黄酮的开发利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验原料 山香圆叶：采自江西泰和，由
江西中医药大学赖学文教授鉴定。
1.1.2 主要试剂 芦丁：江西本草天工科技有限
责任公司；乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠
等均为分析纯。
1.1.3 主要仪器 HH-S 数显恒温水浴锅（江苏
省金坛市医疗仪器厂），UV-1800 紫外分光光度计
（日本岛津公司），BSA223S 电子天平（赛多利斯
科学仪器北京有限公司）。
1.2 方法
1.2.1 标准曲线的制备 精密称取在 105℃干燥
至恒重的芦丁对照品，参照文献 [4] 方法，采用硝
酸铝比色法绘制标准曲线，通过线性回归，得吸
光度 A与黄酮的质量浓度 C的关系为：
A = 0.009 9 × C + 0.035 2，R2 = 0.996 5
1.2.2 山香圆总黄酮的提取及提取率的计算 将
山香圆干燥叶用粉碎机粉碎，过 80 目筛，制成
山香圆粉。称取一定量的山香圆粉，在相应条件
下回流提取，合并得一定体积的滤液，取滤液 2
ml，按绘制标准曲线的方法显色测定吸光度，再
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从工作曲线中查出总黄酮浓度 , 由此计算出总黄酮
得率。
2 结果与分析
2.1 单因素对提取率的影响研究
2.1.1 剂量对提取率的影响 称量 1 g 山香圆
粉，设置料液比（m / v）分别为 1 : 20、1 : 30、1 :
40、1 : 50、1 : 60、1 : 70 的比例加入 50%乙醇溶液，
60℃温度下提取 60 min，测定各料液比中山香圆
总黄酮的提取率。结果表明，山香圆总黄酮的提
取率随溶剂量的增加而增大，但当料液比达到 1 :
60 和 1 : 70 时，山香圆总黄酮的提取率均较高，
但变化不大（如图1）。可见当料液比达到1 : 60后，
山香圆总黄酮已基本溶出。
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
1:20 1:30 1:40 1:50 1：60 1：70
提
取
率
Yi
el
d
ra
te
(m
g/
g)
料液比Ratio of solid to liquid(g·ml-1)
图 1 料液比对山香圆总黄酮提取率的影响
Fig.1 Effect of solid-liquid ratio on the extraction rate of total flavones
from Turpinia arguta Seem
2.1.2 温度对提取率的影响　　称量 1 g 山香圆粉，
按料液比 1 : 60 的比例加入 50% 的乙醇溶液，设置
提取温度分别为 40℃、50℃、60℃、70℃、80℃，
提取 60 min，测定各提取温度下山香圆总黄酮的提取
率。结果表明，山香圆总黄酮的提取率随提取温度
的升高而升高，当提取温度达 60℃时，提取率最高，
之后随温度升高提取率则随之下降（如图 2）。
0
5
10
15
20
40℃ 50℃ 60℃ 70℃ 80℃
提取温度Extrating temprature
提
取
率
Yi
el
d
ra
te
(m
g/
g)
图 2 提取温度对山香圆总黄酮提取率的影响
Fig. 2 Effect of extraction temperature on the extraction rate of total
flavones from Turpinia arguta Seem
2.1.3 溶剂体积分数对提取率的影响 称量 1 g
山香圆粉，按料液比为 1 : 60 的比例，设置溶剂
体积分数分别为 0%、30%、50%、70%、90%、
100% 的乙醇溶液，60℃提取温度下提取 60 min，
测定各溶剂体积分数下山香圆总黄酮的提取率。
结果表明，当乙醇体积分数为 90%时，山香圆总
黄酮的提取率最高（如图 3），但当溶剂体积分数
达到 100%时，一些水溶性黄酮类化合物的溶出降
低，导致总黄酮提取率降低。
0
5
10
15
20
25
30
35
0 30 50 70 90 100
乙醇体积分数Ethanol volume fraction(%)
提
取
率
Y
i
e
l
d

r
a
t
e
(
m
g
/
g
)
图 3 溶剂体积分数对山香圆总黄酮提取率的影响
Fig.3 Effect of alcohol concentration on the extraction rate of total flavones
from Turpinia arguta Seem
2.1.4 时间对提取率的影响 称量 1 g 山香圆
粉，按料液比 1 : 60 的比列加入 90% 乙醇溶液，
60℃温度提取下，设置提取时间分别为 0.5、1.0、
1.5、2.0 、2.5、3.0 h，测定不同提取时间下山香
圆总黄酮的提取率。结果表明，在一定时间范围
内，随着时间的延长，黄酮类物质的溶出增加，
当提取时间为 2.0 h，山香圆总黄酮的提取率最高
（如图4）；时间超过2.0 h后，总黄酮提取率则下降。
26
27
28
29
30
31
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33
1 2 3 4 5 6
提取时间Extrating time(h)
提
取
率
Yi
el
d
ra
te
(m
g/
g)
图 4 提取时间对山香圆总黄酮提取率的影响
Fig. 4 Effect of extraction duration on the extraction rate of total flavones
from Turpinia arguta Seem
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2.1.5 提取次数对提取率的影响 称量 1 g 山香
圆粉，按料液比为 1 : 60 的比列加入 90% 乙醇溶
液，60℃温度提取下，提取 2.0 h，设置提取次数
分别为 1、2、3、4 次，测定不同提取次数下山香
圆总黄酮的提取率。结果表明，山香圆总黄酮的
提取率随着提取次数的增加而增加，当提取次数
为 3次时，山香圆总黄酮的提取率最大（如图 5），
但提取超过 3次后时，由于一些无效物质的溶出，
总黄酮的提取率则下降。
30
31
32
33
34
35
1 2 3 4
提取次数Extrating times
提
取
率
Y
i
e
l
d

r
a
t
e
(
m
g
/
g
)
图 5 提取次数对山香圆总黄酮提取率的影响
Fig5 Effect of extraction duration times on the extraction rate of total
flavones from Turpinia arguta Seem
2.2 山香圆总黄酮提取工艺的优化
根据单因素试验的结果，进一步进行 L16（45）
正交试验（见表 1）。结果表明，各因素对山香圆总
黄酮提取率的影响大小顺序为：提取次数 > 提取温
度 > 乙醇体积分数 > 料液比 > 提取时间；最佳提取
条件为：提取温度 60℃、提取时间 1.5 h、乙醇体
积分数 90%、料液比 1 : 50、提取 4次（见表 2）。
表 1 各因素水平 L16（45）表
Tab.1 L16（45）orthogonal test
水平
因 素
温度
(℃ )
时间
(h)
溶剂
(%)
料液比
(g ·ml-1)
提取数
(次 )
A B C D E
1 40 1 70 1 : 40 1
2 50 1.5 80 1 : 50 2
3 60 2 90 1 : 60 3
4 70 2.5 100 1 : 70 4
2.3 山香圆总黄酮最佳提取工艺的验证
按照上述最佳提取工艺 A3B2C3D2E4 平行进行 3
次提取验证，山香圆总黄酮提取率分别为 4.15%、
4.08%、3.96%，平均为4.06%，说明该方法稳定、可行。
表 2 正交实验结果
Tab. 2 Result of orthogonal test
实验号 因素 提取率（mg·g-1）A B C D E
1 40 1 70 1 : 40 1 12.50
2 40 1.5 80 1 : 50 2 26.13
3 40 2 90 1 : 60 3 29.32
4 40 2.5 100 1 : 70 4 28.76
5 50 1 80 1 : 60 4 31.52
6 50 1.5 70 1 : 70 3 25.16
7 50 2 100 1 : 40 2 29.08
8 50 2.5 90 1 : 50 1 23.22
9 60 1 90 1 : 70 2 33.27
10 60 1.5 100 1 : 60 1 28.18
11 60 2 70 1 : 50 4 33.11
12 60 2.5 80 1 : 40 3 27.92
13 70 1 100 1 : 50 3 32.88
14 70 1.5 90 1 : 40 4 36.12
15 70 2 80 1 : 70 1 23.49
16 70 2.5 70 1 : 60 2 26.23
k1 24.18 27.54 24.25 26.40 21.85
k2 27.245 28.90 27.27 28.83 28.68
k3 30.62 28.75 30.48 28.81 28.82
k4 29.68 26.53 29.72 27.67 32.38
极差 64.40 23.67 62.35 24.30 10.53
3 讨论
本实验结果表明，提取温度、提取时间、乙醇体
积分数、料液比、提取次数对山香圆总黄酮的提取
率均有不同程度的影响，其大小顺序为：提取次数 >
提取温度 > 乙醇体积分数 > 料液比 > 提取时间。山
香圆总黄酮的最佳提取条件为：提取温度为 60℃、
提取时间为 1.5 h、乙醇体积分数为 90%、料液比为
1 : 50、提取 4 次。验证实验表明，该优化工艺稳定
可行，平均山香圆总黄酮的提取率为 4.06%，与罗宪
堂等研究报道的山香圆总黄酮常规醇提法的提取率
0.5% 相比 [4]，本次通过正交试验优化醇提法各条件
后，其总黄酮的提取率明显提高。

参考文献
[1] 杨国泉 . 山香圆的生药学鉴定简报 [J]. 赣南医药 , 1981, (4): 39 - 41.
[2] 孙敬勇 . 山香圆化学成份及药理活性的研究进展 [J]. 食品与药品 , 2011,
13(11): 441 - 444.
[3] 赖闻玲 . 分光光度法测定山香圆片中黄酮的含量[J]. 赣南师范学院学报,
2003, (6): 37 - 38.
[4] 罗宪堂 , 余世平 , 熊友香 . UV 法测定山香圆叶中黄酮类成分含量 [J]. 中
医药研究 , 2002, 18(5): 48 - 50.
收稿日期：2015-04-28
声　明
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