全 文 ：　 　２０１２，Ｖｏｌ．２９Ｎｏ．１化学与生物工程
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
９２
基金项目：陕西国防工业职业技术学院研究与开发项目（Ｇｆｙ１１－０８）
收稿日期：２０１１－１０－１７
作者简介：汤春妮（１９８５－），女，陕西杨凌人，硕士，助教，主要从事天然产物活性成分分离纯化研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｔｃｎ２００７＠１２６．ｃｏｍ。
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－５４２５．２０１２．０１．０２６
分光光度法测定黄花草木樨中总黄酮含量
汤春妮，闫晓前，马喜锋，张军科
（陕西国防工业职业技术学院，陕西 西安７１０３０２）
摘　要：采用分光光度法测定了黄花草木樨中总黄酮的含量。以芦丁为对照品，ＮａＮＯ２－Ａｌ（ＮＯ３）３－ＮａＯＨ 体系显
色，在波长５１０ｎｍ处对样品中的总黄酮进行含量测定。结果表明，总黄酮在１０～５０μｇ·ｍＬ
－１（Ｒ＝０．９９９２）范围内线性
关系良好，平均回收率为９９．１９％（ＲＳＤ＝０．７９％，ｎ＝９），测得样品中总黄酮平均含量为１．４４％。该方法操作简便、准
确，具有很好的重现性和稳定性，适用于黄花草木樨中总黄酮含量的测定。
关键词：黄花草木樨；总黄酮；分光光度法；含量；测定
中图分类号：Ｏ　６５７．３２　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１６７２－５４２５（２０１２）０１－００９２－０３
　　黄花草木樨（Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ）为豆科（Ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｅ）草
木樨属（Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ　Ｍｉｌ．）一年生或两年生草本植物，
在我国分布广泛［１］，其全草具有抗炎抗菌、改变血管通
透性、促进血液循环、改善血管平滑肌、调节免疫、抗氧
化和清除自由基等药理作用［２，３］。黄花草木樨含有香
豆素类、黄酮类、酚酸类、甾体类、三萜类、糖类、蛋白质
类等化学成分，其中黄酮类化合物是主要功效成分之
一［４～８］。目前，国内对黄花草木樨中总黄酮含量测定
方法的研究报道甚少［９］。分光光度法常用来测定植物
中总黄酮含量。黄酮类化合物本身在紫外光谱区具有
吸收带，但存在较多干扰，故通过 ＮａＮＯ２－Ａｌ（ＮＯ３）３－
ＮａＯＨ 比色法［即黄酮类化合物在亚硝酸盐存在的碱
性条件下与 Ａｌ（ＮＯ３）３形成稳定的红色配合物］使其
吸收带位移至可见光区进行测定，以较少干扰测得以
芦丁为标样的总黄酮含量。作者采用分光光度法测定
黄花草木樨中总黄酮的含量，以期为黄花草木樨中总
黄酮的开发提供依据。
１　实验
１．１　试药、试剂与仪器
芸香叶苷（芦丁），生化级，中国医药上海化学试剂
公司；其余所用试剂均为分析纯；市购草木樨，经鉴定
为黄花草木樨Ｍ．ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ　Ｌ．Ｄｅｓｒ。
ＵＶ－９２００型紫外可见分光光度计，北京瑞利分析
仪器公司；ＢＰ２１１Ｄ型电子天平，ＳＡＲＴＯＲＬＵＳ；ＤＦ－
１０１Ｓ型集热式恒热加热磁力搅拌器，上海东尔制冷仪
器设备有限公司；ＫＱ３２００型超声波清洗器，昆山超声
仪器有限公司；ＬＤＡ－２型低速离心机，北京医用离心
机厂。
１．２　供试品溶液的制备
方法一（热回流提取法）：精密称取粉碎过筛的草
木樨药材１．００００ｇ，加入３０ｍＬ　８０％甲醇溶液，在
６０℃下回流提取２ｈ，离心分离，共提取３次，合并滤
液定容至１００ｍＬ作为供试品溶液备用。
方法二（超声波提取法）：精密称取粉碎过筛的草
木樨药材１．００００ｇ，加入３０ｍＬ　８０％甲醇溶液，常温
下超声提取４０ｍｉｎ，离心分离，共提取３次，合并滤液
定容至１００ｍＬ作为供试品溶液备用。
方法三（冷浸提取法）：精密称取粉碎过筛的草木
樨药材１．００００ｇ，加入３０ｍＬ　８０％甲醇溶液，常温下
提取２４ｈ（前６ｈ时时振摇，后１８ｈ静置），离心分离，
共提取３次，合并滤液定容至１００ｍＬ作为供试品溶
液备用。
１．３　标准曲线的绘制［１０，１１］
精确称取芦丁１０．０ｍｇ（１０５℃烘干至恒重），用
８０％的甲醇溶解并定容至１００ｍＬ，得０．１ｍｇ·ｍＬ－１
的芦丁标准储备液，备用。精密量取芦丁标准储备液
１ｍＬ、２ｍＬ、３ｍＬ、４ｍＬ、５ｍＬ置于１０ｍＬ容量瓶
中，分别加入５％ ＮａＮＯ２溶液０．３ｍＬ，静置６ｍｉｎ，再
分别加入１０％ Ａｌ（ＮＯ３）３溶液０．３ｍＬ，静置６ｍｉｎ，最
汤春妮等：分光光度法测定黄花草木樨中总黄酮含量／２０１２年第１期 　９３　
后加入４％ ＮａＯＨ溶液４ｍＬ，用甲醇定容至１０ｍＬ，
静置２０ｍｉｎ；以相应试剂为空白，用紫外可见分光光
度计在５１０ｎｍ处测定吸光度值。结果表明，芦丁在
１０～５０μｇ·ｍＬ
－１浓度范围内，吸光度值与浓度呈良
好的线性关系：Ａ＝０．０１２８ｃ－０．０１９４（Ｒ＝０．９９９２）。
１．４　样品含量的测定
分别精密吸取按１．２项方法制备的供试品溶液
２．０ｍＬ置于１０ｍＬ容量瓶中，按１．３项操作，测定吸
光度，计算总黄酮含量。
２　结果与讨论
２．１　精密度实验
精密量取６份芦丁标准储备液各３．０ｍＬ，分别置
于１０ｍＬ容量瓶中，按１．３项操作，测定吸光度分别
为０．３７２、０．３７３、０．３７１、０．３７５、０．３７２、０．３７１，平均值
为０．３７２，ＲＳＤ＝０．４１％。表明方法的精密度良好。
２．２　稳定性实验
精密吸取供试品溶液２．０ｍＬ，置于１０ｍＬ容量
瓶中，按１．３项操作，每隔１０ｍｉｎ测定１次吸光度，共
测６次，吸光度分别为０．３４８、０．３４７、０．３４６、０．３４４、
０．３４３、０．３４１，平均值为０．３４５，ＲＳＤ＝０．７７％。表明
供试品溶液在显色后６０ｍｉｎ内稳定性良好。
２．３　重现性实验
取同一批草木樨药材６份，按１．２项方法一制备
供试品溶液，精密吸取制备的供试品溶液２．０ｍＬ，置
于１０ｍＬ容量瓶中，按１．３项操作，测定吸光度分别
为０．３４６、０．３４９、０．３４５、０．３４４、０．３４０、０．３４３，平均值
为０．３４５，ＲＳＤ＝０．８８％。表明方法的重现性良好。
２．４　回收率实验
精密量取９份已知含量的供试品溶液（方法一）
１．０ｍＬ至１０ｍＬ容量瓶中，再分别准确加入芦丁标
准储备液１．１ｍＬ、１．４ｍＬ、１．８ｍＬ，进行３组平行实
验，每组３份，按１．３项操作，分别测定吸光度，计算回
收率，结果见表１。
由表１数据计算，平均回收率为９９．１９％、ＲＳＤ为
０．７９％，表明方法的回收率良好。
２．５　样品含量测定
按１．２项方法制备供试品溶液，精密吸取２．０ｍＬ
置于１０ｍＬ容量瓶中，按１．３项操作，分别测定吸光
度，结果见表２。
由表２可知，与超声波提取法、冷浸提取法相比，
热回流提取法提取黄花草木樨中总黄酮的效果最好，
其平均含量为１．４４％，这可能与黄花草木樨中含有的
黄酮类化合物的种类与结构有关。因此，确定热回流
表１ 回收率实验结果
Ｔａｂ．１ Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔ
编号
供试品溶液中
总黄酮质量／μｇ
芦丁加入量
μｇ
实际测得值
μｇ
回收率
％
１　 １４２．３４　 １１０．００　 ２４９．５３　 ９８．０３
２　 １４２．３４　 １１０．００　 ２５０．３１　 ９８．５８
３　 １４２．３４　 １１０．００　 ２５０．３１　 ９８．５８
４　 １４２．３４　 １４０．００　 ２８０．７８　 ９８．９０
５　 １４２．３４　 １４０．００　 ２８０．７８　 ９８．９０
６　 １４２．３４　 １４０．００　 ２８１．５６　 ９９．４５
７　 １４２．３４　 １８０．００　 ３２２．１９　 ９９．８９
８　 １４２．３４　 １８０．００　 ３２２．９７　 １００．４４
９　 １４２．３４　 １８０．００　 ３２２．１９　 ９９．８９
表２ 不同提取方法的总黄酮含量测定结果
Ｔａｂ．２　　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ
Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ　ｂｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄｓ
方法
总黄酮含量／％
１　 ２　 ３ 平均
ＲＳＤ／％
热回流提取法 １．４４　 １．４２　 １．４６　 １．４４　 １．０７
超声波提取法 １．２３　 １．２５　 １．２６　 １．２４　 １．６８
冷浸提取法 １．３２　 １．３４　 １．３１　 １．３２　 １．１６
提取法为测定黄花草木樨中总黄酮时的提取方法。
３　结论
采用分光光度法测定黄花草木樨中总黄酮含量，
操作简便、准确、可靠、稳定性和重现性好，可用于黄花
草木樨中总黄酮的含量测定。
参考文献：
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Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｏｔａｌ　Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ　ｂｙ　Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ
ＴＡＮＧ　Ｃｈｕｎ－ｎｉ，ＹＡＮ　Ｘｉａｏ－ｑｉａｎ，ＭＡ　Ｘｉ－ｆｅｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｊｕｎ－ｋｅ
（Ｓｈａｎｘｉ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉ′ａｎ　７１０３０２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ．Ｒｕｔｉｎ　ｗａｓ
ｕｓｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｓａｍｐｌｅ　ａｎｄ　ＮａＮＯ２－Ａｌ（ＮＯ３）３－ＮａＯＨ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｃｏｍｐｏｓｅ　ｔｈｅ　ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃ　ｓｙｓｔｅｍ．Ｔｈｅ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ａｔ　５１０ｎｍ．Ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　１０～５０μｇ·
ｍＬ－１（Ｒ＝０．９９９２）ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　９９．１９％ ｗｉｔｈ　ａ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｄｅｖｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　０．７９％（ｎ＝
９）．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓｗａｓ　１．４４％．Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｒｅｌｉａｂｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ
ｒａｐｉｄ　ｗｉｔｈ　ｇｏｏｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ．Ｉｔ　ｉｓ　ａ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｗａｙ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ；ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ；ｃｏｎｔｅｎｔ；

ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
（上接第８６页）
［７］　李建政，汪群慧．废物资源化与生物能源［Ｍ］．北京：化学工业出
版社，２００４．
［８］　刘国生．微生物学实验技术［Ｍ］．北京：科学出版社，２００７：１２５－
１２７．
Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｋｉｔｃｈｅｎ　Ｗａｓｔｅ　ｆｏｒ　Ｂｉｏ－Ｆｅｅｄ
ＺＨＵＡＮＧ　Ｘｉ－ｙｉ　１，ＣＨＵ　Ｗｅｉ－ｈｕａ１，ＭＡ　Ｘｉｎｇ－ｗａｎｇ２，ＺＨＵ　Ｗｅｉ　１
（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎａ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｎａｎｊｉｎｇ　Ｒｉｓｈｅｎｇｋａｎｇ　Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｃｏ．Ｌｔｄ．，Ｎａｎｊｉｎｇ２１１１０３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　ｗａｓ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏｂｅ（Ｃａｎｄｉｄａ　ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ，Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ
ｃｅｒｉｖｉｓｉａｅ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｋｉｔｃｈｅｎ　ｆｏｏｄ　ｗａｓｔｅ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　６０％ ｗａｔｅｒ　ｔｏ　ｐｒｏｄｕｃｅ　ｂｉｏ－ｆｅｅｄ．Ｔｈｅ
ｏｐｔｉｍａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ａｓ　ｆｏｌｏｗ：ａｄｄｉｎｇ　１．５％ｕｒｅａ，ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　２％ ｍｉｃｒｏｂｅ（ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ
ｓｔｒａｉｎｓ　ｗａｓ　１∶１∶１），ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ａｔ　３０℃ｆｏｒ　４８ｈａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｄｒｙｉｎｇ　ａｔ　５０℃．Ｔｈｅ　ｃｒｕｄｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ－
ｃｒｅａｓｅｄ　４．５％ａｎｄ　ｒｅａｃｈｅｄ　２８％．Ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ａｎｄ　ｔｏｔａｌ　ｙｅａｓｔ　ｗｅｒｅ　ｏｖｅｒ　５．２×１０９　ｃｆｕ·ｇ－１
ａｎｄ　８．４×１０８　ｃｆｕ·ｇ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ｔｈｅ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｂｏｔｈ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｆｅｅｄ　ａｎｄ　ｐｒｏｂｉｏｔ－
ｉｃｓ　ｗｉｔｈ　ａｒｏｍａｔｈｅｒａｐｙ　ｓｃｅｎｔ　ａｎｄ　ｇｏｏｄ　ｐａｌａｔａｂｉｌｉｔｙ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｋｉｔｃｈｅｎ　ｆｏｏｄ　ｗａｓｔｅ；ｍｉｃｒｏｂｅ；ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ；

ｂｉｏ－ｆｅｅｄ
（上接第９１页）
［５］　Ｒｕｂｉｎｓｔｅｉｎ　Ｉ，Ｂａｒｄ　Ａ　Ｊ．Ｐｏｌｙｍｅｒ－ｆｉｌｍｓ　ｏｎ　Ｅｌｅｃｔｒｏｄｅｓ．５．Ｅｌｅｃｔｒｏ－
ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｉ－ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ａｔ　ｎａｆｉｏｎ－ｃｏａｔｅｄ　ｅｌｅｃｔｒｏｄｅｓ［Ｊ］．
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ，１９８１，１０３（１７）：５００７－５０１３．
［６］　Ｚｈｕａｎｇ　Ｙ　Ｆ，Ｊｕ　Ｈ　Ｘ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ　ａｄｅｎ－
ｉｎｅ　ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒｉｓ（２，２′－ｂｉｐｙｒｉｄｙｌ）
ｒｕｔｈｅｎｉｕｍ（Ⅱ）ｉｎ　ｍｕｌｔｉｗａｌ　ｃａｒｂｏｎ　ｎａｎｏｔｕｂｅｓ／ｎａｆｉｏｎ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ
ｍｅｍｂｒａｎｅ［Ｊ］．Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００５，３８（１３）：２０７７－２０８８．
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｐｅｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ　ｂｙ　Ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　Ｍｅｔｈｏｄ
Ｕｓｉｎｇ　Ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ　Ｒｕ（ｂｐｙ）２＋３ －Ｎ－Ｃ
ＴＯＮＧ　Ｙｉｎｇ，ＺＨＥＮＧ　Ｊｉｅ，ＳＵＮ　Ｊｉｎｇ－ｙｉ，ＷＥＩ　Ｗｅｉ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｅａｓｔｅｒｎ－Ｓｏｕｔｈ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００１９，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｎａｆｉｏｎ－ｄｏｐｅｄ　ｍｕｌｔｉｗａｌ　ｃａｒｂｏｎ　ｎａｎｏｔｕｂｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ　ｆｉｌｍ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｆｉｘ　Ｒｕ（ｂｐｙ）２＋３ ｏｎ　ｇｌａｓｓｙ　ｃａｒ－
ｂｏｎ　ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ａｎｄ　ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ　Ｒｕ（ｂｐｙ）２＋３ －Ｎ－Ｃ　ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ．Ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｓｐｅｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｈｏｓ－
ｐｈａｔｅ　ｂｕｆｆｅｒ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｃｏｕｌｄ　ｅｎｈａｎｃｅ　ｔｈｅ　ｅｌｅｃｔｒｏｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ　ｓｉｇｎａｌｓ　ｓｔｒｏｎｇｌｙ．Ｔｈｕｓ，ｓｐｅｃｔｉｎｏｍｙ－
ｃｉｎ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　Ｒｕ（ｂｐｙ）２＋３ －Ｎ－Ｃ　ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ　ｕｎｄｅｒ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ　ｗａｓ　１．０×
１０－５～２．０×１０－４　ｍｏｌ·Ｌ－１　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｌｉｍｉｔ　ｏｆ　２．５×１０－６　ｍｏｌ·Ｌ－１．Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ
ｓｐｅｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ　ｉｎ　ｕｒｉｎｅ　ｓａｍｐｌｅ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　８７．１％～１２０．２％．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｎａｆｉｏｎ；ｍｕｌｔｉｗａｌ　ｃａｒｂｏｎ　ｎａｎｏｔｕｂｅ；Ｒｕ（ｂｐｙ）２＋３ ；ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ；ｓｐｅｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ