全 文 ：kg-1 ,用药 10d。在给药的第 8, 9天 ,除空白组外,各组以 10mg·kg-1
腹腔注射异丙肾上腺素复制心肌损伤模型 [ 2] , 末次给药后 2 h断颈
处死大鼠取心脏制成 10%的匀浆, 用相应的试剂盒分别检测
MDA、SOD。
2.2　统计方法 资料用( x±s)表示 ,采用单因素方差分析 SNK法,
应用 SPSS11.0统计软件包统计分析所有数据。
3　结果
模型组与空白组比较MDA显著升高(P<0.01), SOD降低(P<
0.05),说明模型复制成功。心安颗粒大中剂量组及黄芪精组均能降
低损伤心肌中的MDA,升高 SOD,与模型组比较差异有显著性(P<
0.05);心安颗粒小剂量组与模型组比较(P>0.05),心安颗粒大中剂
量组降低 MDA作用与黄芪精相当(P>0.05),小剂量组弱于黄芪精
(P<0.05),试药组与黄芪精组都不能使 MDA恢复到正常水平,与空
白组比较(P<0.05),心安颗粒大中剂量组升高 SOD的作用优于黄
芪精(P<0.05),明显高于正常水平,与空白组比较(P<0.05),心安
颗粒三剂量组比较 ,大与小剂量组差别有显著性(P<0.05),作用有
量-效关系。结果见表 1。
表 1　心安颗粒对心肌组织 MDA, SOD的影响( x±s)
组别 剂量 动物数
MDA
/nmol· mgprot-1
SOD
/NU· mgprot-1
心安颗粒(大) 5.00 g· kg-1 10 1.82±0.09＊#§ 82.45±25.58＊ △#§
心安颗粒(中) 2.50 g· kg-1 10 1.92±0.10＊§ 75.06±23.87＊ △#§
心安颗粒(小) 1.25 g· kg-1 10 2.28±0.17＊△ § 61.71±14.26
黄芪精　　　 5.00 ml· kg-1 10 1.77±0.06＊§ 62.99±28.01＊
模型　　　　 - 10 2.57±0.03§§ 49.67±21.04§
空白　　　　 - 10 1.60±0.06 59.89±24.62
　　与模型组比较＊P<0.05,与黄芪精比较 △P<0.05,与小剂量比较#P<0.05,
与空白组比较 §P<0.05, §§P<0.01
4　讨论
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基 ,攻击生物膜的多
不饱和脂肪酸产生过氧化 , 生成脂质过氧化物如 MDA、酮基 、羟
基等。这些产物中有些无害 , 有些则能引起细胞代谢及功能障
碍 , 甚至死亡。同时机体也存在自由基清除酶系统如 SOD、过氧
化物酶等 ,可清除体内有害的氧自由基 , 机体正常时此两者处于
平衡状态。 近来 , 有学者关于 VMC发病机制提出自由基学
说 [ 2] , 认为病毒攻击心肌后 , 使心肌细胞代谢紊乱 , 产生大量的
氧自由基 , 超过机体 SOD等酶的清除能力 , 使心肌细胞膜 、线粒
体膜脂质过氧化而受损 ,通透性增加 , Ca2+主要通过 Na+-Ca2+
交换内流增加 , 引起心肌电生理紊乱导致心律失常 , 若 Ca2+超负
荷会引起心肌进一步损伤 , 临床资料表明 VMC患儿心肌组织
SOD降低 , MDA升高 [ 3] , 也有动物实验证实柯萨奇 B3性 VMC小
鼠心肌组织 SOD降低 , MDA升高 [ 4] 。据此本实验用大剂量异丙
肾上腺素复制心肌非特异性损伤模型 , 结果模型组 MDA显著升
高 , SOD降低 ,与 VMC患者或柯萨奇 B3性 VMC小鼠心肌炎症时MDA和 SOD变化一致 , 心安颗粒降低大鼠损伤心肌 MDA, 升高
SOD,说明本品能增加氧自由基的清除 , 减少氧自由基及过氧化
脂质含量 ,从而减轻心肌受氧自由基的损伤程度 , 说明心安颗粒
防治 VMC的作用机制与抗氧自由基有关 ,下一步应在柯萨奇 B
3性 VMC小鼠心肌中观察本品有无抗氧自由基作用。
参考文献:
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改变及相关因素和治疗探讨 [ J] .医学影像学杂志 , 2000, 10
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收稿日期:2005-09-26;　修订日期:2006-03-10
基金项目:湖北省卫生厅科研基金资助项目(No.JX2C42)
作者简介:李玉山(1969-),男(土家族), 湖北巴东人, 现任湖北民族学院
医学院实验师 ,学士学位 ,主要从事基础医学研究工作.
长叶胡颓子对大鼠实验性结肠炎作用的研究
李玉山
(湖北民族学院医学院 ,湖北 恩施　445000)
摘要:目的 研究长叶胡颓子果实提取物对大鼠结肠炎损伤的保护作用。方法 建立大鼠结肠炎模型 ,灌肠用药 2周后 ,
评价大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI), 检测结肠髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶
(GSH-PX)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果 长叶胡颓子果实提取物(300, 500, 1 000 mg/kg)灌胃用药均能不同程度
降低模型大鼠结肠损伤指数和 MPO活性 、减少 MDA含量 , 提高 SOD, GSH-PX活性 , 且与用药剂量呈一定量效关系。结
论 长叶胡颓子通过抗脂质过氧化 , 对大鼠结肠炎结肠损伤进行修复 ,减轻结肠损伤 , 抑制结肠炎大鼠炎症反应。
关键词:长叶胡颓子;　抗氧作用;　结肠炎
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)08-1397-02
StudyontheEffectsofElaeagnusbockiiDielsontheExperimentalColonitisinRats
LIYu-shan
(MedicalSchoolofHubeiInstituteforNationalities, Enshi445000, China)
Abstract:ObjectiveTostudytheprotecteffectofElaeagnusbockiDielswaterextractoncolonitisinrats.MethodsRatcoloni-
tismodelwasestablished.ElaeagnusbockiDielswasusedbyclysteronceaday.Aftertwoweeks, thecolonmucossdamageindex
CMDIwasevaluated.TheactivityofMPO, GSH-PX, SODandthelevelsofMDAinthecolonweremeasured.ResultsElaeagnus
bockiiDielswaterextract(300, 500, 1 000mg/kg)decreasedtheactivityofCMDI, MPOandthelevelsofMDA, increasedtheac-
tivityofSOD, GSH-PXinmodelrats.ConclusionTreatmentwithElaeagnusbockiDielscanalleviatethecoloninjuryincolonitis
rats, byeliminatingoxygenfreeradicalandrepairingwound.
Keywords:ElaeagnusbockiDiels;　Anti-oxidation;　Colonitis
　　胡颓子属在全球约有 80余种 [ 1] , 长叶胡颓子 Elaeagnus
bockiiDiels是其中一种 , 属珍贵的药食两用植物 , 根 、叶 、果皆可
入药 [ 2] 。长叶胡颓子可健胃 , 治疗肠胃虚弱 , 消化不良等症状 ,
其果实味酸 、涩 ,含鞣质 [ 3] , 有涩肠止泻作用 [ 4] , 民间习用。为探
讨长叶胡颓子对炎症性肠炎是否有抗损伤保护作用 ,笔者通过建
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.8 时珍国医国药 2006年第 17卷第 8期
立大鼠肠炎模型 , 采用长叶胡颓子果实提取物灌胃给药 , 进行了
相关实验研究。现将研究结果报道如下。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　长叶胡颓子果实水提取物 野生长叶胡颓子果实于 2005
-04采自湖北恩施自治州巴东野三关。长叶胡颓子果实水提取
物:以下简称提取物(生药含量 1mg/ml),挑选上好果实水煎煮 3
次 , 过滤后浓缩成 1 g/ml的浓度即得。
1.1.2　试剂和仪器 2, 4, 6-三硝基苯磺酸(TNBS)为美国 Sigma
公司产品 , 柳氮磺吡啶(SASP)原药由上海三维制药有限公司提
供(国药准字 H31020450), MPO、SOD、MDA、GSH-PX试剂盒由南
京建成生物工程研究所提供。AEPROSET09D05-01全自动生化
分析仪(美国), TL-16G型高速冷冻离心机(上海实验仪器厂生
产)。
1.1.3　动物 健康 Wistar大鼠 , 雌雄兼用 ,体重 250 ～ 270g,由湖
北省动物实验中心提供。
1.2　方法
1.2.1　动物模型的建立及处理 参考文献 [ 5]:大鼠禁食 24 h后
(饮水照常), 将溶于体积分数为 50%乙醇的 TNBS按 100 mg/kg
的体重 、体积 0.25ml/只 , 用导管(直径 4mm)经肛门插入结肠内
约 8 cm灌肠 1次 , 建立大鼠结肠炎模型。 实验设正常组 、模型
组 、阳性药物对照组(灌服 SASP200 mg· kg-1)、胡颓子给药组
(灌服胡颓子提取液 300, 500, 1 000 mg· kg-1), 从制备模型 7 d
后开始灌胃给药 , 1次 /d, 共 14 d。正常组与模型组均给予等量
生理盐水灌胃。
1.2.2　指标检测及方法 实验完成后处死动物 , 参考文献 [ 6]方
法及标准评价 CMDI,评分标准为:0 =无损伤;1=轻度充血 、水
肿 , 表面光滑 , 无糜烂或溃疡;2 =充血水肿 , 黏膜粗糙呈颗粒状 ,
有糜烂或肠粘连;3=高度充血水肿 , 黏膜表面有坏死及溃疡形
成 , 溃疡最大纵径 <1 cm, 肠壁增厚或表面有坏死及炎症;4=在
3分基础上溃疡最大纵径 >1 cm, 或全肠壁坏死。结肠标本常规
石蜡包埋 、切片 , HE染色 ,光镜观察。另取新鲜结肠组织 , 用预
冷的生理盐水冲洗除去血液 , 滤纸吸干称重 , 加 9倍生理盐水 ,在
低温(冰水)中用玻璃研磨器研磨制成 10%的组织匀浆 , 高速离
心取上清液低温(3℃)保存待测。 MPO, SOD, GSH-PX检测操作
按试剂盒说明书进行 。
1.2.3　数据分析 实验数据采用 SPSS10.0软件进行 t检验统计
处理。
2　结果
2.1　结肠标本病理组织学观察 模型组大鼠结肠黏膜充血水肿 ,
大量炎性细胞浸润 , 肠壁增厚 ,黏膜表面有明显坏死及溃疡形成 ,
腺体中杯状细胞减少。而不同剂量的长叶胡颓子用药组以上病
理组织表现明显缓解 。
2.2　对结肠炎大鼠结肠损伤及炎症反应的影响 CMDI, MPO活
性分别是反映结肠损伤与炎症程度的主要指标 ,两者在模型组大
鼠升高 , 而长叶胡颓子(300, 500, 1 000 mg· kg-1)与 SASP(200
mg· kg-1)灌胃用药均不同程度降低了 CMDI及 MPO活性
(P<0.05, P<0.01), 且长叶胡颓子用药呈现一定量-效关系。
结果见表 1。
2.3　对结肠炎大鼠氧自由基的影响 与模型组比较 , 长叶胡颓子
提取物(300, 500, 1 000mg· kg-1)与 SASP(200 mg· kg-1)灌胃
用药均降低结肠组织中 MDA含量 , 升高 SOD, GSH-PX活性 , 且
长叶胡颓子中 、大剂量作用显著(P<0.01)。结果见表 2。
表 1　长叶胡颓子对结肠炎大鼠结肠损伤及炎症反应的影响( x±s)
组别　　　 剂量 C/mg· kg-1 CDMI MPO/U· g-1
正常　　　　 0.0±0.0 55.03±9.05
模型　　　　 3.17±0.40a 160.55±38.18a
SASP　　　　 200 1.69±0.26b 101.72±13.87b
长叶胡颓子(低) 300 2.61±0.48c 135.72±29.65c
长叶胡颓子(中) 500 2.11±0.61b 120.69±21.97b
长叶胡颓子(高) 1 000 1.79±0.44b 107.36±15.04b
　　与对照组比较 , a:P<0.01;与模型组比较 , b:P<0.01;c:P<0.05, n=10
表 2　长叶胡颓子对结肠炎大鼠氧自由基的影响( x±s)
组别　　 剂量C/mg· kg-1
MDA/nmol·
(mgprot)-1
SOD/Nu·
(mgprot)-1
GSH-PX/U·
(gprot)-1
正常　　　　 1.74±0.25 279.36±38.52 26.54±6.52
模型　　　　 2.78±0.68a 160.74±36.23a 11.13±1.09a
SASP　　　　 200 1.85±0.51b 245.32±45.63b 21.42±5.81b
长叶胡颓子(低) 300 2.31±0.44c 202.13±34.26c 14.42±3.89c
长叶胡颓子(中) 500 1.97±0.37b 225.37±34.67b 17.41±5.76b
长叶胡颓子(高) 1 000 1.91±0.31b 253.65±24.54b 19.78±7.56b
　　与对照组比较 , a:P<0.01;与模型组比较 , b:P<0.01;c:P<0.05, n=10
3　讨论
TNBS与乙醇诱发大鼠结肠炎的主要机理为乙醇破坏结肠
粘膜屏障 , TNBS渗入结肠与大分子物质结合 , 形成全抗原引起
肠壁一系列免疫应答与炎症反应 ,其发病机理及病理表现与人类
炎症肠炎非常相似。
免疫异常 、氧自由基作用在炎症性肠病的发病机理中占有重
要地位。 SOD能有效地清除氧自由基从而抑制结肠组织中的脂
质氧化反应 , 并能保护细胞。目前许多实验通过检测 SOD活性
及 MDA浓度的变化来反应其脂过氧化反应。本实验采用 TNBS
与乙醇诱发大鼠结肠炎模型后 , 发现大鼠结肠组织中 SOD活性
显著降低 , MDA浓度明显升高 , 证明了氧自由基在炎症状性肠病
的发病机理中起重要作用。
在本研究中通过病理组织学观察到 ,长叶胡颓子组病理组织
损伤程度明显缓解 ,且呈一定剂量效应 , 显示采用长叶胡颓子提
取物灌胃用药可明显减轻模型组大鼠结肠损伤 , 缓解炎症反应 ,
表现出抗炎 、抗损伤的保护作用;实验中 ,长叶胡颓子提取物灌胃
用药能降低结肠炎模型组大鼠代谢产生的脂质过氧化物 MDA
含量 , 升高重要抗氧化酶 SOD, GSH-PX活性 , 表现出抗氧化特
性 , 从而抑制结肠组织中的脂质过氧化反应 , 保护细胞膜 ,缓解氧
自由基的损伤致炎作用。以上结果表明 ,长叶胡颓子果实提取物
对大鼠结肠炎损伤具有保护作用。
参考文献:
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