全 文 ：年 1 月
华南师范大学学报 《自然科学版 )
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文章编号 : 1(XX) 一 5 4 63( 2以X) )以 一 01 0 一 03
洋紫荆幼苗凝集素含量分布的研究
彭建宗 陈兆平
华南师范大学生物学系 广州 51 06 31
关键词 : 凝集素 ;洋紫荆
中图分类号 : 5Q 13 . 2 文献标识码 : A
豆科植物 的种子富含蛋 白质 ,是动物和人类食物蛋白的重要来源 ,但是豆科植物种子中凝
集素的含量一般也较高 ,而凝集素被认为是植物防止动物食用的一种防御蛋白 [’ 〕 , 因此对豆科
植物凝集素的研究在生态学和营养学上都具有重要的意义 . 我们对洋紫荆 ( B a hu in 她 。 ir eg a 名a
L )的种子及幼苗各器官中凝集素的分布状况进行了初步的研究 .
1 材料和方法
采集成熟的洋紫荆种子 , 晒干 ,挑选大小一致 、 籽粒饱满者备用 .
1
.
1 洋紫荆种子凝集素的分离纯化
10 9 种子磨粉 ,用 10 0 mL 0
.
14 mo l/ L N ac l分两次抽提 ,离心 ( 5 00 r/ 而 n , 20 而n) ,上清
液加人固体 ( N4H ) : 5 04 至 90 % 饱和度 , 离心 ( 50 0 r/ 而 n , 20 而n) , 弃去上清液 ,沉淀透析除盐 ,
得凝集素粗品 . 粗品再上经酸化处理的 s eP ha or s e 6 B 亲和柱 , 先用 p H 7 . 2 , 。 . 05 mol / L BP s 洗
去杂蛋 白 ,再经 1 mo l/ L N ac l 一 o . Z m o l / L 肠 c ot s e 解吸附 , 收集活性峰透析冻干 , 获纯品凝集素
( BV L )
.
1
.
2 幼苗的培养和样品的抽提
10 9 种子经浸种露白后 ,采用完全培养液于玻璃房进行砂培 , 温度在 25 一 30 ℃之间 , 自然
光照 . 每隔 7 d 收获植株 30 株 ,洗净 ,分成子叶 、 根 、茎 、 叶 4 部分 . 称重 , 研磨 , 用生理盐水抽
提 ,离心 ( 6 0 0 r/ 而 n , 20 而n) , 收集上清液 . 总抽提液体积为 100 m口 10 9 种子 ,植株 的子
叶 、根 、 茎 、 叶各组份均 以鲜重为标准调整其抽提液的体积 .
1
.
3 蛋白含量的测定
按 oF h n 酚法川测定种子及 lZ d 龄幼苗各部分的可溶性蛋白含量 .
1
.
4 S sD
一 聚丙烯酞胺凝胶电泳
· 按张龙翔的方法 3[] 进行圆盘电泳 . 标准蛋白为上海丽珠东风产品 , 内含标准蛋白 : 兔磷酸
化酶 B ( 97 , 40 ) 、牛血清白蛋白 ( 6 , 20 ) 、 兔肌动蛋白 ( 43 , 0 0 ) 、 牛碳酸配酶 ( 3 1 , 0 0 ) 、胰蛋 白
酶抑制剂 ( 21 , 0 0 0 ) 、鸡蛋清溶菌酶 ( 14 , 4 0 ) . 样品有 : 纯品凝集素 ( l m岁mL ) 、种子 、 21 d 龄幼苗
的子叶 、 根 、茎和叶各部分的抽提液 ,上样量为每管 25 ” L .
1
.
5 幼苗中凝集素分布的测定
收稿 日期 : 2X( X) 一 02 一 28
第一作者 简介 : 彭建宗 ,男 ,硕士 , 讲师

的生长 [] v,或抵御动物的摄食 ,植物凝集素能与动物消化道壁粘膜上皮细胞表面的特异受体结
合 ,从而影响到动物消化道壁对营养素的吸收和运输 ,产生毒害作 用 8[] . 因而 , 植物种子及早
期幼苗中的凝集素对于植物本身的生存来说是具重要意义的 .
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表 2 洋紫荆幼苗各部分凝集素含且的变化
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苗龄
忿/ d
子叶 总量
鲜重
625
62 1
609
57 8
4 5 2
凝集素 鲜重 凝集素 鲜重 凝集素 鲜 重 凝集素 凝集素
9763271658
肠四120
6 7
.
2 1 5 6
67
.
7 9 9 3
65
.
53 124
16
.
45 1 8 7
0
.
8 4 227
9 5
16 8
27 5
3 7 2
8 6
2 1 3
礴4 4
7 8 9
鲜重
6 8 1
89 5
1 1 14
14 8 4
18 4 0
0813600
184062
407142835
关
N
o t et s t ed
注 : 鲜重单位 : m / mg · 株 :凝集素单位 : m / m g’ 株
参考文献 :
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atn sn WJ
,
v an Dam me E I M
. 玩 it sn as 目an t def sen orP iet sn 【J] . lP ant hP isr ol , 19 5 , 10 : 347 一 35 2 .南京大学生物系 . 生物化学实验【M〕 . 北京 : 人 民教育出版社 , 197 9 . 1 6 一 n s .
张龙翔 , 张庭芳 ,李令缓 . 生化实验方法和技术【M〕 . 北京 :人民教育出版杜 , 19 82 . 112 .
uP eP keP sG
. 压 istr b u t ion of cle it ns in het Ju m肠 v i rg iin a adn S aP ins h v “ e iet , of het ep ~ t[ J]
. 击配 九` 勺脚邵 e“
L
.
lP an t 户 y s iol , 1979 , 64 : 57 5 一 5 80 .
iSP l
a如 SR , C co h ar n G R , W al k e r RE , Cabl ihs KL , B i t ne r C C . C har e et ir az it o n of a n e w le e it n Of s叮be a n v e罗 t a -
ivt
e it s ue
s
[ J ]
.
lP an t hP y
s io l
,
19 6
,
1 1 0 : 52 5 一 5 3 5 .
儿如ne v众 y B n , 助w U , s itrj do m Bw . oe .ec t io n of le e t ins in n o d u laet d pe an u t a n d so y比an p la n st [ J〕 . H朋 t a ,
1 9 8 8
,
17 6 : 10 ~ 18
.
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.
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.
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