全 文 ：北方园艺２０１５（１１）：１２９～１３２ ·贮藏保鲜加工·
第一作者简介：杜娟（１９７４－），女，硕士，副教授，现主要从事中药质
量标准等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｍｓｄｕｊｕａｎ＠１２６．ｃｏｍ．
基金项目：黑龙江省自然科学基金资助项目（Ｄ２０１２０９）；黑龙江省
教育厅科研资助项目（１２５３１７１４）。
收稿日期：２０１５－０１－１９
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１５１１０３２
响应面法优化野火球总黄酮微波提取工艺
杜 娟，吴 岚，闫 红，李 来 军，陈 宁，张 楠 楠
（佳木斯大学 药学院，黑龙江 佳木斯１５４００７）
摘 要：以野火球为试材，选择乙醇体积分数、微波时间、微波功率、液料比４个因素，利用微
波提取技术对野火球全草总黄酮成分提取工艺进行研究。通过Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ中心组合设计试验
和响应面分析法，模拟得到二次多项式回归方程的预测模型。结果表明：最佳提取工艺条件为乙
醇浓度２０％，微波时间４５ｓ，微波功率３５０Ｗ，液料比１∶２０ｍＬ／ｇ。为野火球的开发利用提供参
考依据和科学数据。
关键词：野火球；总黄酮成分；微波提取法；响应面分析
中图分类号：Ｓ ５６７．２３＋９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１５）１１－０１２９－０４
野火球（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｌｕｐｉｎａｓｔｅｒ Ｌ．）属豆科（Ｌｅｇｕ－
ｍｉｎｏｓａｅ）车轴草属（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ）多年生草本植物，别名车
轴草，始载于《中国主要植物图说》，具有镇静安神、止咳、
止血等功效［１］，目前有关野火球牧草开发［２］和组织培
养［３］方面研究较多，由于野火球中含较丰富的黄酮类成
分［４］，试验通过对其总黄酮成分提取工艺优化［５］，以期为
其药理活性研究奠定基础，为野火球的进一步开发利用
提供理论参考和科学数据。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
供试野火球采摘于黑龙江省伊春市绿潭仙翁山，经
佳木斯大学药学院刘娟教授鉴别为豆科植物野火球
（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｌｕｐｉｎａｓｔｅｒ Ｌ．）。
仪器：Ｓ５４型紫外可见分光光度计（上海棱光技术
有限公司）；ＢＰ２１１Ｄ电子分析天平（德国戴多利斯公
司）；格兰仕微波炉（佛山市格兰仕微波炉电器有限公
司）；架盘药物天平 （北京医用天平厂）；玻璃仪器气流
烘干器 （英峪仪器厂）；乙醇 （天津市凯通化学试剂
有限公司）；芦丁（西安瑞盈生物科技有限公司）；亚硝
酸钠 （哈尔滨新达化工厂）；氢氧化钠 （天津市博迪
化工有限公司）；硝酸铝 （北京化工厂）；试剂均为分
析纯
。
ｃｏａｔｉｎｇ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｃｏａｔｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｔ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ．Ｉｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ，ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ
ｉｎｔｏ ｓｏｄｉｕｍ ａｌｇｉｎａｔｅ－ｂａｓｅｄ ｅｄｉｂｌｅ ｃｏａｔｉｎｇ ｈａｄ ｇｏｏｄ ｅｆｅｃｔ ｏｎ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｅｓｈ－ｃｕｔ Ｂｅｌｉｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ，ｅｓｐｅｃｉａｌｙ
０．０５ｇ／ｍＬ ｓｏｄｉｕｍ ａｌｇｉｎａｔｅ ｃｏａｔｉｎｇ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ２．０％ （ｗ／ｖ）ｏｆ ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ．Ｄｕｅ ｔｏ ｔｈｅ ０．０５ｇ／ｍＬ ｓｏｄｉｕｍ ａｌｇｉｎａｔｅ
ｃｏａｔｉｎｇ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ２．０％ （ｗ／ｖ）ｏｆ ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ，ｔｈｅ ｆｒｅｓｈ ｗｅｉｇｈｔ ｃｈａｎｇｅｓ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ｗｅｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｆｒｅｓｈ ｗｅｉｇｈｔ
ｃｈａｎｇｅｓ ｏｎｌｙ ｒｅａｃｈｅｄ－０．３３％ａｆｔｅｒ ２４ｄａｙｓ；ｗｉｔｈｅｒｉｎｇ ｒａｔｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｐｅｒｆｅｃｔｌｙ，ＣＫ ｇｒｏｕｐ ｏｆ ｆｒｅｓｈ－ｃｕｔ Ｂｅｌｉｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ
ｆａｄｅｄ ｎｅａｒｌｙ ａｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ ｏｆ ０．０５ｇ／ｍＬ ｓｏｄｉｕｍ ａｌｇｉｎａｔｅ ａｎｄ ０．０５ｇ／ｍＬ ｓｏｄｉｕｍ ａｌｇｉｎａｔｅ ｃｏａｔｉｎｇ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ １．０％
（ｗ／ｖ）ｏｆ ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ ｆａｄｅｄ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ｈａｌｆ，ｂｕｔ ｏｎｌｙ １６．５６％ｆｒｅｓｈ－ｃｕｔ Ｂｅｌｉｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ ｂｅｃｏｍｅ ｆａｄｅｄ；ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ
ｓｏｌｕｂｌｅ ｓｕｇａｒ ａｎｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｌｏｗｌｙ；ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｖａｌｕｅ ｏｆ ＰＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ＰＰＯ ａｃｔｉｖｉｔｙ
ａｐｐｅａｒｅｄ ｓｌｏｗｅｒ，ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ａ ｄｅｌａｙ ｆｏｒ ８ｄａｙｓ，４ｄａｙｓ，４ｄａｙｓ ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＣＫ ｇｒｏｕｐ，０．０５ｇ／ｍＬ ｓｏｄｉｕｍ
ａｌｇｉｎａｔｅ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ０．０５ｇ／ｍＬ ｓｏｄｉｕｍ ａｌｇｉｎａｔｅ ｃｏａｔｉｎｇ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ １．０％ （ｗ／ｖ）ｏｆ ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ ｇｒｏｕｐ；ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ
ｆｒｅｓｈ－ｃｕｔ Ｂｅｌｉｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｌｏｗｌｙ ｗｉｔｈｉｎ ２４ｄａｙｓ，ａｎｄ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｓｍａｌｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ＣＫ ｇｒｏｕｐ
ｉｎ ｔｈｅ ｌａｔｅ；ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ ｓｔａｙ ａｔ ａ ｌｏｗｅｒ ｌｅｖｅｒ，ｂｕｔ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｏｔｈｅｒ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ｆｒｅｓｈ－ｃｕｔ
Ｂｅｌｉｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ ｈａｄ ｇｒｅａｔｌｙ ｉｍｐｒｏｖｅｄ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｂｅｌｉｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ；ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ；ｓｏｄｉｕｍ ａｌｇｉｎａｔｅ；ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ
９２１
·贮藏保鲜加工· 北方园艺２０１５（１１）：１２９～１３２
１．２ 试验方法
１．２．１ 野火球药材的处理 将野火球药材洗净后干燥，
粉碎，过筛以待备用。
１．２．２ 标准溶液和储备液的配制 精密移取０．０、０．２、
０．４、０．６、０．８ｍＬ芦丁标准溶液，分别置于２５ｍＬ容量瓶
中，加水至２．４ｍＬ，加５％亚硝酸钠溶液０．４ｍＬ摇匀放
置６ｍｉｎ，精确加入１０％硝酸铝溶液０．４ｍＬ摇匀放置
６ｍｉｎ，精确加入４．３％氢氧化钠溶液４ｍＬ，加水至２５ｍＬ，
摇匀后静置１５ｍｉｎ。以试剂空白为参比，通过紫外分光
光度计测定，对芦丁溶液浓度（ｘ）和吸光度（ｙ）进行回归
处理得到回归方程为ｙ＝８．９０５６ｘ＋０．０００２，Ｒ２＝０．９９８８，
表明芦丁的含量和吸光度呈良好的线性关系。
１．２．３ 微波法提取总黄酮成分单因素考察 称取野
火球粉末０．１ｇ，采用微波提取法，分别考察乙醇浓度
２０％～８０％，微微波时间１５～６０ｓ，微波功率２００～
４００Ｗ，液料比（１∶１０）～（１∶３０）ｍＬ／ｇ［６］对黄酮成分的
影响。
１．２．４ 响应面试验设计 在以上微波单因素试验考
查的基础上，应用响应面法中心组合设计（Ｂｏｘ－
Ｂｅｈｎｋｅｎ ８．０．５ｂ），以黄酮提取率（Ｒ）为响应值，提取液料
比、微波的提取功率、乙醇溶液浓度和提取时间４个因
素为自变量［７］，进行总黄酮成分提取工艺条件试验优化
设计，见表１。
表１ 试验因素水平及编码
Ｔａｂｌｅ １ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｆａｃｔｏｒｓ ｌｅｖｅｌ ａｎｄ ｃｏｄｉｎｇ
水平
Ｌｅｖｅｌ
Ａ浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／％
Ｂ时间
Ｔｉｍｅ／ｓ
Ｃ功率
Ｐｏｗｅｒ／Ｗ
Ｄ液料比
Ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ／（ｍＬ·ｇ－１）
－１ ２０ １５ ２５０ １∶２０
０ ４０ ３０ ３００ １∶２５
＋１ ６０ ４５ ３５０ １∶３０
２ 结果与分析
２．１ 单因素试验结果
２．１．１ 乙醇浓度的选择 按液料比１∶２０ｍＬ／ｇ分别
加入０％、２０％、４０％、６０％、８０％不同浓度的乙醇，在微波
功率３００Ｗ加热３０ｓ，过滤，精密移取滤液０．２ｍＬ。由
图１可知，随着乙醇体积分数增加总黄酮得率逐渐提
高，当乙醇体积分数约为４０％时提取率达到最大，之后
随着乙醇体积分数的增大提取率下降，因此在其它条件
确定时乙醇最佳体积分数约为４０％。
２．１．２ 微波时间的选择 按液料比１∶２０ｍＬ／ｇ加入
４０％的乙醇，在微波功率３００Ｗ分别加热０、１５、３０、４５、
６０ｓ，过滤，精密移取滤液０．２ｍＬ。由图２可知，随着反
应时间的增加，总黄酮得率逐渐提高，当提取时间为４５ｓ
时达到最大，之后开始减少，因此，在其它条件确定的情
况下，４５ｓ约为黄酮微波提取的最佳时间。
２．１．３ 液料比选择 按液料比分别为１∶１０、１∶１５、
图１ 乙醇浓度对提取率的影响
Ｆｉｇ．１ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ
ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
图２ 不同提取时间对提取率的影响
Ｆｉｇ．２ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｎ
ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
１∶２０、１∶２５、１∶３０ｍＬ／ｇ加入４０％的乙醇，在微波功
率为３００Ｗ下加热４５ｓ，过滤，精密移取滤液０．２ｍＬ。
由图３可知，在料液比约为１∶１０ｍＬ／ｇ时黄酮得率达
到最大值，之后随液料比增大得率下降，因此在其它条件
一定时，１∶１０ｍＬ／ｇ为最佳料液比。
２．１．４ 微波功率的选择 按液料比１∶２０ｍＬ／ｇ加入
４０％的乙醇，在微波功率分别为２００、２５０、３００、３５０、４００Ｗ
下加热４５ｓ，过滤，精密移取滤液０．２ｍＬ。由图４可知，
随着微波功率增加总黄酮得率逐渐提高，当微波功率达
４００Ｗ时提取率达到最大，因此在其它条件确定的情况
下，４００Ｗ为最优微波功率。
图３ 不同液料比对提取率的影响
Ｆｉｇ．３ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ ｏｎ
ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
０３１
北方园艺２０１５（１１）：１２９～１３２ ·贮藏保鲜加工·
图４ 不同功率对提取率的影响
Ｆｉｇ．４ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｐｏｗｅｒ ｏｎ
ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
２．２ 提取工艺条件的优化
由表２、３可知，对试验数据进行多项式拟合回归，以
总黄酮提取率（Ｙ）为因变量，乙醇浓度（Ａ），微波时间（Ｂ），
微波功率（Ｃ）和液料比（Ｄ）为自变量，建立回归方程如下：
Ｙ＝０．４８９６０＋０．０３３５１９Ａ＋０．０３１３６５Ｂ＋０．０１７１８１Ｃ－
０．２５００３Ｄ－４．９９９５８Ｅ－００４ＡＢ－３．２８１２５Ｅ－００５ＡＣ＋
９．５００００Ｅ－００６ＡＤ－５．５００００Ｅ－００５ＢＣ＋５．８９０００Ｅ－
００４ＢＤ－３．０００００Ｅ－００５ＣＤ－１．１９６３１Ｅ－００４Ａ２ －
３．５８７２２Ｅ－００５Ｂ２ －１．８９５８５Ｅ－００５Ｃ２ ＋４．００９４０Ｅ－
００３Ｄ２。由表３可知，上述回归方程描述与响应面值之
间的关系时因其模型的Ｐ＜０．０００１（显著），差拟项检
验的Ｐ＝０．２１７１（不显著），Ｒ２＝０．９９８８，表明模型充分
表２ 响应面分析方案及试验结果
Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ
ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
试验号
Ｎｏ．
Ａ乙醇浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
％
Ｂ微波时间
Ｔｉｍｅ
／ｓ
Ｃ微波功率
Ｐｏｗｅｒ
／Ｗ
Ｄ液料比
Ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ
／（ｍＬ·ｇ－１）
Ｙ提取率
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
％
１ １ ０ ０ －１ １．２０００
２ －１ －１ ０ ０ ０．７５００
３ ０ －１ ０ －１ １．２２６３
４ ０ ０ ０ ０ １．０５７５
５ ０ ０ ０ ０ ０．９７８８
６ －１ ０ ０ －１ １．２３３８
７ －１ ０ －１ ０ ０．８０６３
８ ０ １ １ ０ １．１０２５
９ －１ ０ １ ０ １．０８３７５
１０ １ １ ０ ０ ０．８２１３
１１ ０ ０ １ －１ １．３３８８
１２ ０ １ ０ －１ １．４２５０
１３ ０ １ ０ １ １．０９８８
１４ ０ －１ －１ ０ ０．６０００
１５ －１ １ ０ ０ １．１４００
１６ ０ ０ ０ ０ ０．９２２８
１７ ０ ０ ０ ０ ０．９８６３
１８ ０ １ －１ ０ ０．９７５０
１９ －１ ０ ０ １ ０．７９８８
２０ ０ －１ ０ １ ０．７２３４
２１ １ ０ －１ ０ ０．８４３８
２２ １ ０ １ ０ ０．９９００
２３ ０ ０ －１ １ ０．７６５０
２４ ０ －１ １ ０ ０．８９２５
２５ １ －１ ０ ０ １．０３１２５
２６ ０ ０ ０ ０ ０．９９７５
２７ ０ ０ －１ －１ １．１１７５
２８ １ ０ ０ １ ０．７６８８
２９ ０ ０ １ １ ０．９５６３
表３ 回归模型方差分析
Ｔａｂｌｅ ３ Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ
方差来源
Ｓｏｕｒｃｅ
平方和
Ｓｕｍ ｏｆ Ｓｑｕａｒｅ
自由度
ＤＦ
均方
Ｍｅａｎ ｓｑｕａｒｅ
Ｆ
Ｆｖａｌｕｅ
Ｐｒ＞Ｆ
模型 １．００ １４ ０．０７２ １５．９３ ＜０．０００１
Ａ－乙醇浓度 ２．０６７Ｅ－００３ １ ２．０６７Ｅ－００３ ０．４６ ０．５０８５
Ｂ－微波时间 ０．１５ １ ０．１５ ３３．２８ ＜０．０００１
Ｃ－微波功率 ０．１３ １ ０．１３ ２９．２９ ＜０．０００１
Ｄ－料液比 ０．４９ １ ０．４９ １０９．６２ ＜０．０００１
ＡＢ ０．０９０ １ ０．０９０ ２０．０４ ０．０００５
ＡＣ ４．３０７Ｅ－００３ １ ４．３０７Ｅ－００３ ０．９６ ０．３４４０
ＡＤ ３．６１０Ｅ－００６ １ ３．６１０Ｅ－００６ ８．０４０Ｅ－００４ ０．９７７８
ＢＣ ６．８０６Ｅ－００３ １ ６．８０６Ｅ－００３ １．５２ ０．２３８５
ＢＤ ７．８０６Ｅ－００３ １ ７．８０６Ｅ－００３ １．７４ ０．２０８５
ＣＤ ２．２５０Ｅ－００４ １ ２．２５０Ｅ－００４ ０．０５０ ０．８２６１
Ａ２ ０．０１５ １ ０．０１５ ３．３１ ０．０９０４
Ｂ２ ４．２２６Ｅ－００４ １ ４．２２６Ｅ－００４ ０．０９４ ０．７６３５
Ｃ２ ０．０１５ １ ０．０１５ ３．２５ ０．０９３２
Ｄ２ ０．０６５ １ ０．０６５ １４．５１ ０．００１９
残差 ０．０６３ １４ ４．４９０Ｅ－００３
失拟性 ０．０５４ １０ ５．３６０Ｅ－００３ ２．３２ ０．２１７１
纯误差 ９．２５７Ｅ ４ ２．３１４Ｅ－００３
总差 １．０６ ２８
拟合试验数据，该方程是野火球中总黄酮提取率与提
取工艺各参数的合适数学模型［８］。由图５、６可知，利
用此回归方程确定野火球总黄酮的最佳提取工艺为乙
醇浓度２０％，微波时间４５ｓ，微波功率３５０Ｗ，料液比
１∶２０ｍＬ／ｇ。
图５ 微波时间和功率对提取率的影响
Ｆｉｇ．５ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｐｏｗｅｒ ｏｎ
ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
１３１
·贮藏保鲜加工· 北方园艺２０１５（１１）：１２９～１３２
图６ 微波时间和液料比对提取率影响
Ｆｉｇ．６ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ ｏｎ
ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
３ 结论
该研究在单因素试验的基础上，应用微波提取法，
对野火球全草总黄酮成分提取工艺进行了优化，在响应
面分析基础上建立了提取量与４种因素的回归方程，确
立了最佳提取工艺根据拟合模型绘制响应面的三维图
与等高线图１、２中试验确定最佳提取工艺条件，结果显
示，最佳提取条件为乙醇浓度２０％，微波时间４５ｓ，微波
功率３５０Ｗ，液料比１∶２０ｍＬ／ｇ，为野火球开发利用提
供了科学依据。
参考文献
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Ｔｈｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｆｒｏｍＴｒｉｆｏｌｉｕｍ ｌｕｐｉｎａｓｔｅｒ Ｌ．
ＤＵ Ｊｕａｎ，ＷＵ Ｌａｎ，ＹＡＮ Ｈｏｎｇ，ＬＩ Ｌａｉ－ｊｕｎ，ＣＨＥＮ Ｎｉｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｎａｎ－ｎａｎ
（Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｊｉａｍｕｓｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉａｍｕｓｉ，Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ １５４００７）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｌｕｐｉｎａｓｔｅｒ ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌ，ｔｈｅ ｅｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｖｏｌｕｍｅ ｆｒａｃｔｉｏｎ，ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ，
ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｐｏｗｅｒ，ｍａｔｅｒｉａｌ ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ
ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｕｓｉｎｇ Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ ｃｅｎｔｒａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ（ＲＳＭ）
ｍｅｔｈｏｄ，ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｔｗｏ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｏｔａｌ
ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｂｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｇｒａｐｈ ｄｒａｗｉｎｇ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｏｕｒ ｍａｐ ａｓ ｔｈｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｖａｌｕｅ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ，ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｔｅｓｔ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ，ｔｈａｔ ｗｅｒｅ ２０％ｅｔｈａｎｏｌ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｔｉｍｅ ４５ｓｅｃｏｎｄｓ，ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｐｏｗｅｒ ３５０Ｗ，ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄ ｔｏ ｓｏｌｉｄ １∶２０ｍＬ／ｇ．Ｉｔ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ａ
ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ａｎｄ ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｓｕｐｐｏｒｔ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｌｕｐｉｎａｓｔｅｒ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｌｕｐｉｎａｓｔｅｒ；ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ；ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
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