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野火球(Trifolium lupinaster L.)原生质体培养再生植株简报



全 文 :一步研究。
3
. 叶片在长光下促进营养体生长 。 全株短光 (处理1 )和露生长点遮全部叶片处理 (处理
3 )株高叶龄数少。 全株1 4小时长光和露生长点遮不同叶层处理 (处理 4一0 1 ), 即遮光叶数少 , 株高
叶片数大 。 说明叶龄在长光下促进营养体生长。
表 2 各处理开花期和试验结束时生长发育情况
试验结束时结荚期
编 号 8小时 1 4 小 时
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叶产长点和其他叶片叶 生长点和其他叶片
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注 : 株高 : 厘米
通过本试验认为 , 大豆自出苗到第 2 复叶定形期间 , 即幼苗期 , 为短光反应的主要时期 。
野火球 ( T r i f o l i u m l u p i n a s t e r L . )
原生质体培养再生植株简报
近年 长野火球原生质体店养再生植株为研究很受国内外有关学者 自重视 , 但尚未见成功的报道 。 我
们于 1 9 8 9年 1。月获得野火球原生质体再生植株 。 现简报如下:
原生质体分离 取继代培养 3 一 4 个月转代第 3 天灼下胚轴急浮细胞 ( 鲜重约 : 克 ) 置入混合
酶液 E M一 7 中 ( 1 . 0 %半纤维素酶五e m i 。 e l l u x。 s e H P 1 5 o, 0 . 4 ;石纤维素酶 e e l l。 l a 5。 。 n 。 z u k 。 R一 1 0,
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1% 果胶酶 P e 。 t。 1; a s 。 Y一 2 3 , e P w g M , P H S . s ) 酶解 6 小时 , 暗处 , Z s oC , 5。转 / 分 。 酶解后经
4 0 目尼龙筛网过筛 、 离心 、 收集原生质体 , 用21 %一 s纯化原生质体一次 , 再用 c P w , 人l洗二次 , 最后
用 K S P原生质体培养基洗一次 。
原生 质体培养 原生质体在 2 一 。 只 1护个原生质体 / m L密度 , 微滴培养 , 24 一 26 ℃ , 暗处静
止培养 。 10 天后统汁植板韦 并添加 c S P液体培养基 ( 0 . 4M的蔗糖 ) 。 当细饱 团发育至肉 lR 可见的点
状愈伤组织时) 转移到增殖培养基。
愈伤组织 及苗的分化 将增殖至 2 o m 大小旅愈伤组织分别转移至 工、 1 、 1 号培养基 _匕 诱
导出 8 种类塑 .刁愈伤组织 。 再将诱导 3 种类型的愈伤组织转移至 M s , 增加 K N O 。至 3 00 Om g / L和谷氨酚
胶 4的 m g / L的 液体培养基再次 悬浮培养一个月后进行分化 。
试验结果 在 1 号类型的愈伤组织上分化出芽 , 芽的分化率为 13 . 6一 2 1 . 0 % 。 将小芽转至壮苗培
养基 ( M : 十 BI A o . Zm g 十 B A o . l m g / L ) , 使其抽茎长叶 , 发育成苗 , 苗的分化率为 6 . 。% 。 当小苗长至 3
c m 高时 , 切去周围相连的愈伤组编 将小苗插入生根培养基 ( 1 / 2 M s + 卜 。N A A 二 g / L ) 。 待长 出 3 一
4 条根时 , 移至盆中, 移栽成活。
吉林省农科院大豆所 赵桂兰供稿
9 6 吉林农业科学
DOI : 10. 16423 /j . cnki . 1003 -8701. 1990. 01. 024