全 文 ：野火球煎剂对小鼠镇静催眠作用的影响
吴 岚1，宋文琦1，刘 娟1，王丽红1，李淑贤1，金哲雄2，杜娟1，2*
(1．佳木斯大学药学院，黑龙江佳木斯 154007;2．哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心，黑龙江哈尔滨 150023)
摘要 ［目的］研究野火球煎剂的镇静催眠作用。［方法］试验分为空白对照(等容生理盐水)、地西泮(0． 001 g /kg)与野火球煎剂高、中、
低剂量(3． 12、1． 56、0． 78 g /kg)组，通过小鼠自主活动试验观察其对小鼠活动的影响，通过阈上和阈下剂量戊巴比妥钠的睡眠试验观察
其对小鼠入睡潜伏期和睡眠时间的协同影响和尼可刹米对小鼠的惊厥作用。［结果］与空白对照组比较，野火球煎剂高、中、低剂量组小
鼠自主活动次数显著减少，可显著缩短小鼠睡眠潜伏期、延长小鼠睡眠时间，且野火球煎剂有抗尼可刹米致惊厥发作的作用。［结论］野
火球煎剂具有镇静催眠作用和抗惊厥作用，为进一步研究野火球镇静催眠作用机制奠定基础。
关键词 野火球煎剂;镇静;催眠;抗惊厥
中图分类号 S567． 23 + 9 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2016)03 －149 －02
The Sedative and Hypnotic Effects of Trifolium lupinaster Decoction on Mice
WU Lan1，SONG Wen-qi1，LIU Juan1，DU Juan1，2* et al (1． College of Pharmacy，Jiamusi University，Jiamusi，Heilongjiang 54007;2．
Research and Development Center of Life Sciences and Environmental Sciences，Herbin University of Commerce，Harbin，Heilongjiang 150076)
Abstract ［Objective］To research the sedative and hypnotic effects of Trifolium lupinaster decoction． ［Method］Mice were randomly divided
into five groups，which were blank control (normal saline)，diazepam group (0． 001 g /kg)，high-，middle- and low-dosage groups (3． 12，
1． 56，0． 78 g /kg)of T． lupinaster decoction． Mice activity was studied by spontaneous activity experiment． Sleep test of pentobarbital sodium at
suprali minal and subliminal doses was carried out to observe the convulsion effects of nikethamideon mice，as well as the collaborative effects on
sleep latency and sleeping time of mice． ［Result］Compared with blank control group，autonomic activity times of mice reduced significantly at
high-，middle-and low-dosage groups of T． lupinaster． Thus，the sleep latency of mice decreased significantly;and the sleeping time of mice
prolonged． T． lupinaster decoction had the anti-seizures effects induced by nikethamide． ［Conclusion］T． lupinaster decoction has both anticon-
vulsant effects and sedative hypnotic effects，which lays foundation for the further research on sedative hypnotic effects of T． lupinaster．
Key words T． lupinaster decoction;Sedation;Hypnosis;Anti-convulsion
基金项目 黑龙江省自然科学基金项目(D201209) ;黑龙江省教育厅科
研项目(12531714) ;佳木斯大学研究生科技创新项目
(LM2015-085)。
作者简介 吴岚(1989 － )，女，山东蓬莱人，硕士研究生，研究方向:中
药质量标准。* 通讯作者，副教授，硕士，硕士生导师，从事
中药质量标准研究。
收稿日期 2015-12-28
野火球(Trifolium lupinaster L．)别名野车轴草，是豆科车
轴草属多年生草本植物，广泛分布于黑龙江、吉林、辽宁、内
蒙古、河北、山西等地，始载于《中国主要植物图说》，具有镇
静安神、止咳、止血等功效。野火球是一种优良牧草，由于花
期较长、花色鲜艳，还可以作为观赏植物和蜜源植物［1］。国
外对野火球的研究很少，国内有对其化学成分［2］、营养价
值［3］、组织培养［4 －5］等方面的研究，但镇静催眠方面的研究
目前尚未见报道。笔者通过小鼠自主活动试验观察其对小
鼠活动的影响，通过阈上和阈下剂量戊巴比妥钠的睡眠试验
观察其对小鼠入睡潜伏期和睡眠时间的协同影响作用［6］，以
期为野火球的进一步开发利用提供理论依据和科学数据。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 仪器。YLS-1A多功能小鼠自主活动记录仪(济南益
延科技发展有限公司);1 mL 一次性注射器(上海治宇医疗
器械有限公司)。
1． 1． 2 药品。野火球煎剂(佳木斯大学药学院制备);地西
泮注射液(天津药业集团有限公司，批号 1408271) ;戊巴比妥
钠(德国 merk公司，批号 20140820) ;尼可刹米注射液(天津
药业集团新郑股份有限公司，批号 1407091)。
1． 1． 3 动物。清洁级昆明种雄性小鼠 180 只，体重 18 ～ 22
g，由哈尔滨医科大学实验动物中心提供［动物使用许可证号
为 SCXK(黑)2013-001］。饲养温度为(23 ± 1)℃，12 h 人工
循环光照(光照期为 08:00 ～ 20:00)，自由摄食饮水。试验
前，于饲养环境中适应 7 d。
1． 2 方法
1． 2． 1 野火球煎剂的制备方法。常规方法煎煮，称取野火
球药材 200 g，加 10倍于药材的温水，浸泡 30 min后微火煎
煮 15 min，文火煎 20 min，滤出药渣，将药液浓缩成 100 mL，
制得含生药量为 2 g /mL 野火球水煎液。
1． 2． 2 野火球煎剂对小鼠自主活动的影响。试验分为 5
组，即空白对照(等容生理盐水)、地西泮(0． 001 g /kg)与野
火球煎剂高、中、低剂量(3． 12、1． 56、0． 78 g /kg，分别为临床
成人用量的2、1、0． 5倍)。灌胃给药，每天1次，连续10 d，末
次给药 60 min后，测定小鼠 5 min内自主活动次数［7］。
1． 2． 3 野火球煎剂对阈下剂量戊巴比妥钠镇静、催眠作用
的影响。分组与给药同“1． 2． 2”方法。各组均于末次给药 60
min后，按照小鼠体重腹腔注射阈下剂量戊巴比妥钠(45
mg /kg)，记录 60 min 内的入睡只数、睡眠潜伏期和睡眠时
间。从腹腔注射戊巴比妥钠到翻正反射消失为睡眠潜伏期。
以翻正反射消失 1 min 以上者为入睡，以翻正反射消失到翻
正反射恢复为睡眠时间。未入睡者睡眠潜伏期定为 60 min。
1． 2． 4 野火球煎剂对阈上剂量戊巴比妥钠镇静、催眠作用
的影响。分组与给药同“1． 2． 2”方法。各组均于末次给药 60
min后，按照小鼠体重腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥钠(60
mg /kg)，按“1． 2． 3”方法记录睡眠潜伏期和睡眠时间。
1． 2． 5 抗尼可刹米致小鼠惊厥作用。分组与给药同
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2016，44(3):149 － 150，152 责任编辑 黄小燕 责任校对 李岩
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.03.054
“1． 2． 2”方法。各组均于末次给药 60 min后，按照小鼠体重
腹腔注射尼可刹米(0． 018 g /kg)，记录惊厥小鼠数(以小鼠
出现跌倒并呈现阵挛性惊厥为指标)［8］。
2 结果与分析
2． 1 野火球煎剂对小鼠自主活动的影响 由表 1 可见，与
空白对照组比较，野火球煎剂高、中、低剂量组小鼠 5 min 内
自主活动次数显著减少(P ＜0． 01)。
2． 2 野火球煎剂对阈下剂量戊巴比妥钠镇静、催眠作用的
影响 表 2显示，与空白对照组比较，野火球煎剂高、中、低
剂量组小鼠入睡只数显著增加，睡眠潜伏期显著缩短，睡眠
时间显著延长(P ＜0． 01)。
表 1 野火球煎剂对小鼠自主活动的影响(n =10)
Table 1 Effects of Trifolium lupinaster decoction on the autonomic activities of mice
组别
Group
剂量
Dose∥g /kg
给药前活动次数
Activity number before
administration
给药后活动次数
Activity number after
administration
空白剂量组 Blank control group 109． 83 ±7． 826 125． 42 ±20． 407
地西泮组 Diazepam group 0． 001 111． 75 ±9． 602 60． 67 ±9． 782＊＊
野火球高剂量组 High-dosage group of T． lupinaster 3． 12 112． 17 ±10． 760 80． 00 ±4． 767＊＊
野火球中剂量组 Middle-dosage group of T． lupinaster 1． 56 114． 08 ±7． 229 96． 42 ±6． 735＊＊
野火球低剂量组 Low-dosage group of T． lupinaster 0． 78 109． 31 ±6． 369 99． 69 ±4． 442＊＊
注:* 、＊＊分别表示与空白对照组比较 P ＜0． 05、P ＜0． 01。
Note:Compared with blank control group，* and ＊＊ indicated P ＜0． 05 and P ＜0． 01，respectively．
表 2 野火球煎剂对阈下剂量戊巴比妥钠镇静、催眠作用的影响(n =12)
Table 2 Sedative and hypnotic effects of T． lupinaster decoction on subli minal dose of pentobarbital sodium
组别
Group
剂量
Dose∥g /kg
入睡只数
Number of
sleeping mice
入睡率
Sleeping
rate∥%
睡眠潜伏期
Sleep latency∥min
睡眠时间
Sleeping time∥min
空白剂量组 Blank control group 0 0 60． 000 0 0
地西泮组 Diazepam group 0． 001 10 83． 33 4． 085 0 ±0． 786 75＊＊ 64． 705 0 ±2． 244 50＊＊
野火球高剂量组 High-dosage group
of T． lupinaster 3． 12 8 66． 67 5． 683 8 ±1． 030 20
＊＊ 56． 230 0 ±4． 095 24＊＊
野火球中剂量组Middle-dosage group
of T． lupinaster 1． 56 8 66． 67 6． 471 3 ±0． 517 40
＊＊ 42． 451 3 ±3． 648 44＊＊
野火球低剂量组 Low-dosage group of
T． lupinaster 0． 78 6 50． 00 8． 128 3 ±0． 347 87
＊＊ 31． 168 3 ±8． 487 16＊＊
注:* 、＊＊分别表示与空白对照组比较 P ＜0． 05、P ＜0． 01。
Note:Compared with blank control group，* and ＊＊ indicated P ＜0． 05 and P ＜0． 01，respectively．
表 3 野火球煎剂对阈上剂量戊巴比妥钠镇静、催眠作用的影响(n =12)
Table 3 Sedative and hypnotic effects of T． lupinaster decoction on suprali minal dose of pentobarbital sodium
组别
Group
剂量
Dose∥g /kg
睡眠潜伏期
Sleep latency∥min
睡眠时间
Sleeping time∥min
空白剂量组 Blank control group 6． 735 0 ±1． 415 06 34． 113 3 ±4． 837 83
地西泮组 Diazepam group 0． 001 2． 424 2 ±0． 824 42＊＊ 111． 701 7 ±6． 216 01＊＊
野火球高剂量组 High-dosage group of T． lupinaster 3． 12 3． 780 8 ±0． 831 94＊＊ 82． 816 7 ±4． 054 46＊＊
野火球中剂量组 Middle-dosage group of T． lupinaster 1． 56 5． 788 3 ±0． 379 76* 75． 649 2 ±2． 387 26＊＊
野火球低剂量组 Low-dosage group of T． lupinaster 0． 78 6． 473 3 ±0． 580 84 68． 601 7 ±2． 123 63＊＊
注:* 、＊＊分别表示与空白对照组比较 P ＜0． 05、P ＜0． 01。
Note:Compared with blank control group，* and ＊＊ indicated P ＜0． 05 and P ＜0． 01，respectively．
表 4 各组尼可刹米致小鼠惊厥作用的比较(n =12)
Table 4 Comparison of convulsion effects of mice induced by niketha-
mide
组别
Group
剂量
Dose
g /kg
发生惊
厥只数
Number of
seizure mice
抗惊厥率
Anti-convu
lsion
rate∥%
空白剂量组 Blank control group 12 100． 00
地西泮组 Diazepam group 0． 001 5 41． 67＊＊
野火球高剂量组 High-dosage group
of T． lupinaster 3． 12 7 58． 33
*
野火球中剂量组Middle-dosage group
of T． lupinaster 1． 56 8 66． 67
野火球低剂量组 Low-dosage group of
T． lupinaster 0． 78 11 91． 67
*
注:* 、＊＊分别表示与空白对照组比较 P ＜0． 05、P ＜0． 01。
Note:Compared with blank control group，* and ＊＊ indicated P ＜
0． 05 and P ＜0． 01，respectively．
2． 3 野火球煎剂对阈上剂量戊巴比妥钠镇静、催眠作用的
影响 从表 3 可看出，与空白对照组比较，野火球煎剂高、
中、低剂量组小鼠睡眠潜伏期缩短，睡眠时间显著延长(P ＜
0． 01)。
2． 4 抗惊厥作用 由表 4可见，与空白组比较，地西泮组及
野火球高、低剂量组可显著降低小鼠的惊厥发生率，野火球
中剂量组能降低小鼠的惊厥发生率但无明显差异。表明野
火球有一定的抗惊厥作用。
3 小结
该试验分别采用小鼠自主活动试验及阈上、阈下剂量戊
巴比妥钠诱导小鼠睡眠试验及尼可刹米致小鼠惊厥试验来
(下转第 152页)
051 安徽农业科学 2016 年
提高北柴胡种子的萌发率。GA3 和 6-BA能够打破新鲜北柴
胡种子的休眠，对贮藏过的种子却无明显作用。雷燕妮［10］分
析证明用 1% KMnO4 处理对种胚的发育有促进作用，北柴胡
种子发芽率可高达 82%。H2O2 处理也能使北柴胡种子发芽
率有明显提高，效果次于 1% KMnO4 溶液处理
［13］。PEG 常
用作种子引发剂，可延长种子萌发的吸胀期，张慧玲［14］分析
指出用不同浓度 PEG600 浸泡种子均能提高种子发芽率，其
中以 5%的 PEG600浸种处理最佳，发芽率为 75%。但化学
试剂如果处理时间不当，在种皮被腐蚀浸软的同时，种胚也
会受到不同程度的损伤［15］。
3 北柴胡栽培技术
3． 1 种植方法 北柴胡春秋播均可，秋播宜在 9 月下旬 ～
10月上旬，在气候较阴湿的地区，秋播苗齐、苗壮，产量高，优
于春播。在种植时，选择与冬小麦、冬油菜混作的栽培技术，
即小麦成熟前 30 ～40 d，先浇水再将北柴胡种子 37． 5 ～ 45． 0
kg /hm2 与等量干细沙土混合均匀撒于地表，然后耙耱 2次以
上;或当玉米、黄豆等作物高 30 cm 左右时，锄草后，播种北
柴胡。北柴胡套种技术省工省时，解决了北柴胡苗期遮阴保
湿的难题，同时不影响当年套种作物的产量，合理利用了土
地，比育苗移栽和大田直播技术值得推广［16］。
3． 2 田间管理 当苗高5 ～6 cm时进行间苗、松土、除草，且
不要损伤根部，保苗 400 万 ～ 600 万株 /hm2。若发现缺苗应
及时补苗。沈路莹［17］研究关中平原中部地区不同行距北柴
胡播种密度对其产量的影响发现，在行距 25 cm、密度达 90
万株 /hm2 时产量最高，其播种密度各地差异较大，为 69． 0万
～169． 5万株 /hm2。当苗高 10 ～15 cm时进行第 2次中耕锄
草，中耕宜浅，以免伤苗。1个生育期需要追肥 2次。第 1次
在北柴胡旺盛生长期，适当追肥和浇水，用以促进小苗快发;
第 2次在北柴胡开花前施肥，促使根部肥大，生长期间遇干
旱应及时浇水，雨季要注意排涝;株高 40 cm时需除蕾打顶，
促进养分向根部迅速转移，使根部迅速生长膨大［18］。
3． 3 病虫害防治 根结线虫病在整地时用 80%二溴氯丙烷
乳油 100 ～150倍液进行土壤消毒，在施药半月后再进行播
种。锈病在发病初期用25%粉锈宁1 000倍液喷雾防治。蚜
虫用 50%抗蚜威可湿性粉剂 3 000 倍液或 40%乐果乳油
1 500 ～2 000倍液喷雾防治。黄凤蝶可采用人工扑杀或用
90%敌百虫 1 500倍液喷洒，也可用青虫菌 300倍液喷雾防治。
赤条蝽蟓采用人工扑捉或用 90%敌百虫 1 500倍液喷杀［3］。
4 采收与加工
当茎叶 60%枯萎时，应及时采挖，采挖时避免伤根，以保
持根的完整性。王启帅等［19］研究不同采收期北柴胡指标性
成分的动态积累发现，自 9月起北柴胡皂苷 a、北柴胡皂苷 d
的含量总和已基本稳定在 1． 10% ～1． 16%，其中以 9月的含
量最高(1． 16%);北柴胡最佳采收期为 9 月份;北柴胡挥发
油 10月最高(1． 441%) ，所以需要北柴胡挥发油量较高时，
以 10月作为采收期。采收时折断主根，抖去泥，并留足 1 ～
2 cm的茎秆。把采挖的根用水冲洗干净进行晒干即可。
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1204 －1207．
(上接第 150页)
评价野火球煎剂对小鼠的镇静催眠效果。结果表明，与空白
对照组比较，野火球煎剂高、中、低剂量组可以明显减少小鼠
5 min内自主活动次数;戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠试验中，野
火球煎剂高、中、低剂量组可显著缩短小鼠睡眠潜伏期、延长
小鼠睡眠时间;尼可刹米致小鼠惊厥试验验证了野火球煎剂
能够降低小鼠的惊厥发生率。由此可知，野火球煎剂具有一
定的镇静催眠作用。
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251 安徽农业科学 2016 年