全 文 ：第 卷 ,第 期
年 月 光 谱 实 验 室 了 ,
,
白霸果实中总黄酮的测定①
申林。 骆磊。 肖华华“ 陈蕾“ 石娟娟“ 吴保天“ 吴德波“
施绍贵。 蔡凌云②,占
凯里学院化学与材料工程学院 贵州省凯里市开发区开元路 号
西华师范大学生命科学学院 西南野生动植物资源保护教育部重点实验室 四川省南充市华凤镇师大路 号 。。
摘 要 为确定白筋果实总黄酮的含量 ,采用超声辅助法提取白筋果实中的黄酮类化合物 ,以芦丁为
对照 ,采用分光光度法在 处测定白筋果实中的总黄酮 回归方程为 一 ,相关系
数 二 ,精密度实验 为 ,稳定性实验 分别为 芦丁 和 白
霸 ,平均加标回收率为 , 。采用分光光度法 ,操作简便 ,结果准确 ,灵敏度高 ,重
复性好 ,准确测定白筋果实中总黄酮含量为 。
关键词 白筋 果实 总黄酮含量 分光光度法
中图分类号 文献标识码 文章编号 一 一 一
引言
白籁 〔 议 〕,为五加科 五加属 攀援
状灌木 ,辛 、凉 ,味苦 、气微香 。又称三加皮 、刺三加 、鹅掌簌等 。白籁具有多种食疗功 ,作为蔬菜有悠
久的历史 。而在东南亚一带 ,把白籁作为与人参样功效的药物 〕。白籁传统药用部位为根皮 、食用
部位为嫩叶 ,白籁果实有待开发 。国外学者对白籁三菇皂昔的研究较多 一习,研究表明 ,白籁根 、茎 、
叶中含黄酮含量较高 〕,黄酮具有多种生物活性 〕,主要在护肝 、抗炎 、抗菌抗病毒 、免疫激活 、抗
氧化 、抑制肿瘤细胞 、防治糖尿病及其并发症和对心血管系统等有显著疗效 。但白籁果实黄酮未见
研究报道 ,因此本文以白籁果实为研究对象 ,首次通过超声辅助提取白籁果实中总黄酮并测定其含
量 ,为进一步提取分离 、鉴定白籁果实黄酮成分 、探讨其药理作用提供理论基础 ,并为白搞综合利用
和开发提供依据 。
实验部分
材料 、仪器与试剂
材料
白籁果实 年 月采集于贵州省丹寨县卡啦村 ,经凯里学院环境与生命科学学院周江菊教
授鉴定为五加属植物白籁 。
①凯里学院服务地方经济项目 凯里学院学生课题 贵州省教育厅项目 黔教科 〔 〕 贵州省重点学科
建设基金资助 黔教科 〕
②联系人 ,手机 传真 一 ·
作者简介 申林 一 男 伦佬族 ,贵州省务川县人 主要从事天然产物的提取研究工作
收稿 日期 一 一 接受日期 一 一
光谱实验室 第 卷
仪 器与试剂
一 型旋转蒸发仪 瑞士 公司 型移液器 德国 股份公
司 一 。。型紫外可见分光光度 北京普析通用仪器有限责任公司 一 型超声波清洗
器 上海新诺仪器设备有限公司 一 型循环水真空泵 上海雅荣生化设备仪器有限公司
型电子天平 〔赛多利斯科学仪器 北京 有限公司〕。
芦丁标准品 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心 ,编号 一 ,无水乙醇为分析
纯 安徽安特生物化学有限公司 。实验用水为蒸馏水 。
方法
样品处理和校准曲线
样品处理和提取液制备
称取白籁果实粉末 自然干燥 ,过 目筛 ,用石油醚 一 ℃ 、索氏提取器脱脂 、
脱色 连续回流 ,样品置于通风处干燥备用 。
准确称上述白籁果实粉 鲍 ,置于 锥形瓶中 ,按料液比 加 乙醇 ,
超声功率 间歇提取 次 ,每次 ,合并提取液 ,减压蒸干 ,用 乙醇溶解 ,用 乙醇
定容于 ,容量瓶 ,待用 。
标准溶液的配制
准确称取 芦丁标准品用 乙醇溶解后 ,分别用 乙醇定容于 容量瓶中 ,即
得芦丁对照品液 。
测定波长选择
在 一 内测定吸收值 ,选择芦丁和样品均有的最大或较大吸收波长作为分光光度法
的测量波长 。
校准曲线制作
取对照品溶液 、 、 、 、 、 、 、 、 三次平行 分别放人 一
号 容量瓶中按 项下操作 。以吸光度 为纵坐标 、芦丁浓度 为横坐标绘制校准曲
线 。
精密度实验
准确吸取芦丁对照品溶液 ,按 项下处理 ,重复测定 次 ,计算 。
穗定性 实验
准确吸取 制备的提取溶液和芦丁对照品溶液 ,按 项下分别处理 ,每
测定 次吸光度 ,考察 ,计算 。
,矛、﹃曰…︸日八侧彭叙炭回收率测定准确吸取 制备的提取液 份 ,分别置于 容量瓶中 ,加入一定量芦丁对照品溶液 ,按项下处理 ,计算平均回收率和 。
白霸果实总黄酮含童
准确吸取 制备的提取液 ,分别置
于 容量瓶中 ,按 项下处理 ,测定吸光
度 ,做 次平行 ,以 值 次的平均值代人回归方
程计算白籁果实总黄酮的含量 。
二 ·
。卯 ,
芦丁浓度
图 芦丁对照品校准曲线示意图
第 期 申林等 白编果实中总黄酮的测定
结果与讨论
波长确定和校准曲线绘制
波长确定
经测定 ,在波长 处芦丁和样品有最大吸收 ,确定测定波长为 。
校准曲线绘制
经计算得到校准曲线的回归方程为 一 一。 ,相关系数二 ” ,在 。 一
范围内呈良好的线性关系 图 。
精密度 、稳定性 、回收率实验结果
表 精密度实验结果
序号
吸光度 芦丁
表 稳定性实验结果
时间 〕
吸光度 芦丁
吸光度 样品
。 。
。 。
表 加标回收率实骏结果
样品 总黄酮含量 加标量 加标后总黄酮含量 回收率 平均回收率
扫`二魂
以芦丁为标准品 ,精密度实验的 为 肠 见表 和稳定性实验的 为 芦
丁 和 白霸 见表 ,平均回收率为 , 为 见表 。以上结果表明测定
方法的精密度 、稳定性良好 ,经回收率实验证明都具有良好的准确度和重现性 ,适用于白籁果实总
黄酮的测定 。
白霸果实总黄酮含量
以吸光度 值 次的平均值代人回归方程计算白籁果实总黄酮的含量为 。
讨论
目前白籁果实中总黄酮研究未见报道 ,本文用乙醚除脂除色素 ,以乙醇为提取剂 ,首次利
用超声辅助提取白篇果实中的黄酮类化合物 。结果研究为开发白籁果实黄酮资源提供了理论参考 。
总黄酮含量的测定方式一般有分光光度法和高效液相色谱法 一` 〕,高效液相色谱法虽然
重现性 、稳定性等指标均较好 ,但仪器设备昂贵 ,操作复杂 ,费用较高 。分光光度法测定黄酮含量 ,不
但操作简单方便 ,利于普及 ,而且结果准确可靠 。
结论
实验用芦丁作标准品 ,在 处测定吸光度 ,所得校准曲线线性良好 ,回归方程为
一 , 稳定性良好 , 为 芦 和 白籁 精密度良
6 1 2 光谱实验室 第 卷
好 , 为 写 平均加标回收率为 , 为 。结果表明 ,分光光度法操作
简便 ,结果准确 ,重复性好 ,为白籁果实中总黄酮含量测定的一种简便可行的方法 。
通过对白筋果实黄酮成分的提取和测定 ,可知白籁中果实黄酮含量高于白籁其他部位 , 〕,为
白籁菜的进一步开发和综合利用提供理论依据 。本文相信 ,白霸不论是作为野生保健蔬菜还是药用
植物 ,都具有较高的经济价值和广泛的开发前景 。
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